基于薄层色谱-生物自显影-MSn法表征枸骨叶中的脂肪酶抑制活性成分

为寻找枸骨叶的降脂减肥活性成分,本文采用薄层色谱-生物自显影法,筛选其具有脂肪酶抑制活性的成分,再通过原位TLC-EFISI-MSn技术,对具有脂肪酶抑制活性的成分进行快速结构解析。通过对10个具有脂肪酶抑制活性的薄层色谱-生物自显影斑点进行快速解析,初步鉴定出15个可能的成分,包括9个熊果烷型三萜、1个齐墩果烷型三萜,以及5个18,19-裂环型三萜,其中有7个活性斑点所包含的12个化合物通过对照品比对得到验证。该方法能够快速从枸骨叶中筛选、表征出具有脂肪酶抑制活性成分,从而为确定枸骨叶活性成分的筛选和鉴定提供依据。

薄层色谱生物自显影法检测豆豉中乙酰胆碱酯酶抑制剂的研究

分别采用两种薄层色谱生物自显影法检测豆豉中乙酰胆碱酯酶抑制剂,结果表明两种方法均能较好检出豆豉中的抑酶组分,薄层色谱生物自显影法(二)深色背景与白色斑点对比更明显,检测效果更好。与薄层色谱生物自显影检测法相比,微孔板法的检测限更低,但最终检出所需试样量却更大。实验表明,采用薄层色谱生物自显影法检测豆豉中乙酰胆碱酯酶抑制剂是一个快捷、简便、高效的方法。

应用薄层色谱-生物自显影技术评价乌药等三种中药的抗氧化活性

目的采用薄层色谱-生物自显影法研究与评价中药的抗氧化活性。方法用1，1-二苯基-2-苦肼基自由基乙醇溶液（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）和传统显色剂显色，拍摄图像，采用模拟扫描，获得各抗氧化成分的峰面积。结果以总峰面积大小为指标判定不同来源中药的抗氧化能力，结果表明浙江天台产乌药（94340）、四川凉山产厚朴（175647）和收集于上海的紫苏子（153206）清除DPPH自由基能力最强。以化学对照品峰面积与总峰面积的百分比来判定化合物抗氧化活性，表明去甲异波尔定（43．8％～66．0％）、厚朴酚与和厚朴酚（73．2％～93．2％）、木犀草素与芹菜素及成分“U”（47．6％～68．0％）分别是乌药、厚朴和紫苏子的主要抗氧化活性成分。结论本方法在中药抗氧化活性成分筛选及质量评价方面具有操作简便、选择性高、重现性好等优点。

石蒜科生物碱的研究Ⅻ-薄层色谱鉴别石蒜生物碱和高效液相色谱法测定加兰他敏的含量

目的： 研究分离鉴别石蒜科生物碱加兰他敏和力可拉敏（ 二氢加兰他敏） 及加兰他敏含量测定的方法。方法： 采用硅胶薄层色谱分离鉴别石蒜生物碱， 以二氯甲烷－ 甲醇－ 氨水（９０∶１０∶０－５）展开， 稀碘化铋钾试剂显色； 高效液相色谱法采用硅胶柱， 流动相为二氯甲烷－ 甲醇（１００∶８） ， 检测波长为２５４ ｎｍ ， 线性范围为８０ ～３２０ μｇ ， ｒ ＝ ０－９９９ ６ 。结果： 硅胶薄层色谱可分离鉴别石蒜生物碱加兰他敏和力可拉敏， 硅胶柱高效液相色谱法分离加兰他敏和力可拉敏及测定加兰他敏的含量， 分离效果好， 定量准确。结论： 本法简便快速， 定量准确。在原料药和制剂的分析中有推广价值。

薄层色谱-生物自显影观察新疆两色金鸡菊中清除自由基和抑制α-葡萄糖苷酶活性成分

目的:采用薄层色谱-生物自显影技术(TLC-bioautography),观察新疆两色金鸡菊提取物中具有清除自由基和抑制α-葡萄糖苷酶活性成分.方法:以1,1'-二苯基苦基苯肼(DPPH)和2,2'-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为显色剂,观察新疆两色金鸡菊水提物和醇提物中清除自由基的有效成分;以对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p-Nitrophanyl-β-D-Gluopyranoside,p NPG)为底物,观察水提物和醇提物中具有抑制α-葡萄糖苷酶(来源于啤酒酵母菌)的活性成分.采用混合标准物质TLC色谱进行活性成分定性分析.结果:新疆两色金鸡菊水提物和醇提物中均含有马里苷、奥卡宁、栎草亭-7-O-β-D-葡萄糖苷、黄酮奥卡宁(flavanokanin)、绿原酸、芦丁和槲皮素等化学成分.经薄层色谱-生物自显影实验,两色金鸡菊水提物和醇提物中的黄酮奥卡宁、马里苷、芦丁和绿原酸均有较强清除DPPH和ABTS自由基的能力;水提物和醇提物中黄酮奥卡宁、奥卡宁和马里苷能有效抑制α-葡萄糖苷酶的活性.结论:经薄层色谱-生物自显影技术可快速发现两色金鸡菊中具有清除自由基和抑制α-葡萄糖苷酶活性成分,为进一步研究提供了指引.

薄层色谱-热辅助水解甲基化-气相色谱法测定生物柴油中的甘油酯

建立了薄层色谱-热辅助水解甲基化-气相色谱法测定生物柴油中残余甘油酯含量的方法。样品中的甘油酯经薄层色谱分离,萃取后与三甲基氢氧化硫(0.1 mol/L)各3μL先后加入到样品杯中,在350℃下,于裂解器中进行衍生化反应,气相色谱测定生成的脂肪酸甲酯,确定甘油酯的含量。生物柴油中常见的甘油一酯、二酯、三酯在60～2000 mg/L浓度范围内线性关系良好,r2为0.9863～0.9993。对于浓度为250 mg/L的4种甘油二酯重复测定5次,相对标准偏差为3.2%～7.2%。本方法对实际样品中的甘油酯的测定结果表明,方法准确、灵敏。

薄层色谱扫描法检测氟康唑对真菌麦角固醇生物合成的影响

目的：用薄层色谱扫描法检测抗真菌药物氟康唑对真菌麦角固醇生物合成的影响。方法：真菌与不同浓度氟康唑温育２４ｈ后计数、称量、皂化，提取真菌中难皂化脂，薄层层析，扫描测定其中的麦角固醇和羊毛固醇含量。结果：随着氟康唑浓度的增加，真菌中的麦角固醇含量逐渐减少，而羊毛固醇含量迅速增加。当抑制８５％的麦角固醇生物合成时，真菌生长繁殖的受抑率也在８５％左右。结论：薄层色谱扫描法能准确测定真菌中的麦角固醇和羊毛固醇含量，可用于考察抗真菌药物对真菌麦角固醇生物合成的影响。

高效薄层色谱法纯化合成寡核苷酸及其衍生物

在分子生物学研究的许多领域均需要一定纯度的寡核苷酸.目前寡核苷酸的纯化方法主要有高效液相色谱法及电泳法两种.这两种方法不仅需要一定的仪器设备而且纯化周期长(2—3d)、回收率低(50%—80%).文中报道建立了一种高效薄层色谱纯化寡核苷酸及其衍生物的方法.该方法可在3—4h 内获得寡核苷酸纯品,平 均回收率可达97.7%.

薄层色谱扫描法测定清肾颗粒中蒽醌类衍生物的含量

目的建立同时测定清肾颗粒中蒽醌类衍生物的含量测定方法。方法采用薄层扫描法对清肾颗粒中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚进行含量测定。展开剂为正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5),扫描波长λS=435 nm,参比波长λR=650nm。结果芦荟大黄素的线性范围是0.023 6～0.118 1μg(r=0.998 13),平均回收率101.32%,RSD=2.44%(n=6);大黄酸的线性范围是0.060 0～0.300 0μg(r=0.998 61),平均回收率为101.31%,RSD=1.45%(n=6);大黄素的线性范围是0.045 0～0.225 0μg(r=0.998 41),平均回收率为100.82%,RSD=2.36%(n=6);大黄素甲醚线性范围是0.046 7～0.233 3μg(r=0.99681),平均回收率为100.87%,RSD=2.80%(n=6);大黄酚线性范围是0.032 5～0.162 5μg(r=0.997 56),平均回收率为105.35%,RSD=2.49%(n=6)。结论该方法简便、快捷、准确,可用于清肾颗粒中蒽醌类衍生物的含量测定。

黑果腺肋花楸果微乳系统薄层色谱分析及生物自显影抗氧化活性研究

建立了新食品原料黑果腺肋花楸果实中多种成分半定量测定方法,并测定其抗氧化能力及初步确定抗氧化活性成分。以质量分数75%含水量微乳-甲酸(体积比9∶1)为展开剂,采用高效薄层色谱法同时对黑果腺肋花楸果实中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷和绿原酸进行含量测定,并采用DPPH自由基法和薄层生物自显影技术初步确定黑果腺肋花楸果中抗氧化活性成分。结果表明,方法学考察表明微乳系统薄层色谱分析方法良好;维生素C清除50%DPPH自由基质量浓度约为13.5μg/mL,黑果腺肋花楸质量浓度约为0.18 mg/mL;薄层生物自显影结果表明,黑果腺肋花楸果中矢车菊素-3-O-阿拉伯糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、绿原酸,新绿原酸均具抗氧化活性。该研究建立的高效薄层扫描方法重复性、稳定性好,可作为一个简单、快速的半定量方法,黑果腺肋花楸果中抗氧化活性的测定及成分指认可为后续研究奠定基础。

用薄层色谱扫描法测定微生物酶反应液中的布洛芬

用薄层色谱扫描法(TLCS)测定由微生物酶立体选择性水解布洛芬消旋酯生成布洛芬的转化率。酶水解的反应液经酸化处理后用正己烷提取,在硅胶薄层板上用甲苯-乙酸乙酯-乙酸(70:30:1.5)上行展开,然后对布洛芬斑点进行原位吸光度扫描,测定波长212nm,以外标二点法面积校正定量。本法在测定布洛芬量2—6μg范围内,响应呈现良好的线性关系。测定水解反应液转化率的最大相对标准偏差小于4%,加量回收率为97.4—101.0%。

薄层色谱法检测黄酒生物胺的研究

在传统薄层色谱检测技术的基础上,建立了一种改良的生物胺测定薄层色谱检测方法,并将该方法应用于不同发酵阶段及不同年份黄酒的生物胺检测。结果表明,该方法可以成功定性、定量检测黄酒中的生物胺,酒中主要是酪胺、组胺、亚精胺、尸胺和腐胺,其中组胺含量未超过50 mg/kg,生物胺总量未超过1 000 mg/kg,符合食品中生物胺限量标准。从生物胺的角度,说明黄酒是安全性食品。另外,与高效液相色谱法相比,本方法不但实现了黄酒生物胺的定性、定量分析,且操作简便、费用低,可同时检测多个样品。

薄层色谱和荧光分析法测定黄连生物碱在高速逆流色谱溶剂体系中分配系数的方法

目的研究薄层色谱和荧光分析法测定黄连生物碱在高速逆流色谱溶剂体系中分配系数的方法。方法当黄连生物碱的样品在溶剂体系分配平衡之后,收集等量的上下相,使用坡层色谱法进行点板,展开等操作后使用荧光分光光度分析法对黄连生物碱的样品荧光值进行检测,计算黄连生物碱在高速逆流色谱溶剂体系中的分配系数。结果黄连碱的Rf值是0.74,分配系数是2.20;表小檗碱的Rf值是0.61,分配系数是1.60;小檗碱的Rf值是0.29,分配系数是0.83;巴马汀的Rf值是0.21,分配系数是0.83。结论使用薄层色谱和荧光分析法对黄连生物碱在高速逆流色谱溶剂体系中分配系数进行测定具有检测时间短、准确度高、应用范围比较广的诸多优点,值得推广使用。

吲哚衍生物的薄层色谱分离方法

N-烷基化取代吲哚是吲哚苯酞类压敏染料的重要中间体,通过非N-烷基化取代吲哚进行相转移催化合成。为了采用薄层色谱法跟踪相转移催化反应,必须寻找取代吲哚在N-烷基化前后两者薄层色谱分离的条件。文献较多地报道了吲哚母体及含羧基、羟基、氨基、氰基、酯基等极性吲哚衍生物在有关展开剂中的比移值R_f,而对极性相差很小的N-烷基化和非N-烷基化取代吲哚的分离条件,尚未见详细报道。

径向展开薄层色谱法分离生物碱及其分离效能

径向展开薄层色谱法是一种将样品由中心沿径向向外展开的简便、快速、高效的色谱方法。该文组装了简单的径向展开薄层色谱装置,并建立了朱砂安神丸的径向展开薄层色谱检测法,对其中的生物碱成分进行分离,研究了径向展开薄层色谱的分离特性。从薄层色谱基础理论出发,对径向展开薄层色谱和一般薄层色谱的分离效能进行了比对研究,设计试验进行计算和求解。证明了径向展开薄层色谱法更快、更高效、更经济,适用于生物碱等高极性样品分离。探索了径向展开薄层色谱法高分离效率的理论根源,这一研究思路也为理论创新提供了新的方法和思路。

薄层色谱法分析苦豆子提取物中生物碱及黄酮类成分

目的建立苦豆子提取物薄层质量标准。方法采用硅胶薄层色谱法对苦豆子提取物中的生物碱类活性成分进行鉴别,以甲苯-丙酮-甲醇-氨水(8∶3∶0.2∶0.5)为展开剂,显色剂为改良碘化铋钾试液,白光下检视;采用聚酰胺薄膜层析色谱法对苦豆子提取物中的黄酮类活性成分进行鉴别,以微乳液为展开剂,先喷2-APB,后喷聚乙二醇400进行显色,紫外灯366 nm下检视。结果苦豆子提取物的生物碱供试品色谱图中,在与苦参碱、槐果碱、槐定碱对照品色谱相应的位置上,均显相同的橙色斑点,分离度好;黄酮供试品色谱图中有很多斑点,但没有相对应的对照品。结论采用薄层色谱定性鉴别苦豆子提取物的主要生物碱成分为苦参碱、槐果碱、槐定碱;由于缺乏对照品,不能确定苦豆子提取物中的黄酮类成分具体是哪些物质。建立的薄层色谱方法简单易行,重现性好,为苦豆子提取物的质量标准提供了依据。

远志薄层色谱鉴别及生物自显影色谱筛选研究

目的通过远志薄层色谱及生物自显影色谱分析,为远志质量评价及对抑制乙酰胆碱酯酶活性成分筛选提供支持。方法采用薄层色谱法分离和自显影活性测定技术,对不同来源远志进行多成分分离及抑制乙酰胆碱酯酶活性分析。结果远志药材可见十二个薄层色谱主斑点,远志汕酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖、远志糖苷A可用于远志药材鉴别;细叶远志皂苷、远志皂苷元可用于远志药材质量评价。利用生物自显影色谱斑点初步筛选出1个活性成分。结论远志薄层色谱鉴别方法简便易行,特征性强,可以用于不同远志药材鉴别以及评价药材质量优劣;薄层生物自显影色谱适用于远志乙酰胆碱酯酶抑制成分的筛选。

薄层色谱-生物自显影技术在活性物质筛选中的应用

薄层色谱-生物自显影技术(TLC-bioautography)将薄层色谱分离和生物活性测定相结合,是一种活性指导下的快速靶向追踪分离、筛选活性成分的方法。此法操作简单、耗时短、灵敏度和专属性高,常应用于抗细菌、抗真菌、抗氧化,以及对乙酰胆碱酯酶抑制剂、葡萄糖苷酶抑制剂等活性天然产物的筛选。笔者对薄层色谱-生物自显影技术在活性物质筛选方面的应用进行综述。

二维薄层色谱法在苦参生物碱成分分析中的应用

建立可用于苦参的二维薄层色谱方法。采用微波加热的方法快速获得苦参提取液,在硅胶薄层板上,以氯仿和甲醇(4:1,v/v)为第一维展开剂,以乙腈和水(9:1,v/v)为第二维展开剂,分别对苦参提取液、苦参碱和氧化苦参碱溶液进行二维展开,通过与苦参碱和氧化苦参碱的标准品的二维展开对比,并结合液质联用技术,对二维展开的定性分析能力进行评价。二维薄层色谱可以提供多维度的分离和Rf信息,适用于中药等复杂体系的初步分离和定性分析。

薄层色谱自显影法分离检测海洋放线菌T-2-3中抑菌成分

目的:采用薄层色谱生物自显影方法对北极海洋放线菌T-2-3提取物的抑菌成分进行研究。方法采用大孔树脂对该放线菌活性成分进行富集,并针对活性成分进行薄层生物自显影检测。结果经检测,Rf 0.40的点为活性化合物。结论薄层色谱生物自显影法是一种快速分离检测抑菌成分的实验手段。