影响鸡马立克氏病HVT活疫苗蚀斑测定因素

在鸡马立克氏病 HVT活疫苗蚀斑测定中 ,通过对不同的稀释液、吸附条件、维持液残留量、培养液存放时间及计数时机等进行蚀斑计数的比较试验 ,分析了影响蚀斑测定的因素 。

用免疫过氧化物酶蚀斑测定法检测REV

美国农业部禽病和肿瘤学实验室的Jay G.Calvert等人用网状内皮组织增生病毒(REV)感染鸡胚成纤维细胞单层培养物并在琼脂覆盖下孵育6天。去掉覆盖物后,用丙酮/乙醇固定细胞。用抗REV包膜单克隆抗体或恢复鸡血清作为原始抗体。

用免疫过氧化物酶蚀斑测定MDV蚀斑

美国研究人员报告了用免疫过氧化物酶染色的方法,快速、准确检测和定量马立克氏病病毒（MDV）蚀斑。固定单层培养物并与对MDV特异的单克隆抗体孵育。洗涤后,加第二抗体结合辣根过氧化物酶的山羊抗鼠IgG孵育1小时,并用磷酸盐缓冲液洗涤。培养物与二氨联苯胺、GoCl2及H2O2孵育后,蚀斑表现为黑色斑点并容易见到和计数。

一种基于胶体微晶纤维素的改良病毒蚀斑测定法的建立与评价

胶体微晶纤维素(avicel)是一种由微晶纤维素(microcrystalline cellulose, MCC)和羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)制成的混合物,可用于病毒蚀斑测定。常用的avicel由FMC公司生产,其MCC和CMC比例相对固定,无法很好地适应所有类型病毒的蚀斑测定实验。本研究通过对比不同的MCC和CMC配制比例对avicel在病毒蚀斑测定作用的影响,建立了一种操作简便、实用性好和稳定性好的改良avicel病毒蚀斑测定法。为了配制不同浓度MCC和CMC的混合物,本研究制备出12种2×avicel覆盖层,测定其总体黏度及底层黏度,评估其与传统覆盖层相比,使用时的操作难易程度。进一步将12种2×avicel覆盖层制备成avicel-DMEM营养覆盖层,测定96孔板中猪流行性腹泻病毒滴度,比较12种avicel覆盖层及传统覆盖层蚀斑大小、清晰度、稳定性及滴度准确性等的差异,筛选出最佳测定方法。结果显示,12种2×avicel覆盖层中,除4.8%MCC+1.4%CMC和4.8%MCC+1.0%CMC外,其余2×avicel覆盖层在实际使用中均比2×CMC覆盖层更容易吸取和配制营养覆盖层。最后,利用avicel病毒蚀斑测定法测定96孔板中猪流行性腹泻病毒滴度,结果显示CMC浓度越高蚀斑越小,其中终浓度为0.6%MCC+0.7%CMC的avicel覆盖层测定蚀斑染色最清晰,准确度与传统覆盖层相似,但操作较传统覆盖层更简便。综上所述,本研究建立了一种操作简便、实用性好和稳定性好的改良avicel病毒蚀斑测定法,为病毒的病原学、抗病毒药物及疫苗等相关研究的展开提供了良好的实验基础。

大蒜新素治疗鼠巨细胞病毒性心肌炎的实验研究

目的 :探讨大蒜新素 (即大蒜素注射液 )对鼠巨细胞病毒 (MCMV)心肌炎的治疗作用。方法 :建立鼠巨细胞病毒性心肌炎小鼠模型 ,3 0只模型鼠被随机分成大蒜新素治疗组 (n =10 )、更昔洛韦治疗组 (n=10 )和对照组 (n =10 )。以MCMVK181接种之日为 0 ,第 1天开始分别运用大蒜新素和更昔洛韦腹腔注射 ,每天 1次 ,持续 6天。对照组用生理盐水治疗对照。各组分别于第 7天和第 3 5天分别处死 5只小鼠 ,取心脏 ,心脏沿正中线横断切片 ,观察各组小鼠心肌细胞浸润炎性病灶数量 ;取脾、肝和唾液腺组织匀浆 ,用蚀斑形成实验方法进行病毒滴定 ,以观察大蒜新素对MCMV感染小鼠心肌炎疗效 ,并与更昔洛韦比较。结果 :鼠巨细胞病毒 (MCMV)感染BALB/c小鼠能导致心肌炎性细胞浸润灶形成。在心肌炎急性阶段 ,大蒜新素和更昔洛韦与安慰剂组比较 ,能显著抑制模型鼠心脏浸润炎性病灶数量和脾、肝和唾液腺组织中病毒滴度( P <0 .0 1) ,且两药疗效无明显性差异 ( P <0 .0 1)。但在心肌炎慢性阶段大蒜新素疗效与更昔洛韦比较有明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :鼠巨细胞病毒 (MCMV)感染BALB/c小鼠能导致心肌炎的发生 ;在心肌炎急性阶段 ,大蒜新素能有效地减少心肌细胞浸润炎性病灶数量和抑制脾、肝和唾液腺组织中病毒复制 ,其治疗效果与?