RP-HPLC法测定中药材蚂蟥中蚂蟥多肽的含量

建立了一种测定蚂蟥药材中抗凝血活性多肽类化合物蚂蟥多肽含量的反相高效液相色谱（RP—HPLC）新方法。色谱柱采用Hypersil．C18柱（200×4．6mm，5μm），流动相为乙腈和水（体积比为2：98），加入质量分数0．03％KH2P04，再用体积分数36％HAc调至pH3．80，检测波长280nm，流速1．0ml Mmin，柱温35℃。当蚂蟥多肽的质量浓度为186—942mg／L时，其峰面积与质量浓度的线性关系良好（r=0．9996）；平均回收率为99．8％，RSD〈2％。方法可作为蚂蟥药材或含有蚂蟥药材的中成药的质控方法。

蚂蟥冻干粉针的制备及质量研究

目的制备蚂蟥冻干粉针并建立其质量控制方法。方法筛选赋形剂的种类和用量,得出最佳处方和制备工艺;以高效液相色谱(HPLC)法测定蚂蟥多肽(whitmanin)的含量,并以此作为主要指标考察制剂质量。另通过长期实验考察其稳定性。结果使用5%甘露醇作为赋形剂效果较好;含量测定中平均加样回收率为99.8%(RSD=1.8%);其室温留样12个月稳定性良好。结论所制蚂蟥冻干粉针处方合理,制备工艺可行,质量可控。

水蛭抗凝血活性成分的研究

目的:研究水蛭的抗凝血成分。方法:以血浆复钙时间为指标,应用Sephadex DEAE A-50阴离子交换树脂色谱、Sephadex G-25和Sephadex LH-20凝胶过滤色谱及反相高压液相色谱技术分离纯化。结果:得到3个抗凝血活性多肽,其中化合物1,2在自然条件下互相转化,它们的相对分子质量分别为7 100和5 531;采用HPLC及SDS-PAGE鉴定了化合物3的纯度,采用MALDI-TOF-MS法测定出其相对分子质量为8 608,并测定了其氨基酸组成。结论:推测化合物3为首次分离得到的抗凝血多肽,命名为蚂蟥多肽(whitmanin)。