维生素C对藏猪精液4℃保存及其精子全基因组DNA甲基化的影响

旨在研究维生素C对藏猪精液4℃保存效果及其精子全基因组DNA甲基化的影响。用手握法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度的维生素C(0.0、2.5、5.0、7.5、10.0g·L^(-1)),4℃保存到第5天时,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价指标,探讨维生素C对藏猪精液4℃保存的效果;用甲基化荧光定量法检测藏猪新鲜精液组、保存到第5天时未添加维生素C组、添加维生素C组(添加维生素C最佳效果组5.0g·L^(-1))精液DNA甲基化的水平,以探讨维生素C对藏猪精液4℃保存所造成的精子全基因组DNA甲基化的影响。结果显示:添加5.0g·L^(-1)维生素C组其精子活力、畸形率、顶体完整率和质膜完整率均显著好于其它组(P<0.05);鲜精组、未添加维生素C组、添加维生素C组的DNA甲基化水平分别为(0.604 7±0.040 3)、(0.920 2±0.016 9)、(0.656 9±0.048 3)ng,鲜精组与添加组均显著低于未添加组(P<0.05),而鲜精组与添加组间差异不显著(P>0.05)。综上表明,在改进的猪精液稀释液中添加5.0g·L^(-1)维生素C可以明显改善藏猪精液4℃保存的效果,并且可以明显降低4℃保存对藏猪精液精子全基因组DNA甲基化的影响,这将为藏猪精液低温保存的生产应用奠定基础。

不同稀释液对藏猪精液4℃保存效果的影响

为探讨不同精液稀释液对4℃保存藏猪精液的效果,保证优良藏猪种公猪精液的合理、高效利用,该试验选用5种常用的猪精液常温保存稀释液,并在藏猪精液4℃保存至第5天时检查藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率等。结果表明,在精液保存过程中,2号液对藏猪精液的保存效果最佳,精子活力在保存至第5天时仍然保持在0.54,且藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率均高于其余4组(P<0.05)。该试验研究初步筛选了4℃保存藏猪精液的稀释液,为今后藏猪精液的生产应用奠定了基础。

红景天多糖对藏猪精液冻后品质及精子基因组DNA甲基化的影响

在藏猪精液的冷冻液中添加不同质量浓度的红景天多糖(0,2,4,6,8,10mg/L),制成高密度细管冻精,以冷冻解冻后精子活率、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为精液品质的评价指标,筛选最适红景天多糖添加质量浓度;用甲基化荧光定量法检测3组(鲜精组、未添加组、最适添加组)精子基因组DNA甲基化的水平。结果显示:添加红景天多糖质量浓度为6mg/L组的精子活率显著高于其他组(P<0.05),该组精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率也显著好于未添加组(P<0.05);这3组精子基因组的DNA甲基化水平(0.610 5±0.080 0,0.945 7±0.043 7,0.680 2±0.051 0)中,最适添加组虽显著高于鲜精组(P<0.05),但却显著低于未添加组(P<0.05)。结果表明:在藏猪精液冷冻液中添加质量浓度6mg/L的红景天多糖不仅可以明显改善藏猪精液冻后品质,而且可以明显减少冷冻对藏猪精子基因组DNA甲基化水平的影响,这将为提高藏猪精液冷冻保存效果的进一步研究提供参考。

不同温度对高原藏猪精液保存效果的影响

为了提高高原藏猪人工授精的成功率,试验采用猪精液质量自动检测系统对8℃、17℃、25℃不同保存温度的藏猪精液进行质量检测,并统计活精子数及pH值。结果表明:在8℃、17℃、25℃条件下藏猪精液色泽无明显变化;在第72小时,25℃条件下精液散发出浓烈的腥臭味;第12,24小时,8℃、17℃、25℃温度下精液的活精子数无显著变化(P>0.05);第36小时,在17℃和25℃下活精子数显著高于8℃下保存的精液(P<0.05);第96小时,17℃保存的精液活精子数明显高于25℃,差异不显著(P>0.05);17℃保存条件下,精液pH值第12小时下降了0.09,第24小时后上升到7.31,第60小时达到7.47,之后趋于稳定。说明17℃的保存温度是藏猪精液长时间保存的最佳选择,精子各项指标最佳;藏猪精液pH值总体呈现先下降后上升,最后趋于稳定的趋势,在pH值呈弱碱性条件下对藏猪精液稀释液进行短期的保存是可行的。