蛇床子水提取物的抗心律失常作用

蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床的果实。蛇床子的主要成分蛇床子素有钙拮抗剂的活性,蛇床子提取液有抑制Na^+内流作用。因此,推测蛇床子可能会影响心肌细胞膜的Na^+、Ca^(2+)内流,从而发挥抗心律失常作用。故进行了下述实验。

高效液相色谱法测定复方蛇床酊中蛇床子素的含量

目的建立复方蛇床酊中蛇床子素含量的高效液相色谱测定方法。方法采用Hypersil ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(70∶30),流速为1.0mL/min;测定波长为322nm;柱温为室温。结果蛇床子素在0.018～0.126μg范围与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.55%,RSD=1.45%。结论该方法操作简便快速、准确可靠,可用于复方蛇床酊中蛇床子素含量的测定。

HPLC法同时测定复方蛇床酊中蛇床子素和土荆皮乙酸的含量

目的:建立可同时测定复方蛇床酊中蛇床子素和土荆皮乙酸含量的HPLC法。方法:色谱柱:Apollo C_(18)(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-1%醋酸溶液(65:35),流速:1.0ml·min^(-1);检测波长:322nm。结果:蛇床子素和土荆皮乙酸分别在0.010～0.080μg(r=0.9998)和0.005～0.040μg(r=0.9996)范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.50%和98.78%,RSD分别为1.94%和1.42%。结论:该方法简便易行,结果准确,重复性好,可用于控制复方蛇床酊的质量。

蛇床子和兴安蛇床果实挥发油的成分分析

蛇床子是常用中药。孟正木等曾报道过朝鲜产蛇床子挥发油的化学成分[南京药学院学报,1986,17(3):167]。我们利用GC-MS技术分离並鉴定出国产蛇床子挥发油中的20个成分,其中有10个成分是首次从中发现;兴安蛇床是蛇床的同属植物,有关其挥发油成分的研究尚未见报道,我们用GC-MS技术从其成熟果实的挥发油中首次分离出30个成分。

正交设计优选复方蛇床子酊的醇提工艺

目的优选复方蛇床子酊的最佳渗漉醇提工艺条件。方法以醇浸出物和蛇床子素含量为评价指标,采用正交设计实验法考察乙醇浓度、加乙醇量、浸渍时间及渗漉速度对醇提工艺效果的影响。结果乙醇浓度对复方蛇床子酊的醇浸出物含量有显著性影响,而其他3个因素的影响很小。结论复方蛇床子酊的最佳提取工艺条件为:用13倍量的70%乙醇浸渍24h后,以3ml·min-·1kg-1的速度渗漉。

不同生育期、盐胁迫下蛇床植株中蛇床子素含量的变化

土壤盐分测定结果表明,正常生长条件下的土壤盐分含量是盐胁迫条件下的4.0倍多,且在盐胁迫下,蛇床植株能够正常生长.利用液相色谱法(HPLC)测定了正常生长条件下蛇床植株幼苗期、营养生长盛期、开花结果期及盐胁迫条件下蛇床植株开花结果期不同部位的蛇床子素含量,结果表明在不同生长条件下开花结果期各部位中蛇床子素含量均达到最大值.盐胁迫条件下开花结果期蛇床子素总含量316.86μg/g干重,是正常生长条件下160.00μg/g干重的1.9倍.

基于内质网应激研究蛇床子素对成骨细胞增殖与分化的影响

背景:研究表明,蛇床子素可以通过促进成骨细胞分化而促进骨形成,但是蛇床子素抗骨质疏松效应的机制尚不明确。目的:观察蛇床子素对体外培养大鼠成骨细胞增殖与分化的影响,探究其抗骨质疏松效应的机制。方法:采用二次酶消化法分离大鼠成骨细胞,并使用碱性磷酸酶染色以及矿化结节染色进行鉴定。实验分5组,分别为溶剂对照组、β-雌二醇组以及蛇床子素低、中、高剂量组(1×10^(-6),1×10^(-5),1×10^(-4) mol/L)。用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶活力以及矿化结节染色评价细胞分化情况,蛋白免疫印迹法检测GRP78、PDI、CHOP蛋白表达。结果与结论:(1)1×10^(-4),1×10^(-5) mol/L蛇床子素可抑制成骨细胞增殖;(2)10^(-4) mol/L蛇床子素可增加成骨细胞碱性磷酸酶活力、增强成骨细胞矿化能力;(3)10^(-4)mol/L蛇床子素可降低GRP78蛋白水平,增加PDI及CHOP蛋白表达;(4)结果表明,蛇床子素可促进成骨细胞分化,可能通过内质网应激抑制成骨细胞增殖。

中国不同地区蛇床的rDNA ITS序列分析

目的：探讨不同分布区的蛇床Ｃｎｉｄｉｕｍ ｍｏｎｎｉｅｒｉ 的ＩＴＳ序列变异与其地理分布和化学成分的相关性。方法：设计２ 对引物，Ｐｆ＋ Ｐｂ 及Ｐ５－８ＳＩＴＳ１＋ Ｐ５－８ＳＩＴＳ２ ，ＰＣＲ扩增产物纯化后用银染法或ＡＢＩ３１０ 测序。结果：得到核糖体ＤＮＡ中的ＩＴＳ及５－８ＳｒＤＮＡ 完全序列，１８Ｓ和２６ＳｒＤＮＡ 部分序列，共约７００ ｂｐ 。５ 个地点样品的ＩＴＳ１及ＩＴＳ２ 的序列大小分别为２１０～２１７ ｂｐ 和２１９ ～２２４ ｂｐ。ＩＴＳ１ 碱基序列的遗传距离０－００ ～１－９３％ ，ＩＴＳ２ 碱基序列的遗传距离０－４６ ～２－３４％ ，ＩＴＳ１ 较为保守。以ＮＪ法根据ＩＴＳ２ 序列数据重建系统发生树。哈尔滨样品聚为一组，衡水与德州样品和郑州与高淳样品各自聚为一组。结论：ＩＴＳ２ 序列的变异与中国产蛇床的纬度分布相关，而其与蛇床化学型的关系尚需作进一步研究。

蛇床果实中香豆素类成分的变异及其规律

目的：探讨蛇床果实种内香豆素成分的变异与地理分布的关系及其变异规律。方法：用毛细管ＧＣ 法对蛇床果实４８ 个居群５９ 个样品中蛇床子素、佛手柑内酯、欧前胡素、Ｏ乙酰哥伦比亚苷元等９ 个香豆素成分进行含量测定与定性分析。结果与结论：根据蛇床果实中香豆素成分化学结构的差异及各成分的有无与含量的高低结合地理分布，可将蛇床分为３ 个类型，即化学型Ｉ：以蛇床子素和线型呋喃香豆素为主要成分；分布于福建、浙江、江苏等亚热带常绿阔叶林区域。化学型ＩＩ：以角型呋喃香豆素为主要成分；分布于辽宁、黑龙江、内蒙古等温带针阔叶混交林区域。化学型ＩＩＩ：蛇床子素、线型和角型呋喃香豆素同时存在，属于混合的过渡类群；分布于河南、河北。

蛇床子的体视学研究和计算机图像分析测定

经对４种蛇床的果实、花粉粒、维管束、气孔和内胚乳细胞的大小进行分析测定，结果表明，果实和维管束的大小顺序为兴安蛇床＞碱蛇床＞滨蛇床＞蛇床：花粉粒大小为碱蛇床＞兴安蛇床＞滨蛇床＞蛇床；内胚乳细胞则兴安蛇床＞滨蛇床＞碱蛇床＞蛇床。

蛇床子素预防去卵巢大鼠骨质疏松形成的实验研究

目的观察蛇床子素对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法以尼尔雌醇为对照观察蛇床子素对双侧卵巢切除大鼠体重、子宫重量、子宫内膜腺体数;血清Ca2+,P,ALP,E2,CT,TGF-β1,BGP;大鼠股骨骨密度的影响。结果与模型组相比,蛇床子素各剂量组大鼠体重、子宫重量、子宫内膜腺体数未见明显变化,血清P含量下降,血清Ca2+,E2,CT,TGF-β1和BGP升高。蛇床子素组大鼠股骨骨密度较模型组明显增加。结论蛇床子素能提高去卵巢大鼠股骨骨密度,防止骨质疏松的发生,其作用机制可能与增加血清CT,TGF-β1和BGP含量等有关。

蛇床子总香豆素的测定及其提取条件的正交设计优选

目的 建立蛇床子总香豆素的RP -HPLC测定方法 ,探讨其提取分离的优化条件。方法 以蛇床子素、欧前胡素为定量指标成分 ,通过对蛇床子浸出、水煎、超声等提取方法的比较与筛选 ,确定乙醇浓度、水浴温度、超声时间、浸渍时间 ,并以L9(34 )正交设计表安排试验。结果 蛇床子药材细粉加 2 0倍量 75 %乙醇5 5℃水浴温度下 4 3Hz超声提取 90min为蛇床子总香豆素的最佳提取工艺。结论 优选的超声提取条件效率高 ,可增加蛇床子药材的利用率。

蛇床子质量的研究——抗菌作用的比较

对4个产地蛇床Cnidium monnieri及同属其它2种植物果实的水煎液作了抗细菌和抗真菌作用的比较研究,实验表明均有不同程度的抑制作用。抑细菌效果:蛇床、碱蛇床>兴安蛇床;抑真菌效果:蛇床>兴安蛇床>碱蛇床。

蛇床幼茎离体培养中体细胞胚胎形成的观察

蛇床幼茎外植体经诱导产生了愈伤组织。在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．４ｍｇ／Ｌ培养基中，愈伤组织转变成胚性愈伤组织。转入ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．８ｍｇ／Ｌ培养基以后，胚性愈伤组织分化出体细胞胚胎。体细胞胚胎在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基中可直接发育成为完整植株。显微观察表明，体细胞胚胎产生于愈伤组织的表层细胞或内部细胞。在鱼雷胚期已有螺纹导管的分化。子叶期的维管组织从两片子叶伸向胚根，呈“丫”形。

蛇床及其近缘物种的ITS2分子鉴定

目的:对传统中药蛇床子基原植物及其近缘物种的ITS2条形码序列进行分析,探讨药用植物蛇床子的分子鉴定方法。方法:采用PCR技术扩增蛇床ITS2基因片段,进行双向测序,运用CodonCodeAligner拼接后,用MEGA5.0软件进行相关数据分析,构建NJ树。应用Schultz等建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果:蛇床与其近缘物种ITS2序列间存在明显差异,基于ITS2序列的NJ树及其ITS2二级结构均可以将蛇床及其近缘物种区分开。结论:ITS2可有效地鉴别蛇床及其近缘物种。

蛇床种内变异的RAPD分析

目的 :从DNA分子水平上探讨不同地区产蛇床的种内变异。方法 :用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析 9个产地的蛇床基因组DNA多态性 ,并构建树状聚类图。结果 :从 2 0个 10bp随机引物中筛选出 12个有效引物 ,共扩增出 75条DNA带 ,其中 6 4条表现出多态性。结论 :地理分布距离越小 ,蛇床的遗传差异越小 ,反之越大 ,但生态环境对蛇床遗传变异的作用也不可忽视。

一测多评法测定芹菜籽中芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯

目的建立一测多评法同时测定芹菜籽中芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯的含量,验证该方法在芹菜籽中应用的准确可行性。方法以芹菜籽原料药中主要成分芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯为指标,在一定范围内建立芹菜甲素与芹菜乙素、芹菜甲素与新蛇床内酯的校正因子。测定芹菜甲素的含量,测得校正因子f芹菜甲素/芹菜乙素=0.226;用校正因子测定芹菜乙素和新蛇床内酯的含量,测得校正因子f芹菜甲素/新蛇床内酯=0.702,同时,采用外标法测定6批不同批次中3个成分的含量,以验证一测多评法的准确性和科学性。结果不同仪器所得相对校正因子的RSD为4.4%～6.7%,同一台仪器不同色谱柱所得相对校正因子的RSD为2.3%～3.6%,建立的校正因子重现性良好,原料药中采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间没有明显差异。结论在缺乏对照品的情况下,该方法可用于芹菜籽中多成分质量评价研究。

复方蛇床酊的药效学研究

目的:研究复方蛇床酊的抑菌、抗炎及止痒的药理作用,为其临床应用提供药效学依据。方法:采用二倍稀释法、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法及磷酸组织胺致痒法,观察复方蛇床酊的体外抑菌最小抑菌浓度、对动物的肿胀及致痒阈的影响。结果:复方蛇床酊对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及铜绿假单胞菌均具有不同程度的抑制作用;能明显抑制小鼠耳廓肿胀和大鼠足跖肿胀;能显著提高小鼠对组胺的致痒阈。结论:复方蛇床酊具有良好的抗菌、消炎、止痒等作用。

蛇床子香豆素成分的种间差异和种内变异

４种蛇床子香豆素成分的ＴＬＣ图谱差别很大；正品蛇床子根据香豆素成分的ＴＬＣ结果可分为４种化学类型，分别测定了其中香豆素成分的含量。

高效液相色谱法同时测定芹菜籽油中新蛇床内酯与芹菜甲素的含量

目的:建立同时测定芹菜籽油中抗惊有效成分伞形科内酯类化合物含量的高效液相色谱法。方法:采用 Diamonsil-C_(18)色谱柱(5μm,200 mm×4.6 mm),甲醇-水(60:40)为流动相,检测波长235 nm,流速为1.0 mL·min^(-1);柱温为室温,外标法测定。结果:新蛇床内酯和芹菜甲素浓度分别在28.3～566.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)和10.05～201.00μg·mL^(-1)(r=0.9999)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.9%和99.0%;8 h 内含量均稳定;4种芹菜籽油中新蛇床内酯的含量分别为4.07%,2.25%,3.57%,0.43%;芹菜甲素的含量分别为4.06%,2.39%,2.53%,1.62%。结论:本法操作简便,方法准确、灵敏、重现性好。