蛇黄乳膏防治湿疹作用机理研究

目的:在确定蛇黄乳膏药理作用的基础上,进一步探索其作用机理,为其临床应用提供理论依据及实验依据。方法:选用40只雄性小鼠,对照组、模型组、蛇黄乳膏组和艾洛松组各10只,2 cm×2 cm范围腹部脱毛,正常组不致敏和激发,其余各组腹部脱毛区域行1%2,4-二硝基氟苯(DNFB)涂抹致敏,次日行1次加强致敏。以后每隔6 d行BDNF均匀涂抹各只小鼠右耳部激发,共激发3次。期间在其脱毛处,正常组和模型组乳膏基质涂抹,其余各组于脱毛处行对应乳膏1 mg·g-1均匀涂抹。采用HE染色后在显微镜下观察皮肤组织病理变化。采用ELISA检测血清IFN-γ、IL-4含量。免疫组化及Real-Time qPCR法分别检测小鼠皮损区域皮肤组织FLG、Caspase-14蛋白及基因表达。结果:与正常组相比,模型组表皮肥厚,角化过度,真皮层伴炎细胞浸润,存在慢性湿疹病理表现,蛇黄乳膏组和艾洛松组湿疹样病理表现得到改善。与正常组相比,模型组小鼠血清IFN-γ含量较高(P<0.05),IL-4含量较低(P<0.05);与模型组相比,蛇黄乳膏组和艾洛松组IFN-γ含量均降低(P<0.05),IL-4含量均升高(P<0.05)。与正常组相比,模型组小鼠皮损组织FLG、Caspase-14蛋白和mRNA表达量均较低(P<0.05);与模型组相比,蛇黄乳膏组和艾洛松组表现相似,皮损组织FLG、Caspase-14蛋白和mRNA表达量均上调(P<0.05)。结论:蛇黄乳膏可能通过调节IFN-γ、IL-4从而改善皮肤屏障FLG、Caspase-14表达发挥抗湿疹功效。

蛇黄乳膏止痒功效相关机制

目的:探讨蛇黄乳膏防治湿疹止痒作用的相关机制。方法:取小鼠随机分组,即对照组、模型组、艾洛松组、蛇黄乳膏各浓度组,采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发性变态反应;用二甲苯致小鼠耳廓肿胀计算出肿胀抑制率;用角叉菜胶致小鼠足肿胀观察足肿胀改善情况;复制冰醋酸致小鼠毛细血管通透性增加模型,以上实验均于皮损约4cm2处外用给药1 mg.g-1。取SD大鼠60只,随机分为6组,对照组、模型组、氯雷他定组、蛇黄乳膏各浓度组,给药5 d,用0.1%磷酸组胺复制大鼠皮肤通透性增高模型;取豚鼠65只,分5组,外用皮损3 cm2给药5 d,用磷酸组胺致豚鼠瘙痒统计致痒浓度值。通过以上实验来探讨蛇黄乳膏止痒作用的相关机制。结果:蛇黄乳膏可显著抑制DNFB所诱导迟发性超敏反应,但对胸腺指数以及脾脏指数影响不明显;蛇黄乳膏可直接对抗组织胺所诱导的瘙痒反应(P<0.01),并可降低磷酸组胺所致皮肤通透性增加(P<0.01);对二甲苯直接刺激血管扩张所致的炎症、冰醋酸通过刺激炎症介质生成等所致的炎症反应有明显抑制作用(P<0.01),但对有多种致炎因子参与的角叉菜胶所致的炎症反应作用微弱。结论:蛇黄乳膏的止痒作用与调节机体免疫功能、直接对抗组织胺、减少炎症反应等作用有关。

基于Th17/Treg漂移探讨蛇黄乳膏在湿疹皮肤屏障中的干预机制

湿疹被WHO列入21世纪重点防治疾病。研究表明,Th17/Treg失衡是湿疹发生发展的重要病理机制。湿疹存在皮肤屏障功能障碍,阻断皮肤屏障受损是临床治疗湿疹的前提和保障。其中角质形成细胞是皮肤屏障的关键组成,其与Th17/Treg稳态失衡是湿疹皮肤屏障受损陷入恶性循环的关键病理机制。课题组前期实验表明,蛇黄乳膏有一定的免疫调节、抗炎止痒等作用,对皮损组织有上调FLG、Caspase-14表达改善皮肤屏障功能的影响。综上推测,蛇黄乳膏可能通过调节Th17/Treg平衡影响角质形成细胞进而发挥改善湿疹皮肤屏障功能的作用。