用PCR诊断不同虫荷量的大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的价值

目的 评价在不同虫荷量条件下用 PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)的价值。 方法 将 PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组 ,测定其肺虫荷量 ,收集其支气管灌洗液 (BAL F)和血清标本 ,用 PCR和半套式 (Sn) PCR检测标本中的卡氏肺孢子虫基因 ,比较 PCR和环六亚甲基四胺银 (GMS)染色结果 ,及与病鼠肺虫荷量的关系。 结果 虫荷量高的未治疗组病鼠的 BAL F标本 PCR、Sn PCR及 GMS染色阳性率分别为 10 0 %、10 0 %和 92 .6 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;而虫荷量低的治疗组的 PCR(88.1% )、Sn PCR(94 .9% )阳性率均显著高于 GMS染色镜检阳性率 (30 .5 % ) (P<0 .0 5 )。肺虫荷量 >5 0 0个 /mg肺的 PCP大鼠 ,血清 PCR阳性率显著高于≤ 5 0 0者 (分别为 4 2 .9%和 1.7% )。 结论 PCR可用于虫株负荷量较低时的 PCP诊断 ,对判断 PCP病情及疗效考核亦有一定的帮助。

非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫对雏鸡组织荷虫量及脾脏细胞因子表达水平的影响

将2周龄雏鸡随机分成3组,试验组雏鸡颈部皮下注射0.l mL 107个/mL非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫(NRTUAs),感染对照组和空白对照组分别注射等剂量的RH虫株和PBS;于感染的第4天采集各组雏鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、睾丸、法氏囊、胸腺、脑、胸肌、腿肌组织,提取其DNA,采用绝对荧光定量PCR检测各器官组织的荷虫量;提取剩余脾脏组织的RNA,采用相对荧光定量PCR仪检测脾脏中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL26、STAT1、IRF1、IFN-γ、IL-10的转录水平。结果表明,雏鸡感染弓形虫的第4天,各器官组织不能完全清除NRTUAs,除肝脏、睾丸、腿肌和脑组织外,NRTUAs组的组织荷虫量均显著低于RH组的;NRTUAs刺激脾脏不会使免疫相关细胞因子的转录水平显著上调或下调,说明NRTUAs是致病性较低的虫株,不会刺激雏鸡脾脏引发强烈的先天性免疫反应,不会引起促炎、抑炎因子的过量产生。

绵羊胃肠道线虫荷虫量与粪检虫卵相关性研究

用粪便虫卵计数 (EPG)和动物体内蠕虫计数法对新疆 3个不同地区的 16只绵羊直肠粪便中的线虫虫卵和胃肠道线虫进行研究表明 ,在同一地区 ,绵羊直肠粪便中 EPG与体内线虫荷虫量基本呈正相关 ;但不同季节、不同虫种的感染以及不同年龄之间卵与虫相关性的比值变化较大 ;

福建省放牧山羊主要蠕虫粪检虫卵数与荷虫量的相关性研究

【目的】为了了解山羊主要蠕虫克粪便虫卵数(EPG)与其荷虫量的相关性。【方法】通过对15例肝片吸虫病例、13例捻转血矛线虫病例、12例莫尼茨绦虫病例、9例阔盘吸虫病例以及11例同盘吸虫病例的克粪便虫卵数与其荷虫量计数,计算出两者之间的相关系数。【结果】肝片吸虫、捻转血矛线虫、莫尼茨绦虫、阔盘吸虫和同盘吸虫的EPG值和荷虫量的相关系数(r)分别为0.803、0.643、-0.176、0.985、0.926,表明肝片吸虫病、阔盘吸虫病、同盘吸虫病的EPG与其荷虫量的相关性都极显著(P<0.01);捻转血矛线虫病的EPG与其荷虫量的相关性较显著(P<0.05);莫尼茨绦虫病的的EPG与其荷虫量没有直接相关。【结论】山羊主要蠕虫的EPG与其荷虫量的相关系数大小可为临床上判断蠕虫感染强度以及制定合理的驱虫方案提供依据。

感染胃肠线虫羊群粪检虫卵数与荷虫量的定量研究

通过对１１０只主要感染有捻转血矛线虫和细颈线虫羊只的粪便虫卵检查和剖解虫体计数，研究了宿主粪便虫卵数与荷虫量的定量关系。结果发现，虫卵数与虫体总数之间呈高度相关（相关系数ｒ＝０．７３５）。不同季节的研究表明，虫体有明显的产卵季节，虫卵数与虫体数的相关程度也有明显变化。其中，３且份ｒ＝０．１５７；５月份ｒ＝０．２９７；８月份ｒ＝０．６４３；１１月份ｒ＝－０．０９３。本文同时分析了混合感染种群中，不同虫体数与粪便虫卵数的相关关系。结果表明，捻转血矛线虫数与虫卵总数的相关程度较大，一般呈中等正直线相关到强正直线相关；细颈线虫数与虫卵数的相关程度变异很大，主要表现为弱直线相关。本研究作为粪检虫卵数与荷虫量相关关系研究的一个初探，旨在依据虫卵计数的监测而设计寄生虫防制计划。并认为，此技术有助于对整群羊只胃肠线虫感染的诊断和防制。

三株弓形虫对昆明鼠致病性的比较研究

刚地弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,弓形虫属仅有刚地弓形虫一种,但世界各地的分离株有着丰富的遗传多样性。作者以Ⅱ型(Pru、BJ)和Ⅲ型(VEG)虫株为研究对象,通过腹腔接种昆明小鼠,观察小鼠的临床表现,检测血清抗体水平、弓形虫在组织器官的动态分布及脑荷虫量等指标,比较不同虫株对小鼠致病性的差异。结果显示:Ⅱ型虫株接种小鼠表现出更明显的临床症状。监测小鼠血清抗体变化发现,Ⅱ型虫株感染小鼠在第4天即检测到弓形虫特异性抗体,随后抗体水平至第64天持续上升,感染Ⅲ型虫株小鼠血清在感染后第32天达到峰值并维持在较高水平。并且,三种虫株在小鼠组织器官的动态分布趋势大体相同,感染早期(第1天)侵染肺、肾、肌肉,中期(第8天)多分布在心、肺、肌肉、脑中,后期(第32天)存在于脑中,脾、肾、肝中不易检测到虫体。成功建立了三种弓形虫虫株感染昆明小鼠模型,证明Ⅱ型和Ⅲ型虫株对昆明鼠致病力的具体差异,并发现不同基因型弓形虫速殖子感染小鼠后在小鼠体内的分布随时间呈现一定的规律性,为弓形虫致病力的研究和动物模型的建立提供参考。

新孢子虫对小鼠致病力及在小鼠体内动态分布的研究

小鼠是研究新孢子虫的动物模型.通过小鼠毒力试验,检测3株新孢子虫（Nc-1,Nc-LIV和Nc-BJ）对BALB/c小鼠的致病力差异;同时研究了低剂量Nc-LIV株（1＆#215;106）感染后,新孢子虫在小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和后肢肌肉中的分布情况及其在血清中抗体的动态变化规律.结果显示,Nc-LIV对BALB/c小鼠的毒力最强,Nc-BJ其次,Nc-1最弱.小鼠血清中新孢子虫抗体在感染后4d出现至第32天达到峰值.感染后第8天在脑组织中可检测到新孢子虫特异性基因Nc-5,在第32天达到峰值后下降;其他组织中则分布很少.通过观察新孢子虫Nc-LIV在小鼠体内各器官组织动态分布的规律,为进一步建立小鼠感染新孢子虫的动物模型,研究新孢子虫病奠定了基础.

NRTUAs感染对小鼠的组织荷虫量及脾脏细胞因子转录水平的影响

为进一步研究非增殖型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫(NRTUAs)对小鼠的致病性,本研究以NRTUAs和Δku80虫株分别感染小鼠,每日检测各组小鼠的组织荷虫量,并检测感染后1~3d脾脏相关细胞因子的转录水平。结果表明:1)NRTUAs感染的小鼠不能在7d内清除虫体,NRTUAs刺激小鼠脾脏上调IL-12、TNF-α和IL-10的表达,并诱导温和的炎症反应;2)Δku80虫株感染的小鼠在感染后6d内死亡,组织荷虫量平均水平高于NRTUAs感染的小鼠,Δku80虫株刺激小鼠脾脏上调IL-12、TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IL-10的表达,诱导剧烈的炎症反应而导致小鼠死亡。综上,NRTUAs对小鼠的致病性较低,NRTUAs组织荷虫量平均水平低于Δku80组,诱导机体的炎症反应显著轻于Δku80组,为NRTUAs作为畜禽免疫增强剂的开发提供研究基础。

乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠炎性细胞因子及肠道菌群的影响

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂量组分别给予乳双歧杆菌灌胃,模型组和空白对照组每日给予等量磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)连续灌胃30 d;胃蛋白酶消化法检测各组第7 d肠道成虫数量及第30 d肌肉幼虫数量。ELISA法检测各组模型小鼠血清中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平,采集各组小鼠肠道感染期粪便样本,采用16S rDNA高通量测序进行微生物组生物信息学分析,评估样本多样性和分类学特征。结果虫荷量结果显示,高剂量乳双歧杆菌显著降低旋毛虫感染小鼠第7 d肠道成虫及第30 d肌肉幼虫数量(P<0.05);炎性因子水平检测发现高剂量乳双歧杆菌使旋毛虫感染小鼠血清抑炎因子(IL-10)水平升高(P<0.05),促炎因子(TNF-α)水平降低(P<0.05)。肠道微生物组成结果显示,乳双歧杆菌干预使感染小鼠厚壁菌门与拟杆菌门比值上升,降低普雷沃菌属丰度,高剂量组中异杆菌属、颤螺菌属丰度增加,中剂量组中布劳特菌属增加。结论乳双歧杆菌能改善旋毛虫感染小鼠炎症表现,促进旋毛虫清除,提高感染小鼠肠道内有益菌丰度。