虾副产物自溶过程研究与潜在抗冻肽鉴定

为加强海洋副产物的高值化加工利用,本文以虾副产物为原料,在原始pH(7.81~7.83)与50℃水浴条件下进行自溶反应,将酶解产物于95℃水浴加热20 min使内源酶失活,研究了过程中酶解产物的多肽组成变化,并基于活性预测平台筛选得到抗冻肽序列,提供了一种高效率筛选活性肽的方法。自溶处理的0~3 h,酶解物的水解度(DH)和TCA可溶性肽含量急剧增加,分别达到49.8%和26.1 mg/g,随后增长速度变缓。在酶解0.5 h产物(A-0.5)中检出1301条肽段,酶解3 h产物(A-3)中检出197条;A-0.5中大于1600 Da的肽含量达到69.5%,而A-3中肽以600~1600 Da为主。基于活性预测平台Cryoprotect,筛选QVHPDTGISS、GYGCARPNYPGV、TTGEVCDSGDGVTH、EQICINFCNEK、DEYEESGPGIVH、DIDNDGFLDK和DIDNNGFLDK 7个序列为抗冻肽,并通过酶切模拟得到肽段的来源。

不同初始pH对枯草芽孢杆菌发酵虾副产物的影响

目的探讨初始发酵pH对枯草芽孢杆菌发酵虾副产物的组胺含量和发酵液抗氧化活性调节作用。方法中华管鞭虾加工副产物灭菌后接种枯草芽孢杆菌,在37℃下进行发酵,添加适量葡萄糖,调节初始发酵pH 7.0~10.0,测定发酵1~7 d时组胺含量、pH、肽浓度和氨基酸态氮(amino acid nitrogen,AA-N)含量动态变化和发酵液的抗氧化活性,分析各指标间相关性。结果添加5%葡萄糖液可显著抑制组胺生成,初始发酵pH影响发酵液组胺和AA-N含量,其中初始发酵pH10.0发酵6d时组胺的含量低至(17.54±2.64)mg/100mL,而AA-N含量则提高到(0.81±0.02)g/100 mL。而且,初始发酵pH 10.0的发酵液具有很强的清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、总抗氧化能力及清除羟基自由基能力。Pearson相关分析得出发酵液的组胺含量与肽浓度呈极显著正相关(P<0.01),与AA-N含量、羟自由基清除能力和总抗氧化能力呈显著负相关(P<0.01或P<0.05)。结论中华管鞭虾加工副产物接种枯草芽孢杆菌后调节初始发酵pH 10.0,有效降低了发酵液的组胺含量,提高了发酵液的AA-N含量和抗氧化活性,为高品质虾加工副产物发酵制品的开发提供了技术依据。

酶解虾副产物制备抗氧化肽的研究

以虾副产物为原料,采用α-胰凝乳蛋白酶和嗜热菌蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽。酶解液经透析、Sephadex G-15凝胶过滤层析、离子交换色谱和反向高效液相色谱分离,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力和铁离子还原能力(FRAP)为指标进行纯化,得到了高抗氧化活性组分F1。质谱分析结果表明组分F1中有三个肽,对这三个肽进行序列合成并测定其活性,发现十肽GCKVALIVVG的活性最高,其DPPH自由基清除能力按抗坏血酸当量计(AAE)为(16.10±0.02)μmol AAE/g pro,铁离子还原能力为(245.37±0.03)μmol AAE/g pro。本实验研究制备并分离纯化得到高活性的抗氧化肽,为虾副产物的生产应用提供了理论依据。

特异性蛋白酶酶解虾副产物制备ACE抑制肽

ACE抑制肽构效关系（QSAR）的研究认为小肽C末端氨基酸的疏水性和其ACE抑制活性之间呈正相关关系。针对性地选择胰凝乳蛋白酶和脯氨酸蛋白酶两步酶解虾副产物制备AcE抑制肽。在一定温度、pH和加酶量条件下，以蛋白质的水解度和ACE抑制率为指标，确定胰凝乳蛋白酶、脯氨酸蛋白酶的最佳酶解时间均为4h。两步酶解产物ACE抑制的IC50值为1．645mgprotein／mL。经透析后，得到0-500u（组分1）和500～1000u（组分2）两个组分，组分1和组分2的IC50值分别降为0．333mgpeptide／mL和1．320mgpeptide／mL。质谱分析结果表明组分1中含有10个肽，分别由5～14个氨基酸组成；组分2中含有15个肽，分别由7～14个氨基酸组成。25个已知序列多肽中有22个多肽的羧基端是脯氨酸或芳香族氨基酸，与预期相符。

羧肽酶A/B水解虾副产物制备ACE抑制肽

为了获得血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽,使用α-胰凝乳蛋白酶对虾副产物进行预酶解,再选择羧肽酶A/B进行酶解,通过透析和凝胶层析纯化后,测定分离肽的ACE抑制活性。通过检测水解度,确定α-胰凝乳蛋白酶的最优水解时间为4h,羧肽酶A/B最优水解时间为6h。两步酶解产物的ACE半抑制浓度（IC50）值为6.39mg/mL。通过透析,得到〈500Da和500～1 000Da 2个抑制活性更高的组分,IC50分别为1.69和2.87mg/mL。进一步通过Sephadex G-15凝胶层析分离,得到4个IC50值小于0.2mg/mL的组分,其中组分F8最低,为0.134mg/mL,显示了较高的ACE抑制活性。该结果验证了羧肽酶A/B酶解可制备出高活性ACE抑制肽。

虾副产物制备的钙肽结合物理化性质研究

研究由虾加工副产物经过胰蛋白酶水解得到的多肽与氯化钙反应制备的钙肽结合物的理化性质。钙肽结合物中肽含量75.03 g/100g,钙含量11.56 g/100g,水分含量6.02 g/100g。温度对钙肽结合物的溶解度影响较小,在酸性或碱性条件下钙肽结合物溶解性很好,不溶于常见的有机溶剂。钙肽结合物的紫外、红外光谱均表明钙与肽之间形成了新的化学键。

虾加工副产物抗菌型水解液制备条件优化及抑菌作用

目的:为了探究水产品加工副产物用于抗菌型水解液制备,并研究其抑菌作用,本文以南美白对虾优势腐败菌(Specific spoilage organisms of Penaeus vannamei,PV-SSOs)为实验用菌,采用虾加工副产物制备抗菌型水解液(Antibacterial hydrolysate from shrimp processing by-products,SPPH),考察对PV-SSOs的抑菌作用。方法:以中华管鞭虾加工副产物为原料,分别采用5种蛋白酶水解,测定水解液对PV-SSOs的抑菌作用。以抑菌效果最强酶为实验用酶,研究加酶量、酶解时间、酶解温度和料液比对PV-SSOs的抑菌效果影响,然后采用响应面法优化SPPH酶解条件,高效液相色谱法分析SPPH中肽段分子量分布,采用膜渗漏法测定SPPH对PV-SSOs的细胞膜渗透性影响,进一步通过扫描电子显微镜观察SPPH作用后PV-SSOs菌体微观结构变化。结果:选用胃蛋白酶为水解用酶,在酶解反应pH2.0和料液比(1:2,w/v)条件下,经响应面Box-Behnke三因素三水平试验确定抑制PV-SSOs的SPPH最佳制备条件为:胃蛋白酶添加量700 U/g,酶解2.3 h,酶解温度33℃。经测定SPPH对PV-SSOs的抑菌直径达到24.10±0.43 mm。SPPH中分子量小于3000 Da肽组分的相对百分含量接近70%。PV-SSOs经SPPH作用2~12 h菌体细胞膜渗透性均显著高于菌对照组(P<0.05),扫描电镜下PV-SSOs经SPPH处理12 h可见部分菌体发生扭曲、皱缩,细胞膜表面形成凹陷、孔洞及内容物渗出。结论:中华管鞭虾加工副产物可用于制备抗菌型水解液,SPPH通过膜损伤方式抑制PV-SSOs,本研究为SPPH进一步用于南美白对虾保鲜研究提供了理论依据。

酶解虾加工副产物工艺条件的优化研究

虾产品是我国渔业的优势出口产品,随着生产加工规模的扩大,产生了大量的虾头、虾壳等加工副产物,这些副产物含有丰富的蛋白质等营养物质。以虾加工副产物为原料,添加外源蛋白酶并控制水解进程,可以得到富含蛋白、多肽等物质的水解液。本文研究了以酶解的方法提取虾加工副产物中的蛋白,为提高虾资源的利用率和附加值提供理论和应用基础。首先通过比较不同水解酶的水解效率,确定了碱性蛋白酶为最佳的水解酶,其次研究了起始pH、料液比、时间、温度和酶添加量对蛋白提取率的影响。最后根据正交试验,得到了最佳酶解工艺条件为:起始pH9.0,酶添加量1.2%,温度65℃,料液比1:30,时间2.5h;此条件下蛋白提取率为68.76%。

虾加工副产物蛋白肽提制及其生物活性研究进展

随着社会对水产品需求的不断提高,虾类产业链规模不断扩大,导致虾类加工过程中副产物激增,即虾头、虾壳、虾足以及低值小虾等部分,这些副产物中同样含有丰富的营养物质。本文归纳总结几种虾副产物中活性蛋白肽的提取方法及其活性研究进展,旨在为虾副产物进一步产业化开发利用提供参考;从虾副产物中提取制备的活性多肽在功能食品开发利用领域有着广泛的应用潜力与市场前景。

虾加工副产物酶解工艺研究

通过比较不同的水解酶水解虾加工副产物的效率,确定碱性蛋白酶为水解虾加工副产物用酶。考察了料液比、时间、温度、起始pH值、酶添加量对蛋白提取率的影响,确定最优的酶解工艺条件为:酶添加量为虾粉质量的0.8%、温度60℃、料液比4 g∶100 mL、起始pH9.0、时间2.0 h、蛋白提取率为65.3%。

虾类加工副产物制备虾青素的研究进展

文章介绍了从虾类加工副产物中提取和纯化虾青素的工艺技术。比较了不同前处理方式对虾青素提取效率的影响,并概括了高效液相色谱法和柱层析法纯化虾青素的相关技术。为天然虾青素的规模化生产提供理论依据。

虾蟹副产物微波膨化休闲产品的工艺及配方优化

以虾蟹副产物为主要原料,在单因素试验的基础上,采用正交试验分析产品厚度、膨化前水分含量、微波时间、微波功率对产品感官评分及膨化率的影响,结果表明:最优工艺条件为微波功率900 W,膨化前水分含量5%,微波时间80s,产品厚度2mm。同时以感官评分为指标,采用响应面试验优化配方,结果表明:虾蟹副产物20g,木薯粉∶小麦粉为60∶20(g/g),膨化助剂0.2g。在该配方和工艺条件下产品感官评分为14.3分,膨化率为3.57,可为低值水产品开发利用提供有效参考。

虾蛋白肽对蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响

研究和探讨了虾加工副产物的酶解产物(Enzymatic Hydrolysis Production,EHP)对蛋鸡产蛋率和蛋品质的影响。以虾加工副产物为原料,应用复合生物酶酶解技术制备EHP,选择产蛋率在80%以上的300日龄笼养褐壳蛋鸡288只,随机分成3组,在基础日粮中分别添加0、1.5g/100g、3g/100g虾加工副产物EHP,并替代相应重量的鱼粉,试验期为60天。EHP,可显著提高鸡蛋的哈夫单位(P<0.05),试验组蛋鸡产蛋率平均提高3.14%,料蛋比相应低于对照组。表明虾加工副产物EHP可显著提高产蛋高峰期过后处于衰减期的鸡蛋的哈夫单位及产蛋率。

丙二醇体系热反应型虾味香精的制备及成分分析研究

虾加工副产物是虾加工过程中产生的小虾、虾壳和虾头等副产物。以虾加工副产物为原料,通过热反应技术在丙二醇反应体系中制备得到具有虾味特征香味的反应型香精。结果表明,丙二醇体系热反应型虾味香精的最佳配方为:虾加工副产物水解物为100%,复合氨基酸添加量为3.0%(谷氨酸、胱氨酸、甘氨酸和精氨酸,质量比为4∶3∶2∶1),还原糖用量为11%(葡萄糖和果糖,质量比为1∶1),反应温度为110℃,反应时间为30min。通过GC-MS检测热反应型虾味香精的香味成分,发现反应型虾味香精的挥发性成分有15种,主要呈香成分为吡嗪类化合物。

虾蟹壳中甲壳素绿色提取技术研究进展

甲壳素的提取需经脱除蛋白质、矿物质、脂质和色素等工艺,酸碱法有成本高、环境危害等缺点,微生物发酵、酶法或基因工程等生物法绿色提取技术亟待研究。本文综述以虾蟹壳为原料,由传统化学法、生物法绿色提取技术的进展;分析微生物发酵、酶法及基因工程等生物法的优缺点,微生物生物转化及酶处理利用发酵产生的有机酸和蛋白酶,经济有效易实现大规模生产,提出微生物发酵法提取甲壳素具有产业化潜力;最后对遗传操作和代谢工程在近几年的进展也进行了讨论。以生物法绿色提取技术生产甲壳素既具备环境友好又具备高效性,具有重要的发展前景。

不同反应体系热反应型虾味香料的成分分析

以虾加工副产物为原料,分别在水解液、油相、丙二醇3个体系中进行热反应制备虾味香料,将所得虾味香料用GC-MS处理,分析不同体系中香气成分的差异。结果表明,水解液体系热反应型虾味香料的香气成分主要有28种,主要的呈香成分为吡嗪类、羧酸类、醛类和酮类等化合物,其中酮类化合物占最大比重;油相体系热反应型虾味香料的香气成分主要有12种,主要的呈香成分为吡嗪类、醛类、酮类和硫醚类等化合物,其中醛类化合物占最大比重;丙二醇体系反应型虾味香料的香气成分主要有15种,主要的呈香成分为吡嗪类、醛类和酮类等化合物,其中酮类化合物占最大比重。

响应面优化虾加工副产物酶解制备抗氧化肽的研究

利用响应面法优化虾加工副产物酶促水解制备具有清除ABTS自由基能力抗氧化肽的工艺条件。结果表明,碱性蛋白酶最佳水解条件为pH 8.4、温度59.6℃、加酶量597.3 U/g、时间120 min。在此条件下酶解,水解度达40.2%,ABTS自由基清除率为38.8%,平均肽段长度2.5;水解液经凝胶色谱测定,其肽分子量低于6.5 kDa,大部分集中于1-5 kDa。