基于UPLC-Q TOF-MSE技术的藤黄健骨丸指纹图谱建立及共有峰鉴定

建立藤黄健骨丸高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,完善产品质量标准。采用Waters Symmetry C18(150 mm×2.1 mm,3.5μm)色谱柱;流速为0.4 mL/min;进样量为2μL;紫外检测波长为260 nm;在柱温30℃下以0.1%甲酸水(A)和0.1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版本)”建立藤黄健骨丸指纹图谱,并分析相似度。采用液质联用技术(UPLC-Q TOF-MSE),根据化合物串联质谱信息结合对照品进行了共有峰结构鉴定。共确定了10批藤黄健骨丸指纹图谱中20个共有峰,相似度均在0.95以上。基于对照品和串联质谱信息指认了共有峰中13种成分的结构,并进行了峰归属。对10批藤黄健骨丸指纹图谱共有峰的相对保留时间和相对峰面积进行了计算,结果显示各批次样品共有峰的相对保留时间和相对峰面积均比较稳定,表明它们所对应的各成分含量较为均一。采用该指纹图谱对中间体进行了相似度评价,发现中间体与成品相关性良好。该方法精密度、重复性和稳定性好,不仅可用于藤黄健骨丸成品的质量控制,还可对中间体进行检测,用于生产过程的控制。

踝关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合双氯芬酸临床观察

目的:观察踝关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合双氯芬酸的效果。方法:96例采用随机数表法分为对照组48例和观察组48例,两组术后均予以双氯芬酸,观察组加用藤黄健骨丸。结果:治疗7d后观察组瘀斑、肿胀、疼痛评分低于对照组(P<0.05),视觉模拟评分法(VAS)评分低于对照组(P<0.05),白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平均低于对照组(P<0.05),AOFAS踝-后足评分和Baird-Jackson踝关节评分评分低于对照组(P<0.05)。结论:踝关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合双氯芬酸能减轻瘀斑、肿胀、疼痛,促进关节功能恢复。

骨质疏松性髋关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合阿法骨化醇临床观察

目的:观察骨质疏松(OP)性髋关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合阿法骨化醇的效果。方法:106例随机分为试验组和对照组各53例。两组术后均用阿法骨化醇,试验组加用藤黄健骨丸。结果:试验组Harris髋关节评分高于对照组,VAS评分低于对照组(P<0.05)。试验组CTX、NTX和BGP水平低于对照组,骨密度高于对照组(P<0.05)。两组不良反应差异性不显著(P>0.05)。结论:OP性髋关节骨折术后应用藤黄健骨丸联合阿法骨化醇可改善骨代谢,减轻疼痛,疗效较好且安全。

藤黄健骨丸调控BMP-2/Smad信号通路治疗绝经后骨质疏松症

目的观察藤黄健骨丸对绝经后骨质疏松症模型大鼠的治疗作用。方法将72只雌性大鼠随机分为6组,分别为假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、仙灵骨葆胶囊组(XLGB)、藤黄健骨丸低剂量组(THJGW-L)、藤黄健骨丸中剂量组(THJGW-M)及藤黄健骨丸高剂量组(THJGW-H)。手术造模3 d后给药,除假手术组、模型组灌胃蒸馏水外,其余4组均按照相应剂量灌胃药物。连续灌胃8周后,分别检测大鼠术后各阶段体质量、子宫和肾脏重量、骨强度值,观察股骨病理变化。Western-blot法检测大鼠股骨中Runx2、BMP-2和Smad1蛋白表达水平。结果实验结果显示,藤黄健骨丸可以增加去卵巢大鼠的子宫和肾脏重量,能够提高去卵巢大鼠的股骨荷载力,改善骨微结构,增加钙离子沉积,增加骨细胞数量。Western-blot结果显示去势大鼠骨组织中Runx2、BMP-2和Smad1相对蛋白水平降低,经过藤黄健骨丸治疗后,Runx2、BMP-2和Smad1相对蛋白水平显著升高。结论藤黄健骨丸可以提高去势大鼠骨强度,改善骨组织形态,其作用机制可能与调控BMP-2/Smad信号通路来促进骨形成,对绝经后骨质疏松症有一定的治疗作用。

藤黄健骨丸HPLC指纹图谱的建立及7种成分的含量测定

目的建立藤黄健骨丸HPLC指纹图谱,并同时测定淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、柚皮苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量。方法采用高效液相色谱法,Agilent ZORBAX Extend C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 ml/min;柱温为25℃;检测波长280 nm;进样量为10μl。结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)建立11批藤黄健骨丸的指纹图谱并进行相似度评价。结果从11批藤黄健骨丸指纹图谱中共标定20个共有峰,相似度均在0.98以上。7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9997),平均加标回收率97.70%~99.25%,RSD 0.53%~1.57%。结论所建指纹图谱重复性好,准确,可用于藤黄健骨丸的质量控制。

HPLC法测定藤黄健骨丸中松果菊苷的含量

目的:建立藤黄健骨丸中松果菊苷含量的HPLC测定方法。方法:色谱柱:Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%甲酸(28.5:71.5),流速:1.0ml·min^(-1),柱温:25℃,检测波长:330nm。结果:松果菊苷线性范围为0.18～1.84μg,r=0.999 9,平均回收率为98.36%,RSD为0.56%(n=6)。结论:本法操作简便,结果准确。

补阳还五汤加味合藤黄健骨丸治疗闭塞性动脉硬化症合并腰椎病变89例

目的:观察补阳还五汤加味合藤黄健骨丸治疗闭塞性动脉硬化症合并腰椎病变的疗效。方法:选取89例闭塞性动脉硬化症合并腰椎病变的患者,应用补阳还五汤加味内服并药渣外洗,配合藤黄健骨丸内服,治疗2个月后观察疗效。结果:治疗后患者肢体怕冷、麻木、疼痛改善明显,总有效率分别为89.80%、86.79%、87.50%。结论:补阳还五汤加味配合藤黄健骨丸内服治疗闭塞性动脉硬化症合并腰椎病变有较好的疗效,益气活血通络法具有促进侧支循环建立、扩张血管、改善肢体血液循环的作用。

高效液相色谱法测定藤黄健骨丸中淫羊霍苷的含量

目的:研究藤黄健骨丸中淫羊藿苷的定量方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Kromonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(30∶70);检测波长:270 nm。结果:线性范围为0.042 95～0.859μg(r=1.000 0,n=5)。平均加样回收率为99.1%,RSD=0.31%。结论:本法简便、灵敏、准确,可用于藤黄健骨丸的质量控制。

藤黄健骨丸质量标准研究

目的:提高完善藤黄健骨丸的质量标准。方法:采用显微法对淫羊藿和鹿衔草进行鉴别;采用TLC法对熟地黄,淫羊藿进行鉴别;采用HPLC法分别测定骨碎补中柚皮苷以及淫羊藿中淫羊藿苷的含量,色谱柱为ECOSIL C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为乙睛-水(15:85)、乙睛-水(30:70);柱温为35℃,流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长分别为283 nm、270 nm。结果:淫羊藿和鹿衔草的显微特征较易见;TLC色谱斑点清晰,专属性强,重复性良好;柚皮苷对照品在0.136～3.410μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为99.69%(浓缩大蜜丸,RSD=0.82%)、99.07%(浓缩水蜜丸,RSD=1.38%)。淫羊藿苷对照品在0.045～2.236μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.68%(浓缩大蜜丸,RSD=1.0%)、99.46%(浓缩水蜜丸,RSD=0.93%)。结论:本方法简便、可靠、准确,灵敏度高,重复性好,可用于该制剂的质量控制。

高效液相色谱一测多评法同时检测藤黄健骨丸中7种成分含量

目的 建立高效液相色谱一测多评法同步检测藤黄健骨丸中松果菊苷、麦角甾苷、柚皮苷、淫羊藿定A、淫羊藿定B、淫羊藿定C、淫羊藿苷含量的方法。方法 采用高效液相色谱法,Agilent ZORBAX Extend C(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长280 nm;柱温为25℃;进样量为10μl。以淫羊藿苷为内参物,建立其他6种成分的相对校正因子,并计算各成分含量。采用外标法测定藤黄健骨丸中7种成分含量与一测多评法计算结果的准确性进行比较。结果 测定了11批藤黄健骨丸中上述成分的含量,7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加标回收率为97.70%~99.25%,RSD为0.53%~1.57%(n=6)。一测多评法所测结果与外标法无明显差异。结论 该方法可用于藤黄健骨丸中7种成分含量的同步测定,达到多指标质量控制的目的。

RP-HPLC法测定藤黄健骨丸中淫羊藿苷的含量

目的建立以反相高效液相色谱法测定藤黄健骨丸中淫羊藿苷含量的方法。方法色谱柱:依利特Hypersil BDS C18(5μm,4.6×250mm);流动相:乙腈-水(27∶73);检测波长:270nm;流速:1.0mL.min-1;柱温:40℃。结果淫羊藿苷在0.2168～2.168μg(R2=0.9998)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.38%,RSD为0.82%(n=6)。结论本方法简便快捷、可靠性高、分离度较好,可作为藤黄健骨丸的质量控制。

藤黄健骨丸联合关节镜手术治疗膝骨关节炎临床研究

目的:观察藤黄健骨丸联合关节镜手术治疗膝骨关节炎(KOA)的效果。方法:选择106例接受手术治疗的KOA患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组各53例,对照组进行关节镜手术治疗结合功能锻炼,观察组在对照组治疗基础上使用藤黄健骨丸,对比2组治疗效果。结果:术后2个月,2组膝关节疼痛程度均降低(P<0.05),观察组的降低幅度大于对照组(t=6.509,P<0.05);2组膝关节功能均改善(P<0.05),观察组的改善幅度大于对照组(t=-5.656,P<0.05);2组生活质量均改善(P<0.05),观察组的改善幅度大于对照组(t=-5.815,P<0.05)。结论:藤黄健骨丸联合关节镜手术治疗KOA,可以促进患者术后恢复,提升治疗效果。

对藤黄健骨丸中淫羊藿苷含量测定的研究

藤黄健骨丸由熟地黄,骨碎补,淫羊藿等七味中药材,经一定工艺提取加工制成,具有补肾,活血,止痛的功效,用于肥大性脊椎炎,颈椎病,跟骨刺,增生性关节炎,大骨节病,在地标升国标中成药骨伤病分册[1]中记录有该药的质量标准,但该方法甲醇用量高,分析时间长,柱压较高,难洗脱.故此对该方法作一些改讲.……

藤黄健骨丸联合腰椎牵引治疗腰间盘突出症的疗效观察

目的：观察藤黄健骨丸联合腰椎牵引治疗腰间盘突出症的治疗效果,并用腰痛宁肢囊对照.方法：收集2008年1月-2011年12月邳州市人民医院及我院门诊病人108例年龄14-70岁经临床及影像学检查诊断为腰椎间盘突出症患者.按就诊顺序及治疗方法不同,随机分为治疗组（藤黄健骨丸联合腰椎牵引）和对照组（腰痛宁肢囊配合腰椎牵引）,每组各54例.每组病人经过2个疗程（2月）的治疗,并根据各组病例治疗前后的症状、体征变化进行比较,评价藤黄健骨丸配合腰椎牵引治疗腰间盘突出症的临床疗效.结果：治疗组治愈25例,对照组治愈17例,治疗组疗效明显优于对照组（P〈0.05）.差别有统计学意义.结论：藤黄健骨丸配合牵引治疗腰椎间盘突出症是安全可行的,有效率高,无需手术,痛苦小的优点,可在基层医院推广应用.

藤黄健骨丸联合关节镜手术治疗膝骨性关节炎疗效分析

目的:观察藤黄健骨丸配合关节镜清理术治疗膝骨性关节炎的临床疗效。方法:将120例符合关节镜清理手术指针的膝骨性关节炎患者根据入院顺序随机分为对照组(单纯关节镜手术组A组,n=60)和治疗组(关节镜手术+藤黄健骨丸组B组,n=60)2组,A组单纯给予膝关节镜下清理手术,B组在A组基础上配合中医经验药方服用藤黄健骨丸治疗。比较2组治疗后的临床疗效、症状评分,记录治疗前后膝关节Lysholm评分及VAS评分情况。结果:将120例患者治疗前膝关节Lysholm评分及VAS评分数据统计比较,差异无统计学意义(P>0.05);经治疗,2组患者在治疗后第1、4、7周膝关节疼痛的VAS评分分值均明显下降,且B组下降幅度较A组大;而第3、5、7周膝关节的Lysholm评分二者均有上升,且B组提升效果更加明显;治疗组的临床总有效率明显高于对照组。结论:藤黄健骨丸联合关节镜清理术治疗膝骨性关节炎,可以有效的减轻患者的临床症状及促进患膝关节功能改善,值得临床推广。

藤黄健骨丸治疗老年性腰椎骨质退行性变致腰腿痛的临床疗效观察

目的:探讨藤黄健骨丸治疗老年性腰椎骨质退行性变致腰腿痛的临床疗效。方法老年性腰椎骨质退行性变致腰腿痛患者58例,根据挂号单双号分为治疗组与对照组,各29例,所有患者都给予手术减压治疗,在此基础上治疗组在围手术期口服藤黄健骨丸治疗。结果所有患者都顺利完成治疗,治疗组与对照组的治疗优良率分别为86.2%和65.6%,对比差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前疼痛评分对比无明显差异,治疗后组间与组内对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论藤黄健骨丸辅助治疗老年性腰椎骨质退行性变致腰腿痛可取得很好的缓解疼痛效果,有很好的应用价值。

藤黄健骨丸联合洛索洛芬钠治疗膝骨关节炎的临床研究

目的探讨藤黄健骨联合洛索洛芬钠治疗膝骨关节炎的临床疗效和安全性。方法选取2016年6月—2017年6月在河南省洛阳正骨医院诊治膝骨关节炎患者152例,随机分成对照组(76例)和治疗组(76例)两组。对照组患者口服洛索洛芬钠片,1片/次,3次/d;治疗组患者在对照组基础上口服藤黄健骨丸,1丸/次,2次/d。两组患者均连续治疗6周。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者骨关节炎指数、KSS评分和15 m行走时间,血清白细胞介素-1β(IL-1β)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)和前列腺素E2(PGE2)水平及不良反应。结果治疗后,对照组临床有效率为86.84%,显著低于治疗组的97.37%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者骨关节炎指数和15 m行走时间均显著下降(P<0.05),KSS评分显著升高(P<0.05),且治疗组患者骨关节炎指数、KSS评分和15 m行走时间均明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者血清IL-1β、COMP和PGE2水平均显著下降(P<0.05),且治疗组患者血清IL-1β、COMP和PGE2水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗期间,治疗组药物不良反应发生率为2.63%,显著低于对照组的13.16%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论藤黄健骨联合洛索洛芬钠治疗膝骨关节炎疗效显著、安全性高,具有一定的临床推广应用价值。