家兔去除粘蛋白层胚胎的体内外发育

104枚去除粘蛋白层的2-、8,16-细胞期和早期桑桩胚阶段的兔胚在TCM-199中体外培养120小时,结果分别有16.00％(8/50)、48.39％(15/31)和56.52％(13/23)的胚胎发育至囊胚,但无一囊胚继续发育。给10只受体移植的93枚去除粘蛋白层兔胚无一发育至胎儿,而6只受体移植的41枚未去除粘蛋白层的兔胚有3只怀孕,有4枚胚胎发育至胎儿。

核纤层蛋白基因在胶质母细胞瘤恶性生物学行为中的作用

目的:研究核纤层蛋白基因(LMNA)在人类胶质母细胞瘤中的表达特点及该基因在胶质母细胞瘤发病过程中的作用机制。方法:分析公共数据库TCGA中LMNA基因在胶质母细胞瘤中的表达及其与患者预后的关系。构建LMNA基因的敲减慢病毒,构建胶质母细胞瘤细胞系U87的LMNA基因稳定敲减株;进一步对U87的LMNA基因敲减株及其对照细胞株进行克隆形成实验和细胞3D成球实验,检测LMNA基因对细胞增殖与成球能力的影响;通过替莫唑胺加药实验检测LMNA基因敲减细胞株对替莫唑胺的耐药性;最后经裸鼠颅内种瘤实验检测LMNA基因敲减在体内对胶质母细胞瘤生长的抑制作用。结果:TCGA数据显示,LMNA基因在胶质母细胞瘤组织中的表达程度显著高于正常组织,且与患者生存预后呈负相关,与肿瘤细胞恶性程度呈正相关。LMNA基因敲减显著降低了U87细胞株的克隆生成及细胞成球能力,显著增加了U87细胞株对替莫唑胺的敏感性;裸鼠颅内种瘤实验显示,LMNA基因敲减的U87细胞株在裸鼠脑内生成的肿瘤体积显著减小,且小鼠存活时间延长。结论:LMNA基因在胶质母细胞瘤中表达增高,与患者生存呈负相关,LMNA基因敲减可抑制U87胶质母细胞瘤细胞株的增殖,并增加对替莫唑胺的敏感性,是胶质母细胞瘤治疗的潜在靶点。

核纤层蛋白B2在胃癌中高表达并调节胃癌的免疫微环境

目的:研究核纤层蛋白B2(LMNB2)在胃癌患者中的表达特征及其与临床预后、临床病理特征相关性,并探讨LMNB2表达对胃癌免疫微环境的影响。方法:下载UCSC数据库中经统一标准化的泛癌数据集,对其中19131例癌旁正常组织及60499例肿瘤组织中LMNB2的表达情况进行分析。收集自2014年至2016年间在温州医科大学附属第一医院行胃癌根治性切除术的142例胃癌组织及28例配对癌旁正常组织,免疫组化技术检测127例胃癌组织及28对配对癌旁组织中LMNB2的差异表达情况,并结合临床信息,对LMNB2表达情况与患者预后、临床病理特征之间的关系进行分析。采用ESTIMATE等算法分析LMNB2表达水平对胃癌组织中的基质、免疫细胞浸润等的影响;分析胃癌组织中不同免疫细胞的浸润情况及肿瘤突变负荷(TMB)、微卫星不稳定性(MSI)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)与LMNB2表达水平之间的相关性,并通过基于免疫组化技术进行的评分,对临床组织样本进一步验证分析。结果:LMNB2在胃癌组织中表达上调,与患者的不良预后、更差的TNM分期等临床病理特征相关性。ESTIMATE分析显示,LMNB2的表达与免疫评分(r=-0.202,P<0.001)、基质评分(r=-0.272,P<0.001)、ESTIMATE评分(r=-0.251,P<0.001)呈负相关。免疫细胞的浸润情况分析发现,LMNB2表达与M1型巨噬细胞(r=0.322,P<0.001)、NK细胞(r=0.423,P<0.001)、中性粒细胞(r=0.307,P<0.001)浸润呈正相关。免疫组化对组织芯片进一步分析显示LMNB2高表达组拥有更高的CD4、CD56评分(均P<0.05),而其CD8、CD163评分则更低(均P<0.05)。LMNB2的表达水平与胃癌中TMB评分(r=0.343,P<0.001)及MSI评分(r=0.221,P<0.001)呈正相关,且LMNB2高表达组的PD-L1表达水平上调(P<0.05)。结论:LMNB2在胃癌中的表达上调,调节胃癌中的免疫微环境,可能是潜在的胃癌诊断标志物及评价胃癌病人免疫检查点抑制剂疗效的指标。

血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原辅助诊断原发性肝癌的临床意义分析

目的 分析血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)辅助诊断原发性肝癌的可行性和临床价值。方法 选取82例原发性肝癌患者、33例肝硬化患者及127例健康对照者作为研究对象,分别作为原发性肝癌组、肝硬化组及健康对照组。检测并比较三组血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ水平;分析血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ的受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC);分析血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ的诊断界值及诊断效能。结果 原发性肝癌组血清HA 80.32(42.18, 165.50)ng/ml、LN 42.91(31.47, 74.91)ng/ml、PⅢNP 16.15(10.93, 31.33)ng/ml和CⅣ126.00(73.16, 236.60)ng/ml均显著高于健康对照组的26.83(17.25, 40.02)、30.46(25.02, 40.95)、6.38(4.93, 7.86)、48.49(40.24, 57.57)ng/ml(P<0.05);原发性肝癌组血清HA、LN、PⅢNP水平显著低于肝硬化组(P<0.05),原发性肝癌组血清CⅣ水平与肝硬化组比较无统计学差异(P>0.05);肝硬化组血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ水平均显著高于健康对照组(P<0.05)。ROC曲线及AUC分析血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ的诊断效能显示:血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ诊断原发性肝癌的AUC分别为0.8453、0.7195、0.9310和0.8842;血清HA、LN和PⅢNP鉴别原发性肝癌和肝硬化的AUC分别为0.7749、0.6208和0.6384。根据ROC曲线计算原发性肝癌和肝硬化的诊断界值,血清HA+LN+PⅢNP+CⅣ诊断原发性肝癌的灵敏度为92.7%。结论 血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ可用于原发性肝癌的辅助诊断,具有重要的临床价值。

层粘连蛋白与老年急性心肌梗死病人主要不良心血管事件的相关性

目的 分析层粘连蛋白(laminin,LN)预测老年急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)病人住院期间主要不良心血管事件(major adverse cardiovascular events,MACE)的价值。方法 回顾性分析在我院接受治疗的132例老年AMI病人资料,根据住院期间是否出现MACE分为事件组和非事件组,观察比较2组LN水平,并分析LN对MACE的预测价值。结果 132例老年AMI病人中,37例(28.03%)发生MACE,事件组LN水平较非事件组高(P<0.01)。Logistic回归分析显示,高LN水平是老年AMI病人住院期间发生MACE的独立危险因素(OR=1.010,95%CI:1.001~1.020)。ROC曲线显示,LN预测老年AMI病人发生MACE的AUC为0.819。结论 LN升高与老年AMI病人院内发生MACE有关。

层黏连蛋白基质在肿瘤细胞行为及血管生成拟态形成中的机制研究

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)描述了肿瘤细胞在无内皮细胞参与下形成新的微循环模式的过程。临床上,VM与侵袭性表型和较差的患者生存率有关。以前的许多研究都集中在血管生成因子方面;最近的研究发现,肿瘤细胞周围的细胞外基质对肿瘤发展具有显著调控作用。细胞外基质蛋白质可能授予肿瘤细胞形成血管生成拟态的能力。在本研究中,我们研究了层黏连蛋白(laminin,LN)基质在黑色素瘤和骨肉瘤的肿瘤进程和VM形成中的作用。相较于Control组,高浓度LN基质培养下,肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移、干性表达和VM形成能力显著增强;利用免疫荧光染色和实时定量PCR分析其内在的分子机制,结果显示:与对照组相比,层黏连蛋白基质可以显著促进肿瘤细胞CD133的表达,同时E-钙黏着蛋白I的mRNA表达下调(P<0.05),而Integrin、N-cadherin、Vimentin以及Snail、Twist的mRNA表达上调(P<0.05)。以上研究结果表明,层黏连蛋白促进肿瘤细胞的黏附、增殖、迁移和VM形成能力,并揭示了VM形成的潜在机制,为后期抗血管生成拟态的诊疗提供了新的思路。

姬峻芳教授团队揭示层粘连蛋白可促进表皮生长因子受体蛋白翻译驱动肝内胆管细胞癌发生发展

2024年3月25日,《先进科学》(Advanced Science)在线刊登了浙江大学生命科学研究院姬峻芳教授团队的成果论文“Oncogenic roles of laminin subunit gamma-2 in intrahepatic cholangiocarcinoma via promoting EGFR translation”(DOI:10.1002/advs.202309010),揭示层粘连蛋白亚基γ2(LAMC2)促进肝内胆管细胞癌(iCCA)发生发展的新机制,为LAMC2高表达iCCA患者进行表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂治疗或靶向LAMC2治疗提供了参考。

核纤层蛋白A基因通过MAPK通路调控胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡

目的探究敲低核纤层蛋白A基因(LMNA)对人胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡的影响和可能的作用机制。方法通过生信分析LMNA基因在胃正常组织与胃癌组织中的表达情况;取对数生长期的人胃癌细胞HGC27,根据是否敲低LMNA基因分为敲低LMNA组(si-1、si-2、si-3组)和对照组(si-NC组)共4组,取瞬时转染率最高的si-2组为si-LMNA组;采用CCK-8实验检测细胞活力,Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力,流式检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase3、Bcl-2和丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)通路中的p38、p-p38、ERK1/2及pERK1/2的表达;在si-LMNA组加入MAPK通路的特异性激活剂Chicoric acid,进一步验证LMNA的表达情况。结果生信分析结果提示LMNA基因在胃癌组织中高表达,LMNA低表达患者生存率更高;与si-NC组相比,si-LMNA组细胞活力下降(P<0.05),凋亡蛋白Bax、Caspase3表达升高、抗凋亡蛋白Bcl-2降低及细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期、S期细胞减少(P<0.05),侵袭与迁移能力降低(P<0.05),p38、ERK1/2磷酸化水平降低(P<0.05);加入激活剂后,LaminA/C表达量增高,p38、ERK1/2磷酸化水平升高,凋亡相关蛋白的表达被逆转,侵袭迁移能力被促进(P<0.05)。结论敲低LMNA基因后能促进胃癌细胞的凋亡,细胞周期被阻滞在G0/G1期,增殖、侵袭及迁移能力被抑制,其作用机制可能与MAPK信号通路密切相关。

高糖对血管内皮细胞层粘连蛋白α1的表达影响

目的分析高糖对视网膜血管内皮细胞中层粘连蛋白α1(LAMA1)的影响。方法体外培育视网膜血管内皮细胞(RF/6A),设置4种糖浓度培养液(5、15、25、35 mmol/L),其中5 mmol/L作为对照组,15、25、35 mmol/L作为高糖组。观察不同糖浓度培养液处理后的细胞生长情况,LAMA1的表达情况、检测细胞的迁移、增殖能力变化。结果随着观察时间的延长,高糖环境下细胞的生长速度增加,糖浓度越高,相对应生长速度越快。免疫荧光法检测发现,在处理24、48 h后,LAMA1在细胞质中表达,在高糖组(25、35 mmol/L)中表达量较对照组减少。处理24 h时,高糖组(25、35 mmol/L)中LAMA1蛋白表达量低于对照组(t分别=4.40、5.20,P均<0.05);处理48 h时,高糖组(35 mmol/L)LAMA1蛋白表达量和mRNA表达均低于对照组(t分别=6.80、4.23,P均<0.05)。在处理48、72 h后,高糖组(15、25、35 mmol/L)细胞的迁移能力较对照组明显增加(t分别=6.78、10.47、10.00、10.78、10.78、10.78,P均<0.05)。处理48、72、96 h后,高糖组(25、35 mmol/L)的细胞增殖能力明显高于对照组(t分别=6.68、4.60、3.89、4.09、4.29、4.37,P均<0.05)。结论高糖短期内刺激了细胞的生长、迁移、增殖,但抑制了LAMA1蛋白的表达,LAMA1可能参与了糖尿病视网膜病变的发生发展,并可能起到一定的保护作用。

生长抑素联合奥美拉唑对肝硬化上消化道出血疗效及前胶原Ⅲ型层黏连蛋白和血管紧张素转化酶水平影响

目的 观察生长抑素联合奥美拉唑对肝硬化上消化道出血疗效及对患者前胶原Ⅲ型(PCⅢ)、层黏连蛋白(LN)和血管紧张素转化酶(ACE)水平的影响。方法 前瞻性选取2022年3月至2023年3月我院收治的112例肝硬化上消化道出血患者,根据有无使用生长抑素随机分为生长抑素组和奥美拉唑组,各56例。2组均予西医常规治疗,奥美拉唑组予奥美拉唑肠溶治疗,生长抑素组在奥美拉唑组的基础上加予生长抑素辅助治疗。2组均连续治疗3 d。比较2组患者的凝血功能指标、临床疗效、住院时间、止血时间、出血量、肝功能Child-Pugh评分、血红蛋白(Hb)、PCⅢ、LN和ACE水平。结果 治疗后,2组与治疗前相比,纤维蛋白原(FIB)、血小板(PLT)水平均升高,且生长抑素组低于奥美拉唑组;血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)水平均下降,且生长抑素组低于奥美拉唑组;LN、PCⅢ、ACE、门静脉内径(PVD)、肝功能Child-Pugh评分指标均较本组治疗前降低,且生长抑素组低于奥美拉唑组;出血量、止血时间及住院时间均低于奥美拉唑组;生长抑素组组患者综合评估后总有效率92.9%高于奥美拉唑组76.8%(均P<0.05),说明生长抑素组的治疗效果优于奥美拉唑组。2组不良反应发生率对比,差异无统计学意义(χ^(2)=0.14,P=0.714)。结论 生长抑素联合奥美拉唑能够改善肝功能指标,降低PCⅢ、LN等肝硬化上消化道出血标志物,临床疗效显著。

层粘连蛋白α4亚基的功能及其与疾病关系的研究进展

层粘连蛋白家族是基底膜的主要成分。作为家族中的一员,层粘连蛋白α4亚基(LAMA4)广泛存在于成人组织的细胞间质中,参与细胞的固定,并可与相应的整合素受体结合,激活相关的信号转导通路,对于细胞的生长、增殖和迁移,以及人体的正常生长发育均起着重要作用。现有的研究已发现LAMA4与许多疾病的发生、发展有关;此外,还发现LAMA4与多种肿瘤细胞的迁移和侵袭有密切的联系。本文综述了当前LAMA4的研究进展,着重探讨LAMA4与疾病尤其是肿瘤发生发展的关系,以期为相关疾病的诊治提供新的思路。

软骨中间层蛋白1在心肌纤维化中的研究进展

心肌纤维化是心肌损伤后出现的病理性重塑,主要表现为富含胶原蛋白的细胞外基质过度沉积和纤维瘢痕形成,过度的心肌不良重塑最终导致心脏的收缩和舒张功能障碍,引起心律失常、心力衰竭等疾病。软骨中间层蛋白1(CILP-1)是一种细胞外基质蛋白,其主要发挥抗心肌纤维化的作用,但在特殊情况下也会促进心肌成纤维细胞增殖。CILP-1是一种可以便捷测量的生物标志物,相关临床试验结果也肯定了其作为心肌纤维化新型标志物的潜力,有望为心肌纤维化的预防和治疗提供新策略。

层粘连蛋白γ1基因沉默对膀胱癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况,以及沉默LAMC1基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法选取河北省邯郸市中心医院2019年1月至2021年12月收治的48例膀胱癌患者的癌及癌旁组织。采用RT-qPCR法检测UMUC3、T24、5637及J82细胞中LAMC1的m RNA表达水平。将LAMC1-si RNA质粒转染至5637细胞中,设置LAMC1沉默组和阴性对照组,RT-qPCR和Western blot验证转染效率;采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术检测LAMC1基因沉默对膀胱癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin D1、p16和p21的表达水平。结果5637细胞中LAMC1 m RNA表达水平较UMUC3、T24、J82细胞高(P<0.05)。癌旁组织与膀胱癌组织中LAMC1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LAMC1沉默组中LAMC1 m RNA和蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞增殖活力和克隆形成能力低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞中S期细胞所占百分比低于阴性对照组(P<0.01),G1期细胞所占百分比高于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中的cyclin D1和cyclin A蛋白的表达水平低于阴性对照组(P<0.01),而p16和p21蛋白的表达水平高于阴性对照组(P<0.01)。结论沉默LAMC1基因表达能够抑制细胞周期相关蛋白的表达从而抑制膀胱癌5637细胞增殖能力,提示其可能是膀胱癌潜在的治疗靶点。

原发性肝癌组织中层粘连蛋白3、黏着斑激酶蛋白表达及其与患者临床病理特征和预后关系研究

目的:探讨层粘连蛋白3(LAMA3)、黏着斑激酶(FAK)蛋白在原发性肝癌组织中的表达情况,分析它们与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取接受手术治疗的原发性肝癌患者75例,收集癌组织和癌旁组织标本。采用免疫组化染色检测癌组织和癌旁组织LAMA3、FAK蛋白表达。术后随访肝癌患者3年,统计生存情况。分析肝癌组织LAMA3、FAK蛋白表达与患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析LAMA3、FAK蛋白表达与原发性肝癌患者预后的关系。采用Logistic回归分析原发性肝癌患者预后的影响因素。结果:肝癌组织LAMA3和FAK蛋白阳性表达率高于癌旁组织LAMA3和FAK蛋白阳性表达率(均P<0.05)。有淋巴结转移和血管侵犯的患者肝癌组织LAMA3、FAK蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移和无血管侵犯的患者(均P<0.05)。术后随访3年,生存患者35例,病死患者40例。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,肝癌组织LAMA3、FAK蛋白表达阳性患者3年累积生存率低于LAMA3、FAK蛋白表达阴性患者(均P<0.05)。Logistic回归分析发现,有淋巴结转移、有血管侵犯、LAMA3蛋白阳性和FAK蛋白阳性是原发性肝癌患者术后3年预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论:原发性肝癌组织中LAMA3、FAK蛋白呈高表达,且两者阳性表达与患者淋巴结转移、血管侵犯及预后有关,可能作为原发性肝癌潜在的预后标志物。

层粘连蛋白、纤粘连蛋白、IV型胶原在人月经周期子宫内膜中的表达

目的 研究细胞外基质蛋白层粘连蛋白 (LN)、纤粘连蛋白 (FN)和IV型胶原 (IVCL)在正常人月经周期子宫内膜中的表达。 方法 采用免疫组织化学方法检测 4 9例正常月经周期子宫内膜中LN、FN、IVCL蛋白的表达。 结果 LN主要分布于腺上皮及腔上皮基底膜 ,分泌中期表达最强。FN主要分布于间质 ,腔上皮及腺上皮基底膜也均有表达 ,分泌中期含量丰富。IVCL在腺上皮基底膜的表达分泌中期最强 ,在间质的表达分泌早期最强 ,分泌中、晚期表达逐渐减弱。LN、FN、IVCL在血管基底膜上均有表达 ,无周期性变化。 结论 LN、FN、IVCL在月经周期子宫内膜中的表达随月经周期而变化。

敲低核纤层蛋白B1通过抑制PI3K/AKT通路在肝癌中发挥抑癌作用

目的探讨核纤层蛋白B1(lamin B1,LMNB1)对肝癌进展的影响,发掘肝癌新的治疗靶点。方法利用工具网站基因表达水平值的交互式分析平台(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)分析癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中肝癌组织及癌旁组织LMNB1的表达水平,使用Kaplan-Meier分析LMNB1表达水平差异对肝癌患者预后的影响。采用实时定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测正常肝细胞系及肝癌细胞系中LMNB1表达水平。选取LMNB1表达水平较高的两种人肝癌细胞株Hep3B、HepG2,转染小干扰RNA敲低LMNB1表达,在LMNB1表达水平较低的细胞SUN475中构建LMNB1稳定过表达细胞系并使用Western blot验证转染效率,采用CCK8法检测敲低或过表达LMNB1后肝癌细胞的增殖能力,采用平板克隆形成检测敲低或过表达LMNB1后细胞形成克隆的能力。采用Transwell检测敲低或过表达LMNB1后细胞侵袭及迁移能力的变化。采用Western blot实验检测磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinases,p-ERK)及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)的变化。结果TCGA数据库分析表明肝癌组织中LMNB1表达水平较癌旁正常组织高(P<0.05),且LMNB1表达水平与肝癌患者预后呈负相关(P=0.003)。实时定量PCR显示相对正常人肝细胞系,肝癌细胞中LMNB1 mRNA表达量分别为MHCC97H:1.80±0.10(t=11.08,P<0.001);SUN475:1.29±0.03(t=5.88,P=0.004);HepG2:2.97±0.04(t=39.68,P<0.001);PLC/Prf/5:1.74±0.04(t=14.51,P<0.001);HuH7:1.70±0.02(t=15.22,P<0.001);SK-HEP-1:1.59±0.05(t=11.17,P<0.001);Hep3B:2.27±0.09(t=18.50,P<0.001);均显著高于正常人肝细胞系。Westernblot结果显示在HepG2及Hep3B细胞系中,与siScramble阴性对照组相比,转染siLMNB1实验组的LMNB1表达水平显著降低(HepG2:0.60±0.10 vs 1.60±0.10,t=11.55,P<0.001;Hep3B:0.40±0.10 vs 1.70±0.10;t=15.61,P<0.001);而SUN475中转染质粒后LMNB1表达显著增加(0.70±0.20 vs 0.07±0.04;t=5.541,P=0.005)。敲低LMNB1后培养96 h,与对照组相比,Hep3B(10.81±0.67 vs 15.48±0.62;t=8.86,P<0.001)及HepG2(9.45±0.61 vs17.08±0.75;t=13.67,P<0.001)细胞增殖能力被显著抑制;而在SUN475中过表达LMNB1后,实验组细胞增殖活性显著增加(16.94±1.52 vs 12.65±1.06;t=3.99,P=0.016)。在HepG2及Hep3B细胞系中敲低LMNB1后,细胞克隆形成数显著减少[HepG2:(90.30±7.24)个vs(382.01±25.27)个,t=19.24,P<0.001;Hep3B:(128.03±8.24)个vs(395.85±28.27)个,t=15.76,P<0.001],在SUN475中过表达LMNB1组比对照组克隆形成个数显著增加[(467.82±42.45)个vs(85.31±15.32)个;t=14.87,P=0.001]。在HepG2及Hep3B细胞系中敲低LMNB1后,肝癌细胞迁移数量显著减少[HepG2:(75.25±8.10)个vs(15.02±3.50)个,t=11.90,P<0.001;Hep3B:(168.20±12.26)个vs(34.83±7.61)个,t=15.96,P<0.001],侵袭的细胞数量同样显著减少[HepG2:(110.21±12.01)个vs(25.76±4.03)个,t=11.50,P<0.001;Hep3B:(150.22±15.16)个vs(22.03±14.26)个,t=10.65,P<0.001];在SUN475中,过表达LMNB1组比对照组细胞迁移数量显著增加[(50.11±5.55)个vs(349.85±25.26)个;t=11.33,P<0.001],侵袭的细胞数量同样显著增加[(40.11±5.26)个vs(80.13±12.20)个;t=5.21,P=0.007]。与对照组相比,敲低LMNB1后,AKT的磷酸化活性形式p-AKT表达水平显著下降,而过表达LMNB1可导致p-AKT表达升高(P均<0.05)。而敲低或过表达LMNB1后,p-ERK表达水平无显著变化,AKT和ERK的本底表达水平均未发生明显变化。结论抑制LMNB1可通过抑制PI3K/AKT信号转导通路的激活抑制肝癌的发生发展,可作为诊断肝癌的生物标记物和潜在的治疗靶点。

核骨架与细胞骨架的连接体复合体在核纤层蛋白病中的研究进展

核骨架与细胞骨架的连接体(LINC)广泛存在于真核生物中,是建立核膜内外联系的重要复合体。LINC复合体具有维持细胞核形态与定位、传导核骨架与细胞骨架之间机械力、调节基因表达等作用。人肌肉细胞中的LINC复合体若发生缺陷,不仅会造成细胞核的固定、迁移等细胞层面的活动失常,还会由于肌肉细胞内部结构松散使机械力无法正常传导,从而导致Emery-Dreifuss肌营养不良综合征、扩张型心肌病和遗传性运动感觉神经病变等疾病。然而,目前对于这些疾病仍缺乏有效的治疗方法,因此亟须深入研究LINC复合体的功能与致病机制。

层粘连蛋白基因家族在低级别胶质瘤中的表达及功能的生物信息学分析

为了分析层粘连蛋白基因家族在低级别胶质瘤中的表达和预后评估价值,我们使用生物信息学数据挖掘方法。具体而言,我们从不同数据库下载了低级别胶质瘤的表达数据和临床信息,然后使用R验证了不同级别胶质瘤的表达情况,并测算了低级别胶质瘤的生存情况。接着,我们使用ROC预测模型验证了我们的结果。此外,我们还利用了cBioPortal、String、GeneMANIA和DAVID数据库,分析了层粘连蛋白基因家族在低级别胶质瘤中的基因变异、蛋白–蛋白相互作用,并进行了功能富集分析。研究结果表明,LAMA4、LAMA5、LAMB1、LAMB2、LAMB4、LAMC1、LAMC2和LAMC3是低级别胶质瘤中的明显促癌基因,与临床WHO分期密切相关,并且在2、3、4级中的表达逐级升高。另外,LAMA3是抑癌基因,表达量随着WHO级别的升高而降低。预后分析表明,除了LAMC2基因以外,所有基因和低级别胶质瘤的生存都具有统计学意义。TCGA数据库和cBioPortal工具的分析显示,这些基因的变异率相对较低。功能富集分析表明,层粘连蛋白基因家族的主要癌症相关功能涉及细胞外基质、细胞黏附和癌症相关信号等。因此,我们得出结论:层粘连蛋白家族分子可以作为低级别患者肿瘤分级和预后判断的潜在靶标,这一发现可能为胶质瘤的研究和个体化治疗提供一个新的视角。

乳酸菌S-层蛋白的功能特性及在微生态制剂中的应用

S-层蛋白(surface layer protein,slp)是一些乳酸菌,细菌及古细菌细胞壁表面所包被的生物活性大分子。这些蛋白能够形成周期性的有序结构,如倾斜形,正方形或是匀称的六边形。最新研究表明,这些结构是通过非共价键相互作用,在熵驱动下自我组装而成。与其他S-层蛋白相比,乳酸菌S-层蛋白的显著特点是分子质量小、等电点高。一些乳酸菌含有多种S-层蛋白编码基因,他们能够分别或同时表达。随后,文中介绍了3种乳酸菌S-层蛋白的分离方法。最后简单介绍了乳酸菌S-层蛋白在益生菌微生态制剂中的的应用。

乳酸菌S-层蛋白的多样性及其研究方法

乳酸菌是人体和许多动物肠道的正常菌群,在预防肠道感染、促进人体健康方面,具有不可或缺的作用。乳酸菌通过竞争性黏附来抑制致病菌的繁殖。研究表明,乳酸菌的黏附作用与细胞表层蛋白密切相关。表层蛋白又名S-层蛋白（surface layer protein,Slp）,是许多细菌及古生菌细胞壁表面所包被的生物活性大分子,在一些乳酸菌中也发现了S-层蛋白的存在。S-层蛋白的相对分子质量在40000～200000间,而在已发现的乳酸菌中,S-层蛋白相对分子质量在25000～70000间。作者讨论了乳酸菌中S-层蛋白的多样性及主要特性,对乳酸菌S-层蛋白的研究方法进行了初步探索。