层理鞭枝藻藻蓝蛋白E和F基因的克隆及序列分析

克隆并测定了层理鞭枝藻藻蓝蛋白 E和 F基因全序列 ,通过将其氨基酸序列与其他蓝藻的相应序列进行比较 ,表明层理鞭枝藻中 cpc E、cpc F所编码的蛋白质是层理鞭枝藻中 α-

坛紫菜别藻蓝蛋白α,β亚基基因的克隆和序列分析

以野生坛紫菜色素体DNA为模板，通过PCR扩增获得编码坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基和β亚基的序列及两者之间的间隔序列，该序列全长为1055bp，其中编码α和β亚基的序列均为486bp，间隔序列为83bp，该序列与GenBank收录的其他4种红藻相关序列的同源性在75．6％～87．4％，与2种蓝藻的同源性分别为66．9％，68．5％，其中编码区同源性更高。

珊瑚藻藻红蛋白β亚基脱辅基蛋白基因克隆与序列分析

首次报道珊瑚藻R-藻红蛋白β亚基基因的全序列.测定的基因序列长为983个碱基,包括β亚基起始密码子上游的10个碱基、β亚基编码区的534个碱基(编码177个氨基酸)、101个碱基的间隔区以及α亚基编码区近5′端的338个碱基(编码112个氨基酸).对其序列在核酸和氨基酸水平上的同源性与已知基因序列的9种红藻作了比较分析,认为β亚基氨基酸序列在红藻分类上具有重要意义.

藻红蛋白基因部分序列的克隆和顺序分析

报道了真核红藻—龙须菜的藻红蛋白亚基基因的部分序列，位于β亚基的近碳端、α亚基的近氮端，包括β亚基部分３０９个核苷酸，α亚基部分１６２个核苷酸，还有间隔部分５５个核苷酸，可编码β近碳端的１０２个氨基酸和α近氮端的５４个氨基酸，并与目前已知的相应序列做了比较。该序列与已知红藻ＰＥ亚基基因相应部分的相似性为７７．９％到８１．１％。对应的氨基酸序列的相似性为７９．５％到８６．５％，蛋白质序列的保守性高于核苷酸序列。

绵羊角蛋白中间丝基因KIF1.2的克隆及序列分析

为了分析南疆地方品种羊和田羊毛囊角蛋白中间丝KIF1.2基因,以和田羊为实验动物,从绵阳毛囊中提取总RNA,利用反转录获得的cDNA第一链为模板,通过PCR扩增KIF1.2基因,插入pMD18-T克隆载体中经限制性内切酶双酶切和PCR检测双重鉴定并测定序列。结果,扩增出序列长度为1215 bp的基因片段,测序结果与GenBank上已公布的序列同源性为99%。该实验研究将为进一步通过基因和蛋白的调节来改良南疆地方品种羊和田羊羊毛品质提供必要的理论依据。

盐藻肌动蛋白基因启动子驱动的bar基因表达作为核转化筛选标记(英文)

运用基因组步行方法克隆盐藻肌动蛋白基因 5′上游调控序列,发现相对于ATG上游 -573和 -424b的位置上分别有 75bp长的两个重复序列。没有典型的TATA盒,但有两个TATA样结构、一个CCAAT结构和一个与GCTC(G/C)AAGGC一致的序列。以 700bp的盐藻肌动蛋白基因启动子区序列驱动bar基因的表达作为转化盐藻的筛选标记。转化的藻细胞暗光恢复 24h后,在含 0 5μg/mL除草剂的培养基中常规培养生长 1周,然后将细胞平铺于含 0 5μg/mL除草剂的固体培养基上继续筛选培养。约 20d后从固体培养板上挑选出 5个藻落并作了进一步培养和分析。结果显示, 5个转化藻中携带bar嵌合基因的整合位点均位于核基因组内。Southerblotting分析表明,仅有一个转化藻整合单拷贝的bar基因,而另外 4个转化藻株则包含多个拷贝bar基因片段,提示盐藻核基因转化主要是外源基因的随机整合,外源基因在转化盐藻中的整合拷贝数并不影响其除草剂抗性RT PCR方法证明了bar基因在转化藻中的转录。5个转化藻在含除草剂的液体培养基中维持生长了至少 7个月,表明核基因转化的稳定性。

委内瑞拉产地龙须菜藻红蛋白基因的克隆及其系统学研究

本文报道了红藻 Gracilaria lemaneiformis委内瑞拉株的藻红蛋白基因的部分序列 ,将所得序列与其它红藻 - Rhodella violacea,Polysiphonia boldii,Griffithsia monolis,Porphyra tenera,Porphyra yezoensis及青岛产龙须菜的相应序列对齐后 ,进行了系统学研究。结果显示 ,同一属的藻红蛋白 α和 β亚基之间的间隔序列 ,从长度到核苷酸序列均非常相似 ,而同一科不同属或同一目的科间的该序列有很大的不同 ;两不同产地龙须菜的 PE基因在 β亚基上的转换多于颠换 ,说明 β亚基比 α亚基保守 ;委内瑞拉来源龙须菜与青岛产地龙须菜可能不属于同一物种 ,应为同属不同种关系 ;由藻红蛋白基因所得的系统树包括 3个与建立在形态标准上的遗传位置一致的分支 ;藻红蛋白基因序列可用于种间及更高地位的分子系统研究。

盐生盐藻肌动蛋白基因及其5′上游片段的克隆

在盐生盐藻 c DNA文库和基因组文库中对肌动蛋白基因进行了筛选 ,结果得到了一个c DNA克隆和两个基因克隆 ,并进一步从基因克隆中克隆出该基因的 5′上游片段 .检索结果表明 ,所得到的 c DNA和基因属于盐生盐藻的肌动蛋白基因 .通过将盐生盐藻肌动蛋白基因序列同其c DNA序列及其他生物的肌动蛋白序列相比较 ,给出了一个此基因

1例中间型β-地中海贫血的临床诊断和基因检测

目的通过回顾性分析1例中间型β-地中海贫血(地贫)的诊断及基因检测流程,总结中间型地贫的诊断策略。方法分析1例β-地贫合并α-地贫基因型患儿的临床表现,通过地贫基因多重PCR检测及DNA序列测定明确诊断,结合相关文献复习,探讨影响β-地贫表现型的基因因素。结果该地贫患儿基因型为β珠蛋白基因41/42突变的杂合子合并αααanti3.7基因杂合子。结论中间型地贫的诊断,需要临床表现与基因病变相一致,多重PCR结合DNA序列测定等方法可确诊罕见型基因突变。

盐生杜氏藻核糖体蛋白L38部分cDNA的克隆及分析

从盐生杜氏藻 (Dunaliellasalina)中 ,克隆到L38蛋白的部分cDNA序列及完整的CDS ,由生物信息学分析发现与L38家族其它成员高度同源 ,证明该家族在进化上的高度保守性 。

西流湖水体藻类污染现状和产毒蓝藻的全细胞PCR检测

目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列（PC-IGS）和微囊藻毒素多肽合成酶基因mcyB,并对mcyB扩增产物克隆测序.结果西流湖水体藻类主要是蓝藻、绿藻、硅藻和裸藻,夏秋季蓝藻为优势藻门;2004年7月7日～9月27日水样PC-IGS序列PCR检测阳性,7月29日～9月27日水样mcyB基因PCR检测阳性,扩增片断mcyB测序结果与Genbank报道的铜绿微囊藻mcyB同源性大于97%,氨基酸序列同源性大于94%.结论西流湖夏秋季有产毒蓝藻出现,全细胞PCR法可以检测水体中产毒蓝藻.

蛋白质空间结构的最新进展与蛋白质工程

蛋白质和核酸在结构上的一个重要特点,就是其空间结构对其功能的巨大影响。可以说,没有特征的空间结构就没有复杂的蛋白质和核酸的功能。因此,要了解各种重要生物过程,深入探讨生命活动的本质规律及其实际应用,蛋白质和核酸的空间结构知识极为重要.蛋白质空间结构研究一个重要的新进展是。

分子遗传学:从实验室走向田间

第五届国际固氮会,是一次多学科综合性会议,内容从氮化合物的配位化学到固氮微生物的生态学,目的在于将对固氮的各个领域有兴趣的科学家们召集起来进行交流。很明显,目前分子生物学技术对在农业上的生物固氮作用正发生重大影响。对Klebsiella pneunoniae固氮分子遗传学的基础研究,已经被应用于较不易进行遗传操作的细菌的固氮分析,如念珠藻和根瘤菌,二者都是农业上重要的共生参与者。

草鱼呼肠孤病毒的三维重构与衣壳蛋白特性

草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)为呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属一新成员.最新的基因组序列分析发现,GCRV与哺乳动物呼肠孤病毒(mammalian reovirus,MRV)具有高度的同源性.为了解GCRV致病机理,进行了分辨率达到17?的三维重构与衣壳蛋白特性研究.结果表明:GCRV颗粒呈多层排列,包括RNA核心与内壳层、中间层及外壳层.由200个按T=13对称排列的三聚体组成外衣壳,其典型特征是在5次轴上出现三聚体缺失凹陷区,暴露出中间层三聚体亚单位.内壳层由120个单体组成,按T=1排列,结构特点与呼肠孤病毒科成员内衣壳特征相一致.衣壳蛋白电泳显示,GCRV颗粒含有7种蛋白(VP1-VP7)组分,与MRV衣壳蛋白特性相近,两者在衣壳结构组成上的相似性与基因组序列的高度同源性相吻合.此结果对进一步研究GCRV与宿主细胞相互作用机理具有指导意义.