反转录聚合酶链反应法检测端粒酶催化蛋白亚单位mRNA

为研究端粒酶催化蛋白亚单位(caltalytic protein subunits of telomerase,hTERT)mRNA在肿瘤组织中的表达情况,建立一种恶性肿瘤诊断的新方法,通过提取肿瘤组织总RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法对76例各型肿瘤组织及5例恶性胞腹水进行了检测。结果表明,76例各型肿瘤组织中66例阳性,5例恶性胸腹水全部阳性,表明RT-PCR法检测hTERTmRNA是一种灵敏、简便的恶性肿瘤诊断的新方法。

APOBEC3G对新型布尼亚病毒复制能力的影响

目的研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化亚单位3G(APOBEC3G)对新型布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)复制及IL-6生成的影响。方法首先通过慢病毒感染方式构建稳定过表达APOBEC3G的A549细胞,再使用人源SFTSV感染APOBEC3G过表达A549细胞;RT-qPCR检测细胞内的APOBEC3G、SFTSV-非结构蛋白编码基因(non-structural protein,NS)、白介素-6(IL-6)的mRNA表达量;流式荧光法检测细胞培养液上清中IL-6蛋白水平。结果SFTSV感染A549细胞可诱导APOBEC3G、IL-6 mRNA分别显著上调约100、800倍(P均<0.001);过表达APOBEC3G的A549细胞感染SFTSV后,细胞内SFTSV的NS mRNA表达下调57%(P=0.001)、IL-6 mRNA表达上调约58%(P=0.001),培养液上清中IL-6蛋白水平升高[对照组为(11257.92±274.36)pg/mL,过表达APOBEC3G组为(15150.65±215.54)pg/mL,P<0.001]。结论SFTSV感染细胞后APOBEC3G表达水平升高,过表达APOBEC3G可抑制SFTSV复制,并可促进IL-6的生成。