高效液相色谱法测定林芝市藏丹参丹参酮ⅡA的含量

目的:运用高效液相色谱法测定西藏林芝市4个藏丹参资源丰富区内藏丹参的丹参酮ⅡA的含量。方法:色谱条件为Supersil ODS2-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.02%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,20℃恒温柱温,检测波长为270 nm,进样量10μL。分别采用超声提取和醇提水沉法提取藏丹参中的丹参酮ⅡA,比较两种方法及不同产地之间的含量差异。结果:超声提取和醇提水沉两种方法均可提取到丹参酮ⅡA,醇提水沉提取量更高,更加适合丹参酮ⅡA的工业化生产。对四个优势产区进行含量检测,米林市的样品含量相对稳定,朗县的样品含量更高。结论:本方法简单准确、高效、稳定性好,为藏丹参的资源开发和种植提供了参考,并为藏丹参资源的充分利用提供了科学依据。

藏丹参的化学成分及药理作用研究进展

藏丹参是一种生长在高原地区的药材。藏丹参含丹参酮、丹酚酸等多种有效药用成分,拥有抗炎、抗菌、抗肿瘤、保护血管、保护神经等多种药理作用。为进一步开发利用藏丹参,本文将对藏丹参的化学成分及其药理作用研究进展进行综述。

丹参和藏丹参毛状根MYB和bHLH转录因子基因表达差异研究

为了筛选参与丹参次生代谢的 MYB 和 bHLH 转录因子,选取47个 MYB 转录因子和47个 bHLH 转录因子基因进行分析。采用实时荧光定量PCR的方法,比较藏丹参和紫花丹参毛状根 MYB 和 bHLH 的基因表达差异。结果表明:4个 MYB 和6个 bHLH 在藏丹参中高表达,24个 MYB 和15个 bHLH 在丹参中高表达,19个 MYB 和26个 bHLH 在两种材料中表达差异不明显。这些差异表达基因可能与藏丹参高丹参酮和迷迭香酸积累以及低丹酚酸B积累有关。这为进一步研究藏丹参和紫花丹参次生代谢差异机制奠定了基础。

不同氮源对丹参和藏丹参毛状根有效成分积累的影响

目的氮素是中药材有效成分积累的重要影响元素,为探讨不同氮源对丹参Salviamiltiorrhiza和藏丹参Salvia castanea毛状根生长和活性成分积累的影响。方法分别采用硝酸铵、水解乳蛋白、蛋白胨、牛肉浸膏、酪蛋白和酵母提取物6种氮源处理对丹参和藏丹参毛状根的影响,分析毛状根生长及活性成分积累的变化。结果硝酸铵最有利于2种丹参毛状根的生长。水解乳蛋白能够显著促进丹酚酸类成分的积累,与硝酸铵对照相比,丹参迷迭香酸和丹酚酸B含量分别提高了2.94倍和3.27倍,藏丹参二者含量分别提高了13.74倍和2.01倍。酵母提取物对2种丹参毛状根二氢丹参酮Ι和隐丹参酮积累的促进效果最为显著,水解乳蛋白能显著促进丹参根中丹参酮IIA的积累,牛肉浸膏则对藏丹参中丹参酮IIA积累的促进作用最为显著。结论硝酸铵是2种丹参毛状根生长的最佳氮源,水解乳蛋白是丹酚酸积累的最佳氮源,不同氮源对4种丹参酮的影响不一致,丹参和藏丹参对不同氮源的响应也不一致。该研究不仅对丹参毛状根规模化培养及活性成分工业化生产具有一定指导意义,也对藏丹参资源的开发利用提供了借鉴作用。

不同碳源对丹参和藏丹参毛状根生长及活性成分积累的影响

为探讨不同碳源对丹参和藏丹参毛状根的产量和活性成分积累的影响,以丹参和藏丹参的毛状根为试验材料,采用半乳糖、果糖、乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖和蔗糖(对照)等6种碳源处理,测定毛状根的鲜重、干重以及丹酚酸类、丹参酮类成分的含量与产量。结果表明,半乳糖对丹参和藏丹参毛状根的生长最为有利,而乳糖和阿拉伯糖不利于2种毛状根生长。对于丹参毛状根,果糖显著促进了丹酚酸B的积累,含量与产量分别比对照组提高了5.801,10.151倍;葡萄糖显著促进了丹酚酸的积累,其中迷迭香酸的含量和产量分别为对照组的7.674,9.260倍,丹酚酸B的含量和产量分别为对照组的5.532,6.675倍。对于藏丹参毛状根,半乳糖显著提高了迷迭香酸的含量和产量,分别达到对照组的7.820,9.944倍;果糖显著促进了隐丹参酮的含量和产量增加,分别达到对照组的9.242,6.609倍。该研究确定了丹参和藏丹参毛状根培养的最佳碳源,为丹参药源性成分的大规模生产以及藏丹参的资源开发利用提供理论支持与指导。

两种丹参毛状根对茉莉酸甲酯的差异响应

为了阐明紫花丹参和藏丹参对信号分子的差异响应,选择茉莉酸甲酯作为信号分子诱导两种丹参毛状根的代谢,对比两者生长状态、次生代谢物积累变化和基因表达模式。结果表明:200μmol/L茉莉酸甲酯显著促进藏丹参毛状根中二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮IIA、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸B积累,而对紫花丹参仅仅影响其毛状根中二氢丹参酮I、隐丹参酮、咖啡酸和丹酚酸B积累;藏丹参毛状根中参与丹参酮和丹酚酸合成的关键基因比紫花丹参毛状根中相应基因更强烈地响应茉莉酸甲酯诱导,这可能导致藏丹参毛状根产生更强烈的隐丹参酮、丹参酮IIA、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸B代谢响应。