蛇床子素化学结构修饰研究进展

蛇床子素,其化学名为7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素,又名甲氧基欧芹酚,是蛇床子成熟果实中的主要有效成分,属香豆素类化合物,拥有丰富的生物活性。为深入研究蛇床子素活性与其结构的关系,人们对其进行了大量的结构修饰研究工作,修饰部位主要集中在内酯环、C-7位甲氧基和C-8位异戊烯基。综述蛇床子素的结构修饰研究进展,以期为该类化合物结构修饰深入研究和应用开发提供参考。

蛇床子对肾阳虚骨质疏松大鼠的治疗作用与机制研究

[目的]探索蛇床子对肾阳虚骨质疏松大鼠的骨保护作用与分子机制。[方法]SD大鼠分为正常、模型、蛇床子提取物与蛇床子素组。除正常组外,其余大鼠每日皮下给予氢化可的松,给药组每日灌胃给药,连续3周。大鼠麻醉后采集股骨,其中左侧股骨进行抗酒石酸磷酸酶染色、骨钙素与转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)免疫组化染色以及骨密度检测,右侧股骨进行实时荧光定量聚合酶链式反应与免疫印迹检测靶基因和蛋白表达。[结果]氢化可的松可显著促进大鼠破骨细胞分化与成熟,抑制成骨细胞生成,降低骨小梁生成,降低骨密度,最终诱导大鼠肾阳虚骨质疏松发生。生物信息预测结果提示,TGF-β信号通路是蛇床子潜在候选靶标通路。蛇床子可显著减轻由氢化可的松诱导的破骨细胞分化与成熟现象,并促进成骨细胞分化与成熟,从而减轻氢化可的松诱发的大鼠骨质疏松。蛇床子提取物可显著增强股骨中因氢化可的松诱导的TGF-β基因下调。[结论]蛇床子可通过调控TGF-β信号通路,抑制肾阳虚大鼠骨质疏松。

蛇床子-海螵蛸对白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜修复的影响

[目的]观察蛇床子-海螵蛸对白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜修复的影响,比较蛇床子-海螵蛸和蛇床子治疗白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜的作用差异。[方法]取40只SPF级SD雌鼠(体质量180~220 g),并将大鼠随机分为空白组、模型组、蛇床子组、蛇床子-海螵蛸组,每组10只,建立白色念珠菌阴道炎(VVC)大鼠模型,空白组和模型组均采用生理盐水冲洗阴道,蛇床子组及蛇床子-海螵蛸组使用5 g生药/mL的发酵药物进行阴道灌洗治疗,每只每次阴道灌洗1 mL,每日1次,共灌洗10 d。采用pH试纸测定大鼠阴道pH值、苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠阴道组织学病理、酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测大鼠阴道组织中白细胞酯酶(LE)、乙酰胺葡萄糖苷酶(OGA)蛋白水平及进行转录组学分析修复阴道黏膜机制。[结果]成功建立VVC大鼠模型,与空白组比较,模型组大鼠阴道黏膜结构不完整,黏膜厚度降低、炎症浸润加剧,pH值及LE、OGA活性因子蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,蛇床子-海螵蛸组及蛇床子组上述指标均下降(P<0.01),蛇床子-海螵蛸组上述指标均低于蛇床子组(P<0.05),且蛇床子-海螵蛸组炎症细胞浸润减少、阴道黏膜结构得到了一定恢复,黏膜厚度增加,而蛇床子组无明显的阴道黏膜修复作用;根据转录组结果可知,与模型组相比,蛇床子-海螵蛸发酵组差异基因一共523个,KEGG富集通路表达上调的主要为过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、细胞色素P450等。表达下调的主要为破骨细胞分化、白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。[结论]蛇床子海螵蛸能够有效修复VVC模型大鼠阴道黏膜结构,能通过调节阴道pH值,改善阴道菌群,修复并保护阴道黏膜结构。蛇床子-海螵蛸可能是通过调控PPAR通路以及细胞P450酶,达到修复阴道黏膜的作用。

蛇床子素通过减轻阿尔茨海默病大鼠模型中的神经炎症改善认知功能障碍

目的抗炎治疗为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供了一个潜在的靶点。蛇床子素(Ost)已被证明可以改善记忆并具有多效性保护作用,但其在AD治疗过程中的确切机制尚不清楚。方法在本研究中,作者研究Ost对β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的认知功能障碍和海马炎症反应的保护作用。采用双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型,在Aβ_(1-42)注射前7 d至注射后7 d每日给予Ost。采用Morris水迷宫(MWM)试验评估大鼠的认知功能。采用免疫组化和Western blot法检测海马神经胶质反应及Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和核因子-κB(NF-κB)的表达。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定促炎细胞因子的产生。结果Ost治疗显著改善了AD大鼠模型海马中Aβ_(1-42)毒性诱导的认知障碍,减轻了胶质细胞的激活,降低了炎症细胞因子的释放(P<0.01)。经Ost处理后,Aβ_(1-42)诱导的TLR4、TRAF6和NF-κB表达的明显降低(P<0.01)。结论Ost通过抑制TLR4/NF-κB信号通路而减轻Aβ_(1-42)诱导的神经炎症,可能是一种很有前途的治疗药物。

蛇床子素通过NF-kB信号通路调控退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应及凋亡

目的 研究蛇床子素对退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应和凋亡的作用及其潜在机制。方法 采用氧糖剥夺(Oxygen Glucose Deprivation, OGD)培养建立退变髓核细胞模型,将细胞分为:对照组(正常培养)、OGD组(OGD培养)、蛇床子素组(OGD培养+蛇床子素处理)、PDTC组(OGD培养+NF-κB通路抑制剂PDTC处理)和蛇床子素+PDTC组(OGD培养+蛇床子素+PDTC处理)。采用Western blot检测细胞中Ⅱ型胶原(Collagen typeⅡ,Col2al)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、P65和p-P65蛋白表达,ELISA法检测细胞培养液中炎性因子血清白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 与对照组比较,OGD组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显降低,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高,细胞凋亡率明显升高,细胞中p-P65蛋白表达明显升高;与OGD组比较,蛇床子素组和PDTC组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显升高,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,细胞凋亡率明显降低,细胞中p-P65蛋白表达明显降低,而蛇床子素+PDTC组上述指标改变最为明显。结论 蛇床子素可能通过抑制核因子激活的B细胞的κ轻链增强(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的活性,促进退变髓核细胞的细胞外基质合成、抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡。

基于BMP2/Smad4信号通路探究蛇床子素对骨质疏松性骨折大鼠愈合过程的影响

目的基于骨形态发生蛋白(BMP)2/Smad4信号通路探究蛇床子素对骨质疏松性骨折(OPF)大鼠愈合过程的影响。方法将90只SD大鼠分成Sham组、OPF组、低剂量组(10 mg/kg蛇床子素)、高剂量组(20 mg/kg蛇床子素)、高剂量+NC组(2μl shRNA)、高剂量+shRNA-BMP2组(2μl shRNA-BMP2),15只/组;摘除大鼠的双侧卵巢以构建骨质疏松(OP)模型,在此模型基础上进行右侧股骨干骨折建立OPF大鼠模型,术后除Sham组及OPF组外其余组灌胃相应剂量蛇床子素,而Sham组及OPF组给予等量生理盐水灌胃,高剂量+NC组、高剂量+shRNA-BMP2组在灌胃第1天于尾静脉注射相应慢病毒,其余组则注射等量生理盐水,灌胃8 w(1次/d);使用双能X线BMD仪检测骨痂部位骨密度(BMD);酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)和碱性磷酸酶(ALP)水平;三点弯曲实验进行股骨生物力学性能检测;Micro-CT扫描股骨骨痂;HE染色观察骨痂组织形态;Western印迹检测骨痂组织成骨细胞特异性转录因子(Osterix)、Runt相关转录因子2(RUNX2)及BMP2/Smad4通路蛋白表达。结果与Sham组比较,OPF组股骨骨痂BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著降低,股骨刚度及最大载荷、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)显著减小,TRACP水平显著升高,骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增大(均P<0.05);与OPF组比较,低、高剂量组BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著升高,股骨刚度及最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著增加,TRACP水平显著降低,Tb.Sp显著减小(均P<0.05);与高剂量组比较,高剂量+shRNA-BMP2组BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著降低,股骨刚度及最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著减小,TRACP水平显著升高,Tb.Sp显著增大(均P<0.05)。结论蛇床子素通过激活BMP2/Smad4信号通路来促进OPF大鼠的骨折处愈合。

蛇床子素调节PI3K/Akt/m TOR信号通路对老龄自发性高血压大鼠肾氧化应激损伤的影响

目的:探究蛇床子素对老龄自发性高血压大鼠的影响机制。方法:购买20月龄的老龄自发性高血压大鼠(SHRs)及健康Wistar-Kyoto(WKY)大鼠,对SHRs进行蛇床子素灌胃治疗处理持续8周。对大鼠收缩压及舒张压进行监测,使用苏木精-伊红(H&E)、碘酸雪夫染色(PAS)和Masson染色观察大鼠肾脏组织病理学变化。使用ELISA试剂盒检测大鼠肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性。采用Western blot对PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白进行检测。结果:蛇床子素降低SHRs收缩压及舒张压,改善了SHRs大鼠肾脏的组织病理学变化,降低SHRs肾脏MDA活性,提升SOD及GSH活性。蛇床子素降低p-PI3K、p-Akt、p-mTOR水平。结论:蛇床子素通过降低PI3K/Akt/mTOR信号通路活性发挥对老龄自发性高血压大鼠肾氧化应激损伤的保护作用。

蛇床子、花椒、白矾、苦参加减辨治对外阴阴道炎阴道微环境影响

目的:观察蛇床子、花椒、白矾、苦参加减辨治对外阴阴道炎临床疗效和对阴道微环境的影响。方法:选取120例外阴阴道炎患者随机分为观察组60例和对照组60例,对照组采用硝呋太尔制霉菌素阴道软膏治疗,观察组采用蛇床子、花椒、白矾、苦参加减辨治药方进行熏洗治疗。比较两组治疗前后临床疗效和阴道微环境变化情况。结果:观察组临床疗效总有效率(95.0%)高于对照组(81.7%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组阴道pH值、阴道清洁度、阴道菌群密集度均优于治疗前(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05),两组阴道过氧化氢阳性率、白细胞酯酶阳性率均低于治疗前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:中药蛇床子、花椒、白矾、苦参加减辨治方对外阴阴道炎有良好疗效,同时可有效改善阴道微环境。

含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物的合成及抗菌活性

设计合成了25个含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物,经核磁共振波谱(1H NMR和13C NMR)及元素分析确证了其结构.抗菌活性测试结果表明,化合物4q对金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氟喹诺酮大肠杆菌(FREC)的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.5,1,2和2μg/mL,化合物4s对S.aureus,E.coli,MRSA和FREC的MIC分别为0.25,0.5,1和2μg/mL,化合物4u对S.aureus,E.coli,MRSA和FREC的MIC分别为0.5,2,1和4μg/mL,3个化合物的抗S.aureu活性与对照药苯唑西林相似,且优于诺氟沙星;抗E.coli,MRSA和FREC活性优于对照药苯唑西林和诺氟沙星.研究结果表明,(杂)芳磺酰基哌嗪的引入能有效提高抗菌活性,扩大抗菌谱.

蛇床子素通过阻断钙通道降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度

目的探讨蛇床子素对蛙坐骨神经复合动作电位的作用以及离子机制。方法通过细胞外空气间隔法诱导蛙坐骨神经复合动作电位,观察蛇床子素作用及其机制。结果蛇床子素剂量依赖降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度。胞外0钙能够减小蛇床子素的抑制效应。广谱钙通道阻断剂氯化镉,氯化镧阻断蛇床子素的抑制效应。L型钙通道阻断剂地尔硫卓、维拉帕米,P/T型钙通道阻断剂氯化镍都能阻断蛇床子素的抑制效应。结论蛇床子素通过抑制钙通道降低蛙的坐骨神经复合动作电位幅度。

蛇床子素对乳腺癌细胞的放疗增敏作用及其机制

目的探讨蛇床子素(OST)对4T1细胞放疗增敏的作用及其机制。方法4T1细胞经不同浓度OST(25,50,75,100,125,150,175,200μmol/L)处理24 h后用CCK-8法检测细胞活力。将4T1细胞分为IR组和OST(50μmol/L)+IR组,采用克隆平板形成实验检测放疗增敏影响。将4T1细胞分为对照组、OST组(50μmol/L)、IR组(2 Gy)、OST(50μmol/L)+IR(2 Gy)组,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测细胞内Nrf2及NQO1蛋白表达水平变化。结果与0μmol/L OST组相比,不同浓度OST(25,50,75,100,125,150,175,200μmol/L)组4T1细胞的增殖活力明显降低(P<0.05)。与IR组相比,OST+IR组细胞克隆存活分数显著降低(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组细胞的增敏比为1.14。与对照组相比,OST组和IR组细胞凋亡率均增加(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。与对照组相比,OST组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显增加(P<0.05),IR组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论蛇床子素可以增加乳腺癌细胞的放疗敏感性,其可能与Nrf2/NQO1通路机制有关。

蛇床子素对脂肪干细胞成膜和成骨能力的影响

研究蛇床子素对脂肪干细胞增殖、细胞膜片形成和成骨分化能力的影响。方法 分离培养C57BL/6小鼠脂肪干细胞(ASCs)并鉴定其多向分化能力;根据细胞培养液中加入蛇床子素的含量(0、10-5、10-6、10-7mol/L)将细胞分为空白对照组、10-5组、10-6组和10-7组。CCK-8 法检测各组细胞增殖水平。用含蛇床子素的成膜诱导液诱导7天收获细胞膜片,冰冻包埋切片后焦油紫染色观察各组膜片厚度。用含蛇床子素的成骨诱导液培养ASCs和ASC膜片,成骨诱导7天后行碱性磷酸酶染色,成骨诱导28天后行茜素红染色,检测其成骨能力。Image J 测量膜片厚度和染色阳性区域面积。结果 蛇床子素对ASCs的增殖没有显著影响;10-7 mol/L蛇床子素可以使ASC膜片显著增厚(P<0.01);成膜诱导与蛇床子素二者联合运用对ASCs成骨能力有更好的促进作用,其中10-7 和10-6mol/L蛇床子素可显著促进ASC膜片的成骨能力(P<0.01),10-7组效果最好。结论 蛇床子素可以促进ASCs的成膜能力;成膜诱导与蛇床子素共同应用对于ASCs的成骨能力具有协同促进效应。

蛇床子鱼腥草煎汤坐浴治老年性外阴瘙痒

蛇床子10克,鱼腥草30克(干品)。上药加水2000毫升,浸泡30分钟后用沙锅煎煮20分钟,去渣取药液,放入木盆中,先趁热熏患处,药温适宜时再坐浴。每日早晚各1次,每次20~30分钟,7剂为1个疗程,连用1~2个疗程,有清热解毒、杀虫止痒之效。

蛇床子素对糖尿病肾病大鼠NF-κB信号通路介导的炎症反应的影响

目的分析蛇床子素对糖尿病肾病大鼠k基因结合核因子(nuclear factor-k-gene binding,NF-κB)信号通路介导的炎症反应的影响。方法选择50只雄性健康SPF级大鼠,采用随机数表法分为空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组共5组;大鼠利用丝裂霉素联合肾脏切除术构建糖尿病肾病大鼠模型;低剂量组大鼠腹腔注射1 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,中剂量组大鼠腹腔注射10 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,高剂量组大鼠腹腔注射50 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,空白组和模型组腹腔注射等体积生理盐水处理;记录各组大鼠治疗过程中一般情况,治疗结束后24 h检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)、24 h尿蛋白总量(24 h-protein,24 h-Pro)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平;取肾脏组织采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)及Masson染色进行干预;采用酶联免疫吸附法检测组织匀浆中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-)1蛋白水平;聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测组织中NF-κB p50、NF-κB p65及NF-κB信使核糖核酸(NF-κB messenger ribonucleic acid,NF-κB mRNA)水平;Western blot法检测肾组织匀浆中NF-κB p50、NF-κB p65及NF-κB蛋白水平。结果对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组大鼠体质量、24 h饮水、24 h饮食及24 h尿量、SCr、24 h-Pro、BUN、FBG、IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1存明显差异,且差异存统计学意义(P<0.05);组间比较分析发现,随使用剂量增加各组大鼠体质量也明显升高,24 h饮水、24 h饮食、24 h尿量、IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1、SCr、24 h Pro、BUN、FBG均明显降低,且差异存在统计学意义(P<0.05);对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组大鼠NF-κB p50、NF-κB p65蛋白及mRNA存明显差异,且差异存统计学意义(P<0.05),组间比较分析发现,随使用剂量增加各组大鼠NF-κB p50、NF-κB p65蛋白及mRNA也明显降低,且差异存在统计学意义(P<0.05);低剂量组、中剂量组、高剂量组及对照组大鼠肾组织HE染色结果显示,其肾小球结构基本正常,偶尔可见少量红细胞,无或轻度肾小球毛细血管扩张,肾小囊内血浆蛋白渗出率较低,可见系膜基质轻度增多,肾小球轻度肥大,少见或不见糖原沉积,系膜区轻度增宽,少见或不见肾小管空泡变形,给药后大鼠病理检测结果显著优于模型组。结论蛇床子素可有效调节糖尿病肾病大鼠NF-κB信号通路抑制体内炎症反应,并改善大鼠病理改善特征。

土壤添加蛇床子(Cnidium monnieri)和苦参(Sophora flavescens)对茄子黄萎病及根际微生物的化感影响

研究了蛇床子、苦参对茄子黄萎病菌的化感抑制作用及对茄子根际微生物数量的影响。结果表明,蛇床子、苦参的提取物抑制了茄子黄萎病菌菌丝生长,并随提取物浓度的增加抑制作用增强。在土壤中施入蛇床子、苦参提取物处理茄子苗后表现出一定的抗病效果,其中蛇床子处理的植株发病率最低。在土壤中添加蛇床子和苦参粉末,经腐解后,苦参处理的茄子植株株高、茎粗均高于对照处理,且二者处理后植株干物质含量高于对照。处理后茄子根际微生物中放线菌数量增加,真菌的数量变化差异不明显,细菌的数量相对减少,在初花期微生物的总量均高于初果期和定植期。

基于网络药理学探讨蛇床子-补骨脂治疗乳腺癌骨转移的作用机制

目的基于网络药理学探讨蛇床子-补骨脂治疗乳腺癌骨转移的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中药分子机制的生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)检索药物的化学成分,借助Swiss Target Prediction数据库获取药物成分对应的相关靶点;在GeneCards、在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库中检索乳腺癌骨转移的相关靶点;利用Venny 2.1在线软件获取药物与疾病的共同靶点;由Cytoscape 3.8.2绘制药物-成分-靶点-疾病网络;STRING数据库构建蛋白相互作用网络;借助DAVID数据库进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果蛇床子-补骨脂中40个有效成分通过调控99个靶点和147条通路对乳腺癌骨转移产生作用。香叶木素、(E)-2,3-双(2-酮-7-甲氧基-甲氧羰基-8-基)丙烯醛、异补骨脂二氢黄酮、cniforin B、补骨脂甲素、O-乙酰异蛇床素、O-乙酰二氢欧山芹酯、补骨脂二氢黄酮甲醚、美花椒内酯、邻-异戊酰基二氢山芹醇、欧芹素、蛇床子素等成分可以通过表皮生长因子受体(EGFR)、RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt1)、类固醇受体辅助活化因子(SRC)等关键靶点介导癌症途径、内分泌抵抗、磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)、癌症中的蛋白聚糖、癌症中的微小RNA、癌症中的中心碳代谢、催乳素、细胞衰老、细胞凋亡、糖尿病并发症中的晚期糖基化终产物-晚期糖基化终产物受体(AGE-RAGE)、Ras、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路来治疗乳腺癌骨转移。结论蛇床子-补骨脂可以通过多成分、多靶点、多途径参与乳腺癌骨转移的治疗,为其临床应用及治疗乳腺癌骨转移的机制深入研究提供了理论依据。

蛇床子素通过调控miR⁃26a表达对人牙周膜干细胞生物学特性的影响

目的探究蛇床子素通过调控miR-26a表达对人牙周膜干细胞(PDLSCs)生物学特性的影响及其相关机制。方法体外培养PDLSCs细胞,以不同浓度蛇床子素(0、1×10^(-4)、1×10^(-5)、1×10^(-6)、1×10^(-7)mol/L)进行干预,筛选适宜浓度;另将细胞分为蛇床子素(1×10^(-5)mol/L)+anti-miR-NC组、蛇床子素(1×10^(-5)mol/L)+anti-miR-26a组。采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞活力和增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-26a表达,蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP2)、基质金属蛋白酶(MMP9)蛋白表达。结果与对照组比较,1×10^(-5)mol/L蛇床子素组细胞OD值、迁移数、miR-26a表达和Ki-67、PCNA蛋白表达升高(P<0.05),MMP2、MMP9蛋白表达降低(P<0.05)。与蛇床子素+anti-miR-NC组比较,蛇床子素+anti-miR-26a组细胞OD值、迁移数、miR-26a表达和Ki-67、PCNA蛋白表达降低(P<0.05),MMP2、MMP9蛋白表达升高(P<0.05)。结论蛇床子素可能通过上调miR-26a表达促进PDLSCs细胞的增殖和迁移。

新型二硫醚蛇床子素衍生物的合成及抗增殖活性

为寻找高效低毒的抗肿瘤先导化合物,依据药物分子设计中的拼合原理,设计合成系列含二硫醚单元的蛇床子素衍生物,利用核磁共振氢谱和碳谱对其结构及性质进行表征和分析。采用MTT法对目标化合物进行体外抗肿瘤活性测试,结果显示目标化合物对各肿瘤细胞均具有一定的抑制活性。其中,对MCF-7细胞最为敏感,化合物的IC50值在10.8~17.1μmol·L^(-1)之间,其中5a的IC_(50)为10.8μmol·L^(-1),强于氟脲嘧啶(20.8μmol·L^(-1))和顺铂(13.9μmol·L^(-1))。初步构效关系表明,目标化合物对各肿瘤细胞增殖的抑制活性随着R直链烷烃上碳原子的增多而逐渐降低,当R为甲基时,目标化合物的抗增殖活性显著提高。

蛇床子素对口腔癌KB细胞周期进程及凋亡的影响

目的研究蛇床子素对口腔癌KB细胞周期进程、凋亡的影响。方法CCK-8法检测KB细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期进程及凋亡率,RT-qPCR法检测细胞c-myc、cyclin A、cyclin D1 mRNA表达,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,ELISA法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性,Western blot法检测细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果与对照组比较,40、80、160μg/mL蛇床子素作用24、48、72 h后,KB细胞增殖抑制率均升高(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,40、80、160μg/mL蛇床子素组作用48 h后,G_(0)/G_(1)细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3、caspase-8、caspase-9活性均升高(P<0.05,P<0.01),细胞核染色质浓缩现象明显,而c-myc、cyclin A、cyclin D1 mRNA表达和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论蛇床子素可以抑制口腔癌KB细胞的增殖,该作用与抑制JAK2/STAT3信号通路活化,促进细胞周期进程阻滞及凋亡有关。

蛇床子素调控LncRNA SNHG5对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 探讨蛇床子素对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、炎症反应的影响及其对长链非编码RNA(LncRNA)SNHG5的调控作用。方法 采用高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,用不同浓度的蛇床子素处理HK-2细胞;pcDNA、pcDNA-SNHG5转染HK-2细胞后加入30 mmol/L葡萄糖处理细胞;si-NC、si-SNHG5分别转染HK-2细胞后加入100 nmol/L蛇床子素与30 mmol/L葡萄糖的处理细胞;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG5的表达量;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞活力、凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的水平。结果 蛇床子素处理高糖诱导的HK-2细胞后可明显提高SNHG5的表达水平,明显增强细胞活力,而明显降低凋亡率、TNF-α、IL-6的水平(P<0.05);高糖诱导的HK-2细胞中转染pcDNA-SNHG5后细胞活力明显升高,而凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05);转染si-SNHG5与蛇床子素联合处理高糖诱导的HK-2细胞后细胞活力明显降低,而凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显升高(P<0.05)。结论 蛇床子素可通过促进SNHG5的表达增强细胞增殖能力而抑制细胞凋亡及炎症反应从而减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。