挤压膨化协同酶解工艺制备蛋壳膜多肽及其抗氧化活性和组成分析

本文以蛋壳膜为研究对象,采用挤压膨化协同酶解工艺制备壳膜多肽。以总氮回收率、D-葡萄糖醛酸提取量及抗氧化性为指标,确定最佳工艺条件为:挤压膨化温度140℃,螺杆转速100 r/min,水分含量20%,酶解时间6 h,加酶量12000 U/g,温度55℃。在该条件下总氮回收率达60.8%,D-葡萄糖醛酸提取量达12.4 mg/g,壳膜多肽的ABTS自由基清除率为29.46%(0.1 mg/mL),OH自由基清除率为26.58%(5 mg/mL),Fe^(2+)螯合能力为50.25%(0.4 mg/mL),细胞抗氧化活性达65%(10μg/mL)。相对分子质量分布结果表明壳膜多肽中主要成分为低聚肽(252~2435 Da),占81.8%。氨基酸组成分析结果表明壳膜肽中Asp和Glu含量较高,与抗氧化活性有关的氨基酸含量为44.70 g/100 g蛋白。因此,蛋壳膜多肽有潜力作为天然抗氧化剂应用于食品、保健品或化妆品领域。

鸡蛋壳膜多肽酶解工艺及抗氧化活性研究

试验以鸡蛋壳膜为原料,通过酶解法制备小分子肽,并对其生物活性进行研究。以水解度为评价指标,通过单因素试验确定蛋白酶种类、酶解时间、料液比以及酶添加量等因素对壳膜多肽水解度的影响,并通过响应面设计(Box-Behnken design,BBD)对酶解条件进行三因素三水平优化;通过高效凝胶过滤色谱测定酶解后壳膜多肽分子量的分布情况,并测定壳膜多肽对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH、O_(2)^(-)·的清除能力。结果表明,最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶(AP-200a),酶添加量2.4%,料液比1∶9.5(g/mL),酶解时间5 h;在此条件下,壳膜多肽水解度为27.15%,水解后相对分子质量小于1000 Da的小分子肽所占比例为90.9%;且壳膜多肽对DPPH·、ABTS^(+)·的清除率分别为(93.03±0.51)%、(94.53±0.92)%,与V_(C)的效果相当;但对·OH和O_(2)^(-)·的清除率分别为(43.33±1.10)%和(53.40±0.70)%。因此,通过该法酶解得到的壳膜多肽中小分子肽占比较高,易被人体消化吸收,且具有一定抗氧化活性。