酶联免疫吸附法与二喹啉甲酸法检测核桃蛋白浓度的比较研究

目的探究间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒2种方法在核桃蛋白浓度检测中的优缺点和适用范围。方法对本实验室提取的核桃蛋白进行烘烤、高温高压以及微波加热处理后,用ELISA法和BCA法2种方法分别检测其蛋白质浓度。结果在不同的热加工处理条件下, ELISA对蛋白浓度测定结果存在显著性差异,高度依赖热处理的类型。与之相比,使用BCA法测定蛋白浓度时,受到热加工处理影响较小。结果提示,在食物加工中的一些剧烈条件下,蛋白质的高级结构很容易遭到破坏,蛋白质结构的改变会干扰其与抗体结合部位的作用,导致ELISA法测定的结果不准确。BCA法测定蛋白质浓度的准确性较高,且受加热影响较小。结论 在剧烈的食品加工条件下,尤其当这种条件引起蛋白结构发生改变后,对其蛋白质浓度进行测定时,可选用BCA法进行测定。