中药远志薄层色谱及超高效液相色谱特征图谱的研究

目的建立远志薄层色谱(thin-layer chromatography,TLC)及超高效液相色谱(ultra-high performance liquid chromatography,UHPLC)特征图谱,并分析远志全根、根皮和木心间化学成分差异,为远志质量评价提供参考。方法以3,6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志苷A和远志皂苷B为指标成分建立TLC图谱;用UHPLC法建立远志特征图谱,结合热图聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)评价多批远志全根、根皮和木心之间的差异性。结果TLC图谱斑点清晰、分离度较好;UHPLC特征图谱共标定28个共有峰,指认了其中的7个特征峰,13批次远志特征图谱与对照图谱相似度均大于0.9,批次间质量较为稳定;TLC和UHPLC特征图谱显示远志全根、根皮和木心化学组成一致,未发现特异成分,热图聚类分析和PCA显示远志全根与根皮中各成分峰面积接近,OPLSDA筛选出10个变量投影重要性(variable important in projection,VIP)值大于1的差异性成分。结论所建立的TLC及UHPLC特征图谱简便、准确、稳定,展开系统和提取溶剂均使用低毒试剂,符合绿色化学理念,适用于远志的质量评价,从化学分析角度说明木心的存在对远志整体化学成分影响较小。

高效液相色谱-二极管阵列检测器测定独一味胶囊中木犀草素含量的研究

建立了一种高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)的方法检测独一味胶囊中的木犀草素的含量;采用色谱柱为BDS HYPERSIL C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-质量分数为0.1%磷酸水溶液(50∶50,V∶V),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃;检测波长为350 nm;木犀草素质量浓度在0.1~100μmol/L范围内呈良好的线性关系,在1.0,5.0和10μmol/L三个标准溶液浓度下加标实验,该方法的回收率为97.67%~105.77%,相对标准偏差(RSD)均小于3%,测得独一味胶囊中木犀草素的平均含量为27.4μmol/L;该方法方便可行,灵敏度高,稳定性好,可用于独一味胶囊中木犀草素的含量测定及质量控制。

HPLC-ELSD法与薄层色谱扫描法用于测定二硬脂酰磷脂酰胆碱有关物质的对比研究

目的:建立二硬脂酰磷脂酰胆碱有关物质的检测方法。方法:对比考察HPLC-ELSD液相色谱法与薄层色谱扫描法。薄层色谱扫描法,采用硅胶G60薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水-浓氨溶液(65∶25∶4∶0.4)为展开剂,检测波长为450 nm。液相色谱法采用C8柱,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,蒸发光散射检测器,以浓度的对数值为横坐标,以峰面积的对数值为纵坐标,进行线性回归计算,并对建立的方法进行了方法学验证。结果:薄层色谱扫描法虽也可定量,但仅检出少量已知杂质,不能有效检出未知杂质。液相色谱法所需样品量少、杂质检出量高、操作简便,优于薄层色谱扫描法。结论:建立方法采用液相色谱法克服了原有薄层色谱法不能准确定量的弊端,检测灵敏度高,定值准确,可作为二硬脂酰磷脂酰胆碱质量控制方法。

高效液相色谱法测定白酒中丁烯醛含量

建立了高效液相色谱法检测白酒中丁烯醛的含量的方法,此方法的特征在于利用酸化的2,4-二硝基苯肼作为衍生剂,采用Agilent Polaris C18-A色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以水和乙腈作为流动相A和B,采用梯度洗脱,洗脱程序如表1,流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为360 nm,丁烯醛在浓度范围为0.594 mg/L~29.7 mg/L具有良好的线性关系(R^(2)=99.991%),选取2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L三个加标量,测试了三个样品,平均加标回收率为92.4%,精密度测试两个样品的相对标准偏差分别为0.90%和2.77%,该方法简单、快速,具有良好的灵敏度、精密度和回收率,适用于白酒中丁烯醛的检测。

高效液相色谱法测定植物油中苯并(α)芘的不确定度

为了评定高效液相色谱法测定植物油中苯并(α)芘的不确定度,根据相关规定和化学分析测量不确定度评定等原理建立数学模型,对整个检测过程中各种不确定度的来源进行分析与计算,找出不确定度分量并合成相对不确定度和扩展不确定度。结果表明,当植物油中苯并(α)芘的测定结果为7.60μg/kg时,其扩展不确定度为0.69μg/kg(k=2),其中,标准溶液配制与测量重复性两方面引入的不确定度占比较高。

高效液相色谱法测定生活饮用水中的五种拟除虫菊酯类农药残留

建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定生活饮用水中5种拟除虫菊酯类农药的方法。取5.0 mL水样,加入2.0 mL乙腈,振荡2 min,再加入1.0 g NaCl,继续振荡2 min,静置分层。取上清液1.0 mL经0.22μm的有机相滤膜过滤后,采用高效液相色谱法进行测定。结果表明,5种拟除虫菊酯类农药在0.02~5.00μg/L水平上线性关系良好,r>0.9980,回收率为71.8%~103.0%,精密度为4.56%~8.32%,方法检出限为0.0005~0.0020 mg/L,定量限为0.002~0.007 mg/L。采用高效液相色谱测定5种拟除虫菊酯类农药残留能有效提高样品前处理的效率,且能达到检测标准的要求。

高效液相色谱法同时定量分析紫苏不同部位的植物代谢物

该研究旨在建立一种同时测定中国紫苏不同部位中代谢物含量的分析方法,明确紫苏不同部位中代谢物的种类与含量,为此类物质的高效利用提供一定科学依据。利用溶剂提取结合高效液相色谱技术,分别对紫苏叶、紫苏壳、紫苏杆中19种植物代谢物进行测定分析。结果表明,19种物质在55 min内完全分离,峰型和分离度良好,检出限在0.05~0.40 mg/L之间,标准曲线R^(2)均在0.9976以上,回收率和精密度分别在61.65%~111.42%和1.02%~17.20%之间。应用该方法对12种紫苏样品进行了检测,发现19种化合物在不同紫苏部位中的含量差异较大,在0.04~24.05 mg/g之间。12个样品中均检出2种酚酸和5种黄酮及黄酮苷。紫苏壳和杆中均检出木犀草素,含量为0.05~0.18 mg/g;紫苏叶中化合物含量顺序为迷迭香酸>野黄芩苷>芹菜素-7-O-葡萄糖苷。此外,在紫苏壳中首次检出HMF和糠醛两种呋喃环衍生物。该方法简单高效,仪器要求低,适用于紫苏及其他植物型样品中代谢物的定量检测。

高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法解析桑椹酒渣中的酚类物质

该研究通过研究桑椹酒渣中的酚类化合物,为开发酒渣的价值提供一定的理论基础和数据支撑。建立云桑二号桑椹酒渣中的酚类化合物的高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-Time-of-Flight Mass Spectrometry,HPLC-Q-TOF-MS)定性分析方法。液相色谱使用ZORBAX SB-Aq(2.1 mm×100 mm,1.8-Micron)色谱柱,流动相为乙腈和0.1%(V/V)甲酸水溶液,梯度洗脱,采用ESI离子源在负离子模式进行质谱检测。最终鉴定出云桑二号桑椹酒渣中酚类物质共14种。然后利用标准品对照高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法鉴定出的多酚类化合物进行了定量测定,发现桑椹酒渣中的酚类物质组成与桑椹大致相同。但各单体酚含量总体降低。其中,花青素类酚类物质含量最高的是天竺葵素-3-葡萄糖苷(718.30μg/g),非花青素类多酚物质含量最高的是儿茶素(1805.87μg/g)。这些结果表明桑椹酒渣酚类含量丰富,是开发健康食品的良好原料。

高效液相色谱法测定聚乙烯吡咯烷酮

聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是一种具有天然表面活性的多功能聚合物,由于其分子量分布范围广,两亲性强,很难准确定量测定。本研究建立了高效液相色谱(HPLC)检测K85-聚乙烯吡咯烷酮的定量分析方法,并对色谱检测条件进行了优化。该分析方法使用Inertsil ODS-SP C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈与水的混合液(10∶90,v∶v),流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm。运用所建立的方法进行测定时,将聚合物解析为单峰,出峰时间t_R=(5.705±0.005)min。检测过程中,色谱柱性能保持不变,峰形保持良好。在5~100 μg/mL呈现良好的线性关系(R^(2)=0.998 8,n=5),检测限为18.9 ng/mL,定量限为57 ng/mL。3次平行添加实验显示,平均回收率分别为99.50%、99.99%、100.64%,RSD值分别为0.996%、0.857%、0.674%。该方法适用于PVP从聚砜类透析膜上洗脱量的相关测定。

高效液相色谱法和薄层色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元的含量

目的 采用高效液相色谱和薄层色谱技术 ,分别测定重楼中薯蓣皂苷元的含量。方法 采用 HPL C法 ,选用 ODS柱 ,流动相 :乙腈 -水 ( 90∶ 10 ) ,检测波长 :2 0 3 nm,柱温 :3 5℃ ;TL C法选用硅胶 G板 ,展开剂 :环已烷 -乙酸乙酯 ( 4∶ 1) ,测定波长 :610 nm,参比波长 :42 0 nm。结果 线性范围分别为 1.2～ 7.2 μg( r=0 .9998) ,0 .2～ 1.0μg( r=0 .9957)。平均回收率分别为 10 2 .2 % ,RSD=3 .3 9% ( n=6) ;10 0 .9% ,RSD=2 .68% ( n=6)。结论 两种方法均可用于重楼中薯蓣皂苷元的质量控制。

青钱柳降糖降尿酸活性部位色谱指纹图谱研究及主成分含量测定

该文开展了青钱柳降糖降尿酸活性部位的含量测定和指纹图谱研究,评价了不同产地青钱柳药材的质量。在活性筛选的指导下优化提取条件,以30%乙醇水溶液为提取溶剂,料液比1∶10,超声提取1 h可有效提取活性部位。采用高效液相色谱法测定绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸C和阿福豆苷的含量,从各成分含量随着产地的波动情况比较青钱柳药材的质量,其中江西药材S1的成分含量较低,与其它产地药材差异较大。同时建立了青钱柳活性部位的指纹图谱,10批药材的相似度均大于0.9,主成分分析(PCA)表明,江西药材S1、湖南药材S6和S8质量差异较大。10个产地药材的α-糖苷酶和黄嘌呤氧化酶活性抑制实验表明,湖南药材S5的降糖和降尿酸活性最佳,而江西药材S1表现较差,与质量评价结果基本一致。所建方法可为青钱柳的质量控制和质量标准建立提供科学依据。

高效液相色谱法测定白酒中6种生物胺的含量

建立了采用高效液相快速准确的检测白酒中6种生物胺(腐胺、亚精胺、精胺、色胺、盐酸吡哆胺、对羟基苯乙胺)含量的方法。此方法特征在于采用正丁醇-二氯甲烷萃取酒样,并优化了萃取步骤,保证萃取效率最高及各样品萃取效率一致。以丹磺酰氯作为衍生剂,衍生条件为60℃、30 min、2 mL衍生剂(浓度为10 mg/mL),采用Agilent Polaris C18-A色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈和水作为流动相A和B,采用梯度洗脱,洗脱程序如表1,流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为254 nm。6种生物胺如表2所示浓度范围内具有良好的线性关系(R2>98.643%),6种生物胺的检出限0.04~0.09 mg/L,定量限0.10~0.32,选取3.000 mg/L、5.000 mg/L 2个水平加标,平均加标回收率为92.20%~108.86%。

高效液相色谱(HPLC)法分析大米红曲中的桔霉素

本文探讨了大米红曲色素中桔霉素的高效液相色谱检测方法,并研究了影响红曲中桔霉素含量的一些因素。结果表明:红曲色素经预处理后以2%冰醋酸水和甲醇为流动相(2%冰醋酸水:甲醇=70:30)时,桔霉素能很好地与其他红曲色素成分分开;选育得到的15株红曲菌种中,11号和14号菌株产生的红曲色素中没有检测到桔霉素;液体发酵产物中桔霉素含量显著低于固体发酵法;干燥方法对桔霉素含量有一定的影响,但没有达到显著性差异。

高效液相色谱(HPLC)分离和检测蛋白质

对近年来利用高效液相色谱 (HPLC)分离检测蛋白质的研究作了综述。比较详细地介绍了用于蛋白质分析的各种HPLC模式、检测器、以及联用技术的发展情况 。

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定麦汁中的草酸

利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定麦汁中的草酸含量。对各种色谱条件进行了研究,最终确定色谱柱Hypersil ODS 4.0×125mm,流动相为0.5%KH2PO4-0.5mmol/L TBA(tetrabutylammonium salt,四丁基铵盐)水溶液,pH2.0,紫外检测波长220nm。试验证明该方法能有效地分离麦汁中的草酸和酒石酸,准确灵敏、回收率高、重复性好,并且操作简便,可应用于啤酒生产中草酸含量的检测。

薄层色谱和高效液相色谱联用测定暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽的含量

通过薄层色谱(TLC)与高效液相色谱(HPLC)联用技术鉴定了暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)肌肉中存在肌肽和谷胱甘肽,同时利用高效液相色谱法测定了肌肽和谷胱甘肽(GSH)的含量。薄层层析采用的展开剂为正丁醇:乙酸:水(4∶2∶1),层析板为硅胶板。高效液相色谱利用Kromasil C18反相柱分析,流动相为10%的纯乙腈和90%含有0.05%三氟乙酸的超纯水。结果表明:通过薄层色谱和高效液相色谱鉴定了暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽,其中暗纹东方鲀肌肉中肌肽含量约213μg/g(鲜重),还原性谷胱甘肽含量约211μg/g(鲜重)。本法样品无需衍生,操作简便,适合于暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽的测定。本文为生物体内肌肽和谷胱甘肽的研究提供借鉴意义。

可乐定透皮贴剂中有关物质的薄层色谱和高效液相色谱检测方法

目的:用薄层色谱法(TLC法)和高效液相色谱法(HPLC法)对可乐定透皮贴剂中有关物质进行检测。方法:TLC法:以硅胶G为吸附剂,正丁醇-水-冰醋酸(4:5:1)为展开剂。HPLC法:色谱柱为Waters Xterra:RP C18,流动相为乙腈-碳酸氢铵水溶液(20:80),检测波长210 nm。结果:TLC法最小检出限为0.15μg;HPILC最小检出限量为0.67ng。结论:两种方法都可用于可乐定透皮贴剂中有关物质的检测。TLC法操作简单,方便;HPLC法灵敏度高,检出限量低。

高效液相色谱法同时测定不同品种菊花中绿原酸和木犀草苷及异绿原酸A含量

采用Alphasil VC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,选择348 nm作为检测波长,柱温为30℃,进样量为5μL,建立同时测定不同品种菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A含量高效液相色谱(HPLC)法。结果表明,绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A在相应的进样浓度范围内与对应的峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9929);平均加样回收率为96.40%~98.07%,RSD为0.69%~1.81%。4种菊花品种中上述3个成分含量分别为0.3575%~0.7872%、0.1879%~0.8239%、0.7611%~1.6169%。该方法简便易行、灵敏度高、结果准确,可用于不同品种菊花的质量控制。

薄层色谱法和高效液相色谱法在中兽药质量控制中的应用

中兽药的质量控制一直是中兽药学工作者研究的重点。当前,我国的色谱技术研究发展迅速,在中兽药质量控制中地位越来越重要。对近年来薄层色谱法及高效液相色谱法在中兽药质量控制领域的应用进行了梳理和综述,以期为中兽药检测工作提供有效参考。

实脾消水凝胶贴膏的薄层色谱鉴别和含量测定研究

目的 建立实脾消水凝胶贴膏的薄层色谱鉴别和含量测定方法。方法 采用薄层色谱法(TLC)对制剂中的黄芪、车前子、莪术、桂枝、猪苓、预知子进行鉴别;采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS)对制剂中君药黄芪所含成分黄芪甲苷进行含量测定。结果 TLC鉴别图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;黄芪甲苷的质量浓度在2.75~33μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6),精密度、重复性、稳定性实验的RSD<3%,平均加样回收率为100.49%(RSD=1.98%,n=6)。结论 本研究所建立的方法准确可靠、专属性强,可用于实脾消水凝胶贴膏的质量控制。