藏药兔耳草超声提取总黄酮的工艺研究

用正交试验法对藏药兔耳草中的黄酮类化合物提取工艺进行了优选研究,采用正交表L9(34),以提取时间,提取次数,提取剂中乙醇含量以及料液比为因素,以总黄酮显色液的吸光度为指标进行试验,得到最佳提取参数为:提取剂浓度80%,超声提取时间30分钟,提取次数3次,料液比1∶9.

藏药短穗兔耳草提取物对急性痛风性关节炎大鼠TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路的影响研究

目的:通过向大鼠右后踝关节注射尿酸钠结晶(MSU)建立大鼠急性痛风性关节炎模型,初步探讨藏药短穗兔耳草提取物抗急性痛风性关节炎的作用机制。方法:60只SD雄性大鼠随机均匀分成正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.3 mg/kg)阳性药组及短穗兔耳草低(0.8 g/kg)、中(1.6 g/kg)、高(3.2 g/kg)剂量组,每日上午各给药组按10 mL/kg给予相应药物灌胃,正常对照组与模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药7 d,于第5天给药后1 h向除正常对照组外各组大鼠右后踝关节注射0.1 mL(50 mg/mL)尿酸钠溶液建立急性痛风性关节炎模型,正常对照组注射等体积无菌氯化钠溶液。足趾容积测量仪检测大鼠右后踝关节的关节肿胀度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;蛋白印迹法(Western blot)检测关节滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达;显微镜下观察关节滑膜组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,模型组在6~48 h踝关节肿胀率显著升高(P<0.01),血清TNF-α水平及滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达显著升高(P<0.01);关节滑膜病理学形态改变明显。与模型组比较,在造模48 h后各给药组大鼠踝关节肿胀率均显著降低(P<0.05或P<0.01);各给药组血清TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);短穗兔耳草高剂量组滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。同时组织病理切片显示藏药短穗兔耳草能改善大鼠滑膜组织病理学变化。结论:藏药短穗兔耳草对尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎大鼠具有一定的保护作用,其机制与TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路有关。

藏药短管兔耳草血中移行成分及其与XOD分子对接研究

目的:研究藏药短管兔耳草(Lagotisbrevituba Maxim)血中移行成分及其潜在的黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制活性,为基于藏药短管兔耳草的降尿酸新药开发提供依据。方法:采用UPLC-Q-TOF/MS液质联用仪分析藏药短管兔耳草提取物灌胃后入血成分,得到各成分的总离子流图和二级质谱图,结合对照品与文献,对各色谱峰进行鉴定。同时,应用分子对接软件研究各成分与XOD的亲和力,预测各成分潜在的XOD抑制活性,并测试了部分捕集成分活性。结果:共检测出14个入血成分,鉴定了11个成分,其中8个为原型成分,3个为代谢成分。这些成分均可与XOD自发结合,其中8个成分对XOD具有抑制活性。结论:UPLC-Q-TOF/MS联用分子对接技术可成功解析藏药短管兔耳草提取物血中移行成分及其潜在的XOD抑制剂,为短管兔耳草降尿酸新药的开发提供了一定实验依据。

藏药短管兔耳草醇提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

研究藏药短管兔耳草醇提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。随机将小鼠分为正常对照组、模型组、兔耳草醇提物组(2.0、4.0、8.0g/kg),均连续灌胃给药15d,模型组为环磷酰胺制备免疫抑制模型,检测胸腺脾脏指数、血清溶血素抗体生成、碳粒廓清指数、迟发型超敏反应,流式检测脾脏T细胞亚群的变化及IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ的水平。与模型组相比,兔耳草醇提物各剂量组均可提高小鼠胸腺指数(P<0.05),高、中剂量组可提高小鼠胸腺脾脏指数(P<0.05,P<0.01),同时各剂量组可增加血清溶血素含量(P<0.05)、提升小鼠的廓清指数(P<0.05)和DNCB所致迟发型超敏反应(P<0.01)。此外,通过流式细胞仪对各组小鼠脾脏中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的检测发现,兔耳草醇提物组可增加小鼠脾脏T细胞的活化与数量,且CD4+/CD8+T细胞比值有差异(P<0.01);另外,兔耳草各剂量组可提升小鼠的IL-4、IFN-γ的水平(P<0.05),但会抑制IL-2、TNF-α的分泌(P<0.05)。以上结果提示藏药短管兔耳草醇提物可从多方面缓解免疫抑制小鼠的免疫功能。