临床药师参与藤黄微球菌致骨组织感染2例的诊疗过程并文献复习

藤黄微球菌又称八叠球菌,属于细菌微球菌科微球菌属,是一种革兰阳性球菌,该菌主要分布于泥土、水等外界环境及正常人和动物的皮肤表面,一般不致病,但当人体抵抗力下降或患严重疾病时,可转为条件致病菌,可引起心内膜炎、败血症、颅内感染、隧道感染、肾盂肾炎等[1-5],但其致骨组织感染的案例较少见。本研究报告临床药师参与2例藤黄微球菌致骨组织感染诊疗过程,并复习相关文献资料,以期为此类病例的诊治提供参考。

1例藤黄微球菌致感染性心内膜炎合并重症肺炎的药学监护

目的为藤黄微球菌致感染性心内膜炎(IE)合并重症肺炎的抗感染药物治疗及药学监护提供思路和用药参考。方法临床药师全程参与1例藤黄微球菌致IE合并重症肺炎患者的治疗过程,所有抗感染治疗方案与调整均为临床医师邀请临床药师会诊后共同协商确定。方案实施后由临床药师从最适宜治疗药物、利用稳态谷浓度和内生肌酐清除率等参数调整万古霉素剂量、监测肾功能及药物不良反应等方面对治疗的有效性和安全性进行药学监护。结果藤黄微球菌致IE患者经手术和术后足疗程的抗菌药物治疗后治愈,重症肺炎好转,原发病及治疗药物引起的肾功能下降有所恢复;临床药师通过协助临床医师制定治疗方案、实施药学监护,保证了患者抗感染治疗的效果,避免了患者进一步的肾损伤,解决了头孢哌酮舒巴坦药物热的问题。结论藤黄微球菌致IE病情较重,可选万古霉素联合利福平治疗,治疗过程中应注意监测患者的肾功能,及时调整万古霉素剂量或更换药物;临床药师提供的抗感染药学监护,保障了患者抗感染治疗的有效性和安全性,避免了严重不良反应的发生。

麝香草酚对藤黄微球菌的抑菌活性及其作用机制

藤黄微球菌是一种条件致病菌,不仅会感染养殖水产品,还会导致人体感染.麝香草酚作为一种绿色、天然、高效的植物源抗菌剂,具有良好的抑菌活性.本研究在细胞水平上探究了麝香草酚对藤黄微球菌的生长、细胞膜通透性以及细胞形态等多方面的影响.结果表明,麝香草酚对藤黄微球菌的最小抑菌浓度为0.31 mg/mL,在该浓度下藤黄微球菌的细胞膜电位、胞内ATP、DNA完整性、胞内pH分别降低了4.79、49.90、0.40、0.56倍,胞内活性氧增加了0.36倍,并通过CLSM和SEM进一步观察到细胞膜皱缩、破损.揭示了麝香草酚对藤黄微球菌的抑菌活性及可能的抑菌机制,为麝香草酚作为天然抗菌剂提供理论支撑.

抗藤黄微球菌Rpf结构域单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的:克隆、表达藤黄微球菌Rpf结构域多肽,并制备针对该多肽的单克隆抗体(mAb)。方法:采用聚合酶链反应(PCR)藤黄微球菌基因组中扩增出藤黄微球菌Rpf结构域基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rpf结构域基因多肽,在变性条件下纯化目的蛋白。用纯化的目的蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合、克隆化制备抗Rpf domain单抗(mAb),用ELISA法初步鉴定其特异性和相对亲和力。结果:在变性条件下用Ni2+-NTA亲和色谱柱纯化目的融合蛋白,纯化获得的蛋白纯度大于90%。用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了3株抗Rpfdomain mAb,这3株mAb均特异性识别Rpf domain多肽。结论:所获得的抗Rpfdomain mAb特异性强、效价高,对进一步研究Rpf domain在结核病免疫预防中的作用提供了有力的工具。

降解除草剂阿特拉津的藤黄微球菌AD3菌株的分离、鉴定和降解特性研究

用富集培养法从农药厂的工业废水和污泥的混合物中分离到能够降解除草剂阿特拉津的AD3菌株,通过16SrRNA基因序列分析和Biolog细菌自动鉴定仪微量平板测定,该菌株被鉴定为藤黄微球菌(Micrococcusluteus).在以阿特拉津为唯一氮源(500μg·mL-1)的基本培养基中,AD3菌株能在48h内使阿特拉津降解97%以上.对AD3菌株和Pseudomonassp.ADP菌株的阿特拉津氯水解酶基因中间区的核苷酸序列和对应氨基酸序列进行比对结果表明,它们的核苷酸序列和氨基酸序列分别有5个位点和4个位点不同,核苷酸序列和氨基酸序列的类似性分别为99.1%和97.7%.

纤溶酶产生菌—藤黄微球菌的筛选、鉴定及纤溶酶基因的克隆

通过血粉培养基富集、纤维蛋白培养基筛选,从自然环境中分离到一株纤溶酶产生菌,命名为ML909。利用传统细菌分类鉴定方法对其形态和生理生化特征进行了研究,发现其与藤黄微球菌的特征相符,16SrDNA序列分析的结果也表明它与藤黄微球菌的16SrDNA序列的同源性高达99%,因此该菌在系统分类学上属于微球菌属(Micrococcus Cohn)藤黄微球菌(Micrococcus luteus)。通过PCR方法对其纤溶酶的编码区序列进行了克隆和序列分析,基因登录GenBank,登录号为EU232121。

QU1.602藤黄微球菌腐乳工艺操作要点

对细菌型腐乳QU1.602藤黄微球菌进行了生理生化特性的鉴定,通过对该菌株的生产性实验总结了QU1.602藤黄微球菌的最佳工艺参数,对其他腐乳工艺有一定的借鉴意义。

环媒恒温基因扩增法检测藤黄微球菌的研究

目的建立藤黄微球菌的环媒恒温基因扩增检测方法。方法基于藤黄微球菌23S rRNA基因部分序列设计1套(共4条)能够识别6个区域的特异性引物;优化扩增条件;评估该方法的特异性与敏感性。结果用7个参考株和大肠埃希菌等8种其他临床病原菌检验本检测法,成功地建立了环媒恒温基因扩增(LAMP)检测法。结论环媒恒温基因扩增法检测藤黄微球菌快速、灵敏高、特异性强。

对一株藤黄微球菌合成海藻糖能力的鉴定

报道了一株藤黄微球菌 (Micrococcusluteus)具有产酶能力 ,可以淀粉糊精为底物合成海藻糖 ,从还原糖含量变化、纸层析和高效阴离子交换

藤黄微球菌rpf基因的克隆表达及其结构预测

为了了解藤黄微球菌(Micrococcus luteus)复苏促进因子(resuscitation-promoting factor,Rpf)的性质,用自行设计的引物,以藤黄微球菌ACCC41016基因组DNA为模板,扩增rpf基因.随后,构建pET-28a(+)-rpf表达载体,在Escherichia coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,并以克隆测得的rpf基因核酸序列为基础,对Rpf蛋白的氨基酸序列、疏水性、信号肽、磷酸化位点、三级结构以及结构功能域进行生物信息学预测分析.结果表明:该rpf基因与文献报道的藤黄微球菌IAM 14879 rpf基因核苷酸序列一致性为69.72%;该rpf基因所编码蛋白的氨基酸序列与文献报道的Rpf蛋白氨基酸序列一致性为63.44%.在E.coli BL21(DE3)中成功表达了Rpf目的蛋白.初步了解了Rpf蛋白的理化性质及生物学功能.解释了Rpf蛋白能够使细菌复苏并促进其生长的理论,为进一步探讨Rpf蛋白的作用机理奠定了基础.

藤黄微球菌(Micrococcus luteus)KDF1胞外蛋白酶酶学性质与水解大豆蛋白产物研究

对1株分离于克东腐乳的优势菌株藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶的酶学性质及其水解大豆分离蛋白（soybean protein isolates，SPI）产生的氨基酸图谱进行研究。以酪蛋白为底物，利用酶学技术研究了温度、pH、NaCl、乙醇和金属离子对藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶的活性和稳定性的影响。研究表明藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶的最适反应温度为40℃，在20—40℃范围内具有良好的稳定性；最适反应pH为9．0，在pH7．0～9．0范围内具有良好的稳定性；在9％（w／v）NaCl和8％（w／v）乙醇中分别表现出良好的催化活性和稳定性；Ca^2＋和Mg^2＋可显著增强藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶的催化活性。利用氨基酸分析技术检测藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶水解SPI产生的氨基酸图谱，结果表明总游离氨基酸、必需氨基酸和风味氨基酸含量明显增加。上述结果表明藤黄微球菌（Micrococcus luteus）KDF1胞外蛋白酶在酶法促熟和酶法发酵腐乳领域有潜在的应用价值。

藤黄微球菌Rpf结构域多肽诱导小鼠免疫应答的实验研究

目的:研究藤黄微球菌Rpf结构域多肽的免疫学特性。方法:用原核表达的藤黄微球菌Rpf结构域多肽免疫BALB/c小鼠3次,每次间隔2周。用ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性抗体滴度。分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激后,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增值指数。ELISA方法检测淋巴淋巴细胞悬液中IFN-γ、IL-10和IL-12产生水平。另一部分免疫的小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4周后,计数脾脏细菌负荷数。结果:藤黄微球菌Rpf结构域多肽免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1∶128000,淋巴细胞增殖指数为(2.10±0.12),明显高于生理盐水对照组(0.90±0.21)。ELISA方法检测Rpf结构域多肽免疫组IFN-γ,IL-10和IL-12水平为(1126±36)ng/L,(368±13)ng/L和(289±14)ng/L,明显高于生理盐水对照组(P<0.01)。与生理盐水免疫组(细菌负荷6.64±0.13)相比较,Rpf结构域多肽免疫的BALB/c小鼠,对攻击感染后抗MTB在脾脏中增殖有明显作用(细菌负荷为5.03±0.11,P<0.05)。结论:藤黄微球菌Rpf结构域多肽有可能作为新型结核疫苗的候选组分。

1例藤黄微球菌致腹膜透析相关隧道炎的护理

介绍了1例藤黄微球菌致腹膜透析相关隧道炎的护理经验,强调护理过程中应注意排脓、隧道冲洗、应用磺胺嘧啶银脂质水胶体敷料填塞引流,经积极治疗及护理20d后病人痊愈出院。

防腐剂复配优化抗藤黄微球菌研究

选择不同的防腐剂,通过药敏纸片法、最小抑菌浓度(MIC)法测定藤黄微球菌对其敏感性,利用正交设计筛选最佳防腐剂组合,并对获得的最佳防腐剂组合抑菌效果进行验证。结果表明,藤黄微球菌对Nisin、聚赖氨酸、尼泊金乙酯较为敏感,MIC分别为0.078,0.039,0.125mg/mL。当Ni-sin、聚赖氨酸和尼泊金乙酯浓度分别为0.313,0.156,0.125mg/mL时,组合抑菌效果最佳,可使基质中藤黄微球菌降低2.7个数量级以上。选择这一最佳组合在25℃和0～4℃条件下,可显著抑制牛乳、里脊肉、猕猴桃果汁中藤黄微球菌的增殖。

藤黄微球菌引起脑室外引流患者颅内感染

1临床资料 患者，男73岁，10月613因脑出血入住石家庄市第二医院神经外科手术，术后脑室留置引流管至体外。患者颅内高压，每天流出脑脊液的量在200ml左右。术后患者深度昏迷，意识不清，局部肢体有僵硬的现象，

藤黄微球菌Rpf基因的克隆表达及纯化鉴定

目的:克隆藤黄微球菌Rpf基因,序列测定正确后进行融合表达纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法,从藤黄微球菌基因组中扩增出藤黄微球菌Rpf基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rpf蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化.结果:获得藤黄微球菌Rpf基因,得到融合6个组氨酸残基的藤黄微球菌Rpf蛋白,可溶性分析发现融合蛋白主要在包涵体中存在,最后在变性条件下,用Ni2+-NTA亲和色谱柱纯化目的融合蛋白,纯化获得的融合蛋白纯度大于90%,Western-Blot证实获得的蛋白为所需要的目的蛋白.结论:构建了藤黄微球菌Rpf基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白,为以后的深入研究奠定了基础.

藤黄微球菌致败血症7例及脓肿1例

目的 :报道藤黄微球菌致败血症 7例及脓肿 1例。方法 :从患者血液及脓液中分离出菌株并作菌株鉴定和药敏试验。结果 :从7例败血症患者中分离菌株 7株 ,脓液中分离出 1株 ,均鉴定为藤黄微珠菌。 7例败血症治愈 6例 ,死亡 1例。结论 :藤黄微球菌可致人体败血症和严重感染。

藤黄微球菌PCR检测方法的建立

根据藤黄微球菌23SrRNA基因序列设计了一对特异性引物,通过优化扩增条件,成功地建立了一种快速、灵敏、准确的PCR检测法。与大肠杆菌、沙门氏杆菌、链球菌等九种其他病原菌无特异性反应,以自然感染猪的临床样品YZ株抽提的DNA为模板,扩增结果为阳性。结果表明,该法检测藤黄微球菌准确性高。本法扩增藤黄微球菌产生的特异性片段为1326bp;最低检出浓度为1058CFU/mL。

藤黄微球菌检测氧氟沙星残留方法的研究

通过制备藤黄微球菌菌悬液，选择最适菌层浓度，运用统计方法及精密度实验来制备标准反应曲线，建立氧氟沙星的残留检测方法，并进行了粪便中氧氟沙星的残留检测。结果表明，氧氟沙星在磷酸盐缓冲液中的最低检测限为0．5μg／mL，标准曲线的工作范围为0．5～8．0μg／g；在鸡粪便中添加氧氟沙星1．000μg和2．000μg／g的回收率分别为81．92±9．09和84．85±9．04。表明该方法灵敏度和回收率高，操作简便，不需特殊设备，样品用量少，易于推产话用干氢螽油厚酌窜号奔析．