蛋氨酸合酶、蛋氨酸合酶还原酶基因多态性与类风湿关节炎患者甲氨蝶呤疗效相关性的研究

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者蛋氨酸合酶（MTR）A2756G、蛋氨酸合酶还原酶（MTRR）A66G基因多态性与甲氨蝶呤（MTX）治疗的疗效和不良反应相关性。方法采用实时荧光定量PCR方法检测107例单用MTX的RA患者的MTR A2756G及MTRR A66G基因多态性,并与其治疗疗效和不良反应结合分析。结果MTR A2756G及MTRR A66G的单基因多态性与RA患者服用MTX的疗效及不良反应无相关性（P〉0.05）。两基因联合作用分析显示,同时是MTR AG型和MTRR AG/GG型者较同时是MTRAA型和MTRR AA型的RA患者对MTX治疗效果差（OR=0.19,95%可信区间为0.04~0.88）,差异有统计学意义（P=0.03）,没有发现两者联合作用与其不良反应有相关性（P〉0.05）。结论MTR和MTRR基因多态性可能对于RA患者服用MTX的疗效存在预示作用。

同型半胱氨酸和蛋氨酸合成酶还原酶A66G基因多态性与Alzheimer病的关系

目的探讨同型半胱氨酸(H cy)和蛋氨酸合成酶还原酶(M SR)A66G基因多态性与Alzheim er病的关系。方法运用多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)和荧光偏振法(FPIA)检测66例Alzheim er病及143例正常人M SR A66G基因多态性和血浆总H cy水平。结果Alzheim er病组M SR A66G基因型频率(%)分别为39.39、59.09和1.52,对照组分别为37.76、59.44和2.80,M SR A66G各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性(P>005)。Alzheim er病病例组与对照组血浆H cy分别为(14.72±6.2)μm ol/L和(10.9±2.4)μm ol/L,两者差异有显著差异(P<0.05)。Alzheim er病患者血浆总H cy水平显著高于正常组。结论M SRA66G多态性与Alzheim er病无明显相关,高同型半胱氨酸血症与Alzheim er病发生有一定关系。

蛋氨酸合成酶还原酶研究新进展

蛋氨酸合成酶还原酶是蛋氨酸合成酶所必需的黄素蛋白。该基因大小约为 34kb ,包含 1 5个外显子。蛋氨酸合成酶还原酶催化甲基钴胺再生 ,是蛋氨酸合成酶的辅助因子 ,对于维持同型半胱氨酸在无毒性水平有重要作用 。

蛋氨酸硫氧化物还原酶研究进展

蛋氨酸硫氧化物还原酶(methionine sulfoxide reductases,Msr)是各种生物体内普遍存在的重要酶类,可将蛋白质中或游离的被氧化的蛋氨酸还原为蛋氨酸,起抗氧化和蛋白修复作用,并可清除体内的活性氧,同时还具有蛋白功能调节的作用。Msr目前可分为MsrA和MsrB两型。本文对Msr酶类基本特点和生物学作用进行了综述。

蛋氨酸合成酶还原酶基因A66G多态性与Down综合征发生的相关研究

目的:研究蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因A66G多态性与Down综合征的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对32例DS患儿母亲及70例未生育DS患儿女性MTRR的A66G进行基因分析。比较上述各组基因型和等位基因频率分布有无差异。结果:MTRR基因A66G突变型等位基因G频率在实验组和对照组中有显著性差异,GG基因型频率分布差异有显著性(P<0·05)。AG基因型比AA基因型生育DS患儿风险高1·98倍,GG基因型比AA基因型生育DS患儿风险高5·2倍。结论:MTRR A66G基因多态性与Down综合征发生相关,AG、GG基因型增加了Down综合征的发生风险。

蛋氨酸合成酶还原酶基因多态性与先天神经管缺陷的关系

目的研究同型半胱氨酸代谢相关酶中蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因的多态性与先天神经管缺陷发病的相关性。方法采用病例对照研究的方法,以82名先天神经管缺陷的胎儿及新生患儿(疾病组)与180名无先天神经管缺陷的胎儿及新生儿(对照组)的血白细胞为样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测两组的MTRR基因第66位点的多态性,比较两组的基因型和等位基因的分布频率,将疾病组按先天神经管缺陷分布分为单一畸形组和多畸形组,分别为28、54名,比较两组的基因型和等位基因的分布频率。结果 MTRR的66位点AA、AG和GG基因型在疾病组中分别为26.83%、43.90%、29.27%,在对照组中分别为43.89%、43.89%、12.22%。两组的分布频率差异有显著性。而此基因位点AA、AG和GG基因型在单一畸形组中分别为25.00%、42.86%、32.14%,在多畸形组中分别为25.93%、40.74%、33.33%,两组的分布频率无显著差异性。结论 (1)MTRR基因第66位点的多态性与先天神经管缺陷的发病具有一定程度的相关性;(2)MTRR基因第66位点中的A/A可能为先天神经管缺陷的保护基因;(3)此位点的变异与先天神经管缺陷的分布频率无明显相关性。

蛋氨酸亚砜／蛋氨酸亚砜还原酶荧光检测研究进展

蛋白质蛋氨酸亚砜化是一种重要的氧化还原依赖的蛋白质翻译后修饰,不仅是氧化应激的重要标志物之一,也是一种蛋白质功能调控开关可影响活性氧信号转导,与一系列疾病尤其是神经退行性疾病的发生发展密切相关。在许多生物体中,蛋氨酸亚砜还原酶是目前已经发现的唯一能将蛋白质蛋氨酸亚砜还原为蛋氨酸的物质,可以修复氧化损伤蛋白,恢复蛋白质功能,调控细胞氧还平衡,对相关疾病的治疗具有非常重要的意义。本文重点介绍蛋氨酸亚砜和蛋氨酸亚砜还原酶的结构和催化机理,综述蛋氨酸亚砜和蛋氨酸亚砜还原酶荧光探针的部分研究进展,对该领域的研究前景进行展望。

MTRR基因A66G多态性与高同型半胱氨酸血症的相关性研究

采用多聚酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性技术,分析高同型半胱氨酸血症患者及健康者的蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因A66G多态性,比较两组基因型与等位基因频率分布。结果两组MTRR基因A66G突变型等位基因G频率、GG基因型频率分布有显著性差异(P均<0.01)。与AA基因型者比较,AG基因型、GG基因型者发生高半胱氨酸血症的风险分别高1.98、3.92倍。认为MTRR多态性与血浆半胱氨酸水平相关,G等位基因可能是高同型半胱氨酸血症的遗传易感标志。

同型半胱氨酸代谢相关酶基因多态性与先天神经管缺陷的关系

目的:研究同型半胱氨酸相关酶中亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因的多态性与先天神经管缺陷的关系。方法:采用病例对照研究的方法,以64名先天神经管缺陷的胎儿及新生患儿(观察组)与104名无先天神经管缺陷的胎儿及新生儿(对照组)的血白细胞为样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测两组的MTHFR基因第677位点及MTRR第66位点的多态性,比较两组各自的基因型和等位基因的分布频率。结果:MTHFR的677位点CC、CT和TT基因型在疾病组中分别为26.56%、45.31%、28.13%,在对照组中分别为43.27%、44.23%、12.50%。两组的分布频率差异有显著性。MTRR基因第66位点AA、AG和GG基因型在疾病组分别为15.63%、70.31%、14.06%,在对照组中分别为48.08%、43.27%、8.65%。两组的分布频率差异有显著性。结论:①MTHFR基因第677位点及MTRR第66位点的多态性与先天神经管缺陷的发病具有一定程度的相关性;②MTHFR基因第677位点中的C/C及MTRR第66位点中的A/A均为先天神经管缺陷的保护基因;③两基因变异在先天神经管缺陷的发病中可能有协同作用。

缺血性脑血管病患者同型半胱氨酸代谢酶MTRR基因A66G及cystatin C基因G73A多态性检测

目的:探讨同型半胱氨酸代谢酶蛋氨酸合成酶还原酶基因(MTRR)A66G及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)基因G73A多态性与缺血性脑血管病(ICVD)的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测187例ICVD患者和122例正常对照者MTRRA66G和cystatin C G73A基因多态性。结果:MTRRA66G3种基因型及等位基因频率在病例组和对照组中的分布差异均有统计学意义(χ2=7.008,P=0.030;χ2=6.045,P=0.014),其中GG型在病例组的分布频率35.3%高于对照组的23.0%(χ2=5.314,P=0.021);cystatinC3种基因型及等位基因频率在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(χ2=2.859,P=0.239;χ2=2.886,P=0.089)。结论:MTRRA66G基因多态性可能与ICVD相关;GG基因型可能是ICVD的易感基因型;cystatin C G73A基因多态性与ICVD发病无关。

同型半胱氨酸及其代谢关键酶MTRR基因多态性与颅内动脉瘤的关系

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)及其代谢关键酶蛋氨酸合成酶还原酶(methionine synthase reductase,MTRR)基因多态性与颅内动脉瘤的关系。方法:采用化学发光技术检测76例颅内动脉瘤患者(颅内动脉瘤组)和77例健康成人(对照组)的血浆Hcy水平,并利用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测其代谢关键酶MTRR基因多态性。结果:颅内动脉瘤患者血浆Hcy水平[(16.14±6.72)μmol/L]明显高于对照组[(11.20±3.20)μmol/L],两组间血浆甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平差异无显著性。两组MTRRA66G基因型分布比较,颅内动脉瘤组GG基因型及G等位基因频率均明显高于对照组,患颅内动脉瘤的风险是对照组的7.30和2.41倍。MTRR A66G不同基因型颅内动脉瘤患者比较,血浆TG、TC浓度差异无显著性,GG基因型血浆Hcy浓度较其他基因型高;对照组不同基因型间血浆Hcy、TG、TC水平差异均无显著性。结论:高Hcy血症与颅内动脉瘤病发生有一定关系;MTRR A66G的AA基因型可能是颅内动脉瘤的保护性基因,发生变异时患病风险增加。

同型半胱氨酸代谢关键酶基因多态性与单纯收缩期高血压关系的初步研究

目的:探讨亚甲基-四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因A66G、蛋氨酸合成酶(MS)基因A2756G 3种同型半胱氨酸代谢相关酶基因多态性与单纯收缩期高血压(ISH)患者发病的关系。方法:以220例单纯收缩期高血压患者作为试验组对象,选择同期就诊的无高血压患者130例作为对照组,检测其血中同型半胱氨酸水平,并应用分子生物学方法对MTHFR C677T、MTRR A66G、MS A2756G 3个基因位点进行多态性检测。结果:(1)ISH组患者血中同型半胱氨酸水平[(14.81±5.88)μmol/L]高于对照组[(12.71±4.32)μmol/L],有统计学意义(P<0.05);(2)ISH组患者MTHFR T/T及C/T基因型分布频率和T等位基因频率(分别为19.5%、60%、49.5%)均高于对照组(分别为15.4%、45.4%、38.1%)(P<0.05)。(3)MS基因A2756G的各型基因型分布频率及等位基因频率与对照组比较差异无明显统计学意义。(4)ISH组患者MTRR基因A/G及G/G基因型分布频率和G等位基因分布频率低于对照组,但无统计学意义。结论:同型半胱氨酸对ISH的影响可能一部分是通过其关键酶基因的突变造成的;MTHFR基因C677T位点的突变可能是ISH的遗传危险因子;而MTRR基因A66G、MS基因A2756的多态性改变与ISH的发生可能无明显关系。

土家族脑卒中患者MTHFR、MTRR67基因单核苷酸多态性及其与血清同型半胱氨酸水平的关系

目的探讨土家族亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677、1298位点及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因66位点单核苷酸多态性(SNP)及其与血清同型半胱氨酸水平的关系。方法选取土家族脑卒中住院患者92例作为卒中组,同期140例土家族健康体检人群作为对照组。采用PCR法检测两组MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点SNP及基因型,高效液相色谱法检测血浆同型半胱氨酸水平。比较MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点不同基因型脑卒中患者同型半胱氨酸水平,分析MTHFR、MTRR基因上述位点SNP与脑卒中的关系。结果两组MTHFR基因677位点CC、TT、CT基因型及C、T等位基因,1298位点CC、AA、AC基因型及C、A等位基因分布比较差异无统计学意义(P均>0.05);与对照组相比,卒中组MTRR基因66位GG基因型比率上升,AG基因型比率下降(χ~2分别为15.13、5.58,P均<0.05)。MTHFR基因677位点TT基因型同型半胱氨酸水平高于CC、CT型(P均<0.05)。MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点SNP与脑卒中发生无明显相关性(P均>0.05)。结论土家族脑卒中患者MTRR基因66位点GG基因型比率上升,AG基因型比率下降;MTHFR基因677位点TT基因型与脑卒中患者高同型半胱氨酸水平有关。

MTHFR MTRR基因多态性及血同型半胱氨酸水平与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性

目的探究5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因多态性及血同型半胱氨酸水平(Hcy)与动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)的相关性。方法选取2018年10月至2020年10月就诊于海安市人民医院的45例ACI患者作为观察组,另选取同期于该院进行健康体检并经颈动脉彩超检查证实无动脉粥样硬化的非ACI人群40例作为对照组,检测两组研究对象MTHFR、MTRR基因分型和Hcy水平。比较两组研究对象MTHFR和MTRR基因型分布情况,血Hcy水平;单因素和多因素logistic回归分析ACI发生的危险因素。结果观察组MTHFR rs1801133基因型、MTRR rs1801394基因型与对照组存在差异(P<0.05),而两组研究对象MTHFR rs1801131基因型差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,观察组血Hcy水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);多因素logistic分析结果显示,高脂血症、高血压、血Hcy水平>15μmol/L、MTRR 677C/T TT基因、MTRR 66A/G GG基因是ACI发生的独立危险因素(P<0.05)。结论高脂血症、高血压、高水平Hcy、MTRR 677C/T TT基因、MTRR 66A/G GG基因是ACI发生的独立危险因素,临床应采取针对性预防干预措施,以降低ACI的发生风险。

蛋氨酸亚砜还原酶的结构特征及与神经退行性疾病的关系

蛋氨酸易被氧化为蛋氨酸亚砜,使生物体中氧化还原平衡失调,诱发各种疾病.蛋氨酸亚砜还原酶(Msrs)能将蛋氨酸亚砜还原成蛋氨酸,恢复蛋白的结构与功能,对调控多种氧化应激相关疾病具有重要作用.本文结合本课题组的研究结果,介绍了Msrs的分类进化、结构特征、催化机理和基因工程表达;综述了Msrs与衰老、帕金森病和阿尔茨海默病的关系,以探讨有关Msrs研究的发展方向和应用前景.

中青年脑梗死患者蛋氨酸合成酶还原酶基因多态性研究

目的 探讨蛋氨酸合成酶还原酶（MTRR）基因多态性与中青年脑梗死的关系. 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术检测105例中青年脑梗死患者（郑州大学第一附属医院神经内科自2008年5月至2009年10月收治）和116例对照者MTRRA66G的基因型,应用高效液相色谱荧光法检测2组对象血浆同型半胱氨酸（Hey）水平. 结果 脑梗死组和对照组MTRRA 66G基因型及等位基因频率比较差异无统计学意义（P＞0.05）.将脑梗死组按是否合并高血压、糖尿病和冠心病进行分层分析,发现脑梗死无合并症组GG基因型及G等位基因频率明显高于对照组（36.4％ vs 23.3％,62.1％ vs 52.2％）,但差异无统计学意义（P＞0.05）；脑梗死合并疾病组基因型及等位基因频率与对照组相比差异亦无统计学意义（P＞0.05）.脑梗死合并疾病组、脑梗死无合并症组及对照组GG基因型血浆Hcy水平均明显高于从基因型,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 MTRR A66G基因多态性与中青年脑梗死发病无关,但MTRR A66G基因纯合子突变可引起血浆Hcy水平明显升高.

梅毒螺旋体蛋氨酸亚砜还原酶的原核表达、纯化及其抗氧化功能研究

目的原核表达、纯化梅毒螺旋体(Treponema pallidum)蛋氨酸亚砜还原酶(Methionine sulfoxide reductase,Msr)并测定其抗氧化功能。方法将TpMsr基因连接到表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-TpMsr,热激法将其转化大肠埃希菌BL21(DE3)得到重组菌BL/pET28a-TpMsr,IPTG诱导重组TpMsr蛋白表达。利用镍柱亲和层析纯化目的蛋白,采用比色法测定Tp Msr蛋白的酶活性。采用菌落计数法测定重组大肠埃希菌在H2O2胁迫下的存活率。结果成功构建重组质粒pET28a-TpMsr,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后高效表达分子质量单位(Mr)约34.8×103的TpMsr,经Ni 2+柱亲和层析纯化得到高纯度的重组TpMsr蛋白。该蛋白能将蛋氨酸亚枫还原为蛋氨酸,且能赋予大肠埃希菌抵抗氧化应激的能力。结论构建的重组质粒pET28a-TpMsr能表达TpMsr蛋白。该蛋白具有抗氧化功能,为研究梅毒螺旋体的抗氧化机制提供了实验依据。

梅毒螺旋体蛋氨酸亚枫还原酶基因克隆及生物信息学分析

[目的]克隆梅毒螺旋体(Treponema pallidum)蛋氨酸亚枫还原酶(methionine sulfoxide reductase,Msr)基因并对其进行生物分信息学分析。[方法]根据梅毒螺旋体Msr基因序列,设计特异性引物,PCR法扩增目的基因,将其连接到p MD19-T载体,进行DNA测序及生物信息学分析。[结果]从梅毒螺旋体中扩增得到的大小为873 bp的Msr基因,编码291个氨基酸。Msr蛋白含有Msr A和Msr B的保守区,为亲水性蛋白,无信号肽,定位在细菌细胞质。三维结构与牛Msr蛋白(PDB:1fvg.1)类似。Msr蛋白含有几个B表位。[结论]克隆获得了Tp Msr基因,并分析了其生物学特性。

蛋氨酸亚砜还原酶A在结肠癌组织中表达及其意义

目的探讨结肠癌细胞中蛋氨酸亚砜还原酶A（methioninesulfoxidereductaseA，MsrA）mRNA表达量及细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）水平，探讨不同组织学分级的结肠癌细胞MsrAmR—NA表达量。方法通过RT．PCR法检测结肠癌细胞以及不同组织学分级的结肠癌细胞MsrAmRNA表达量；通过2’，7’-二氯荧光素双醋酸盐法（DCFH．DA）检测其细胞内反应氧水平。结果结肠癌细胞内ROS荧光度为350．2±6．3；明显高于正常结肠细胞（134．3±15．6），二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结肠癌细胞MsrAmRNA表达量为1．27±0．32，明显低于正常结肠细胞（0．62±0．27），差异有统计学意义（P〈0．05）。组织学I级结肠癌细胞MsrAmRNA表达量为0．93±0．26，明显高于组织学Ⅱ级结肠癌细胞MsrA（0．35±0．29）及组织学Ⅲ级结肠癌细胞MsrAmRNA表达量（0．32±0．20），差异均有统计学意义（P〈0．05）。组织学Ⅱ级结肠癌细胞与组织学Ⅲ级结肠癌细胞MsrAmRNA表达量无显著性差异（P〉0．05）。结论MsrA可能通过调控细胞内反应氧水平参与结肠癌细胞分化。

蛋氨酸亚砜还原酶及其在白内障发生发展中的作用

蛋氨酸(Met)是生物体内很容易被氧化的氨基酸之一,氧化应激条件下,生成S型和R型蛋氨酸亚砜(MetO),晶状体蛋白中MetO的增加与晶状体老化和白内障形成相关。生物体内存在着两种不同的蛋氨酸亚砜还原酶(Msr),即MsrA和B,分别能特异性地作用于自由或结合在蛋白质中的S-MetO和R-MetO,将MetO修复为Met,从而避免了蛋白质结构和功能的改变。在哺乳动物中,MsrA以单基因形式存在,而MsrB有3种异构体,分别为MsrB1,MsrB2和MsrB3,其中MsrB1是一个硒蛋白,又被称为硒蛋白R(SelR)。本文介绍了Msrs的基因表达、分布和亚细胞定位,比较了MsrA和MsrBs蛋白结构和催化机制的异同,讨论了晶状体蛋白Met残基的氧化与白内障形成和发展的关系。现有的这些研究结果表明Msrs作为一类特异性的抗氧化还原酶,通过对MetO的修复,在抑制晶状体的损伤方面发挥重要作用。此外,MsrB1作为一个硒蛋白受机体硒水平的调节,因此,通过补硒保持晶状体适当的硒浓度以维持MsrB1的活性,对白内障的形成和发展可能具有一定的预防作用。