HPLC-MS/MS法测定N+辐射后金莲花荭草苷、牡荆苷、藜芦酸含量

采用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定氮离子(N+)注入后金莲花(Trollius chinensis Bunge)中荭草苷(orientin)、牡荆苷(vitexin)和藜芦酸(veratric acid)含量。样品经甲醇提取后,以超纯水和乙腈为流动相,选用Agilent ZORBAX XDB-C18色谱柱洗脱分离,采用多反应监测模式(MRM)和电喷雾离子源(ESI)负离子模式检测。结果表明:荭草苷、牡荆苷、藜芦酸分别在20~500、40~500、10~1000 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,决定系数均大于0.99;该方法的精密性和稳定性良好,分别在2.23%~3.19%和5.30%~6.94%之间;3种化合物的平均加标回收率在97.06%~98.54%之间,相对标准偏差在2.23%~5.22%之间。该方法具有良好的灵敏度和准确性,适合金莲花中荭草苷、牡荆苷和藜芦酸含量的检测。此外,荭草苷和藜芦酸分别在N+注入剂量为5×10^(15)、2×10^(15)ions·cm^(-2)时其含量最高,牡荆苷在各N+注入剂量下含量均低对照。

藜芦酸抑制LPS刺激的RAW264.7细胞中NO表达的研究

目的:为了观察藜芦酸在LPS刺激的RAW264.7细胞中对一氧化氮(NO)及前炎性因子等表达的抑制作用。方法:采用Griess试剂对RAW264.7细胞培养上清中的NO进行检测;用ELISA法对IL-6、IL-1β及TNF-!等前炎性因子进行分析;并通过Western blot法对诱导型NO合酶(iNOS)、STAT-1及NF-"B的表达进行检测。结果:藜芦酸能显著抑制由LPS刺激的RAW264.7细胞中的NO产生及iNOS的表达,并呈剂量依赖的特点;且还检测到藜芦酸能抑制IL-6的产生,此外,藜芦酸还能抑制STAT-3及NF-"B的磷酸化。结论:本研究揭示了藜芦酸可以中和炎症疾病中产生的过量的NO。

藜芦酸葡萄糖酯的人肠内菌转化研究

采用人肠内菌体外转化模型对藜芦酸葡萄糖酯的肠内菌转化进行了研究。结果表明,藜芦酸葡萄糖酯在3 h内被完全转化为藜芦酸,而肠内菌增殖的对数生长期为1.5-3 h。因此,藜芦酸葡萄糖酯可被人肠内菌转化为藜芦酸,其转化速率与肠内菌的增殖速率呈现正相关。

原儿茶酸和藜芦酸与生物大分子相互作用的光谱学研究

原儿茶酸(P)和藜芦酸(V)属于酚酸类化合物,具有广泛的生理和药理活性。应用荧光光谱,紫外光谱等方法研究了P和V与鱼精DNA(fsDNA)的相互作用机理。紫外光谱显示P和V在190～230 nm(K吸收带)、230～270 nm(B吸收带)和270～310 nm(R吸收带)有3个较强的吸收带。在280 nm激发光波长时,位于338和334 nm处有强的荧光发射峰,其荧光发射峰在与fsDNA结合后发生明显的猝灭现象。P和V的stern-vol mer猝灭速率常数分别1.03×1012和0.61×1012L.mol-1.s-1,为静态猝灭机理。药物与DNA之间形成了复合物,结合常数分别为KfsDNA/P=6.22×106L.mol-1、KfsDNA/V=1.57×104L.mol-1。研究表明,V与DNA之间的结合比为1∶1,而P可以与DNA分子中的两个碱基发生结合,这与P分子中的两个酚羟基有关。P和V的结构对它们与DNA的结合方式有较大的影响。

肝微粒体和肝S9转化藜芦酸葡萄糖酯比较研究

目的比较2种体外肝代谢模型转化藜芦酸葡萄糖酯的转化样式和转化率差异。方法通过大鼠肝微粒体和肝S9体外转化模型对藜芦酸葡萄糖酯进行生物转化,采用HPLC检测转化底物及产物的含量,检测波长254 nm,流动相为乙腈(A)-1%乙酸溶液(B),梯度洗脱(0~6 min,5%~40%A;6~9 min,40%~50%A;9~11 min,50%~5%A),流速1.0 m L/min。结果 2种模型均可将藜芦酸葡萄糖酯转化为藜芦酸,但应用肝S9模型得到的代谢产物多于肝微粒体模型,且肝S9模型对酯类的转化率高于肝微粒体模型。结论肝S9模型对酯类的转化能力高于肝微粒体模型。

高藜芦酸邻菲咯啉铽(Ⅲ)配合物的合成、晶体结构及荧光光谱

A terbium(Ⅲ) complex [Tb2(NO3)(DMPA)5(phen) 2] (HDMPA=homoveratric acid, C12H12O4; phen=1,10- phenanthroline), was synthesized and characterized by elemental analysis, IR and TG-DTG. Its crystal structure was determined by single crystal X-ray diffraction method. The complex, C74H71N5O23Tb2, crystallizes in the monoclinic system, space group P21/n. The emission spectrum of complex, there are four main peaks, 489, 545, 584 and 622 nm, respectively, corresponding to 5D4→7F6, 5D4→7F5, 5D4→7F4 and 5D4→7F3 transitions of Tb(Ⅲ). The intensity of 5D4→7F5 is much stronger than others.

两例基于藜芦酸配体构筑的铜(Ⅱ)配合物合成和晶体结构

本文合成了藜芦酸吡啶铜(Ⅱ)配合物1(C_(28)H_(30)CuN_(2)O_(9))和藜芦酸2,2’-联吡啶铜(Ⅱ)配合物2(C_(28)H_(28)Cu-N_(2)O_(9)),通过元素分析和热重分析对其进行了表征,用单晶射线衍射仪测定了配合物的晶体结构。配合物1:晶胞参数a=6.0770(2)Å,b=19.7884(5)Å,c=23.0166(5)Å,α=90°,β=90°,γ=90°,晶胞体积V=2767.84(13)A^(3),晶胞内分子数Z=4,相对分子质量Mr=602.08,电子数F(000)=1252,密度Dc=1.445mg·m^(-3)。配合物2:晶胞参数a=12.2882(13)Å,b=11.2143(11)Å,c=19.419(2)Å,α=90°,β=101.069(4)°,γ=90°,晶胞体积V=2626.3(5)A^(3),晶胞内分子数Z=4,相对分子质量Mr=600.06,电子数F(000)=1244,密度Dc=1.518mg·m^(-3)。

藜芦酸铜(Ⅱ)配合物的合成和晶体结构

合成了藜芦酸邻菲啰啉铜(Ⅱ)配合物(C_(30)H_(26)CuN_(2)O_(8)),通过元素、热重分析对其进行了表征,用单晶射线衍射仪测定了配合物的晶体结构,结果显示,配合物属于单斜晶系,C2/c空间群。热重分析表明配合物在室温下稳定。

藜芦酸的合成研究

以邻苯二酚为起始原料,将其与硫酸二甲酯反应得到邻苯二甲醚,经过Vilsmeier反应得到藜芦醛,在双氧水与NaOH溶液作用下得到藜芦酸,所得藜芦酸结构经IR确认。本合成方法成本低廉,工艺简单,适合工业化生产。

藜芦酸在大鼠体内的药代动力学

目的：考察藜芦酸在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠口服灌胃给予藜芦酸，在不同时间点采集血样，选择3，4-二羟基苯甲酸甲酯为内标，采用HPLC测定血药浓度，流动相乙腈（A）-1％乙酸（B）梯度洗脱（0-11min，5％-57％A；11～13min，57％～5％A），检测波长256nm，绘制血药浓度-时间曲线，通过Kinetica4．4软件计算药代动力学参数。结果：灌胃给药后藜芦酸在大鼠体内的达峰时间分别为（45．00±10．00），（31．00±8．22）min，存在二次达峰现象；高、低剂量组的Cmax分别为（176．85±28．89），（68．14±12．58）mg·L-1，t1/2分别为（87．74±20．74），（227．18±93．78）min，AUC0-∞分别为（50363．50±11667．7），（18830．32±4354．35）min·mg·L-1，MRT0-∞分别为（201．39±16．72），（227．40±21．37）min。结论：藜芦酸口服吸收较快，消除较慢，体内作用时间较长。

含藜芦酸单元的马蹄金素衍生物的合成及其抗HBV活性研究

目的:设计合成一系列新的马蹄金素(Matijin-Su,MTS)衍生物,并研究其抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)活性。方法:以化合物MTS为先导化合物,通过引入藜芦酸结构单元,设计并合成了新型MTS衍生物,其结构经NMR,ESI-MS确认,并对所合成的目标化合物进行体外细胞抗HBV活性测试。结果:设计并合成了20个含藜芦酸单元的MTS衍生物并进行了抗乙肝病毒的测试。化合物23,24,25表现出良好的抗HBV活性,其IC50为6. 17,9. 18和8. 29μmol·L-1。结论:含有藜芦酸结构的MTS衍生物具有进一步研究的价值。

白藜芦醇乙酰阿魏酸酯的合成

合成了白魏藜芦醇乙酰阿魏酸酯。以阿魏酸为原料与乙酸酐先制得乙酰阿魏酸,再与二氯亚砜反应制得乙酰阿魏酰氯,然后和白藜芦醇反应合成白藜芦醇乙酰阿魏酸酯,并用IR、MS、1H NMR等方法确证了结构。结果表明:该方法具有工艺简单,产率较高,操作方便等优点。

白藜芦醇桂皮酸酯的合成及抗肝损伤实验研究

目的优选白藜芦醇桂皮酸酯的最佳合成工艺,并研究其抗肝损伤的作用。方法以桂皮酸、白藜芦醇为起始原料,经酰氯化、酯化等反应,得到目标化合物;观察白藜芦醇桂皮酸酯对急性肝损伤小鼠的保护作用。结果设计合成了白藜芦醇桂皮酸酯,且其具有比较明显的抗四氯化碳致小鼠肝损伤的作用。结论提供了一种白藜芦醇桂皮酸酯的最佳合成工艺,其方法为:吡啶催化,n(白藜芦醇)∶n(桂皮酰氯)=1∶2,反应时间为5 h,反应产率达90.1%以上。产物经过IR、1H-NMR等进行了表征。

白藜芦醇Labrasol/P407混合胶束稳定性及大鼠体内药动学研究

目的:以白藜芦醇为对照,探讨白藜芦醇-Labrasol/P407混合胶束在大鼠体内的药动学。方法:透析法考察混合胶束在人工胃液和人工肠液的稀释稳定性;大鼠灌胃给药后,采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS方法测定大鼠血浆中白藜芦醇和白藜芦醇-3-葡萄糖醛酸苷的浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果:混合胶束在人工胃液和人工肠液的稀释稳定性良好。与白藜芦醇混悬剂相比,白藜芦醇-Labrasol/P407混合胶束中白藜芦醇在大鼠体内C_(max)(1389.9±373.2 ng/mL)是混悬剂(188.9±58.9 ng/mL)的7.4倍,相对生物利用度是混悬剂的9.6倍;白藜芦醇-3-葡萄糖醛酸苷的达峰浓度(C_(max))分别为(3060.7±787.4)ng/mL和(1298.1±523.2)ng/mL,血药浓度-时间曲线下面积(AUC_(0~24))分别为(14294.9±6085.1)ng·h/mL和(6061.5±874.4)ng·h/mL,分别下降57.59%和57.60%,具有显著性差异(P<0.05)。结论:将白藜芦醇制成混合胶束后可显著提高白藜芦醇的血药浓度和相对生物利用度。

白藜芦醇氧烷酸类衍生物的设计与合成

目的寻找更好的苯氧烷酸类降血脂药物。方法以白藜芦醇、α-溴代异丁酸乙酯为原料,经SN1型取代反应得到二种苯氧烷酸类化合物。所有目标化合物通过红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、质谱(MS)进行结构确证。结果设计、合成并得到相应的产物。结论为降血脂药物开发提供线索。

金莲花中首次分离的一个酚酸类化合物及其抗炎和抑菌活性

目的:研究首次从金莲花(Trollius chinensis Bunge)中分离得到的一个酚酸类化合物的结构及其体外生物活性。方法:经波谱方法鉴定其化学结构,采用微量稀释法和Griess法对该化合物进行了体外抑菌和抗炎活性研究。结果:经1H NMR、13C NMR和二维谱鉴定该化合物为藜芦酸葡萄糖酯,对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO的抑制作用的IC50=264.1μmol·L-1,对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC值分别为256和128μg·m L-1。结论:该化合物具有一定的抗炎和抑菌作用,可被视为金莲花的抗炎和抑菌有效成分之一。

新型喹唑啉类酪氨酸激酶化学抑制剂的设计与合成

以6-氨基藜芦酸和醋酸甲脒为起始原料,合成了一系列4-位具有不同芳胺基团,6,7-位引入不同取代基的新型喹唑啉类酪氨酸激酶化学抑制剂,其结构经1H NMR表征。

基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中6种成分含量

目的建立基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷6个成分的含量。方法以Agilent Eclipse Plus C_(18)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相(梯度洗脱),流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm。分别以荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷为内参物,采用一测多评法建立另外5个待测成分与内参物的相对校正因子,然后计算21批金莲清热颗粒样品中6个成分的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果一测多评法测得21批金莲清热颗粒样品中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷的含量范围分别为0.234~0.516、1.804~2.270、2.143~2.606、0.190~0.223、0.594~0.782、0.080~0.152 mg/g,外标法测定结果分别为0.235~0.523、1.798~2.265、2.137~2.599、0.190~0.224、0.597~0.786、0.077~0.151 mg/g,2种方法所测结果的差异百分比不大于4.00%。结论建立了基于多种内参物同时测定金莲清热颗粒中6种成分含量的一测多评法,该方法与外标法所得结果无明显差异,可用于金莲清热颗粒的质量控制。

HPLC法比较市售与野生金莲花中四种活性成分的含量

目的:建立金莲花中荭草素半乳糖苷、荭草素、牡荆素和藜芦酸的HPLC含量测定方法,并比较市售金莲花与野生金莲花药材中这4种成分的含量差异。方法:采用HPLC法,色谱柱为Synergi Polar-RP苯基C18(4μm,250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈(A)-1%乙酸(B);洗脱程序(0~23 min,2%~20%A;23~28 min,20%~25%A;28~40 min,25%~50%A),柱温:35℃;检测波长256 nm。结果:市售金莲花中荭草素半乳糖苷、荭草素、牡荆素、藜芦酸的含量分别在0.92~9.72、0.77~7.32、0.18~2.53、0.09~0.30 mg/g范围内,野生金莲花中荭草素半乳糖苷、荭草素、牡荆素、藜芦酸的含量分别在1.06~4.82、0.47~2.89、0.64~2.16、0.13~0.46mg/g范围内。结论:市售金莲花与野生金莲花中4种成分的含量整体上没有明显差异,但是,无论是市售金莲花还是野生金莲花,4种成分的含量一致性均较差。