鱼精蛋白凝聚法测定脂质体和纳米脂质体包封率

目的 建立鱼精蛋白凝聚法测定脂质体、纳米脂质体包封率的方法。方法 鱼精蛋白凝聚法分离脂质体、纳米脂质体，以高效液相色谱法为分析手段，测定脂质体药物包封率，并与葡聚糖凝胶柱色谱法比较。考察脂质体粒径、脂质体Zeta电位、鱼精蛋白用量以及药物不同溶解性、荷电性、分子量大小等因素对鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率的影响。结果 鱼精蛋白凝聚法可以准确测定不同溶解性质药物脂质体的包封率；应用葡聚糖凝胶G-50柱色谱法与鱼精蛋白凝聚法均能很好测定粒径≥220nm碘海醇脂质体的包封率。脂质体粒径减小，葡聚糖凝胶柱色谱法药物回收率下降；碘海醇脂质体粒径小于200nm时，葡聚糖凝胶G-50柱色谱法测得药物回收率较鱼精蛋白凝聚法低。葡聚糖凝胶柱色谱法不适合脂溶性药物脂质体的分离且不能准确测定脂溶性药物托氟啶脂质体的药物包封率；鱼精蛋白凝聚法可准确测定粒径在100—500nm的托氟啶脂质体的药物包封率。脂质体荷电性影响鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率；调节介质pH值使托氟啶脂质体Zeta电位分别为-44.07，-4．76和14．5mV，鱼精蛋白凝聚法方法回收率分别为98.1％，95.3％和86.6％。不同荷电性小分子药物不影响鱼精蛋白凝聚法测定脂质体包封率，但大分子药物荷电性有影响；解离的奥沙西罗（荷负电）和pH2的胰岛素（荷正电）回收率较好，而pH7的胰岛素（荷负电）的回收率则较低。结论 鱼精蛋白凝聚法可以测定不同溶解性质药物脂质体、纳米脂质体的包封率，此法适合小分子药物及正电荷大分子药物脂质体的测定；适于中性或负电荷脂质体的测定。

鱼精蛋白凝聚法测定和厚朴酚脂质体的包封率

目的:建立和厚朴酚脂质体包封率(EE)的测定方法。方法:以反相高效液相色谱法为分析手段,采用鱼精蛋白凝聚法测定和厚朴酚脂质体EE。结果:和厚朴酚检测浓度在2.006～160.512mg·L-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999),最低检测限和最低定量限分别为1.4、4.0ng;鱼精蛋白凝聚法的平均回收率为(95.70±2.07)%,RSD=1.71%(n=9);平均EE为85.87%。结论:鱼精蛋白凝聚法操作简单、可行、重现性好,适用于脂溶性药物和厚朴酚脂质体EE的测定。

肉类加热终点温度检测方法的研究进展

出于食品安全卫生的考虑 ,需要在加工制作过程中对畜禽肉进行加热处理 ,以消灭肉类及肉制品可能携带的致病微生物或动物疫病。为监管肉类及肉制品加热处理情况 ,人们依据加热过程中肌肉的变化与加热温度之间的联系开发出酶联免疫吸附法、蛋白凝聚法。

HPLC法测定黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率

目的建立黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率测定方法。方法采用注入法制备黄藤素纳米柔性脂质体,用透射电镜和激光粒度仪评价脂质体的粒径和结构,鱼精蛋白凝聚法分离脂质体。选用Hypersil BDS C18(150mm×4.6mm,5.0μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.4mL·L-1磷酸(20∶80);检测波长:345nm;流速:1.0mL·min-1;进样量:20μL;柱温:25℃。测定黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率。结果在所选定的色谱条件下,辅料及溶剂对测定无干扰,黄藤素在0.84～25.2μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 8),平均回收率为96.0%,精密度RSD值小于2%。结论 HPLC法可用于测定黄藤素纳米柔性脂质体的含量及包封率,该方法准确可靠、简便快速。

HPLC法测定洛莫司汀-碘海醇复方脂质体的药物含量及包封率

目的:建立RP-HPLC法测定洛莫司汀-碘海醇复方脂质体中药物的含量及包封率。方法:使用DiamonsilTM(钻石)C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(65︰35),柱温25℃,体积流量1.0mL/min,检测波长为230nm,鱼精蛋白凝聚法分离游离药物,测定复方脂质体中洛莫司汀的含量及包封率;使用DiamonsilTMC18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(10︰90),柱温25℃,体积流量1.0mL/min,检测波长为244nm,鱼精蛋白凝聚法分离游离药物,测定复方脂质体中碘海醇的含量及包封率。结果:洛莫司汀与辅料及溶剂峰分离良好,在1.0~20.0μg/mL线性关系良好(r=1.0,n=5),回收率为99.0%~101.0%;碘海醇与辅料及溶剂峰分离良好,在6.0~60.0μg/mL线性关系良好(r=0.9999,n=5),回收率为99.0%~101.0%。结论:该方法准确、简单,可用于洛莫司汀-碘海醇复方脂质体含量及包封率的测定。

肺靶向多西他赛脂质体的包封率测定方法研究

为筛选肺靶向多西他赛脂质体（DTX-LP）的包封率测定方法,本研究结合固体分散与泡腾技术制备DTX-LP,马尔文粒度仪测定其粒径分布和Zeta电位;采用高效液相色谱法测定DTX含量;考察DTX在不同媒介中的溶解情况;对比高速离心法和鱼精蛋白凝聚法测定DTX-LP的包封率。研究表明,制得的DTX-LP平均粒径为（0.72±0.23）μm,Zeta电位为-27.5 m V,表面荷负电。DTX在0.5～100μg/m L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,日内精密度和日间精密度均〈2.00%,室温放置0～8 h内稳定性RSD≤2.00%,回收率在99.96%～108.05%之间。当以生理盐水、0.2%吐温80的生理盐水、0.5%吐温80的生理盐水作为媒介,通过高速离心法测得DTX-LP的包封率分别为（91.15±1.07）%、（85.28±3.75）%、（79.76±2.71）%（n=3）,而鱼精蛋白凝聚法测得DTX-LP的包封率分别为（95.46±0.29）%、（93.61±2.75）%、（87.83±1.23）%（n=3）,生理盐水能够完全溶解微量的、未包封的游离药物。通过分析对比,选择鱼精蛋白凝聚法、以生理盐水作媒介,更适用于亚微米级、表面荷负电的DTX-LP包封率的测定,能避免表面活性剂及高速离心对脂质体膜结构的影响,该方法操作简单、快速、可行性好、准确度高。

三七总皂苷脂质体的制备及表征研究

目的采用四种不同的方法制备三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponin, PNS)脂质体,通过评价其表征筛选出最适合PNS脂质体的制备方法。方法分别采用薄膜分散超声法、复乳法、注入法、逆向蒸发法制备PNS脂质体,并采用鱼精蛋白凝聚法测定PNS脂质体包封率,以包封率、载药量、Zeta电位以及粒径为参考指标,选择最合适的制备方法。结果薄膜分散超声法、复乳法、逆向蒸发法、注入法所制备脂质体的包封率分别为71.82%、 60.32%、67.76%、40.70%;载药量分别为:16.66%、5.28%、11.76%、3.91%;粒径分别为:(197.9±3.3)、(267.8±2.9)、(394.6±4.6)、(155.4±1.4) nm;Zeta电位分别为(-7.05±0.6)、(-9.16±0.2)、(-3.00±0.2)、(-3.87±0.3) mV。结论由薄膜分散超声法所制备的PNS脂质体包封率和载药量较高,Zeta电位较高且粒径分布均匀,适合PNS脂质体的制备。