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浅谈蛋白免疫印迹技术方法的改进 被引量:3
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作者 天丁 莫晓川 +1 位作者 曾佳 孟立科 《中国中医药咨讯》 2012年第1期146-146,共1页
目的:探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法。方法:以小鼠为研究对象,采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYPlAl的表达水平。结果:不仅缩短实验时间,而且获得的目标条带清晰,非特异性的本底显色浅。结论:改良的蛋白免疫印迹... 目的:探索蛋白免疫印迹技术关键步骤的改良方法。方法:以小鼠为研究对象,采用改良的蛋白免疫技术分析小鼠肝脏CYPlAl的表达水平。结果:不仅缩短实验时间,而且获得的目标条带清晰,非特异性的本底显色浅。结论:改良的蛋白免疫印迹技术一定程度上能够很好的分离目标蛋白,降低本底,获得比较满意的实验结果,有利于对蛋白质的进一步分析研究。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 改良方法 CYPlAl 小鼠肝脏 免疫技术 实验时间 非特异性 实验结果
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传统蛋白免疫印迹技术常见异常结果及影响因素探究
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作者 洪铸 夏倩 +2 位作者 聂昌 王龙 杜春艳 《基层医学论坛》 2023年第28期89-91,共3页
蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)是检测蛋白质经济、有效的方法,已广泛应用于分子相关的领域,但其影响因素多、操作复杂,常出现异常结果。本研究使用传统蛋白免疫印迹技术法检测(Sprague-Damley,SD)大鼠肝脏、脾脏组织某些蛋白... 蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)是检测蛋白质经济、有效的方法,已广泛应用于分子相关的领域,但其影响因素多、操作复杂,常出现异常结果。本研究使用传统蛋白免疫印迹技术法检测(Sprague-Damley,SD)大鼠肝脏、脾脏组织某些蛋白质的表达,分析探讨常见异常结果及处理方法,为实验室和其他实验者提供参考。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 抗体 SDS-PAGE
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蛋白质免疫印迹技术检测肺癌组织上皮钙粘蛋白的表达 被引量:8
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作者 段勇 黄韬 +3 位作者 袁育林 刘华 李娅 金克炜 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第1期52-56,共5页
目的探讨上皮钙粘蛋白(E-cad)与肺癌及其病理类型之间的相关性。方法应用蛋白质免疫印迹技术(W estern b lot)检测30例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中E-cad的表达,并对部分表达阴性的标本用免疫组化方法进行验证... 目的探讨上皮钙粘蛋白(E-cad)与肺癌及其病理类型之间的相关性。方法应用蛋白质免疫印迹技术(W estern b lot)检测30例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中E-cad的表达,并对部分表达阴性的标本用免疫组化方法进行验证。结果癌组织、癌旁组织、远癌组织E-cad的阳性率分别为36.7%、70.0%、96.7%。癌组织E-cad阳性率明显低于癌旁组织(P<0.017),也明显低于远癌组织(P<0.017);癌旁组织E-cad阳性率明显低于远癌组织(P<0.017)。在30例肺癌患者鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌组织中E-cad阳性率分别为33.3%、40.0%、33.3%;鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌旁组织中的阳性率分别66.7%、73.3%、66.7%;鳞癌、腺癌及腺鳞癌的远癌组织中的阳性率分别为91.7%、100.0%、100.0%。癌、癌旁和远癌组织中E-cad的表达与肺癌组织学类型无关(P>0.05)。结论E-cad蛋白表达减少或缺失与肺癌有相关性,与肺癌的组织类型无相关性。 展开更多
关键词 上皮钙粘蛋白 蛋白免疫印迹技术 肺癌
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蛋白质免疫印迹技术在本科实验教学中的应用 被引量:7
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作者 李欣 赵玉红 +3 位作者 石建党 赵立青 李小菊 张伟英 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2020年第2期195-198,253,共5页
蛋白质免疫印迹技术是生命科学研究领域的常用技术手段,尝试将其改造成适于本科教学实践的实验内容,即在基础性分子生物学实验的基础上开设"免疫印迹法检测目的基因在原核细胞中的表达"这一综合性实验。根据学生的理论和操作... 蛋白质免疫印迹技术是生命科学研究领域的常用技术手段,尝试将其改造成适于本科教学实践的实验内容,即在基础性分子生物学实验的基础上开设"免疫印迹法检测目的基因在原核细胞中的表达"这一综合性实验。根据学生的理论和操作水平以及本科实验教学特点,对实验内容和实验方法进行了优化,并采取研讨式分组教学模式,使学生能够深入、全面、系统地理解和掌握蛋白质免疫印迹技术,提高了实验教学质量,并有助于培养学生的科学思维、科学素养以及综合实践能力。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 分子生物学 实验教学
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蛋白质免疫印迹技术在水产品中的应用 被引量:3
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作者 杨明畅 马俪珍 +6 位作者 李来好 杨贤庆 陈胜军 魏涯 王悦齐 李春生 赵永强 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第20期7914-7919,共6页
蛋白质免疫印迹技术作为一门新兴的方法,在蛋白质组学研究中得到广泛应用。该技术可对待测样品中目的蛋白质进行定性和半定量分析,为探究水产品中蛋白质组成及变化规律带来了新的途径。本文在重点介绍蛋白质免疫印迹技术原理及特点的基... 蛋白质免疫印迹技术作为一门新兴的方法,在蛋白质组学研究中得到广泛应用。该技术可对待测样品中目的蛋白质进行定性和半定量分析,为探究水产品中蛋白质组成及变化规律带来了新的途径。本文在重点介绍蛋白质免疫印迹技术原理及特点的基础上,系统地总结了近年来该技术在水产品加工、贮藏、品质鉴别及质量安全方面的应用研究进展,对目的蛋白质选择的局限性、水产品研究尚未覆盖、蛋白质受环境改变等问题进行了探讨,就此展望了丰富数据库、多组学方法联合分析等发展前景,以期为蛋白质免疫印迹技术在水产品品质与质量安全相关研究和应用提供参考与借鉴。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹技术 水产品 蛋白质组学 质量与安全
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定量斑点印迹分析技术在高通量样品蛋白表达水平检测中的应用 被引量:2
6
作者 刘琳 门婷婷 +3 位作者 张文凤 张建棣 米佳 杨春华 《滨州医学院学报》 2020年第1期11-14,22,共5页
目的检测定量斑点印迹(QDB analysis)技术在高通量组织样品和细胞样品蛋白表达水平定量检测中的应用情况。方法采用QDB analysis技术检测87只小鼠的前列腺组织中tubulin的相对表达水平,以及8种人细胞系中tubulin的绝对表达水平(即蛋白... 目的检测定量斑点印迹(QDB analysis)技术在高通量组织样品和细胞样品蛋白表达水平定量检测中的应用情况。方法采用QDB analysis技术检测87只小鼠的前列腺组织中tubulin的相对表达水平,以及8种人细胞系中tubulin的绝对表达水平(即蛋白真正表达水平)。结果通过QDB analysis技术发现小鼠前列腺组织中tubulin蛋白的表达水平根据小鼠周龄不同而有所不同;8种人细胞系中tubulin蛋白的绝对表达水平在90~140 fmol/μg之间。结论QDB技术可适用于高通量组织样品和细胞样品中蛋白表达水平的相对定量和绝对定量检测。 展开更多
关键词 蛋白质表达 定量检测 定量斑点印迹技术 蛋白免疫印迹技术 TUBULIN
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核受体辅激活蛋白5在肝细胞癌患者中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 张华鹏 方红波 +3 位作者 曹胜利 阎冰 郭文治 张水军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第19期3129-3130,共2页
目的:探讨核受体辅激活蛋白5(NCOA5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)癌组织、癌旁组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:采用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测64例肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中NCOA5蛋白... 目的:探讨核受体辅激活蛋白5(NCOA5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)癌组织、癌旁组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:采用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测64例肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中NCOA5蛋白表达水平,并与临床病理资料进行统计学分析。结果:Western blot分析结果显示NCOA5蛋白在肝细胞癌组织的表达水平(0.27±0.10)明显低于癌旁组织(0.68±0.06)(P<0.05);NCOA5蛋白在肝细胞癌组织中的表达与肿瘤直径、门静脉癌栓、复发转移及分化程度等因素有关(P<0.05)。结论:肝细胞癌患者癌组织中NCOA5蛋白表达水平明显低于癌旁组织,提示NCOA5的低表达与肝癌的发生发展密切相关,且其可能在肝细胞癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 核受体辅激活蛋白5 蛋白免疫印迹技术
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链霉亲和素-自噬相关基因融合蛋白的原核表达及纯化 被引量:1
8
作者 张志平 刘家云 +3 位作者 刁艳君 马越云 苏明权 郝晓柯 《标记免疫分析与临床》 CAS 2014年第2期180-183,共4页
目的构建链霉亲和素(streptavidin,SA)和自噬相关基因(Beclin 1)重组质粒,并对融合蛋白SA-Beclin 1进行表达和纯化。方法利用基因重组技术将核心SA与Beclin 1序列连接,克隆入pQE80形成pQE80-SA-Beclin 1重组载体,IPTG诱导融合蛋白原核表... 目的构建链霉亲和素(streptavidin,SA)和自噬相关基因(Beclin 1)重组质粒,并对融合蛋白SA-Beclin 1进行表达和纯化。方法利用基因重组技术将核心SA与Beclin 1序列连接,克隆入pQE80形成pQE80-SA-Beclin 1重组载体,IPTG诱导融合蛋白原核表达,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,Western blot鉴定。结果 PCR成功扩增核心SA活性中心,酶切鉴定和测序均证实重组载体pQE80-SA-Beclin 1构建成功;IPTG诱导后SA-Beclin 1融合蛋白(含His标签)在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE分析表达的融合蛋白以包涵体为主,经镍亲和凝胶层析柱纯化得到融合蛋白,Western blot鉴定其相对分子量约为72000kD,与预期相符。结论本文成功构建了重组质粒并表达纯化了SA-Beclin 1融合蛋白,为进一步研究SA-Beclin 1的功能及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 自噬相关基因 链霉亲和素 融合蛋白 原核表达 前列腺癌 基因重组技术 蛋白免疫印迹技术 PCR
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针刺内关穴对失血性低血压大鼠心肌细胞PKA表达的影响 被引量:7
9
作者 张雪莲 郝长宏 +2 位作者 甄希成 郑利岩 李春日 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2009年第7期194-195,共2页
目的:用蛋白免疫印迹技术(Western blotting)分析失血性低血压大鼠心肌细胞蛋白激酶A(PKA)蛋白表达,探讨针刺内关穴调节血压的作用途径。方法:用摘眼球取血法,造失血性低血压大鼠模型,成模后电针大鼠双侧内关穴,观察针刺前后血压变化,... 目的:用蛋白免疫印迹技术(Western blotting)分析失血性低血压大鼠心肌细胞蛋白激酶A(PKA)蛋白表达,探讨针刺内关穴调节血压的作用途径。方法:用摘眼球取血法,造失血性低血压大鼠模型,成模后电针大鼠双侧内关穴,观察针刺前后血压变化,同时分析大鼠心肌细胞PKA的变化。结果:电针治疗后,血压和心肌细胞中PKA发生显著改变(P<0.05),结论:针刺内关穴能改善失血性低血压大鼠的血压,其作用机制与PKA有关。结果提示心肌细胞内的PKA在针刺调整血压的过程中起着一定的作用。 展开更多
关键词 内关 失血性低血压 PKA 蛋白免疫印迹技术
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CAPON及其相关分子在大鼠创伤性脑损伤后的表达变化 被引量:1
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作者 张冬梅 郭志琴 +2 位作者 夏小鹏 吴圆圆 成红兵 《交通医学》 2013年第2期110-114,共5页
目的:探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(CAPON)及其相关分子的表达变化及定位。方法:利用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹技术研究大鼠脑损伤后CAPON及其相关分子Daxras1、nNOS的mRNA及蛋白水平表达变化,利用... 目的:探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(CAPON)及其相关分子的表达变化及定位。方法:利用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹技术研究大鼠脑损伤后CAPON及其相关分子Daxras1、nNOS的mRNA及蛋白水平表达变化,利用免疫荧光双标技术检测脑损伤后CAPON分子的细胞定位情况。结果:大鼠TBI后1 d-3 d,CAPON分子mRNA和蛋白表达增加;Dexras1及nNOS的表达变化趋势与CAPON的相一致。在损伤区CAPON主要表达于NeuN阳性的神经元;在损伤周边皮质中,CAPON与星型胶质细胞的标记物GFAP有少量共定位;此外,CAPON在OX-42阳性的小胶质细胞中也有少量的表达。结论:创伤性脑损伤后,CAPON及其相关分子(Daxras1、nNOS)可被诱导表达,损伤神经细胞内的CAPON及其相关分子可能参与了TBI的病理进程。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤(TBI) 一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(CAPON) Daxras1 诱导型一氧化氮合酶(nNOS) 实时荧光定量PCR 蛋白免疫印迹技术 免疫荧光双标技术
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牦牛p38MAPK在雌性主要生殖器官中的表达 被引量:7
11
作者 韩小红 何翃闳 +7 位作者 王靖雷 张慧珠 马悦 马进彪 赵生贤 余四九 崔燕 樊江峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1604-1614,共11页
旨在研究p38MAPK在母牦牛主要生殖器官中的表达情况,了解其表达差异性,为牦牛的繁殖性能研究提供相关基础资料。本研究采集卵泡期、黄体期、妊娠期成年健康母牦牛(各2头)主要生殖器官样品,免疫组化技术检测p38MAPK蛋白的表达部位;qRT-PC... 旨在研究p38MAPK在母牦牛主要生殖器官中的表达情况,了解其表达差异性,为牦牛的繁殖性能研究提供相关基础资料。本研究采集卵泡期、黄体期、妊娠期成年健康母牦牛(各2头)主要生殖器官样品,免疫组化技术检测p38MAPK蛋白的表达部位;qRT-PCR和Western-blot技术对其基因和蛋白进行相对表达量测定。结果:1)免疫组化结果显示,p38MAPK蛋白在牦牛的卵巢、输卵管和子宫均呈阳性表达;2)qRT-PCR结果表明,p38MAPK基因在卵巢中的表达量卵泡期显著高于妊娠期(P<0.05);在输卵管中的表达量黄体期显著高于卵泡期和妊娠期(P<0.05);在子宫中的表达量妊娠期极显著高于卵泡期和黄体期(P<0.01);3)Western-blot结果显示,p38MAPK蛋白在卵巢中的表达量卵泡期极显著高于黄体期和妊娠期(P<0.01);在输卵管中的表达量黄体期极显著高于卵泡期和妊娠期(P<0.01);在子宫中的表达量妊娠期极显著高于卵泡期和黄体期(P<0.01)。结果表明,p38MAPK在母牦牛同一生殖器官的不同繁殖阶段其表达存在差异性,其可能参与了牦牛卵泡发育、黄体功能发挥以及胚胎着床和发育等一系列生殖过程,为牦牛的繁殖性能研究提供相关基础资料。 展开更多
关键词 牦牛 P38丝裂原活化蛋白激酶 免疫蛋白印迹技术 实时荧光定量
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血管抑素对血管内皮细胞中的VEGF表达的影响 被引量:1
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作者 刘子彬 刘海俊 +1 位作者 许丹丹 封亮旗 《中国美容医学》 CAS 2012年第7期1165-1167,共3页
目的:探讨不同浓度的血管抑素对血管内皮细胞中VEGF表达的影响。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为三组:对照组(空白组)、A组(16mg/L血管抑素组)、B组(32mg/L血管抑素组),通过MTT、RT-PCR、Western-Bolt等方法检测细胞内VEGF的表... 目的:探讨不同浓度的血管抑素对血管内皮细胞中VEGF表达的影响。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为三组:对照组(空白组)、A组(16mg/L血管抑素组)、B组(32mg/L血管抑素组),通过MTT、RT-PCR、Western-Bolt等方法检测细胞内VEGF的表达情况。结果:随着血管抑素作用时间的延长和浓度的递增对人脐静脉内皮细胞的抑制作用也逐渐增强,且与对照组相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:血管抑素通过抑制VEGF的表达以抑制人脐静脉内皮细胞增殖,从而抑制血管新生。 展开更多
关键词 血管抑素 血管内皮细胞 血管内皮生长因子 角膜新生血管 免疫蛋白印迹技术 时间浓度依赖
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蛋清源抗氧化肽对HEK293细胞氧化应激损伤的抑制作用及机制 被引量:13
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作者 张燕 陈志飞 +2 位作者 赵颂宁 张婷 刘静波 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期11-22,共12页
食源性抗氧化肽以其安全性高,抗氧化能力好,逐渐成为多肽研究领域的热点。本文以蛋清卵黏蛋白胃蛋白酶水解产物为原料,以蛋清源五肽作为研究对象,首先,采用基于不同机理的体外抗氧化活性化学测定方法,对8条蛋清源五肽的抗氧化活性进行... 食源性抗氧化肽以其安全性高,抗氧化能力好,逐渐成为多肽研究领域的热点。本文以蛋清卵黏蛋白胃蛋白酶水解产物为原料,以蛋清源五肽作为研究对象,首先,采用基于不同机理的体外抗氧化活性化学测定方法,对8条蛋清源五肽的抗氧化活性进行评价。DPPH自由基清除活性最强的为五肽CFDVF,浓度为1.0 mmol/L时,其自由基清除率为50.14%±2.1%;ABTS^+·自由基清除能力最强的为五肽VYQFL,浓度为100μmol/L时,TEAC值为(94.66±0.37)μmol/L TE/100μmol/L;ORAC活性最强的为五肽WNWAD,TEAC值为(2.53±0.18)μmol/L TE/μmol/L。接着,利用HEK293细胞氧化损伤模型评价8条五肽的抗氧化活性,其中五肽WNWAD(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp)的氧化应激抑制活性最强。同时,细胞毒性试验证明,五肽本身对细胞无毒副作用,也无促进增殖作用。最后,综合体外化学和细胞试验结果,筛选出WNWAD进行蛋清肽氧化应激抑制机制研究。首先采用试剂盒方法检测细胞内LDH活性和MDA含量,以及抗氧化酶CAT、T-SOD和GSH-PX的活性,结果表明H2O2可导致细胞LDH释放率上升,MDA含量增高,而WNWAD可以抑制脂质过氧化进程,维持细胞膜完整性,提高细胞内LDH活性,降低MDA含量;H2O2可以抑制细胞内抗氧化酶CAT、T-SOD和GSH-PX的活性,而经过WNWAD预处理,可以显著增强其活性;随着肽浓度的升高,3种酶的活性均有所提高,呈浓度依赖型关系,尤其在肽的浓度为1.0μmol/L时,过氧化氢酶(CAT)活力为(20.63±0.51)U/mg蛋白、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力为(179.39±5.73)U/mg蛋白,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)为(33.97±5.02)个活力单位,较对应损伤组的酶活性均有显著性提高(P<0.01);最后,利用蛋白质免疫印迹技术检测细胞内抗氧化酶相关蛋白表达水平,结果表明:WNWAD预处理可在一定程度上恢复H2O2诱导损伤的HEK293细胞中抗氧化酶CAT、SOD和GSH-PX的蛋白表达水平。 展开更多
关键词 蛋清源活性肽 HEK293细胞 抑制氧化应激 抗氧化酶活性 蛋白免疫印迹技术
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肺动脉内皮细胞缺氧时内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化及蛋白激酶C亚型的作用 被引量:6
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作者 陆德琴 李会革 +3 位作者 叶仕桥 叶红 金肆 王迪浔 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期146-151,共6页
目的 研究蛋白激酶C(PKC)及其亚型对缺氧引起的肺动脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因表达变化的调控作用。方法 将原代培养的猪肺动脉内皮细胞置于缺氧 (5 %O2 )条件培养 2、6、12、2 4、4 8h ,用RT PCR的方法检测eNOSmRNA的... 目的 研究蛋白激酶C(PKC)及其亚型对缺氧引起的肺动脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因表达变化的调控作用。方法 将原代培养的猪肺动脉内皮细胞置于缺氧 (5 %O2 )条件培养 2、6、12、2 4、4 8h ,用RT PCR的方法检测eNOSmRNA的含量。用蛋白质免疫印迹技术检测eNOS和 8种PKC亚型的表达水平。加入选择性PKC抑制剂BIMⅠ (1μmol/L)和G 6 983(1μmol/L) 后观察其对 5 %O2 所引起的eNOSmRNA水平变化的影响。采用瞬时转染的方法 ,通过荧光素酶报告基因实验检测eNOS基因转录起始点上游长 1 6kb启动子区域的活性。加入转录抑制剂放线菌素D后比较不同时间点常氧培养组和 5 %O2 培养组eNOSmRNA的含量。结果  5 %O2培养 12h可使肺动脉内皮细胞eNOS表达增加 ,2 4h达高峰。缺氧 2 4h组eNOSmRNA和蛋白质水平分别是常氧组的 171%± 18% (P <0 0 1)和 16 6 %± 2 1% (P <0 0 5 )。BIMⅠ和G 6 983可抑制缺氧 2 4h引起的eNOSmRNA表达上调。缺氧时新型蛋白激酶Cε(nPKCε)发生了膜转位。报告基因实验表明 ,缺氧 2 4h肺动脉内皮细胞eNOS基因启动子活性明显增加 ,为常氧组的 (2 2 9± 0 73)倍。放线菌素D实验表明缺氧对肺动脉内皮细胞eNOSmRNA的稳定性无明显影响。结果表明 。 展开更多
关键词 肺动脉 内皮细胞 缺氧环境 内皮型一氧化氮合酶 基因表达 蛋白激酶C 蛋白免疫印迹技术
原文传递
营养丰盛期和营养匮乏期牦牛组织中BCMO1蛋白表达
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作者 王蕊 苟锐锋 王树林 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1003-1009,共7页
通过研究营养匮乏期和丰盛期牦牛(Bos mutus)体内β胡萝卜素-15,5′-单加氧酶(BCMO1)蛋白表达水平,探讨不同营养时期BCMO1参与牦牛机体维持维生素A营养平衡的功能。于2013年7月(营养丰盛期)和2014年3月(营养匮乏期)赴青海省海西州乌兰... 通过研究营养匮乏期和丰盛期牦牛(Bos mutus)体内β胡萝卜素-15,5′-单加氧酶(BCMO1)蛋白表达水平,探讨不同营养时期BCMO1参与牦牛机体维持维生素A营养平衡的功能。于2013年7月(营养丰盛期)和2014年3月(营养匮乏期)赴青海省海西州乌兰县铜普镇采集样品,每次选取健康成年(36月龄)雄性牦牛3头,采集组织样品。采用蛋白质免疫印迹技术检测不同营养时期牦牛肝、肺、肾、肌肉、十二指肠、回肠、空肠、瘤胃8种组织中BCMO1蛋白的表达量。利用多重比较和T检验对同一时期不同组织及不同时期同一组织BCMO1蛋白表达量进行比较分析。在营养匮乏期,BCMO1蛋白表达量最高的组织为十二指肠(P<0.05);空肠和回肠组织中BCMO1蛋白表达量高于肾和瘤胃(P<0.05);肝组织中BCMO1蛋白表达量最低。在营养丰盛期牦牛肝组织中BCMO1蛋白表达量最高,明显高于其他组织(P<0.05)。营养丰盛期肝中的BCMO1蛋白表达量为0.919±0.228,显著高于营养匮乏期(P<0.05);而营养丰盛期牦牛十二指肠、空肠、肾、肌肉和瘤胃组织中的BCMO1蛋白表达量分别为0.811±0.134、0.336±0.255、0.739±0.404、0.619±0.092,均低于营养匮乏期表达量(P<0.05);在营养丰盛期和营养匮乏期的肺中BCMO1蛋白表达量分别为1.128±0.407、1.083±0.232,回肠在营养丰盛期和营养匮乏期的BCMO1蛋白表达量分别为0.466±0.337、0.517±0.280,两组织在不同时期BCMO1蛋白表达量差异不明显(P>0.05)。研究表明,在牦牛体内的β-胡萝卜素和维生素A含量较高的营养丰盛期,大部分牦牛组织中BCMO1蛋白表达量较匮乏期要低,体内维生素A的含量提高可能对BCMO1的表达有反馈抑制作用,这对维持和调节牦牛在不同营养时期机体内维生素A营养平衡具有重要意义。 展开更多
关键词 β胡萝卜素-15 5'-单加氧酶 蛋白免疫印迹技术 营养平衡
原文传递
盐酸关附甲素对HERG基因F656C突变钾通道的影响 被引量:7
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作者 黄兴福 杨艳敏 +2 位作者 朱俊 戴研 浦介麟 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期612-616,共5页
目的:评价盐酸关附甲素(AHH)对HERG基因F656C突变表达的钾通道的影响。方法:采用标准的全细胞膜片钳技术记录不同浓度的AHH对F656C突变表达的快速激活延迟整流钾电流(IKr)的影响;应用免疫蛋白印迹技术(Western blot)评价AHH对HERG钾通... 目的:评价盐酸关附甲素(AHH)对HERG基因F656C突变表达的钾通道的影响。方法:采用标准的全细胞膜片钳技术记录不同浓度的AHH对F656C突变表达的快速激活延迟整流钾电流(IKr)的影响;应用免疫蛋白印迹技术(Western blot)评价AHH对HERG钾通道蛋白的影响。结果:AHH对突变后IKr通道的峰电流(IHERG)和尾电流(Itail)具有抑制效应,并使得激活曲线左移。高浓度的AHH可抑制HERG钾通道蛋白的转运,且对F656C突变表达的HERG钾通道蛋白抑制更明显。结论:AHH主要是结合在HERG通道的S6区从而抑制钾电流。AHH不影响HERG蛋白的合成,但高浓度的AHH可抑制HERG蛋白的转运。 展开更多
关键词 关附甲素 钾通道 HERG基因 免疫蛋白印迹技术 突变蛋白
原文传递
注意缺陷多动障碍大鼠前额叶中Homer家族表达研究 被引量:2
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作者 洪琴 池霞 +6 位作者 郭锡熔 童梅玲 张敏 陈荣华 费莉 郭梅 潘晓勤 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第1期64-67,共4页
目的探讨Homer家族在注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型幼年自发性高血压(SHR)大鼠与Wistar京都(WKY)大鼠前额叶中的表达差异情况,分析其与ADHD的关系。方法2006年12月至2007年7月在南京医科大学儿科医学研究所应用反转录-聚合酶链反应(RT... 目的探讨Homer家族在注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型幼年自发性高血压(SHR)大鼠与Wistar京都(WKY)大鼠前额叶中的表达差异情况,分析其与ADHD的关系。方法2006年12月至2007年7月在南京医科大学儿科医学研究所应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫蛋白印迹技术(Western Blotting)检测SHR与WKY大鼠前额叶皮质中Homer1a、Homer1b/c、Homer2a/bmRNA和蛋白的表达情况。结果RT-PCR结果显示,SHR大鼠Homer1a、Homer2a/bmRNA表达量较WKY大鼠降低,差异有统计学意义(t=2.56,P<0.05;t=5.85,P<0.05),Homer1b/c在两组间差异无统计学意义(t=0.44,P>0.05)。Western Blotting结果显示,SHR大鼠Homer1a、Homer2a/b蛋白表达量较WKY大鼠降低,差异有统计学意义(t=2.76,P<0.05;t=3.40,P<0.05)。结论SHR大鼠前额叶皮质Homer1a、Homer2a/b表达较WKY大鼠显著降低,提示Homer1a、Homer2a/b可能与ADHD密切相关。 展开更多
关键词 注意缺陷多动障碍 前额叶皮质 反转录-聚合酶链反应 免疫蛋白印迹技术
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