自身免疫性甲状腺炎血清蛋白质二硫化物异构酶A3抗体的表达

目的探讨自身免疫性甲状腺炎(AIT)患者血清蛋白质二硫化物异构酶A3抗体(PDIA3Ab)的表达,并对该抗体总IgG及各亚型与甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)及甲状腺功能(甲功)进行相关性分析。方法用ELISA法检测AIT与非AIT患者血清PDIA3Ab总IgG及各亚型滴度,电化学发光法检测TPOAb、TgAb及甲功。结果与非AIT患者相比,AIT患者血清PDIA3Ab总IgG、IgG1、IgG3滴度均显著增加(P <0.05),AIT甲功正常组与AIT甲减组血清PDIA3Ab总IgG及各亚型滴度无显著差异(P> 0.05),AIT甲减组血清PDIA3Ab IgG1亚型滴度与TgAb呈负相关(r=-0.679,P <0.05),排除TPOAb、TgAb对甲功的影响后,与促甲状腺激素(TSH)呈正相关(r=0.550,P <0.05)。AIT患者血清PDIA3Ab总IgG、IgG3亚型滴度与TPOAb、TgAb、甲功均无关(P> 0.05)。结论除甲状腺过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(Tg)之外,PDIA3可能是AIT的一种非经典自身抗原,发挥甲状腺腺外损伤作用。

蛋白质二硫键异构酶A3——疾病治疗的新靶点

蛋白质二硫键异构酶 A3（ protein disulfide isomerase A3， PDIA3），又称 ERp57或 ERp57／GRP58，是蛋白质二硫键异构酶（ protein disulfide isomerase，PDI）家族的一员，具有催化内质网中蛋白质二硫键形成、氧化还原及异构化的作用。 Bennett等［1］于1988年首次从不同物种中分离出PDIA3基因的互补DNA编码链，诸多研究显示其氨基酸序列与PDI有高度相似性，具有 PDI 活性，遂将其归为PDI家族。

蛋白质二硫键异构酶A3在消化系统肿瘤中的研究进展

目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致死率、致残率在逐年上升。蛋白质二硫异构酶A3(PDIA3)是PDI家族中重要的一员,是一种功能广泛的硫醇氧化还原酶,其在多种肿瘤中的表达含量升高,与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。尽管大量研究表明,PDIA3在许多肿瘤的发生和发展中起着至关重要的作用,但目前尚无系统的报道PIDA3在消化系统肿瘤中的作用。因此,该文综述了PDIA3在4种消化系统肿瘤中的不同表达情况及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段或临床预后中的作用,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点。这对提高肿瘤患者的生存率具有十分重要的意义。

PDIA3在腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜中的蛋白表达及其意义

背景:肠易激综合征(IBS)的发病机制尚未完全明了,内脏敏感性增高是其主要的病理生理基础之一。研究显示蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在内脏高敏感大鼠结肠黏膜组织中高表达,但其在腹泻型IBS(IBS-D)患者结肠黏膜中的蛋白表达及其意义尚不清楚。目的:探讨PDIA3在IBS-D患者结肠黏膜中的蛋白表达及其作用机制。方法:收集符合罗马Ⅲ诊断标准的15例IBS-D患者和15例健康对照者。采用蛋白质印迹法检测结肠黏膜PDIA3蛋白表达,ELISA法检测结肠黏膜孵育上清液类胰蛋白酶浓度。结果:与对照组相比,IBS-D患者结肠黏膜中PDIA3蛋白表达明显上调,类胰蛋白酶浓度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。IBS-D患者类胰蛋白酶浓度与PDIA3蛋白表达呈正相关(r=0.750,P=0.003)。结论:PDIA3可能通过促进类胰蛋白酶释放,导致内脏敏感性增高,从而在IBS-D的发病机制中起重要作用。

脂联素和蛋白质二硫键异构酶在糖尿病心肌病中的作用研究进展

糖尿病心肌病(DCM)与多种心血管疾病相关,如:猝死、心律失常、心绞痛、心源性休克及心力衰竭等,是糖尿病患者死亡的主要原因之一。因DCM的发病机制复杂,目前尚无明确特效的治疗方案。脂联素是主要由脂肪细胞、心肌细胞分泌的能调控糖脂代谢、保护心肌和血管的细胞因子,其水平降低可导致糖尿病心肌易损性增加,是DCM发病机制之一。蛋白质二硫键异构酶(PDI)是一种多功能的特殊蛋白,也是调节脂联素合成、分泌及多聚体形成的重要蛋白。本文就PDI通过脂联素对DCM的作用进展予以综述。

微小RNA-15a-5p靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的探讨微小RNA-15a-5p(miR-15a-5p)是否可通过靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白(PDIA6)而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法选取2018年2月至2019年3月江南大学附属医院接受治疗的前列腺癌病人50例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白印迹法(Western blotting)分别检测前列腺癌组织、癌旁组织中miR-15a-5p、PDIA6的表达量;体外培养人前列腺癌DU145细胞,将细胞分为miR-NC组、miR-15a-5p组、si-NC组、si-PDIA6组、miR-15a-5p+pcDNA组、miR15a-5p+pcDNA-PDIA6组;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证miR-15a-5p、PDIA6的靶向关系。结果与癌旁组织相比,前列腺癌组织中miR-15a-5p的表达水平降低[(1.00±0.17)比(0.68±0.11)],PDIA6 mRNA[(0.99±0.09)比(1.64±0.18)]和蛋白[(0.44±0.07)比(0.76±0.17)]表达水平升高;转染miR-15a-5p mimics或转染si-PDIA6可降低细胞存活率(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-15a-5p可靶向结合PDIA6;PDIA6过表达可降低miR-15a-5p过表达对DU145细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论过表达miR-15a-5p通过降低PDIA6的表达对列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力有抑制作用。

蛋白质二硫键异构酶在心血管疾病中作用机制的研究进展

蛋白质二硫键异构酶是一种主要存在于内质网中的巯基-二硫键氧化还原酶。已经证实其具有催化二硫键形成及重排、调节蛋白质的折叠等多种生物学功能,现发现该蛋白也可作为一个潜在的心血管疾病生物学标志物,在急性心肌梗死中可以减少梗死面积和凋亡心肌细胞数目;在糖尿病心肌病中,能降低心肌易损性;在高血压和血栓形成过程中也担任着一个重要的角色。因此,本文主要针对蛋白质二硫键异构酶在心血管疾病发生发展中的机制研究进展予以综述。

蛋白质二硫键异构酶参与血栓形成的研究进展

血栓形成可引起心、脑、肺、肾等重要脏器缺血,甚至危及生命。现代凝血理论已证实蛋白质二硫键异构酶在生理性、病理性凝血反应中发挥重要作用。蛋白质二硫键异构酶具有氧化还原、异构化及分子伴侣的作用,能够催化二硫键与巯基之间的互变反应,对参与血栓形成的多种蛋白具有调控作用。近年来关于蛋白质二硫键异构酶对血栓形成调节研究的不断深入,其抑制剂成为抗凝药物研发的新热点。现主要就其作用机制存在的争议展开综述。

类风湿关节炎血清葡萄糖-6-磷酸异构酶水平及其与MMP-3的关系

目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)水平,分析其与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-3的关系。方法:选择85例RA患者,采用ELISA法检测血清GPI水平,同时检测血清MMP-3和C反应蛋白(Creactiveprotein,CRP)水平,并分析GPI与MMP-3和CRP的相关性。结果:活动期RA患者血清GPI水平为(2.64±2.51)mg/L,高于非活动期RA患者的(1.63±1.71)mg/L和正常对照组的(0.08±0.05)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。RA患者血清GPI水平与MMP-3和CRP呈正相关(r=0.50,P<0.05;r=0.43,P<0.05)。结论:RA患者血清GPI水平升高,并与疾病活动有关;GPI可能通过上调MMP-3的表达参与RA的骨质破坏。

三碘甲腺原氨酸不能与蛋白质二硫键异构酶特异结合

蛋白质二硫键异构酶(PDI)是由两个相同亚基组成的蛋白质,分子量约107000,能够催化蛋白质天然二硫键的形成。Edman等在1985年已阐明了鼠PDI的一级结构,近二、三年,又相继报道了三种蛋白的一级结构,它们是脯氨酰-4-羟化酶的β亚基、三碘甲腺原氨酸(T_3)结合蛋白(T_3BP)和蛋白质糖基化部位结合蛋白(GSBP)。

ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究免疫原性细胞死亡相关基因——自噬相关基因5(ATG5)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在宫颈癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性、相关信号通路及药物敏感性。方法:收集自2016年1月至2023年12月间青岛大学附属医院60例宫颈癌癌组织标本作为实验组,26例因子宫肌瘤、子宫腺肌症切除的正常宫颈组织标本作为对照组,并收集相应的临床资料。采用免疫组化法检测宫颈癌组织和正常宫颈组织中ATG5、PDIA3蛋白的表达差异,分析其表达与各项临床病理参数之间的关系。基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)在线分析宫颈癌组织中ATG5、PDIA3的表达水平对患者预后的影响,使用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因集富集分析(GSEA)探究ATG5和PDIA3基因可能涉及的生物学功能及信号通路,用p RRophetic包分析宫颈癌患者癌组织中ATG5、PDIA3高低表达与患者对化疗药物的敏感性。结果:ATG5、PDIA3在宫颈癌组织中的表达率均显著高于正常宫颈组织(83.3%vs 11.5%,χ^(2)=39.538,P=0.001;75.0%vs 46.2%,χ^(2)=6.753,P=0.009),ATG5的表达水平在肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移方面的差异显著(均P<0.01);PDIA3的表达水平在肿瘤直径、分化程度、FIGO分期和淋巴结转移方面的差异显著(P<0.05或P<0.01)。ATG5和PDIA3的表达水平呈正相关(r=0.679,P<0.001)。GEPIA在线分析网站预后分析显示,ATG5和PDIA3高表达宫颈癌患者的预后差(均P<0.05)。ATG5和PDIA3主要富集的功能及信号通路包括细胞增殖与分化、抗原加工与提呈、P53结合、Wnt信号通路、MAPK信号通路及mTOR信号通路。结论:ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中呈高表达,两者高表达与患者不良预后有关,ATG5和PDIA3参与细胞增殖与分化、抗原加工提呈及多种信号通路,有望成为宫颈癌治疗的潜在靶点。

融合蛋白催化D-葡萄糖合成D-阿洛酮糖的研究

D-阿洛酮糖是一种新型功能性代糖,目前主要以价格较高的D-果糖为底物,通过D-阿洛酮糖3-差向异构酶转化获得。寻找低价原料替代D-果糖生产D-阿洛酮糖对其产业化具有重要意义。将葡萄糖异构酶与D-阿洛酮糖3-差向异构酶通过柔性或刚性连接肽,以不同顺序首尾相连,构建4种构型的融合蛋白,从中选择催化效果最好的融合蛋白构型并对此融合蛋白的催化条件进行优化,实现了以价格较低的D-葡萄糖为底物经催化合成D-阿洛酮糖。研究结果表明:融合蛋白AE3G和AS3G同时具备葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶活性,能够将D-葡萄糖转化为D-果糖和D-阿洛酮糖。采用刚性连接肽连接的AE3G活性优于使用柔性连接肽连接的AS3G。优化后的AE3G催化条件为65℃,Tris-HCl缓冲液为50 mmol/L,pH值为7.5,Co 2+浓度为0.5 mmol/L,Mn 2+浓度为0.5 mmol/L,湿细胞质量浓度为75 g/L。在此条件下,分别以100 g/L D-葡萄糖和体积分数为5%的F55果葡糖浆为底物,利用融合蛋白催化产生17.2 g/L和12.5 g/L D-阿洛酮糖,反应液中D-葡萄糖、D-果糖和D-阿洛酮糖的质量比为2.5∶2.3∶1.0。研究旨在证明融合蛋白催化D-葡萄糖转化成D-阿洛酮糖的可行性。研究结果表明,D-阿洛酮糖平衡浓度高于文献报道值,希望为低成本生产D-阿洛酮糖提供理论参考。

MMP-3、GPI和Anti-CCP在类风湿关节炎诊断中的应用

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者基质金属蛋白酶3(MMP-3)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)和抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)等标志物血清中的水平及对RA临床诊断的应用价值。方法选取2022年3月—2022年11月我院风湿免疫科收治的RA患者101例为观察组。另选择同期本院体检健康者96例为对照组。采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别检测MMP-3、GPI和anti-CCP,采用免疫比浊法检测类风湿因子(RF)、抗链球菌溶血素(ASO)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、补体C4,全自动血沉仪法检测血沉(ESR),电化学发光法检测25-羟维生素D 3[25(OH)D 3],比较两组血清中MMP-3、GPI和anti-CCP、RF、ASO、CRP、C3、C4、ESR以及25(OH)D 3水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析单项检测和联合检测诊断RA价值。结果观察组血清中MMP-3、GPI、anti-CCP、RF、CRP、C3、C4、ESR明显高于对照组,ASO、25(OH)D 3明显低于对照组(均P<0.05),ROC曲线结果显示MMP-3、GPI、anti-CCP联合检测时的曲线下面积最大为0.997,敏感度97.8%、特异度94.7%,且MMP-3、GPI、anti-CCP是RA的独立危险因素。结论联合检测RA患者血液中MMP-3、GPI和Anti-CCP时,具有较高的诊断效能,能够为RA的诊断提供一定的依据。

双向凝胶电泳和质谱技术在睾丸蛋白表达研究中的应用

目的 :探讨双向凝胶电泳和质谱技术在睾丸蛋白表达研究中的应用。 方法 :用双向凝胶电泳分离成年雄性ICR小鼠睾丸总蛋白 ;从胶上切下 2个蛋白点 ,经胶内原位酶解后 ,用质谱仪测得其肽质量指纹谱 ;再通过数据库检索鉴定蛋白质。 结果 :从胶上切下的 2个蛋白点数据库检索结果是小鼠血清白蛋白和蛋白质二硫化物异构酶。 结论 :用双向凝胶电泳分离睾丸蛋白样品取得了很高的分辨率 ,质谱技术鉴定蛋白快速方便 。

PDIA3在足月胎膜早破患者胎盘、胎膜组织中的表达及意义

目的观察足月胎膜早破(t PROM)患者胎盘、胎膜组织中蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择t PROM患者30例(观察组)、正常足月产妇30例(对照组),分别采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测两组胎膜、胎盘组织中的PDIA3蛋白和mRNA。结果观察组胎盘、胎膜组织中PDIA3蛋白阳性表达率分别为93.33%、86.67%,对照组分别为60.00%、50.00%,P均<0.05。观察组胎盘、胎膜组织中PDIA3 mRNA相对表达量分别为2.025±0.180、1.440±0.053,对照组分别为0.958±0.418、1.024±0.049,两组比较,P均<0.05。结论 t PROM患者胎盘、胎膜组织中PDIA3呈高表达,其可能参与了t PROM的发生、发展。

拓扑异构酶抑制剂通过ATM/ATR和NF-κB途径上调乳腺癌细胞MICA/B的表达

目的:分析常用化疗药物对免疫识别乳腺癌细胞重要的靶标主要组织相容性复合体Ⅰ类相关分子A和B(major histocompatibility complex classⅠ-related chain A and B,MICA/B)的影响,探讨其调节MICA/B表达的分子机制。方法:用荧光定量RT-PCR法检测化疗药物对乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA表达的影响,流式细胞术检测化疗药物对MICA/B表面蛋白表达的作用。加入咖啡因抑制毛细血管扩张性共济失调突变和Rad3相关激酶(ataxia telangiectasia mutated and Rad3-related kinase,ATM/ATR),加入吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pynolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB),观察其是否能够抑制化疗药物中拓扑异构酶抑制剂对乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA及蛋白的表达。凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测药物是否影响乳腺癌细胞NF-κB与MICA/B启动子区的结合。结果:三种拓扑异构酶抑制剂足叶乙甙、拓扑替康和阿霉素可使乳腺癌MCF-7细胞的MICA和MICB mRNA水平升高。足叶乙甙在浓度为5、20、100μmol/L时,与不加药处理组相比,MICA mRNA水平分别升高到(1.68±0.17)、(2.54±0.25)、(3.42±0.15)倍(P<0.05);MICB mRNA水平分别升高到(1.82±0.24)、(1.56±0.05)、(5.84±0.57)倍(P<0.05)。拓扑替康和阿霉素在特定浓度时也使MCF-7的MICA和MICB mRNA水平显著升高(P<0.05)。拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙和拓扑替康处理另一乳腺癌细胞系SK-BR-3后,MICB mRNA的表达也轻度升高(P<0.05)。足叶乙甙和拓扑替康还增加MCF-7细胞表面MICA/B蛋白的表达(P<0.05),且存活和凋亡细胞MICA/B蛋白的表达均增高。用不同浓度的咖啡因处理足叶乙甙损伤的乳腺癌细胞,MICA/B mRNA和蛋白表达均显著降低,当咖啡因浓度为1、5、10 mmol/L时,MICA mRNA相对表达水平由不用咖啡因处理组的(3.75±0.25)倍分别降为(0.89±0.05)、(0.81±0.02)、(0.48±0.04)倍(P<0.001),MICB mRNA由(6.85±0.35)倍降为(1.36±0.13)、(0.76±0.06)、(0.56±0.03)倍(P<0.05),MICA/B蛋白表达由(3.42±0.05)倍降为(1.32±0.03)、(1.21±0.06)、(1.14±0.03)倍(P<0.001),表明足叶乙甙对MICA/B的上调作用能够被ATM/ATR抑制剂所抑制。同样,加入不同浓度的NF-κB的强抑制剂PDTC(10、50、100μmol/L),MICA/B mRNA和蛋白的表达均明显受到抑制(P<0.05),提示NF-κB也参与这一过程。EMSA实验显示,MCF-7细胞用足叶乙甙处理后,NF-κB与MICA/B基因启动子区的结合活性增强。结论:拓扑异构酶抑制剂诱导并上调乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA及表面蛋白的表达,表明化疗药物有可能增强免疫系统对乳腺癌的识别和杀伤,ATM/ATR和NF-κB途径参与了这一过程。

类风湿关节炎患者中GPI、MMP-3和抗CCP抗体水平的研究

目的探讨葡萄糖6磷酸异构酶（GPI）、血清基质金属蛋白酶3（MMP-3）、抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体检测在类风湿关节炎（RA）诊断中的价值。方法采用ELISA法检测109例RA患者及50例健康对照者GPI、MMP-3和抗CCP抗体水平。结果RA组患者GPI、MMP-3、抗CCP抗体的水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。进一步分析表明，活动期RA患者GPI、MMP3水平明显高于静止期患者，差异有统计学意义（P〈0．01）；关节X线改变为Ⅲ～Ⅳ期的RA患者GP1、MMP3水平明显高于I～Ⅱ期患者，差异有统计学意义（P〈0．01）。抗CCP抗体水平在活动期与静止期及关节X线改变I～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期之间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。同时分析3种检测项目之间的相关性：GPI与MMP3水平呈正相关．抗CCP抗体与GPI、MMP3无明显相关性。结论GPI、MMP-3水平的变化与RA病情活动性及骨质破坏相关，对指导治疗和改善预后具有重要意义，而抗CCP抗体在RA的早期诊断方面更有价值。

TUBB3和TOP2A与晚期乳腺癌患者临床病理特征及与紫杉类联合蒽环类药物治疗疗效的关系

目的探讨3型β微管蛋白(3 beta tubulin,TUBB3)和拓扑异构酶2(topoisomerase 2,TOP2A)在晚期乳腺癌患者乳腺组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系,并分析TUBB3和TOP2A表达与患者接受紫杉类联合蒽环类药物治疗效果的关系。方法回顾性分析我院2015年收治的60例确诊的晚期乳腺癌患者,采用液相芯片法检测患者乳腺组织中TUBB3和TOP2A mRNA的表达,比较不同病理特征患者的TUBB3和TOP2A mRNA表达差异;两组患者均采用(多西他赛+吡柔比星+异环磷酰胺)/(紫杉醇+表柔比星+环磷酰胺)(PAC/PEC)进行化疗,4周后进行疗效评价,并分析临床效果与TUBB3和TOP2A mRNA表达的相关性。结果 TUBB3 mRNA表达在不同乳腺癌组织学分级患者间的差异具有统计学意义(P<0.05);TOP2A mRNA表达与患者的年龄、是否绝经、组织学分级、是否淋巴结转移、ER表达、PR表达、HER-2表达关系不显著(P>0.05);TUBB3 mRNA低表达患者的缓解率高于高表达患者(57.14%vs 14.71%,χ2=5.299,P<0.05);TUBB3 mRNA低表达、中表达患者的总有效率均高于高表达组(92.86%、83.33%vs 52.94%,χ2=10.533、4.190,P<0.05);TOP2A mRNA高表达患者的总有效率高于低表达组(93.55%vs 69.23%,χ2=3.967,P<0.05)。结论 TUBB3mRNA表达与乳腺癌组织学分级有关,TUBB3低表达、TOP2A高表达患者应用PAC/PEC的效果更好。

慢性HBV感染者GPI、MMP-1、MMP-3测定的临床意义

目的:检测葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-3血清标志物在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者中的表达水平,探讨其在慢性肝病及肝癌进展过程中的变化及意义。方法:应用酶联免疫吸附试验定量检测受检者血清中GPI、MMP-1、MMP-3的浓度,AU2700全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)及谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST),分析GPI、MMP-1、MMP-3与ALT、AST的相关性。其中CHB 31例,LC 40例、HCC 46例,健康体检者50例。结果:3组肝病患者中血清GPI、MMP-1、MMP-3表达水平均显著高于健康对照组(均P<0.05);在LC患者中,随着AST的增加MMP-3浓度增高,二者呈弱正相关(r=0.18,P<0.05)。AST>40 IU/L LC患者血清MMP-3浓度显著高于AST≤40 IU/L者(P<0.05)。GPI、MMP-1与ALT、AST均无相关性。结论:血清GPI、MMP-1、MMP-3可作为乙型肝炎病毒感染相关肝病肝损伤的诊断指标。

干扰或过表达PDIA3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨干扰或过表达蛋白质二硫键异构酶(PDI)A3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养星形胶质细胞,构建PDIA3干扰及过表达载体稳定株系,采用过氧化氢(H 2O 2)诱导建立星形胶质细胞损伤模型。实验将星形胶质细胞分为对照组(NC组)、H 2O 2组、H 2O 2+si-con组、H 2O 2+si-PDIA3组、H 2O 2+pcDNA组、H 2O 2+pcDNA-PDIA3组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PDIA3 mRNA表达;Western印迹检测PDIA3及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。收集各组星形胶质培养基上清液检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平。结果与NC组相比,H 2O 2组星形胶质细胞中PDIA3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);H 2O 2组细胞LDH释放量、TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率及p-p38蛋白表达均显著升高(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显升高(P<0.05),PDIA3过表达后明显降低(P<0.05);H 2O 2组细胞存活率显著降低(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显降低(P<0.05),PDIA3过表达后明显升高(P<0.05)。结论PDIA3过表达可改善H 2O 2诱导的星形胶质细胞氧化应激及炎症损伤,其可能通过抑制p38MAPK信号通路激活而发挥作用。