姜西洋参与西洋参对大鼠虚寒证模型的影响

目的观察姜西洋参与西洋参对大鼠虚寒证模型的影响。方法112只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,西洋参低、中、高剂量组及姜西洋参小、中、大剂量组,每组14只。除正常组外,各组均每日灌胃给予寒凉药4ml/只,连续35天建立大鼠虚寒证模型。给寒凉药第8天起,正常组及模型组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠,西洋参及姜西洋参小、中、大剂量组分别灌胃西洋参及姜西洋参0.5、1.0、2.0g/kg,每日1次,连续给药28天。观察大鼠行为状态,记录每周体重。于给药第28天,各组动物放入代谢笼,收集尿液,测定尿液中17羟皮质类固醇(17-OHCS)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量。第29天,各组动物麻醉后腹主动脉采血,测定血清促甲状腺激素(TSH)、环化腺苷酸(cAMP)、环化鸟苷酸(cGMP)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)含量。取胃组织,制备石蜡切片,HE染色,观察病理改变。结果与正常组比较,模型组及西洋参各剂量组大鼠1~4周体重有下降趋势,姜西洋参各剂量组大鼠1~4周体重无明显差异;与模型组比较,西洋参各剂量组大鼠1~4周体重均无明显差异,姜西洋参各剂量组可使大鼠体重明显增加(P<0.05~P<0.001)。与正常组比较,模型组及西洋参各剂量组大鼠尿液17-OHCS、E、NE含量均明显降低(P<0.05~P<0.001),姜西洋参0.5g/kg大鼠尿液NE含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,西洋参2.0g/kg大鼠尿液中17-OHCS、E及NE含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠尿液17-OHCS、E及NE含量均明显增加(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组及西洋参各剂量组大鼠血清cAMP含量及cAMP/cGMP比值均明显降低(P<0.05或P<0.01),姜西洋参各剂量组大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值均无明显差异;与模型组比较,西洋参各剂量组大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值均无明显差异,姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠血清cAMP含量及cAMP/cGMP比值均明显增加(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠血清TSH及IL-2含量均明显降低(P<0.05),西洋参各剂量组大鼠血清TSH含量明显降低(P<0.05或P<0.001),IL-2及IL-8含量均无明显差异,姜西洋参各剂量组大鼠血清TSH、IL-2及IL-8含量均无明显差异;与模型组比较,西洋参2.0g/kg大鼠血清TSH明显降低(P<0.05),姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠血清TSH及IL-2均明显增加(P<0.05或P<0.01)。组织病理学检测,模型组、西洋参及制西洋参各剂量组与正常组比较均无明显差异。结论虚寒证大鼠表现为大便溏泄,倦怠,皮毛疏松,体重减轻,交感-肾上腺髓质、免疫及物质代谢相关因子明显降低。西洋参连续服用28天可加重虚寒证大鼠上述寒凉症状,而姜西洋参对大鼠寒凉症状具有明显改善作用。

温经汤对妇科虚寒证模型大鼠卵巢能量代谢的影响

目的观察温经汤对妇科虚寒证模型大鼠卵巢能量代谢的影响,完善温经汤治疗虚寒型妇科疾病的作用机制。方法将SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,将模型组和治疗组大鼠置于0～1℃冰水中造成妇科虚寒证大鼠模型;同时治疗组给予温经汤灌胃4周。择动情间期处死大鼠,检测血清雌二醇、孕酮、睾酮;取双侧卵巢组织,检测ATP酶、琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶及解偶联蛋白2的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清雌二醇、孕酮值,卵巢ATP酶、琥珀酸脱氢酶均有不同程度下降,卵巢乳酸脱氢酶及解偶联蛋白2表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,治疗组大鼠血清雌二醇、孕酮及卵巢ATP酶、琥珀酸脱氢酶均升高,卵巢乳酸脱氢酶及解偶联蛋白2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温经汤可通过改善妇科虚寒证模型大鼠卵巢能量代谢的失调状态,恢复卵巢功能,治疗虚寒型妇科疾病。

附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠ATP酶活性及能荷的影响

目的研究附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠三磷酸腺苷(ATP)酶活性及能荷的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、附子正丁醇组、附子水提物组,模型组与治疗组大鼠均予灌含生药量3.2g/mL的造模药5mL,每天1次,连续14d,空白对照组每天灌服等量的生理盐水,造模成功后,附子正丁醇和水提物组分别灌服对应的治疗药,每日1次,连续7d,治疗结束后,分光光度数法检测大鼠肝匀浆液中的ATP酶活性,高效液相法测试ATP含量及能荷的比例。结果与空白对照组相比,模型组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低(P<0.01);与模型组相比,附子正丁醇组Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(P<0.05),附子正丁醇组Ca2+-Mg2+-ATP酶活性高于附子水提物组(P<0.05);与空白组相比,模型组ATP含量及能荷比例均降低(P<0.05);与模型组相比,附子正丁醇组能荷比例升高(P<0.05)。结论附子正丁醇和水提物能提高虚寒证大鼠的ATP酶活性及能荷的比例,有利于虚寒证大鼠物质代谢的恢复,ATP酶活性降低可能是造成虚寒模型的原因之一,但仍需后续的研究进一步确认。

妇科虚寒证大鼠模型的创建

目的模拟妇科虚寒证发生的病因,依据"寒邪伤阳"的中医学理论,创建妇科虚寒证模型。方法将SD雌性大鼠按随机数字表法分为模型组和正常组,每组20只。模型组置于0～1℃冰水中并放入4℃冰箱中,2次/天,20min/次,共30天。每天测定大鼠体温及观察动情周期的变化,当大鼠体温降低(与正常组之间比较差异有统计学意义),阴道细胞涂片显示动情周期紊乱时,显示造模成功。择动情间期处死大鼠,检测血液生殖内分泌激素[血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕酮(P)]、甲状腺功能[血清总三碘甲状腺原氨酸(T3)、总甲状腺素(T4)、促甲状腺素(TSH)]、肾上腺功能[血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)]、细胞免疫功能[血清白细胞介素-2(IL-2)]、能量检测[血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、cAMP/cGMP比值,乳酸脱氢酶(LDH)]及胸腺、脾脏、子宫、卵巢指数。结果与正常组比较,第30天时模型组动物外观差,被毛无光泽,耳、爪紫暗;精神萎靡,蜷缩少动,反应迟钝,喜扎堆;饮水量、食量减少,体重减轻,体温降低显著,便溏;动情周期、间期延长;血浆cGMP含量、cAMP/cGMP比值、LDH、血清IL-2含量及E2、P、T、T3、LH、TSH均有不同程度的降低,胸腺和卵巢指数显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论采用延长冰箱冷冻加冰水浸泡时间的方法制作的妇科虚寒证大鼠模型,符合妇科虚寒证的临床特征。

附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性的影响

目的研究附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、附子正丁醇组、附子水提物组,模型组与治疗组大鼠均予灌含生药量3.2 g/ml的造模药5ml,每天1次,连续14天,空白对照组每天灌服等量的生理盐水,分光光度数法检测大鼠肝匀浆液中的琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠琥珀酸脱氢酶含量明显降低(P<0.01);与模型对照组相比,附子正丁醇、水提取物组琥珀酸脱氢酶含量明显升高(P<0.01);与空白对照组相比,模型对照组大鼠乳酸脱氢酶含量明显升高(P<0.05);与模型对照组相比,附子水提取物组乳酸脱氢酶含量明显降低(P<0.01)。结论虚寒证模型大鼠组琥珀酸脱氢酶活性明显低于空白对照组和治疗组,乳酸脱氢酶活性明显高于空白对照组和治疗组。附子正丁醇和水提取物能提高虚寒证大鼠的琥珀酸脱氢酶活性、降低乳酸脱氢酶活性,有利于虚寒证大鼠的物质代谢的恢复,琥珀酸脱氢酶活性降低可能是造成虚寒证的原因之一,但仍需后续的研究进一步确认。

温阳和补气药对虚寒证大鼠神经内分泌的影响

用大鼠喂知母、石膏汤制造虚寒证模型，停止喂药后虚寒状态持续７日以上，是研究药物治疗的好模型。用附姜和参芪方治疗３日，血清ＤβＨ，肾上腺内皮质素，脑ＮＥ，ＤＡ含量均提高，降低５ＨＴ含量，７日更显著。两复方在周缘和中枢均能兴奋交感神经内分泌系统。参芪方作用快但不持久，附姜方作用持久。