日本血吸虫不同发育期虫卵内抗氧化酶检测的研究

目的检测日本血吸虫(Sj)不同发育期虫卵内抗氧化酶水平,分析其是否可作为鉴别虫卵死与活的标志物。方法采用3,3-二甲基联苯胺盐酸盐(DAB)+H2O2底物作为抗氧化酶检测方法对完整Sj虫卵进行染色观察,并探索其染色条件。建立Sj感染后50d和90d的小鼠模型和吡喹酮治疗后30d和90d的小鼠模型。用最佳染色条件对从各模型组小鼠肝肠组织分出的虫卵作检测,比较观察对未成熟卵、成熟卵、近期变性卵和远期变性卵的显色程度与其分布来评价抗氧化酶水平,分析其用于判别Sj虫卵死与活的可能性。结果与不做染色虫卵比,DAB加入完整游离活卵中经室温震动反应30min时,所呈深棕黄色阳性反应的反差最明显;DAB对沸腾处理30min虫卵染色,未见呈显色反应;DAB对Sj感染50d、90d及治后30d和90d的模型鼠肝肠来源虫卵染色的阳性率分别为92.34%、46.03%、13.68%和0.00%。其阳性反应程度:未成熟虫卵普遍呈深棕黄色;成熟卵多呈深黄色,分布于毛蚴体部;近期变性卵中部分有显色;远期变性卵和卵壳均无见显色。结论 Sj活虫卵内均富含抗氧化酶成分,其水平则以未成熟卵内为最高,且随着虫卵发育成熟至死亡而逐渐减低。提示Sj虫卵作抗氧化酶染色可作为虫卵死与活鉴别的标志物。