胆绿素还原酶A rs699512和肝细胞溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1 rs4149015位点基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症易感性相关性研究

目的:分析胆绿素还原酶A(BLVRA)rs699512和肝细胞溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(SLCO1B1)rs4149015位点基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症(HB)易感性的相关性。方法:选取不明原因HB新生儿90例为HB组,另选取同期健康新生儿90例为对照组。比较两组临床资料以及BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因型分布和等位基因频率。比较不同BLVRA rs699512、BLVRA rs699512基因型患儿血清胆红素水平。分析BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因多态性与HB易感性的关系。结果:HB组患儿总胆红素和结合胆红素水平明显高于对照组(均P<0.05)。两组BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因型分布比较差异有统计学意义(均P<0.05)。HB组患儿BLVRA rs699512位点GG基因型分布高于对照组,AA基因型分布低于对照组,G等位基因频率高于对照组(均P<0.05)。HB组患儿SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型分布高于对照组,GG基因型分布低于对照组,A等位基因频率高于对照组(均P<0.05)。BLVRA rs699512中GG基因型总胆红素和结合胆红素水平高于AA基因型(均P<0.05)。SLCO1B1 rs4149015中AA基因型总胆红素和结合胆红素水平均高于GG基因型(均P<0.05)。BLVRA rs699512位点GG基因型与HB发生呈正相关,AA基因型与HB发生呈负相关(r=0.671、-0.608,均P<0.05)。SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型与HB发生呈正相关,GG基因型与HB发生呈负相关(r=0.695、-0.633,均P<0.05)。结论:不明原因HB新生儿BLVRA rs699512位点GG基因型与SLCO1B1 rs4149015位点AA基因型会增加易感性,临床可建立早期防治体系以改善患儿预后。

溶质载体家族1成员5及谷氨酰胺酶2对人甲状腺癌细胞体外恶性行为的影响及机制研究

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)代谢酶溶质载体家族1成员5(SLC1A5)及谷氨酰胺酶2(GLS2)对人甲状腺癌细胞体外恶性行为的影响及机制。方法:敲减人甲状腺癌细胞系8505C和8305C细胞中SLC1A5及GLS2 mRNA表达。通过噻唑蓝(MTT)、平板克隆形成及Transwell实验评估SLC1A5和GLS2对人甲状腺癌细胞体外恶性行为的影响。观察SLC1A5、GLS2抑制剂对甲状腺癌细胞体外增殖能力及c-myc蛋白表达的影响。结果:敲减人甲状腺癌8505C和8305C细胞中SLC1A5、GLS2 mRNA表达后,细胞体外增殖、克隆形成及迁移能力较对照组明显降低(均P<0.05)。8505C、8305C细胞分别加入抑制剂GPNA和CB-839处理后,与未加抑制剂细胞比较,细胞体外增殖能力和c-myc蛋白表达明显降低(均P<0.05)。结论:下调SLC1A5和GLS2表达可有效抑制甲状腺癌8505C、8305C细胞的体外增殖、克隆形成及迁移能力。SLC1A5、GLS2靶向抑制剂可通过下调c-myc癌基因发挥其抗甲状腺癌细胞生物活性的作用。靶向Gln代谢可能成为甲状腺癌的潜在治疗策略。

miR-137通过靶向MCL1和谷氨酰胺转运SLC1A5调节肺癌细胞的铁死亡机制

目的 探讨miR-137通过靶向髓系白血病1蛋白(MCL1)和谷氨酰胺转运蛋白溶质载体家族A1成员(SLC1A)5调节肺癌细胞铁死亡的机制。方法 非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549从美国典型培养物保藏中心获得。培养基均补充有10%胎牛血清(FBS),在37℃的含5%CO_(2)的潮湿空气中孵育。培养细胞以进行miR-137载体转染,直至细胞融合度达到70%~80%。将培养细胞分为对照组、miR-137转染组和miR-137沉默组。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析细胞MCL1和SLC1A5、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4 mRNA表达。通过双重荧光素酶报告基因测定miR-137与MCL1和SLC1A的靶向作用。通过铁测定试剂盒测量每个细胞系中的Fe2+浓度。通过线粒体超氧化物(MitoSOX)指示剂测量了细胞中MitoSOX的产生。通过相应试剂盒检测活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。通过流式细胞仪检测细胞凋亡。通过Transwell法测定miR-137对细胞迁移、侵袭的影响。结果 miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组MCL1、GPX4和SLC1A5 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组MCL1、SLC1A5和GPX4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-137转染组显著降低了用Wt-SLC1A5和Wt-MCL1载体共转染的NSCLC细胞中的荧光素酶活性(P<0.05),而Mut-SLC1A5和Mut-MCL1模拟共转染荧光素酶活性酶无显著变化(P>0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著降低,线粒体相对膜电位显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著升高,线粒体相对膜电位显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组ROS和MDA浓度显著降低,GSH浓度显著升高(P<0.05),miR-137转染组较对照组ROS和MDA浓度显著升高,GSH浓度显著降低(P<0.05)。24、48和72 h时,miR-137转染组较miR-137沉默组和对照组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),72 h时miR-137沉默组较对照组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组细胞迁移、侵袭数量显著增多(P<0.05),miR-137转染组较对照组细胞迁移、侵袭数量显著减少(P<0.05)。结论 miR-137可以靶向调控SLC1A5和MCL1,诱导肺癌细胞铁死亡,从而促进细胞凋亡。

miR-924、SLC1A5在肺癌组织中的表达及其在预后评估中的价值

目的 探讨miR-924和溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在肺癌患者预后评估中的价值。方法 选取2018年2月—2019年2月南阳市中心医院肺癌患者97例,收集所有患者的临床资料,并收集癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>2 cm),检测miR-924、SLC1A5 mRNA和SLC1A5蛋白表达。采用Pearson相关分析评估miR-924与SLC1A5 mRNA的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线评估肺癌患者的生存情况。采用Cox回归分析评估肺癌患者预后不良的危险因素。结果 与癌旁组织比较,癌组织miR-924相对表达量降低(P<0.001),SLC1A5mRNA相对表达量升高(P<0.001)。癌组织SLC1A5蛋白阳性率显著高于癌旁组织(P<0.001)。癌组织miR-924表达与SLC1A5 mRNA表达呈负相关(r=-0.843,P<0.05)。根据癌组织miR-924相对表达量均值或SLC1A5蛋白的表达情况分别分为高表达组、低表达组和阳性组、阴性组。miR-924低表达组与高表达组之间、SLC1A5阳性组与阴性组之间分化程度、临床分期差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,miR-924高表达组累积生存率高于低表达组(Log-rankχ^(2)=5.453,P<0.05);SLC1A5阳性组累积生存率低于阴性组(Log-rankχ^(2)=9.259,P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期、miR-924低表达、SLC1A5蛋白表达阳性均是肺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 肺癌患者癌组织mi R-924和SLC1A5均呈异常表达,或可作为肺癌预后评估的生物标志物。

溶质载体家族6成员1通过调节PI3K/Akt信号通路磷酸化促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的探讨溶质载体家族6成员1(SLC6A1)对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法下载并综合分析数据集GSE125989和GSE100534,筛选差异基因;通过STRING数据库和Cytoscape 3.6.1软件构建差异基因的蛋白相互作用网络,并筛选hub基因;通过Ualcan和GEPIA数据库检测hub基因SLC6A1在乳腺癌中的表达及其对预后的影响;转染SLC6A1-siRNA干扰乳腺癌细胞MDA-MB-231中SLC6A1的表达;细胞划痕实验和Transwell实验检测乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的变化;基因集富集分析和Western blotting检测SLC6A1在乳腺癌中发挥作用的机制;采用SC79激活Akt通路并检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果共筛选出92个乳腺癌原位癌与转移瘤的差异基因,并确定Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、SLC6A1等20个hub基因;SLC6A1在乳腺癌组织中高表达(P<0.001),且与患者预后相关(P=0.01);SLC6A1表达被干扰后,乳腺癌细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05);SLC6A1表达降低可抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化(P<0.05);激活PI3K/Akt通路后SLC6A1-siRNA对乳腺癌细胞迁移和侵袭的抑制作用消失(P<0.05)。结论SLC6A1通过调节PI3K/Akt信号通路促进乳腺癌的侵袭和转移。

SLC1A5在结直肠癌中的作用及机制

目的研究溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在结直肠癌中的表达及与结直肠癌发病的关系。方法使用TIMER2和GEPIA2分析SLC1A5基因表达,通过UALCAN portal和HPA分析SLC1A5蛋白表达。利用UALCAN portal分析SLC1A5表达水平与临床病理参数的关系及结直肠癌中SLC1A5磷酸化蛋白的表达水平。通过Kaplan-Meier Plotter分析结直肠癌中SLC1A5表达水平与预后的关系。使用FunRich 3.1.3预测SLC1A5的转录因子并通过GEPIA2分析SLC1A5表达与转录因子的相关性。采用cBioPortal分析SLC1A5基因变异,TIMER2分析SLC1A5基因表达与免疫浸润之间的关系。通过STRING和GEPIA2获取与SLC1A5相关的基因并进行基因本体(GO)和京都基因和基因组数据库(KEGG)分析。通过GSCA分析SLC1A5表达与药物半数抑制浓度(IC_(50))的关系。结果SLC1A5信使RNA及蛋白在结直肠癌中高表达(P<0.05),SLC1A5表达水平与肿瘤分期及淋巴结转移明显相关(P<0.05)。但是SLC1A5表达水平与结直肠癌患者预后无明显相关性(P=0.088)。E2F转录因子1可正调控SLC1A5的表达(r=0.14,P=0.0083)。突变是结直肠癌中SLC1A5基因最主要的变异类型,而错义突变又是基因突变的主要类型。结肠癌中S503位点磷酸化水平无明显增强(P=0.102)。但是在直肠癌中肿瘤相关成纤维细胞的估计浸润值与SLC1A5的表达水平呈负相关(P=0.0249)。KEGG数据提示SLC1A5在肿瘤发病中的作用可能与耶尔森菌感染和炎症介质对瞬时受体电位通道的调节有关,GO富集分析数据进一步显示,这些基因大多与蛋白质代谢、外泌体、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性和氨肽酶活性有关。IC_(50)数据显示17-AAG、PD-0325901、Trametinib、BMS-345541、BMS-536924、SCH-79797、fluorouracil和pevonedistat可显著抑制SLC1A5基因表达(P<0.05)。结论SLC1A5在结直肠癌中高表达并与结直肠癌的发生发展密切相关,可作为结直肠癌治疗的潜在作用靶点。

SLC1A5协同TM4SF1通过mTOR信号通路调控食管鳞癌细胞迁移

目的探讨氨基酸转运载体溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的相关性,以及SLC1A5对ESCC细胞迁移的影响及潜在分子机制。方法采用TNM plot在线数据库分析SLC1A5基因在ESCC组织和正常组织中的表达情况。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测ESCC组织和癌旁组织中SLC1A5 mRNA表达情况;采用免疫组化(IHC)法检测SLC1A5蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理资料的相关性。分别构建SLC1A5过表达(SLC1A5-OE组)、四跨膜蛋白超家族成员1过表达(TM4SF1-OE组)、SLC1A5和TM4SF1共同过表达的Eca109细胞。采用细胞增殖试验、Transwell实验检测Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过免疫共沉淀(IP)实验证实SLC1A5和TM4SF1的相互作用;采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达水平。结果TNM plot数据库分析显示,ESCC组织中SLC1A5基因表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中SLC1A5 mRNA表达高于成对的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。IHC结果显示,SLC1A5蛋白在癌组织中高表达,并且与临床分期(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.029)显著相关。细胞增殖实验结果显示,SLC1A5-OE组和对照细胞(Con组)增殖能力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示,与Con组比较,SLC1A5-OE组细胞迁移及侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.01)。IP结果表明,SLC1A5与TM4SF1存在相互作用。WB结果显示,相对于SLC1A5-OE组或TM4SF1-OE组,p-mTOR、p-S6蛋白表达水平在SLC1A5和TM4SF1共同过表达的细胞中最高。Transwell实验证实,共同过表达SLC1A5和TM4SF1的ESCC细胞迁移能力最强。结论ESCC中SLC1A5呈高表达,且与患者临床分期、淋巴结转移显著相关,SLC1A5可能通过与TM4SF1相互作用,激活mTOR信号通路,进而促进ESCC细胞迁移。

代谢相关脂肪性肝病患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱关系研究

目的 分析代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者有机阴离子转运蛋白1B1(SLCO1B1)和载脂蛋白E(APOE)基因多态性与脂代谢紊乱的关系。方法 2018年8月~2021年8月我院诊治的MAFLD患者121例和同期健康体检者150例,常规检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用PCR-荧光探针法检测外周血SLCO1B1和APOE基因型。结果 MAFLD组血清TC、TG和LDL-C水平分别为(5.8±2.3)mmol/L、(2.9±1.4)mmol/L和(3.3±1.5)mmol/L,均显著高于健康人【分别为(4.8±1.2)mmol/L、(1.5±1.3)mmol/L和(2.6±1.1)mmol/L,P<0.05】;MAFLD组SLCO1B1基因*1a/*1a和*1a/*1b基因型频率分别为8.3%和35.5%,显著高于健康人的2.7%和23.3%(P<0.05),而*1b/*1b基因型频率为32.2%,显著低于健康人的46.0%(P<0.05);MAFLD组APOE基因ε3/3基因型频率和E3基因表型频率分别为69.4%和71.9%,显著高于健康人的56.7%和58.7%(P<0.05),而ε3/4基因型频率和E4基因表型频率分别为17.4%和18.2%,均显著低于健康人的29.3%和30.7%(P<0.05);26例SLCO1B1基因B型患者血清TC、TG和LDL-C水平分别为(6.4±1.2)mmol/L、(3.5±2.2)mmol/L和(3.8±0.8)mmol/L,均显著高于92例A型患者【分别为(5.5±1.3)mmol/L、(2.6±3.3)mmol/L和(3.0±1.2)mmol/L,P<0.05】或3例C型患者【分别为(4.6±0.3)mmol/L、(2.6±0.9)mmol/L和(2.5±0.2)mmol/L,P<0.05】;87例APOE基因E3型血清TG和LDL-C水平分别为(3.2±1.6)mmol/L和(3.4±1.1)mmol/L,显著高于12例E2型【分别为(2.7±1.8)mmol/L和(2.8±0.8)mmol/L,P<0.05】或22例E4型【分别为(2.3±0.7)mmol/L和(3.0±1.2)mmol/L,P<0.05】。结论 MAFLD患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱密切相关,值得深入研究。

基于TCGA数据库分析SLC5A1在胰腺癌中的表达及潜在促癌作用

目的基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析溶质载体家族5-成员1(solute carrier family 5-member 1,SLC5A1)在胰腺癌中的表达及其与临床病理、预后的相关性,探索其在胰腺癌发生、进展中的作用。方法利用GEPIA分析TCGA数据库中胰腺癌数据,比较SLC5A1在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达情况,同时利用LinkedOmics和GEPIA分析其在胰腺癌中表达与不同临床病理特征的相关性;利用cBioPortal和LinkedOmics分析胰腺癌中与SLC5A1表达相关的基因,并利用DAVID和KEGG进行信号通路聚类;探讨SLC5A1与胰腺癌不同基因亚型标志物表达的相关性。结果SLC5A1 mRNA表达在胰腺癌组织显著高于非胰腺癌组织(P<0.05)。在胰腺癌中与SLC5A1高表达相关的基因大多位于细胞膜和细胞核,负责蛋白和离子的结合,参与细胞生物功能、代谢调节,其高表达与葡萄糖摄取、糖酵解/糖异生、胰腺分泌等的基因信号通路呈正相关。SLC5A1的表达与胰腺癌异常分化的内分泌外分泌(aberrantly differentiated endocrine exocrine,ADEX)亚型的胰岛素(insulin,INS)、核受体亚家族5-组A-成员2(nuclear receptor subfamily 5-group A-member 2,NR5A2)和蛋白酶-丝氨酸-3(protease-serine-3,PRSS3)表达呈正相关,差异有统计学意义;与胰腺祖细胞型叉头框A3(forkhead box A3,FOXA3)、肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1-alpha,HNF1A)、叉头框A2(forkhead box A2,FOXA2)、肝细胞核因子1β(hepatocyte nuclear factor 1β,HNF1B)、胰十二指肠同源框因子-1(pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1)、肝细胞核因4-γ(hepatocyte nuclear factor 4-gamma,HNF4G)、肝细胞核因子4-α(hepatocyte nuclear factor 4-alpha,HNF4A)、多毛和增强子断裂1(hairy and enhancer of split 1,HES1)表达均呈正相关,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论SLC5A1在胰腺癌中高表达;其高表达与葡萄糖摄取、糖酵解、胰腺分泌的基因信号通路呈正相关,与胰腺癌祖细胞亚型及ADEX亚型密切相关。

过表达溶质载体家族1成员5和敲低慢病毒载体构建及稳定转染RAW264.7细胞株

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:构建小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体,以建立稳定转染的RAW264.7细胞株,为深入探讨SLC1A5在炎症中的作用提供实验基础。方法:根据SLC1A5基因序列设计合成引物并使用聚合酶链反应扩增该基因片段。将目的基因定向接入经Age I/Nhe I酶切的载体质粒GV492中构建重组慢病毒质粒,对阳性克隆进一步筛选后测序比对结果;pHelper1.0质粒载体、pHelper2.0质粒载体、目的质粒载体与293T细胞共同培养并转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定;在此基础上,通过体外培养RAW264.7细胞,确定嘌呤霉素工作质量浓度;不同滴度的慢病毒分别与RAW264.7细胞共同培养,根据荧光强度确定转染效率;用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测稳定转染细胞株的SLC1A5基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功;(2)过表达SLC1A5慢病毒的滴度为1×10~9 TU/mL,敲低SLC1A5慢病毒的滴度为3×10~9 TU/mL;(3)确定RAW264.7细胞嘌呤霉素工作质量浓度为3μg/mL;(4)过表达/敲低SLC1A5慢病毒转染RAW264.7细胞的最佳条件皆为HiTransG P转染增强液且感染复数值等于50;(5)过表达SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量明显上调,而敲低SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量显著下调。结果表明,成功构建了小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体并获得稳定转染的RAW264.7细胞株。

SLC1A5在结直肠癌中的表达及与其转移的关系

目的分析溶质载体家族1成员5(SLC1A5)蛋白在原发性结直肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中的表达情况及其与结直肠癌临床病理参数的关系。方法应用组织芯片和免疫组化的方法,检测80例原发性结直肠癌组织和35例癌旁正常组织中SLC1A5的表达,分析SLC1A5表达与结直肠癌临床病理参数的相关性。结果 SLC1A5在80例结直肠癌患者癌组织标本中的阳性表达率(88.75%)高于35例癌旁正常组织中阳性表达率(42.86%)(P<0.05)。SLC1A5高表达与结直肠癌患者是否存在远处转移有关(P<0.05)。但癌组织中SLC1A5的表达水平与患者性别、年龄、T分期、N分期和分化程度无明显相关性(P>0.05)。结论 SLC1A5可能是一个促进肿瘤远处转移的因子。

河北地区汉族心脑血管病患者ApoE和SLCO1B1基因多态性分析

目的分析河北地区汉族人群中心脑血管病患者ApoE和SLCO1B1基因多态性分布情况。方法以2018年6月至2019年10月于河北医科大学第一医院神经内科和心内科就诊的4193例心脑血管病患者为研究对象,利用聚合酶链反应(PCR)-荧光探针技术定性检测其外周全血基因组中ApoE和SLCO1B1基因多态性分布情况,分析基因多态性分布特点,比较不同性别之间基因型分布差异。结果4193例河北地区汉族心脑血管病患者的ApoE以及SLCO1B1基因多态性位点突变频率观察值符合Hardy-Weinberg遗传平衡;男女之间ApoE基因单核苷酸多态性位点388T>C、526C>T,以及SLCO1B1基因单核苷酸多态性位点388A>G、521T>C分布差异无统计学意义(P>0.05)。在ApoE基因的6种表型中,?3/?3所占比例最大,为68.57%(2875/4193);其他表型?3/?4、?2/?3、?2/?4、?4/?4、?2/?2占比依次为15.48%(649/4193)、12.81%(537/4193)、1.69%(71/4193)、0.98%(41/4193)和0.48%(20/4193);不同性别之间ApoE基因表型分布差异无统计学意义(P=0.223)。SLCO1B1基因的7种表型中,*1b/*1b、*1a/*1b的占比较大,分别为39.57%(1659/4193)和31.05%(1302/4193),其他表型*1b/*15、*1a/*1a、*1a/*15、*15/*15、*1a/*5占比依次为14.31%(600/4193)、7.20%(302/4193)、6.42%(269/4193)、1.43%(60/4193)和0.02%(1/4193);不同性别之间SLCO1B1基因表型分布差异无统计学意义(P=0.078)。结论河北地区汉族人群中心脑血管病患者ApoE和SLCO1B1基因多态性分布不均匀,且ApoE和SLCO1B1基因多态性分布与性别无关。

溶质载体家族2促进葡萄糖转运蛋白成员1 HaeⅢ基因多态性与糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨溶质载体家族2促进葡萄糖转运蛋白成员1 HaeⅢ(SLC2A1 HaeⅢ,g20882C>T)基因多态性与DN的关系。方法将380例T2DM患者分为DN组与T2DM组,采用PCRRLFP检测SLC2A1 HaeⅢ(g20882C>T)基因分型,探讨不同基因型患者与DN发病及相关指标的关系。结果 T2DM组与DN组CC、TT基因型比较,差异有统计学意义(P<0.05),C、T等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TT基因型患者胱抑素C(Cys-C)、Hcy、UAER低于CT、CC基因型患者(P<0.05),而eGFR高于CC、CT型患者(P<0.05)。CT基因型患者Cys-C、Hcy低于CC型患者(U=5.67、4.22,P<0.05),而eGFR高于CC型患者(U=4.31,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,CC基因型(OR=2.105,95%CI:1.928~8.117,P<0.05)及C等位基因频率(OR=1.832,95%CI:1.003~5.462,P<0.05)为DN的危险因素。结论 SLC2A1 HaeⅢ(g20882C>T)为DN易感基因,导致Hcy、Cys-C过表达,引起DN的发生发展。

云南省汉族肿瘤患者UGT1A1*6及SLCO1B1基因多态性分布

目的:探究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1基因( UGT1A1* 6)和溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1基因[ SLCO1B1( 388 A>G)]在云南省汉族肿瘤患者中的分布情况。方法:收集122例云南省汉族肿瘤患者外周血,采用数字荧光分子杂交技术对 UGT1A1* 6和 SLCO1B1( 388 A>G)进行基因分型,统计基因型频率和等位基因频率,分析不同临床特征间的基因型分布差异及不同人群间的基因型分布差异。结果: UGT1A1* 6基因分型位点的基因型分为野生型GG、突变杂合子GA及突变纯合子AA, SLCO1B1( 388 A>G)基因分型位点的基因型分为野生型AA、突变杂合子AG及突变纯合子GG;在云南汉族肿瘤患者中, UGT1A1* 6和 SLCO1B1( 388 A>G)两个基因位点的突变频率较高, UGT1A1* 6等位基因的频率为G (77.87%)和A (22.13%), SLCO1B1( 388 A>G)等位基因的频率为A(27.05%)和G(72.95%);云南汉族肿瘤患者的 UGT1A1* 6和 SLCO1B1( 388 A>G)基因型频率在性别、年龄、不同肿瘤部位及与其他肿瘤患者的分布差异均无统计学意义( P >0.05)。结论:云南省汉族肿瘤患者 UGT1A1* 6和 SLCO1B1( 388 A>G)两个基因位点的突变频率较高,与部分临床特征无关。

基于生物信息学分析SLC2A1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的探讨胰腺癌中溶质载体家族2促进葡萄糖转运蛋白成员1(Solute carrier family 2 facilitated glucose transporter member 1,SLC2A1)的表达及临床意义。方法检索CEPIA数据库中SLC2A1表达量,分析胰腺癌和正常对照组SLC2A1的差异。从TCGA数据库中下载胰腺癌SLC2A1 RNA数据及临床病理资料,利用R和SPSS软件分析SLC2A1表达与临床病理特征及预后的关系。Kaplan-Meier plotter和CEPIA数据库分析SLC2A1表达与生存时间的关系。结果CEPIA数据库显示胰腺癌组织中SLC2A1的表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。SLC2A1高表达与胰腺癌浸润深度显著相关(P=0.002),而与年龄、性别、病理分级、淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期的相关性均无统计学意义(P均>0.05)。Kaplan-Meier plotter结果显示SLC2A1低表达组的总生存期和无复发生存期均较高表达组明显延长(P均<0.05)。CEPIA显示SLC2A1低表达组的总生存期和无病生存期均较高表达组明显延长(P均<0.05)。COX多因素回归分析提示SLC2A1是胰腺癌患者总生存期的独立危险因素。结论SLC2A1在胰腺癌组织中高表达,与胰腺癌浸润深度、总生存期、无复发生存期、无病生存期显著相关,而且是胰腺癌患者总生存期的独立危险因素。

基于生物信息学分析SLC2A1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨胰腺癌中溶质载体家族2促进葡萄糖转运蛋白成员1(Solute carrier family 2 facilitated glucose trans-porter member 1,SLC2A1)的表达及临床意义.方法 检索GEPIA数据库中SLC2A1表达量,分析胰腺癌和正常对照组SLC2A1的差异.从TCGA数据库中下载胰腺癌SLC2A1 RNA数据及临床病理资料,利用R和SPSS软件分析SLC2A1表达与临床病理特征及预后的关系.Kaplan-Meier plotter和GEPIA数据库分析SLC2A1表达与生存时间的关系.结果 GEPIA数据库显示胰腺癌组织中SLC2Al的表达量明显高于正常对照组(P<0.05).SLC2A1高表达与胰腺癌浸润深度显著相关(P=0.002),而与年龄、性别、病理分级、淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期的相关性均无统计学意义(P均>0.05).Kaplan-Meier plotter结果显示SLC2A1低表达组的总生存期和无复发生存期均较高表达组明显延长(P均<0.05).GEPIA显示SLC2A1低表达组的总生存期和无病生存期均较高表达组明显延长(P均<0.05).COX多因素回归分析提示SLC2A1是胰腺癌患者总生存期的独立危险因素.结论 SLC2A1在胰腺癌组织中高表达,与胰腺癌浸润深度、总生存期、无复发生存期、无病生存期显著相关,而且是胰腺癌患者总生存期的独立危险因素.

lncRNA SLC16A1-AS1调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lncRNA SLC16A1-AS1表达水平,筛选最佳干预细胞系;通过荧光原位杂交实验、下拉实验、双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、TAGLN2与miR-532-3p的靶向调控关系。①将U251细胞分为小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+NC inhibitor组、si-SLC16A1-AS1+miR-532-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-532-3p mimics组、miR-532-3p mimics+pcDNA组、miR-532-3p mimics+TAGLN2组:检测U251细胞的增殖、迁移和侵袭变化;Western blot检测TAGLN2、E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平。②小鼠体内肿瘤形成实验:验证lncRNA SLC16A1-AS1对胶质瘤生长的影响。结果lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平升高(P<0.05);U251细胞FISH实验、下拉实验、双荧光素酶基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1,TAGLN2与miR-532-3p存在靶向调控关系;抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p可显著抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(P<0.05);抑制miR-532-3p表达或过表达TAGLN2可逆转抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p对U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用(P<0.05)。小鼠体内实验显示,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05)。结论lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平上调,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路,进而抑制胶质瘤的恶性进展。

溶质载体转运蛋白家族11成员1在结直肠癌中的表达及其与免疫微环境的关系

目的探讨溶质载体转运蛋白家族11成员1(SLC11A1)在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌免疫微环境的关系。方法从癌症基因组图谱数据库(TCGA)下载结直肠癌及癌旁正常组织的基因表达及临床数据,分析SLC11A1其在结直肠癌样本中的表达水平及与患者临床病理指标及预后的关系,采用配对样本t检验分析其表达差异,χ^(2)检验分析其与相关临床病理指标的关系,Kaplan-Meier法分析其与预后的关系。通过基因集富集分析(GSEA)探讨SLC11A1参与结直肠癌发生发展的可能机制,通过单样本基因集富集分析(ssGSEA)及Spearman相关性分析探索SLC11A1表达与结直肠癌不同亚型免疫细胞浸润的相关性。结果与正常组织比较,结直肠癌中SLC11A1高表达(1.207±0.694比0.276±0.166,t=8.281,P<0.01)。SLC11A1的表达水平与肿瘤浸润深度(χ^(2)=5.38,P<0.05)呈明显相关。SLC11A1高表达与患者不良预后有关(χ^(2)=6.43,P<0.05)。多因素分析结果表明SLC11A1表达[风险比(HR)=1.126,95%可信区间(CI):1.001~1.266,P<0.05]为影响结直肠癌预后的独立因素。基因集富集分析结果表明SLC11A1可能通过Toll样受体信号通路、自然杀伤细胞介导的细胞毒性以及细胞因子/细胞因子受体相互作用等参与结直肠癌发生发展。ssGSEA分析结果表明SLC11A1表达与DC细胞(r=0.526,P<0.01)、巨噬细胞(r=0.796,P<0.01)、中性粒细胞(r=0.679,P<0.01)等多种免疫细胞浸润相关。结论SLC11A1在结直肠癌中显著高表达,且与结直肠癌不良预后相关,可能作为结直肠癌的潜在预后标志物及治疗靶点。

氨基酸转运载体SLC1A5在胃癌组织中的表达及其临床病理学意义

目的:研究氨基酸转运载体溶质载体家族1成员5(Solute Carrier Family 1 Member 5, SLC1A5)蛋白在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌临床病理特征及预后的相关性。方法:收集进展期胃癌组织及对应癌旁组织90例,应用免疫组化技术检测SLC1A5在上述组织中的表达情况,并统计分析其表达与胃癌临床病理特征及预后的关系。同时通过基因数据库分析SLC1A5在胃癌组织和癌旁组织中表达情况及其对胃癌患者预后的影响。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中SLC1A5表达明显上调(P<0.0001)。数据库研究也显示SLC1A5在胃癌组织中表达明显上调(GSE 65801,P=0.0046;GSE 63809,P<0.0001;GSE 27342,P=0.0147)。胃癌组织中SLC1A5高表达与肿瘤大小(P<0.05)、肿瘤浸润深度(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)、TNM分期(P<0.05)和Ki-67(P<0.01)相关,而与年龄、性别、肿瘤位置及分化程度均无显著相关性(P>0.05)。胃癌组织中SLC1A5表达强度与患者预后相关,表达越高,患者预后越差(总体生存率,P=0.0131;无复发生存率,P=0.0293)。数据库分析也显示SLC1A5高表达可明显缩短患者的总体生存期(GSE 14210,P=0.011;GSE 22377,P=0.0015)和无进展生存期(GSE 14210,P=0.0095;GSE 22377,P=0.0012)。结论:SLC1A5蛋白表达在胃癌组织中明显上调,且与肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关。SLC1A5高表达与胃癌患者预后不良密切相关。

BLVRA基因rs699512和SLCO1B1基因rs4149015位点多态性与新生儿不明原因性高胆红素血症的关联性研究

目的探讨胆绿素还原酶A(BLVRA)rs699512与肝细胞溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(SLCO1B1)rs4149015位点基因多态性在新生儿不明原因高胆红素血症(HB)中的关联性。方法选取保定市儿童医院2019年2月至2022年2月新生儿不明原因HB患儿106例作为HB组,另选取同期健康新生儿106例作为健康组,检测并比较两组BLVRArs699512、SLCO1B1rs4149015位点基因多态性,对比不同基因型患儿血清总胆红素水平,分析两者基因多态性与新生儿不明原因HB易感性的关系及交互作用。结果BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点存在多态性,基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验,具有人群代表性;HB组与健康组BLVRA rs699512、SLCO1B1 rs4149015位点基因型分布差异有统计学意义,HB组BLVRA rs699512位点、SLCO1B1 rs4149015位点携带等位基因A频率高于健康组(P<0.05);HB组BLVRA rs699512位点基因型AA患儿血清总胆红素水平>基因型AG患儿>基因型GG患儿,SLCO1B1rs4149015位点基因型AA患儿血清总胆红素水平>基因型GA患儿>基因型GG患儿(P<0.05);Logistic回归分析,BLVRArs699512、SLCO1B1rs4149015位点基因型AA(OR=5.273、6.229;95%CI:1.714~16.221、1.936~20.041)、携带等位基因A(OR=4.377、5.550;95%CI:1.358~14.108、1.778~17.324)是新生儿不明原因HB的独立危险因素(P<0.05);BLVRA rs699512位点基因型AA与SLCO1B1 rs4149015位点基因型AA在新生儿不明原因HB中呈正向交互作用,OR为23.344,γ为1.654,为次相乘模型。结论新生儿不明原因HB患儿BLVRA rs699512位点基因型AA与SLCO1B1 rs4149015位点基因型AA具有正向交互作用,两者同时存在会显著增加易感性,可根据此建立早期防治体系。