牛羊布鲁氏菌病虎红平板凝集试验技术要点分析

牛羊布鲁氏菌病(布病)为牛羊养殖过程中的重大传染性疾病,既是养殖场(户)在生产管理中的关键防控对象,也是我国兽医部门每年春防、秋防规定必须严格监测的疫病。为了提升当前基层兽医人员对牛羊布病的防控检测水平,提高检测结果的准确性,结合团队成员近几年在基层牛羊布病虎红平板凝集试验检测指导的经验,依据中华人民共和国卫生行业标准WS269-2019《布鲁氏菌病诊断标准》,对基层兽医技术人员在检测过程中的操作误区进行详尽剖析,并提出精细化、规范化的指导建议。旨在提升基层技术人员的操作技能,并为相关研究提供参考。

5种虎红平板凝集检测试剂盒应用效果评价

为评价常见市售虎红平板凝集试验(RBT)试剂盒的试验特性,选取基层动物疫病预防控制机构常用的5种试剂盒,以布鲁氏菌竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)结果为相对金标准,分别对60份阳性、50份阴性布鲁氏菌病羊血清进行检测。结果显示,5种RBT试剂检测结果敏感性为70%~91.67%,特异性为94%~100%,符合率为81.82%~92.73%,与布鲁氏菌cELISA检测方法的Kappa值介于0.64~0.86。其中有2种RBT试剂检测结果与cELISA检测结果无统计学差异。研究结果为基层动物疫病预防控制机构选择适合的筛检试剂建立了参考方法,为进一步提高布鲁氏菌流行情况估计和布鲁氏菌病疫病净化效果评估等工作的准确性提供了可靠的技术支持。

抗凝血样对家畜布鲁氏菌病虎红平板凝集试验的影响及应对方法

使用健康家畜血浆做布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBT)时,容易出现假阳性现象。本文旨在探讨含抗凝剂的血液样品对家畜(牛、羊、猪)RBT试验的影响。本研究选取健康牛、羊、猪的血样各10份和4份布病抗体阳性牛血样。将试验分成4组,第1组的血样自然凝固离心获得血清(对照组),分离的血清和血浆进行RBT试验,其余3组分别添加EDTA-K2、枸椽酸钠、肝素钠3种抗凝剂,同时4组血液样品采用竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)对比RBT的特异性和一致性。将34份家畜血清各分装成3份,直接加入到3种不同抗凝剂管中,做RBT,观察抗凝剂对检测结果是否存在直接影响;所有血浆加入凝血酶时间(PT)试剂处理后,取其上清液做虎红平板凝集试验,观察结果,分析干扰因素和处理方案。结果显示,30头健康家畜的血浆均是阳性,而血清均是阴性,4头布病抗体阳性牛的血浆和血清结果均是阳性,说明抗凝剂导致RBT出现非特异性凝集,且无畜种差异。使用PT试剂能消除部分抗凝剂(EDTA-K2、枸椽酸钠)制备血浆的非特异性凝集,由于虎红抗原与血浆中纤维蛋白原能产生非特异性凝集,导致出现假阳性。因此,给家畜做布病初筛时,不能直接用血浆做RBT,可通过PT试剂处理血浆中纤维蛋白原后消除干扰因素(肝素钠血浆除外),也可以直接用血浆做cELISA试验,为临床布病诊断提供检测参考数据。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测人布病抗体的应用分析

对比人布病抗体检测中虎红平板凝集试验、试管凝集试验的参考价值。方法 研究对象是有布病抗体检测需求与必要性的相关人员,共有1434名,检测时间2020.1-2023.8,其中初筛使用虎红平板凝集试验,针对初筛阳性者利用试管凝集试验进行复检,统计学分析检查资料。结果 185人初筛阳性,复检后159人阳性,符合率85.94%。结论 布鲁氏杆菌病诊断期间,虎红试验与试管凝集试验各有优势,建议联合应用,依靠优势互补保证实际检测结果的可靠性。

EDTA对猪布鲁氏菌病虎红平板凝集试验的影响

猪种布鲁氏菌可引起妊娠母猪流产、公猪睾丸炎,是一种急性或慢性传染病,即猪布鲁氏菌病。猪种布鲁氏菌对人类具有很强的致病性,是一种人兽共患病原菌,具有重要的公共卫生学意义。我国兽医实验室常用虎红平板凝集试验(RBP)作为家畜布鲁氏菌病的初筛试验,采用试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)作为家畜布鲁氏菌病的血清学确诊试验。

倍比稀释虎红平板凝集试验对布鲁氏菌病诊断的探讨

研究倍比稀释虎红平板凝集试验对布鲁氏菌病诊断质量。方法 将某院在2016年3月-2022年10月接收108例疑似布鲁氏菌病患者作为本次研究对象,对所有患者进行血液采集、血清分离,对所有血液标本进行倍比稀释虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测,在进行倍比稀释虎红平板凝集试验时分别采取1:2、1:4、1:8、1:16稀释比例,将试管凝集试验检测结果作为金标准,分析不同稀释比例下布鲁氏菌病诊断准确性。结果 在进行不同倍比稀释虎红平板凝集试验诊断布鲁氏菌病中,1:2倍比稀释虎红平板凝集试验检测准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均最高。结论 在进行倍比稀释虎红平板凝集试验对布鲁氏菌病诊断时其稀释比例为1:2诊断准确性、灵敏性最高,可促使患者布鲁氏菌病及时被诊断出。因此,在利用倍比稀释虎红平板凝集试验进行布鲁氏菌病诊断时还可及时将稀释比例合理控制为1:2,促使诊断质量不断提升,便于患者及时接受针对性治疗措施,促进诊断价值性不断提升。

两种虎红平板凝集试验检测羊布鲁氏菌病效果比较

为比较常规和改良虎红平板凝集试验(RBPT)的羊布鲁氏菌病检测效果,对239份免疫、非免疫场绵羊和阴性绵羊血清进行检测,并通过竞争ELISA试验(cELISA)和试管凝集试验(SAT)进行确诊。结果显示:常规RBPT检测非免疫血清的敏感性为68.85%,特异性为93.55%,与cELISA的符合率为77.17%;检测免疫羊血清的敏感性为75.81%,特异性为73.33%,与cELISA的符合率为75.00%。改良RBPT检测非免疫羊血清的敏感性为91.80%,特异性为70.97%,与cELISA的符合率为84.78%;检测免疫羊血清的敏感性为98.39%,特异性为10%,与cELISA的符合率为69.57%。两种RBPT和c ELISA的阴性血清检测结果全部为阴性,符合率为100%。结果表明:改良RBPT法的敏感性要高于常规RBPT法,可以在阳性羊群中筛选到更多抗体效价较低的早期感染动物。但其特异性有一定程度的降低,必须结合SAT、cELISA等特异性高的方法进行确诊。本研究为羊布鲁氏菌病检测方法的选择提供了参考。

正确认识和应用布鲁氏菌虎红平板凝集试验

布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的全球常见细菌性人兽共患病。在开展布鲁氏菌病诊断、监测、防控等相关工作时,虎红平板凝集试验(rose bengal test,RBT)是最常用的布鲁氏菌抗体检测方法。但是,在实际应用过程中,因对布鲁氏菌抗体特点及RBT特性等缺乏充分理解,导致RBT检测结果被“误用”的情况时有发生。本文将从动物感染布鲁氏菌后产生抗体的种类和特点,抗体凝集反应中存在的“前带现象”和非特异性反应,RBT抗原酸化和标准化对其检测性能的改善,RBT阳性结果需“确证”的起因及“误用”,在不同临床条件下如何使用RBT和解释检测结果等方面作一综述。充分认识和理解RBT的特性,以及在不同临床情形下正确使用RBT及其检测结果,不但可以降低布鲁氏菌病诊断成本,而且还能极大发挥RBT在布鲁氏菌病防控中的作用。

抗凝剂对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响

为探讨含抗凝剂样品对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响,采集猪、牛、羊等不同动物的血液各10份,经柠檬酸钠、EDTA、肝素钠等抗凝剂处理后与对应的自然凝固、立即离心获得的样品分别进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验,比较两种试验结果的差异。结果显示,经抗凝剂处理后的血浆样品虎红平板凝集试验结果均为阳性,试管凝集试验均为阴性,而自然凝固的血清样品两个试验结果均为阴性,不同处理方式造成的虎红平板凝集试验结果差异现象不受动物种类的影响。抗凝剂对虎红平板凝集试验影响非常显著,对试管凝集试验无影响。因此,临床上用虎红平板凝集试验进行动物布鲁菌病筛查时,不能使用含有抗凝剂的血液样品,否则会出现严重的非特异性凝集现象。

常规试管凝集试验与虎红平板凝集试验检测布鲁氏菌结果比较

目的对比布鲁氏菌分别采取常规试管凝集试验以及虎红平板凝集试验的检测结果。方法选择南营村疑似布鲁氏菌患者40例,予以常规试管凝集试验检测及虎红平板凝集试验检测,对比两种方法的检测结果。结果常规试管凝集试验检测的阳性率为5%,明显低于虎红平板凝集试验检测阳性率15%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虎红平板凝集试验检测布鲁氏菌的阳性率高于常规试管凝集试验检测布鲁氏菌的阳性率,该检测方法可作为布鲁氏菌首要筛选方法。

布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验的比较

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患传染性疾病，包括人间布鲁氏菌病和动物间布鲁氏菌病。人间布鲁氏菌病一般由动物间传播而来，一旦发生该病，将会引起严重的公共卫生问题。当前全国的布鲁氏菌病疫情正处于历史高发时期，根除布鲁氏菌病传播的根本措施是扑杀患病动物，消灭传染源。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病的比较

布鲁菌病主要采用凝集试验来检测,本试验用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对江苏海安、江都、无锡和兴化地区的660头奶牛的血清样品进行平行检测,虎红平板凝集试验的阳性检出率为9.7%,试验管凝集试验的阳性检出率为5.5%;与后者相比,虎红平板凝集试验的敏感性为100%,特异性为95.3%,符合率为95.6%。这些数据表明,江苏地区某些奶牛场存在布鲁菌感染,虎红平板凝集试验可以用于布鲁菌病初步检测。

影响虎红平板凝集实验检测结果的原因分析

虎红平板凝集实验是一种敏感性高、特异性强、操作简便、检测快速的血清学检测方法。常用于牛羊布鲁氏菌病普查净化的血清学监测初筛。影响虎红平板凝集实验检测结果的因素,主要是人员、设备、被检样品、操作、检测环境这五种因素,作为--名合格的检测人员应对每-一个检测环节认真分析,排除一切可能引起检测结果不准确的因素,使检测的结果准确、可靠,为布鲁氏菌病的普查净化提供可靠服务。

试管凝集试验与虎红平板凝集试验对布鲁氏杆菌病的诊断价值

目的研究试管凝集试验与虎红平板凝集试验对布鲁氏杆菌病的诊断价值。方法于2017年1月至2019年12月将清丰县疾病预防控制中心接受布鲁氏杆菌病筛查的120例疑似布鲁氏杆菌病患者纳入研究,对血液标本进行试管凝集试验、虎红平板凝集试验,比较试管凝集试验与虎红平板凝集试验的诊断结果。结果在布鲁氏杆菌病诊断中,参照布鲁氏杆菌病综合检测结果,虎红平板凝集试验的灵敏度、阴性预测值均高于试管凝集试验,而试管凝集试验的特异度、阳性预测值均高于虎红平板凝集试验(P<0.05),试管凝集试验与虎红平板凝集试验的准确度无显著差异(P>0.05)。试管凝集试验、虎红平板凝集试验诊断结果与布鲁氏杆菌病综合检测结果之间均呈高度一致(Kappa=0.807、0.823)。结论试管凝集试验、虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌病诊断中具有各自优势,临床诊断时可结合两种凝集试验方法进行综合诊断,以提高诊断的准确性。

改良试管凝集试验和虎红平板凝集试验检测羊布鲁氏菌病结果比较

虎红平板凝集试验方便、快捷,目前已广泛应用于养殖场羊布鲁氏菌病的普查,但其假阳性情况有待探究。利用改良试管凝集试验对虎红平板凝集试验检出的阳性个体进行分析,发现阳性率仅为88.8%。表明虎红平板凝集试验存在假阳性,可先用虎红平板凝集试验进行大面积普查,阳性样品再用改良试管凝集试验复核。

布氏菌病虎红平板凝集反应、抗体测定与细菌学检验的结果分析

目的对布氏菌病虎红平板凝集反应、抗体测定与细菌学检验三种检验方法的检测结果进行对比分析,为今后的临床检验工作提供可靠的参考依据。方法抽取在2008年1月至2013年12月间我中心收集的布氏菌阳性患者的血样28例,对其分别展开虎红平板凝集反应、抗体测定与细菌学检验,并对检验结果进行对比分析。结果 28例患者经虎红平板凝集反应检测证实全部为阳性,经抗体测定检测证实为阳性者4例,可疑者1例,经细菌学检验证实为阳性者5例。结论虎红平板凝集反应、抗体测定与细菌学检验之间不一定存在对应的关系,无论抗体检测效价情况如何均可分离得到布氏菌,临床应对其给予关注。

提高布氏杆菌病虎红平板凝集试验抗原产量的研究

为提高布氏杆菌病虎红平板凝集试验抗原的产量,在生产中进行了一些探索,并对此进行分析、总结。

基层兽医检验室布病虎红平板凝集试验能力比对结果及影响因素分析

目的:探讨基层兽医检验室布鲁氏菌病虎红平板凝集试验正确率及影响因素。方法:新疆哈密市36个乡镇兽医检验室,共计44位检验人员参加布鲁氏菌病虎红平板凝集试验能力比对。每位检测人员分发比对样品10份,要求进行布鲁氏菌病虎红平板凝集试验操作,并且判断结果。统计比对结果的正确率,对平板反应温度、反应时间、移液操作和检验室光照等影响因素进行分析。结果:440份样品中有34份(7.73%)比对结果错误。对检验的影响因素依次为平板反应温度偏低(58.82%)、反应时间不足(20.59%)、移液操作不当(14.71%)、检验室光照不足(5.88%)。结论:平板反应温度、反应时间、移液操作、光照等因素直接影响到布鲁氏菌病虎红平板凝集试验正确率,应予以严格要求。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测人布鲁菌病抗体的应用探讨

目的观察分析在人布鲁菌病抗体中进行虎红平板凝集试验以及试管凝集试验检测效果。方法选择我疾控中心于2014年至2019年内收到的80例人布鲁菌病患者血清样品为研究对象,将所有样品按照检测方法的不同,分为对照组(40例,进行试管凝集试验检测)和观察组(40例,进行虎红平板凝集试验检测)。对两组样品在检测完成后的效果进行收集和分析。并对两组的敏感度、准确度、阳性率、阴性率以及布鲁菌检出率。结果对照组进行试管凝集试验检测后敏感度80%,准确度为82.50%,观察组进行虎红平板凝集试验检测后敏感度为100%,准确度为97.50%。观察组进行虎红平板凝聚试验检测后敏感性以及准确性明显高于对照组进行试管凝集试验检测后准确性以及敏感性(P<0.05);对照组进行试管凝集试验检测后阳性36(90.00%)例,阴性4(10.00%)例,观察组进行虎红平板凝集试验检测后阳性40(100.00%)例,阴性0例,观察组进行虎红平板凝集试验检测后检测效果明显优于对照组进行试管凝集试验检测后检测效果(P<0.05)。在布鲁菌结果方面上,观察组布鲁菌检出率为95.00%;对照组布鲁菌检出率为77.50%;观察组数据相比较对照组较高(P<0.05)。结论在人布鲁菌病抗体中采用虎红平板凝集试验检测能够提高敏感性和准确性,具有明显检测效果,在实际工作中为保证精确度,往往采用虎红平板凝集和试管凝集试验相结合检测。

三种ELISA试剂盒与虎红平板凝集试验检测牛布鲁氏菌病的比较试验研究

为比较牛布鲁氏菌抗体ELISA检测试剂盒的性能,以及ELISA与虎红平板凝集试验(RBPT)的符合率,采用国内外三种商品化ELISA试剂盒和虎红平板凝集试验,对315份奶牛血清进行了牛布鲁氏菌检测。试验结果显示,美国某公司生产的牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为94.1%,阴性符合率为90.6%,Kappa值为0.85,为完全符合;瑞典某公司生产的牛牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为96.2%,阴性符合率为79.7%,Kappa值为0.78,为高度符合;国内某公司生产的牛布鲁氏菌ELISA试剂盒与RBPT的阳性符合率为90.9%,阴性符合率为82.8%,Kappa值为0.74,为高度符合。比较结果表明,三种ELISA试剂盒与RBPT的符合性均较好,国产试剂盒与国外同类产品的一致性较好,可推荐用于大规模的流行病学调查、临床样布的初步诊断及规模化养殖的日常监控。