包埋青蛤免疫活性肽脂质体的制备及性质表征

为进一步提高青蛤免疫活性肽(Cyclina sinensis immunoceactive peptides,SCSP)的免疫调节功能,寻求更好的多肽递送方法,采用脂质体技术包埋SCSP,优化其制备工艺,并探究其理化性质和生物活性。比较了乙醇注入法、薄膜水合法、逆相蒸发法对包埋SCSP脂质体(SCS P-LIP)的平均粒径和包封率的影响;以平均粒径、包封率为评价指标,蛋黄卵磷脂质量、胆固醇与蛋黄卵磷脂质量比、SCSP与蛋黄卵磷脂质量比为变量,优化SCS P-LIP的制备工艺;考察了SCS P-LIP在4℃和25℃条件下贮藏7 d的稳定性;探究了SCS P-LIP对RAW 264.7细胞的免疫调节和细胞摄取效果。研究结果表明,薄膜水合法较适合SCS P-LIP的制备,优化制备条件为蛋黄卵磷脂质量40 mg、胆固醇与蛋黄卵磷脂质量比1∶4、SCSP与蛋黄卵磷脂质量比1∶4、探头超声12 min,在此条件下,SCS P-LIP的平均粒径为(107.500±2.301)nm,多分散指数为0.175±0.023,Zeta电位为(-29.800±0.577)mV,包封率为69.95%±1.24%。SCS P-LIP体系澄清透明,无特殊气味;透射电镜结果显示,SCS P-LIP呈球状,分布均匀;红外光谱结果显示,SCSP被包裹在脂质体极性部位;贮藏稳定性结果表明,SCS P-LIP更适合于4℃条件下避光保存;细胞实验结果表明,SCS P-LIP具有促RAW 264.7细胞增殖分化作用,对巨噬细胞吞噬功能的提升比SCSP更强,且具有较好的细胞摄取效果。研究结果表明,SCS P-LIP的制备工艺简单、性质稳定,有望为进一步开发具有免疫调节活性的多肽类功能食品提供技术参考。