虎杖总蒽醌对糖尿病肾病模型小鼠肾皮质AGEs与RAGE水平的影响

目的:观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病(DN)肾脏皮质糖基化终末产物(AGEs)、糖基化终末产物受体的(RAGE)影响。方法:运用链脲佐菌素制作DN模型,将成模NH小鼠随机分为模型组,开搏通组,虎杖总蒽醌高、中、低剂量组(每组17只),另外选取17只NH小鼠作为正常对照组。运用荧光法、免疫组化法分别观察小鼠肾脏皮质AGEs、RAGE水平的变化。结果:与正常对照组相比,模型组组小鼠肾皮质AGEs水平明显升高,而高、中剂量虎杖总蒽醌组肾脏皮质AGEs水平明显下降(F=15.200,P<0.001);模型组小鼠肾皮质RAGE的表达高于正常对照组,而高、中剂量虎杖总蒽醌组较模型组降低,差异具有统计学意义(F=12.485,P<0.001)。结论:AGEs、RAGE与DN形成有关;虎杖总蒽醌能够降低DN小鼠肾皮质AGEs水平,抑制肾RAGE的表达。

虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响

目的观察虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响。方法大鼠随机分为空白组、博来霉素组、虎杖总蒽醌组、Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组、Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组。除空白组外,其余各组大鼠切开气管注入博来霉素(BLM,10 mg/kg)建立肺纤维化大鼠模型。造模后次日虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌(400 mg/kg)灌胃,每日1次,Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌灌胃并于造模后次日尾静脉注射Smad3 siRNA质粒(3 mL/kg),Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组每天给予虎杖总蒽醌灌胃基础上于造模后次日腹腔注射Smad3抑制剂(2 mg/kg)。4周后大鼠处死,取右肺,RT-PCR检测肺组织匀浆中上皮细胞标志物(E-cad)、间皮细胞标志物(α-SMA)及信号通路相关分子Smad3、TGF-β1、CTGF的mRNA的蛋白表达变化。取左肺组织匀浆后离心,碱裂解法检测肺组织中羟脯胺酸(HYP),大鼠摘眼球取血,酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、间质胶原蛋白Ⅰ、间质胶原蛋白Ⅲ的表达。结果RT-PCR显示,虎杖总蒽醌可提高模型大鼠肺组织中E-cad水平,降低TGF-β、Smad3、a-SMA、CTGF水平,而SiRNA+虎杖总蒽醌组及Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。酶联免疫吸附法显示,虎杖总蒽醌组肺组织HYP、血清CollagenⅠ、CollagenⅢ、TNF-α、VEGF、MMP-2水平均有所降低,SiRNA+虎杖总蒽醌组与Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。结论虎杖总蒽醌可能通过阻断TGFβ1-smad信号通路来抑制肺纤维化的发生,并通过抑制TGFβ1-smad信号通路的激活及降低肺组织HYP及血清TNF-α炎症因子达到减轻肺纤维化的作用。

虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒的制备工艺研究

以卵磷脂和硬脂酸为脂质材料,分别运用薄膜-超声分散法、乳化蒸发-低温固化法、溶剂-乳化挥发法、高压匀质法制备虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒,以筛选虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒的最佳制备工艺.采用透射电镜观察虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒的形态,激光纳米粒度仪测定其粒径和Zeta电位,HPLC法测定药物包封率,并进行虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒的初步稳定性考察.结果表明,运用高压匀质法制备虎杖总蒽醌固体脂质纳米粒为类圆球状,粒径较均匀.平均粒径为(100±21)nm,包封率为(87.0±0.69)%,平均Zeta电位为-66.3 mV,且在4℃条件下贮存3个月无明显变化,说明本实验工艺合理、可行.同时,制备的纳米粒大小均匀,且稳定性良好.

虎杖总蒽醌对糖尿病肾病模型小鼠肾皮质TGF-β_1,Smad3的影响

目的:观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾脏皮质转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3的影响。方法:将成模小鼠随机分为模型、开搏通、虎杖总蒽醌高、中、低剂量5组,每组17只,另外选取17只小鼠做为空白组。给药组分别ig高、中、低剂量的虎杖总蒽醌(400,200,100 mg.kg-1),共给药8周。运用免疫组化法,分别观察虎杖总蒽醌对DN模型肾脏皮质TGF-β1,Smad3的影响。结果:NH小鼠DN模型肾皮质TGF-β1,Smad3蛋白表达水平明显升高,而中剂量虎杖总蒽醌组NH小鼠肾皮质Smad3蛋白表达水平明显下降(IA为542.00±116.89)(P<0.05);虎杖总蒽醌高、中、低剂量组肾TGF-β1 IA值有降低的趋势,但无统计学意义。结论:TGF-β1,Smad3与DN形成有关;虎杖总蒽醌能显著抑制NH小鼠DN模型肾皮质Smad3蛋白表达。

虎杖总蒽醌对糖尿病肾病早期血瘀模型大鼠脂代谢及血液流变性的影响

目的:观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病(DN)早期血瘀模型大鼠脂代谢及血液流变性的影响。方法:运用链脲佐菌素复制大鼠DN模型。将动物随机分为6组,分别ig高、中、低剂量的虎杖总蒽醌(400,200,100 mg·kg-1),阳性对照组ig开博通6.25 mg·kg-1,模型组和空白组ig同体积(5 mL.只-1)的生理盐水,1次/d,连续8周。实验第8周末,动物取血前1 d,除空白组外,其余各组大鼠sc肾上腺素注射液0.08 mL·kg-1,共2次,间隔4 h,在2次注射间隔期间,将大鼠浸入冰水5 min,以建立DN血瘀模型,并用全自动生化仪、血流变仪分别观察DN早期血瘀模型大鼠脂代谢及血液流变性变化。结果:与模型组比较,虎杖总蒽醌高、中剂量能明显降低TG水平(P<0.01)。高剂量能明显降低LDL水平(P<0.01);与模型组比较,虎杖总蒽醌高、中、低剂量对模型大鼠全血黏度、血浆黏度有明显降低作用。结论:虎杖总蒽醌可降低DN早期血瘀模型大鼠全血黏度和血浆黏度,并对脂代谢紊乱有一定调节作用。

虎杖总蒽醌对糖尿病肾病早期大鼠肾脏的保护作用

目的:观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用。方法:运用链尿佐菌素(STZ)复制大鼠DN模型。将动物随机分为6组,分别ig高、中、低剂量的虎杖总蒽醌(400,200,100 mg.kg-1),开博通6.25 mg.kg-1,模型组和空白组ig同体积(5 mL/只)的生理盐水,1次/d,连续给药8周。通过虎杖总蒽醌对模型大鼠血糖、尿微量白蛋白等指标影响的观察,结合模型大鼠肾脏形态学改变情况,综合评价虎杖总蒽醌对DN大鼠肾脏的保护作用。结果:虎杖高、中剂量组在用药第8周大鼠尿白蛋白量降低(P<0.05);给药4周后虎杖高、中剂量组血糖水平降低(P<0.05);给药组大鼠肾脏病理改变有一定程度改善。结论:虎杖总蒽醌对模型大鼠肾脏具有一定程度的保护作用。