蛇类药材分子遗传标记鉴别的初步研究

蛇类药材分子遗传标记鉴别的初步研究王义权周开亚（南京师范大学生物系，南京２１００９７）蛇类药材的鉴别，目前主要是根据其外部形态特征［１，２］和骨骼、鳞片的形态特征［３～５］。随机扩增多态ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈ...

蛇类药材的本草考证

本草考证认为古代本草所载乌蛇的原动物为游蛇科的乌梢蛇(Zaocys dhumnades),白花蛇的原动物为(?)科的尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus),二者均始载于《雷公炮炙论》.金钱白花蛇的原动物为眼镜蛇科的银环蛇(Bungarus multicinctus),在古代本草未见收载.

蛇类药材的药源调查

对1990年版《中国药典》收载的3种蛇类药材的药源调查表明，乌梢蛇的主要产区为江苏、浙江、安徽、江西、湖南、湖北和四川等省。蕲蛇主产区为浙江、江西、湖南、福建等省。金钱白花蛇主产区为广东、湖南、江西等省。目前蛇类药材直接或间接来自野生蛇类，在人工养殖条件下尚未实现大规模的人工繁殖。

14种蛇类药材的微量元素分析

用电感耦合等离子体发射光谱法检测了１４种蛇类药材的２４种微量元素。结果表明，蛇类药材含有丰富的Ｚｎ、Ｆｅ、Ｍｎ和Ｃｕ等人体必需的微量元素，而有害元素含量极微或无。

蛇类药材的性状鉴别

鉴于目前流通领域中蛇类药材的品种混乱情况比较严重,缺少简便而有效的鉴别手段,本文对收集自全国10个省区的263件蛇类药材及其伪、混品标本共14种进行了生药性状描述,归纳了《中国药典》(1995年版)所载三种正品蛇类药材的鉴别要点,并编制了蛇类药材及其常见伪、混品的性状鉴定检索表。

蛇类药材的氨基酸分析

用PICO—TAG氨基酸分析法检测了蛇类药材14种样品的17种氨基酸含量,结果表明,蛇类药材的总氨基酸含量平均达62.45％,其中必需、半必需氨基酸占47.38％,提示蛇类具有较高的营养价值。结果还表明,仅用氨基酸分析的方法不能鉴别蛇类药材的品种。

10种去皮蛇类药材的头骨鉴别法

本文报道了10种蛇类药材的头骨鉴别特征,为蛇类药材鉴别提供了一些新的依据。

常用蛇类药材鉴别研究进展

蛇是人类宝贵的野生动物资源,也是我国重要的蛇类药材来源。它具有祛风、通络、定惊止痉等功效,在风湿痹证方面具有良好的治疗效果。近年来,在经济利益驱使下,加上我国蛇种类繁多,现有蛇类多达241种,且各自形态特征差异不明显,使得准确鉴定药材困难,容易导致市场用药品种混乱。文章就近10年来用于常用蛇类药材(主要以《中国药典》收载品种乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇为例)及其混伪品的鉴别方法进行了整理研究,综述了各类鉴别方法在蛇类药材中的研究进展,包括传统的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别及近年来发展的微性状鉴别、色谱质谱技术和一些现代的分子鉴别方法如DNA条形码技术,并阐述了各种鉴别方法的适用对象及其优缺点,以期为蛇类药材或者动物类药材的鉴别研究提供思路和参考。发现目前药用蛇在现场快检、中成药的鉴别和优劣鉴别方面仍然面临着一些困难,提示对药用蛇品质进行客观评价时,还需将传统与现代鉴别方法相结合、真伪与优劣鉴别技术相联系。

快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材（乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇）真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础，采用碱裂解法提取基因组总DNA，加人特异性PCR引物，采用两步法进行PCR扩增，从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化，并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察，分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBRGreenI染料，正品显示出明亮绿色荧光，而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30—45min完成，为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。

40种蛇类动物骨骼的鉴别

报道了40种蛇类动物(主要是药用蛇)的骨骼鉴别检索表,可供去皮蛇类药材鉴别时应用。

中药乌梢蛇的鉴定方法

本文通过调查观察浙江省收购的中药乌梢蛇,发现常见混淆品有八种。文中分别作了原动物分类鉴定;列出了包括乌梢蛇在内的九种蛇的原动物及药材检索表;讨论了乌梢蛇的科学鉴定方法;并附图及蛇类磷被常用术语。

养蛇业将持续火爆

目前,我国国内已经开发的蛇类产品达700多种,产品畅销世界各地,活蛇出口再创历史最高纪录,达60余万吨。各种蛇类药材市场上价格一涨再涨,五步蛇于国内各药市均已告断市。蛇胆国内供应已显不足,无力供应国际市场。今年蛇店供应的三蛇胆每副售价300—540港元,五步蛇胆售价430港元,三蛇肉每副售价390港元。酒店方面表示蛇胆、蛇肉价格比去年同期上涨45％左右,但并不影响生意,相反却吸引了更多的食客。

金钱白花蛇江西产区见闻

金钱白花蛇又名童子蛇、七寸蛇，是常用的蛇类药材之一。在市场上深受消费者的青睐，销量不断上升。 进入8月下旬，金钱白花蛇在江西红土地上陆续产新，从风景如画的美玉山，到湘鄂赣交界的萍乡，从庐山脚下到信丰大地，今年金钱白花蛇产量均减产30％以上，有的地区超过40％，由于货少客多．大货不易组织。在产区赣州周边地区方圆300公里之内，一个收购点一天难收5000条新贷。在集镇收购点里．收购经理一天打十多个电话，才仅收购到1000-2000条。产区大货不好收，要货的人越来越多，收购价由产新前期的8．3—8．5元升为后期的9．3—9．5元．今秋金钱白花蛇为何走俏价格攀升呢？

养蛇业将火爆全国

联合网北京讯据有关蛇类专家分析预测,近年蛇类养殖业将非常火爆,呈现前所未有的新局面。统计数字表明:自去年以来全国共涌现投资百万元以上的蛇类养殖开发企业2万余家,最大的“飞龙蛇世界”投资9亿元之多。

使用碱裂解法快速提取药材DNA方法的研究

目的:建立药材DNA快速提取方法。方法:使用碱裂解缓冲液提取药材DNA,考察提取液配方组成和中和剂种类对药材DNA纯度、浓度的影响。利用优化提取液提取了144个中药材DNA,动物药使用COⅠ、植物药使用psbA-trnH通用引物进行PCR扩增。结果:0.5 mol.L-1氢氧化钠、1%PVP和1%Triton×100具有最佳的DNA提取效果。对144个中药材进行PCR扩增,利用琼脂糖凝胶电泳可检测到123个中药材DNA的PCR产物。碱裂解法可用于快速提取蛇类药材DNA,并成功用于乌梢蛇、金钱白花蛇的分子鉴定。结论:优化的碱裂解法可用于提取中药材基因组DNA,其提取时间可控制在10 min左右,且避免了酚、三氯甲烷等对人体有毒试剂的使用,对药材快速分子鉴定体系的建立将发挥重要作用。