毛细管区带电泳法测定不同虫草菌粉制剂中多糖的单糖组成

目的采用毛细管区带电泳法(CZE)测定不同虫草菌粉制剂中多糖的单糖组成。方法设计正交试验优化制剂中所提取多糖的全降解条件;以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为衍生试剂,采用CZE法测定其单糖组成;电泳条件:未涂层弹性石英毛细管柱(70 cm×50μm,有效长度61 cm);运行缓冲液为40 mmol/L硼砂缓冲液(pH 10.1);检测波长245nm;运行电压13 kV;重力进样(10 cm×8 s)。结果多糖全降解的最优条件为硫酸浓度1.0 mol/L,温度100℃,时间5 h;心肝宝胶囊、百令胶囊、至灵菌丝胶囊和金水宝胶囊的多糖中均含有木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖4种单糖,但含量各有差异;4种制剂中多糖的单糖组成与冬虫夏草多糖中的单糖组成基本一致,且检测出了冬虫夏草中未见报道的木糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸等单糖。对所建立的CZE法进行方法学验证,结果显示各单糖在0.01～0.20mg/m L线性关系良好,检测限0.205～0.397μg/m L,定量限0.684～1.323μg/m L,精密度RSD为0.8%～3.6%,重复性RSD为2.7%～4.7%,稳定性RSD为2.8%～4.7%。葡萄糖和半乳糖的平均回收率分别为96.1%～99.8%和95.1%～99.6%,其RSD分别为1.0%～2.0%和1.5%～1.9%。结论该方法快速高效,为虫草菌粉制剂质量标准的完善和虫草菌粉替代冬虫夏草的深入研究提供参考。