血清抗氨基甲酰化蛋白自身抗体定量检测微阵列化学发光免疫分析法的建立及应用

目的基于微阵列蛋白芯片技术自建检测抗氨基甲酰化蛋白(Car P)抗体的化学发光免疫分析法,对该方法的检测性能进行评价,并探讨该指标在类风湿性关节炎(RA)患者的初步临床应用价值。方法自建抗Car P抗体定量检测方法,评价该方法的精密度、最低检测限、线性范围、特异性等。以120例健康对照人群血清抗Car P抗体水平的第95分位为临界值,分析RA组、非RA组抗Car P抗体水平及阳性率;分析RA组抗Car P抗体与疾病活动性指标间的关联性。结果该方法检测高值和低值样本的精密度均<15%;线性范围可达(3. 31～1448. 18) AU/m L,抗Car P抗体与抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体几乎不存在交叉反应。与健康对照组相比,RA组、抗CCP抗体阳性RA组和关节痛组患者抗Car P抗体水平显著升高,未分化结缔组织病组也升高。与健康对照组抗Car P抗体5%阳性率相比,RA患者的阳性率达28. 21%,抗CCP抗体阳性RA组阳性率达32. 2%;关节痛组阳性率为38. 89%,均显著升高;其余疾病组间则无统计学差异。RA患者抗Car P抗体水平与类风湿因子(RF)水平和血沉(ESR)均呈弱相关,与CRP和Ig G水平均呈中等相关。结论建立的定量检测抗Car P抗体的蛋白芯片化学发光法具有良好的检测精密度和较宽的线性范围,敏感性和特异性较好。抗Car P抗体检测对RA诊断和疾病的活动性评价有价值。

不孕相关抗体检测女性不孕症的实验研究

目的探讨6种自身免疫抗体与女性不孕症间是否存在相关性。方法采用蛋白微阵列技术联合检测140例不孕症患者血清中抗精子抗体(ASAb)、抗子宫内膜抗体(AEmAb)、抗卵巢抗体(AVoAb)、抗透明带抗体(AZpAb)、抗滋养层抗体(ATAb)和抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCG Ab),并评价这6种抗体与女性不孕症的相关性。结果与对照组相比,不孕组中除AVoAb外,其他5种抗体检测的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。不孕组中,6种抗体联合检测的阳性率与单独检测比较差异有统计学意义(P<0.05)。原发不孕组和继发不孕组中6种自身抗体的阳性率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同病因引起的继发不孕中6种自身抗体的检测阳性率间比较差异无统计学意义(P>0.05)。不孕组中ANA的阳性率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但实验者ANA抗体滴度多大于或等于1∶100(6/7),核型多为核颗粒型(5/7),与对照组中阳性滴度较低不同。不孕相关性抗体阳性患者和抗体阴性患者中ANA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论ASAb、AZpAb、AEmAb、AhCGAb和ATAb与女性不孕症存在相关性,6种自身免疫抗体的联合检测可明显提高实验的灵敏度。