蛋白激酶底物P36在人膀胱肿瘤中的表达及意义

应用ＳＰ免疫细胞化学方法，检测３０例膀胱肿瘤组织中Ｐ３６的分布及表达．结果显示，１６例表达阳性，总阳性率为５３．３％，它主要分布在胞浆内（占６２．５％）和胞膜上（３７．５％）．在肿瘤分化越差，浸润越深及复发和死亡的病例中，其阳性染色越强．结果提示，Ｐ３６做为细胞信号传导系统中的重要分子，与膀胱肿瘤的发生发展关系密切，是判定膀胱肿瘤恶度及预后的有意义的标记物．

小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B底物160在有氧运动促进葡萄糖转运体4转运中的作用

目的:通过研究有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌细胞蛋白激酶B(PKB/Akt)底物蛋白160(AS160)和葡萄糖转运体4(GLUT4)表达的影响,探讨AS160在调节细胞葡萄糖转运过程中的作用及有氧运动影响骨骼肌细胞葡萄糖代谢的生物学机制。方法:20只16周龄、雄性C57BL/6小鼠,随机分为安静组(NC,n=10)和运动组(NE,n=10);运动组进行为期6周、75%VO2max强度的有氧跑台训练。6周训练结束后24h,动物麻醉后取材。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨骼肌组织AS160、GLUT4基因表达;免疫印迹杂交(Western blot)和免疫荧光染色(IF)分别检测骨骼肌细胞AS160、pAS160-Thr642和GLUT4蛋白表达及定位。结果:与NC组相比,NE组小鼠骨骼肌细胞AS160 mRNA和蛋白表达差异无显著性,但pAS160-Thr642表达显著增加;NE组小鼠骨骼肌细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达较NC组显著增加,GLUT4向细胞膜迁移明显增加。结论:有氧运动显著增强骨骼肌细胞pAS160-Thr642的活性,增强GLUT4表达及促进GLUT4向细胞膜转移,促进骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。

Src抑制的蛋白激酶C底物在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的表达及其意义

目的研究Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)进程中的表达情况,探讨其在EAE病理过程中可能的功能及意义,为多发性硬化(multiple sclerosis,MS)和EAE提供新的治疗靶点。方法构建EAE大鼠模型,进行临床打分评估;用HE染色检测EAE大鼠脊髓组织的炎性浸润情况;用western blot检测SSeCKS的表达变化;用免疫组织化学观察SSeCKS在脊髓组织中的分布。结果髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)诱导单相的EAE过程:Lewis大鼠经MBP免疫后7～10d开始有临床症状,13～16d达到发病高峰,之后自发地恢复,至30d左右恢复到病前水平;EAE病程高峰期,大鼠脊髓炎性浸润情况显著;SSeCKS蛋白表达在EAE起始E1期显著增加,E3期达到高峰,之后开始下降,恢复期基本恢复到正常水平。结论本实验成功构建了Lewis大鼠的EAE模型;EAE病理过程中,SSeCKS蛋白表达水平发生变化,提示SSeCKS可能参与了EAE过程。

大鼠坐骨神经切断后Src抑制的蛋白激酶C的底物的表达变化

目的探讨大鼠坐骨神经切断后,Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在神经中的表达变化及其意义。方法制备成年SD大鼠坐骨神经切断模型。通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经切断后SSeCKS表达的时空变化。结果Western blotting显示,大鼠坐骨神经切断后,近端SSeCKS的表达逐步升高,伤后2d达到高峰,之后逐渐下降。远端SSeCKS表达于12h达到高峰,之后呈下降趋势。免疫组织化学方法结果表明,SSeCKS在神经断端处高表达,成簇状聚集;在远离断端处表达明显降低,分布亦较为均一。免疫荧光双标记结果显示,SSeCKS与S100、NF200及GAP43有部分共定位。结论大鼠坐骨神经切断后,可以引起SSeCKS的表达变化,其可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导,并与损伤后神经的再生及功能修复有关。

细菌脂多糖对培养星形胶质细胞中Src抑制的蛋白激酶C底物表达的影响

目的研究细菌脂多糖(LPS)对培养的大鼠星形胶质细胞中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)表达的影响。方法培养的星形胶质细胞随机分为空白对照组、LPS单一刺激组、LPS联合PKC抑制剂(RO-31-8220)刺激组。运用荧光定量PCR(Real time RT-PCR)、免疫印迹和免疫细胞化学法分析SSeCKS的表达变化和亚细胞定位。结果Real time RT-PCR显示,LPS可以上调SSeCKS mRNA水平,在作用浓度为100μg/L和1 mg/L时与对照组有显著差异(P<0.01)。Western blotting表明,当LPS作用浓度为100μg/L时,SSeCKS蛋白表达量明显上调;在此浓度作用下,SSeCKS表达于6 h达高峰并广泛磷酸化,至24 h其蛋白表达仍维持于较高水平。免疫细胞化学分析显示,正常情况下,SSeCKS散在分布于胞质,于胞膜略有浓集。在LPS单一刺激组,SSeCKS富集于核周;当LPS联合RO-31-8220共同作用时,SSeCKS的亚细胞定位与正常组无明显差异。结论在体外培养的星形胶质细胞中,LPS可诱导SSeCKS表达,上调其磷酸化水平,影响其细胞内定位。这些改变与PKC的功能相关。提示SSeCKS可能参与星形胶质细胞中炎症信号的转导。

大鼠坐骨神经损伤后Src抑制的蛋白激酶C的底物在背根神经节中的表达变化

目的:探讨大鼠坐骨神经损伤后,Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在背根神经节(DRG)中的表达变化及其意义。方法:制备成年SD(Sprague-Dawley)大鼠坐骨神经夹伤及切断模型。通过Western印迹法、Real-time PCR及免疫组织化学方法检测坐骨神经损伤后SSeCKS在DRG中表达的时空变化。结果:大鼠坐骨神经夹伤后6h,DRG中可检测到SSeCKS的表达并逐步升高,伤后12h达到高峰,2d后逐渐下降;而大鼠坐骨神经切断后DRG中SSeCKS的表达高峰发生在伤后2周,1d时最低;SSeCKS主要分布于DRG大、中、小神经元胞质;SSeCKS与NeuN、NF200以及GAP43存在共定位。结论:大鼠坐骨神经损伤后,引起DRG中SSeCKS的表达变化,其可能参与疼痛信号转导通路并与周围神经损伤后的再生有关。

长期饮酒后肺损伤大鼠Src抑制的蛋白激酶C底物的变化

目的探讨长期饮酒对大鼠内外源性肺损伤时Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)的影响。方法 SD雄性大鼠36只,随机分为单纯饮酒组、饮酒内源性肺损伤组、饮酒外源性肺损伤组、单纯饮水组、饮水内源性肺损伤组和饮水外源性肺损伤组,每组6只。采用实时PCR法测定肺组织SSeCKSmRNA表达变化,比较各组上述指标是否存在差异。结果单纯饮酒组肺组织SSeCKSmRNA表达较饮水组增多(P<0.05),饮酒内、外源性肺损伤各组较饮水内、外源性肺损伤各组增多显著(P<0.05),饮酒内、外源性肺损伤组之间表达无统计学差异(P>0.05)。结论 SSeCKS表达增加是长期饮酒引起急性呼吸窘迫综合征(actue respiratory distress syndrome,ARDS)的易感性增加和病情严重的可能机制之一。

Src抑制的蛋白激酶C的底物在脑组织中的表达

目的:探讨大鼠发育过程中,SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C的底物)在脑组织中的表达变化及意义。方法:通过Western blot,免疫组织化学法检测SSeCKS在脑组织中表达的时空变化及细胞定位。结果:SSeCKS在大鼠脑发育过程中存在明显的表达变化,在胎鼠和生后早期的SD大鼠中表达水平较高,尤以生后1周明显,成年以后显著降低,4周时最低。脑分区检测显示端脑、海马和间脑符合全脑检测结果。DAB显色示SSeCKS在脑组织中呈点状散在分布,免疫荧光双标记示SSeCKS与星形胶质细胞有部分共定位,与神经元无明显共定位。结论:SSeCKS在大鼠脑发育过程中存在时空变化,并且主要定位于星形胶质细胞。提示SSeCKS可能通过参与细胞骨架的调节和信号通路的活化影响大鼠胚胎发育过程中星形胶质细胞指导的神经元的迁移和轴突的生长。

血小板活化因子诱导大鼠肺微血管内皮细胞Src抑制的蛋白激酶C底物基因表达

目的研究血小板活化因子（PAF）对大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVEC）中Src抑制的蛋白激酶C底物（SSeCKs）mRNA表达的影响及其信号转导途径。方法体外培养RPMVEC，采用细胞原位杂交技术检测不同刺激条件下RPMVEC中SSeCKsmRNA的表达变化。结果正常RPMVEC中有少量SSeCKSmRNA表达，为棕黄色细颗粒状杂交信号，分布于胞质；用10^-10、10^-9、10^-8、10^-7mol／L的PAF分别孵育RPMVEc1．5h，SSeCKSinRNA表达随其浓度增加而升高（分别为0．0549±0．0007、0．0599±0．0018、0．0690±0．0018、0．0754±0．0019），与正常对照组（O．0368±0．0037）比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）；10^-7mol／LPAF刺激RPMVEC0．5、1．5、3、6、12、24h，SSeCKS mRNA表达水平于0．5h即显著升高（0．0710±0．0015），1．5h达峰值（0．0756±0．0017），之后逐渐下降，24h时（0．0439±0．0010）仍高于正常对照组（0．0382±0．0041，均P〈0．05）；10／lmol／L核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂吡咯烷二巯基氨甲酸（PDTc）预处理RPMVEC1h可显著下调PAF对SSeCKSmRNA的诱导效应（0．0497±0．0032比0．0719±0．0019，P〈0．05），而蛋白激酶C（PKC）抑制剂双吲哚基顺丁烯二酰亚胺（BIM）预处理RPMVEC0．5h则不影响此效应（0．0697±0．0021比0．0719±0．0019，P〉0．05）。结论PAF呈浓度和时间依赖的方式上调RPMVEC中SSeCKS基因转录；NF-κB信号通路而非PKC参与了PAF的诱导效应。

src抑制的蛋白激酶C底物调控内皮细胞分泌TNF-α

目的探讨8re抑制的蛋白激酶c底物（SSeCKS）对脂多糖（LPS）诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）分泌肿瘤坏死因子（TNF）-α的影响。方法体外培养Wistar大鼠PMVEC，按随机数字表法分组（n=4），10mg／LLPS刺激1h、3h、6h、12h、24h或0．1mg／L、1mg／L、10mg／LLPS刺激24h；蛋白激酶C抑制剂（BIM）预处理0．5h或50nmol／LSSeCKS-siRNA转染PMVEC48h后再加入10mg／LLPS孵育24h，酶联免疫吸附法检测细胞培养液上清TNF-α 量（ng／L）。采用SPSSl0．0软件进行分析，组间比较采用单因素方差分析，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果0．1、1、10mg／LLPS刺激PMVEC24h后的，TNF-α分泌量分别为（253．70±23．55）、（327．88±37．25）、（403．204-36．22）ng／L，均高于未刺激组（82．28±22．56）ng／L（均P=0．000）；10mg／LLPS刺激PMVEC后，TNF-α分泌量于1h升高（170．11±49．22）ng／L，6h达峰值（404．82±13．78）ng／L，刺激24h后仍维持高水平（395．67±36．23）ng／L，分别与未刺激组（84．60±23．61）ng／L比较：P=0．001，0．000，0．000；BIM预处理PMVEC后再给予LPS刺激，TNF-α分泌量（200．44±27．39）ng／L较LPS单独刺激（402．28±31．07）ng／L显著较少（P=0．000）；与LPS单独刺激比较（407．28±32．64）ng／L，SSeCKS-siRNA抑制SSeCKS表达后，LPS对PMVEC分泌TNF-α的诱导效应（195．20±13．28）ng／L也显著下降（P=0．000）。结论下调SSeCKS表达和蛋白激酶C活性可抑制LPS对PMVEC分泌TNF-α的诱导效应，从而减轻PMVEC的炎症反应。

高体积分数氧致新生大鼠肺组织毛细血管内皮细胞中Src抑制的蛋白激酶C的底物的表达及亚细胞定位变化

目的观察高体积分数氧(高氧)暴露时新生大鼠肺组织毛细血管内皮细胞中Src抑制的蛋白激酶C(PKC)的底物(SSeCKS)的表达及亚细胞定位的变化。方法出生12 h内大鼠128只按照随机数字表法分为4组:空气对照组、高氧暴露组、高氧暴露加蛋白激酶C抑制剂(R031-8220)组、高氧暴露加9 g/L盐水组。空气对照组置于空气中,余3组均置于常压高氧仓中,氧体积分数>950 mL/L,高氧暴露加R031-8220组自高氧暴露第1天起,腹腔注射5×10-2g/(kg.d)R031-8220,连续72 h;高氧暴露加9 g/L盐水组自高氧暴露第1天起,腹腔注射9 g/L盐水0.2 mL/(kg.d),连续72 h。于高氧暴露12、24、48和72 h时相点处死动物,在高氧暴露72 h行肺组织的病理学检查及肺湿/干质量比值(W/D)检测,应用免疫荧光双标法观察肺组织毛细血管内皮细胞SSeCKS的表达并通过IPP6.0软件对结果进行分析。采用SPSS13.0统计软件分析数据。结果高氧暴露组72 h时相点新生大鼠肺泡内可见大量红细胞,肺泡间隔增宽,粒细胞浸润;高氧暴露加R031-8220组新生大鼠肺组织病理改变较高氧暴露组明显减轻。与空气对照组比较,高氧暴露组W/D增加(t=9.223 P<0.01);与高氧暴露组比较,高氧暴露加R031-8220组W/D降低(t=5.050P<0.01)。72 h时相点其肺组织毛细血管内皮细胞SSeCKS的表达及亚细胞位置的变化:空气对照组SSeCKS主要分布在细胞膜;与空气对照组比较高氧暴露组SSeCKS表达增加,且有非常显著性差异(t=8.861 P<0.01),主要表达在细胞质中,高氧暴露加R031-8220组SSeCKS表达与高氧暴露组比较明显减少,有非常显著性差异(t=9.863 P<0.01),SSeCKS主要表达在细胞膜。结论新生大鼠肺组织毛细血管内皮细胞SSeCKS的变化参与高氧致新生大鼠肺组织毛细血管损伤的病理过程。

Src抑制的蛋白激酶C底物与炎性肺组织损伤

Src抑制的蛋白激酶C底物是一种新发现的细胞支架蛋白，亦是一种脂多糖反应蛋白，和炎症反应密切相关，可能参与了炎症所致的肺组织损伤。它和炎症所致肺血管损伤相关信号转导机制有着密切的关系，如蛋白激酶C、酪氨酸蛋白激酶、G蛋白耦联受体相关的信号通路，可能具有调节血管通透性的作用。通过对其的研究，能为急性肺损伤的防治提供新的理论依据。

β淀粉样蛋白(1-40)对痴呆老龄大鼠海马MARCKS mRNA表达及学习记忆的影响

目的:研究β-淀粉样蛋白(1-40)致痴呆老龄大鼠海马富含丙氨酸的豆蔻酰化蛋白激酶C的作用底物(MARCKS mRNA)的表达和学习记忆功能的影响。方法:将大鼠随机分为年轻组、老龄组、假手术组以及模型组,对老龄大鼠采用β-淀粉样蛋白(1-40)1次性侧脑室注射,建立痴呆模型。通过行为学以及RT-PCR检测,观察模型大鼠学习记忆功能以及海马MARCKS mRNA的变化。结果:行为学检测表明模型组的学习记忆功能明显低于正常组,模型组MARCKS mRNA表达明显高于老龄组、正常组及假手术组均明显降低(P<0.01)。结论:侧脑室注射β-淀粉样蛋白(1-40)可以明显增加老龄大鼠海马MARCKS mRNA的表达,并且导致老龄大鼠学习记忆障碍。提示MARCKS表达异常很可能是β-淀粉样蛋白(1-40)致神经元可塑性降低的关键环节。

PRAS40蛋白的研究进展

40 kD大小的富含脯氨酸蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)底物蛋白(prolin-rich Akt substrate of 40 kD,PRAS40)是2003年Roth等从胞质锚定蛋白14-3-3的伴侣蛋白及Akt激酶的底物中首先鉴定的。PRAS40的活化主要方式为磷酸化修饰,并具有多个磷酸化位点。PRAS40参与调控哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1),Akt,NF-κB和核糖体蛋白L11(ribosomal protein L11,RPL11)等多条信号通路,影响细胞的增殖、衰老、自噬、凋亡、外泌体分泌等。

LPS和TNF-α对血管内皮细胞SSeCKS的表达影响

目的:研究细菌脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)对牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C Kinase Substrate,SSeCKS)表达的影响和对细胞骨架结构的影响,探讨SSeCKS参与细胞骨架结构改变的可能机制。方法:应用LPS、TNF-α刺激体外培养的BPAEC,应用原位杂交、免疫印迹方法检测不同刺激条件下BPAEC中SSeCKS mRNA和蛋白的表达情况;免疫细胞荧光法观察LPS、TNF-α对内皮细胞中SSeCKS与纤维状肌动蛋白(F-actin)定位和结构的影响。结果:静息状态的BPAEC表达极少量的SSeCKS;经LPS刺激后,SSeCKS表达没有明显变化;而TNF-α以浓度和时间依赖的方式诱导内皮细胞SSeCKS表达增加;LPS和TNF-α刺激后,F-actin发生重构,且SSeCKS向核周、细胞膜纤维、板状伪足聚集;蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro-31-8220抑制LPS和TNF-α对内皮细胞F-actin和SSeCKS细胞内定位改变的影响。结论:TNF-α能够诱导内皮细胞SSeCKS表达增加,PKC参与LPS、TNF-α诱导内皮细胞F-actin的重构和SSeCKS重新分布,提示SSeCKS可能与LPS和TNF-α诱导内皮细胞F-actin的重构有关。

Hck、Lyn和SSeCKS在Kupffer细胞中的表达及意义

目的 :探讨Src家族相关激酶(Hck、Lyn)和Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSe CKS)在Kupffer细胞中的表达及意义。方法:应用Real-time PCR的方法检测正常Kupffer细胞和炎症Kupffer细胞中Hck、Lyn和SSe CKS的表达水平;用Western Blot的方法检测Hck、Lyn和SSe CKS在Kupffer细胞中的表达水平。构建非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠模型,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测Hck、Lyn和SSe CKS在大鼠肝脏组织Kupffer细胞中的表达水平。结果:RT-PCR显示Hck、Lyn和SSe CKS在小鼠Kupffer细胞中均有表达,用60%CCl4损伤液刺激后Hck、Lyn表达明显升高(P<0.01),SSe CKS表达减少,但差异无统计学意义(P>0.05);Western Blot结果显示在Kupffer细胞中Hck、SSe CKS表达较为明显,Lyn未见明显表达;IHC结果显示Hck、Lyn和SSe CKS在大鼠正常肝组织Kupffer中均有表达;在炎症组织中Hck、Lyn的表达明显增加,而SSe CKS的表达却显著减少。在炎症刺激后Hck、Lyn的表达与Kupffer细胞数呈正相关,而SSe CKS的表达与Kupffer细胞数呈负相关。结论:Hck、Lyn和SSe CKS参与了NASH的发生发展,可作为NASH炎症反应的潜在调控靶点;检测其表达有助于NASH炎症程度的判断,为临床上治疗NASH提供一定的客观依据。

SSeCKS对施万细胞TNF-α自分泌的作用

目的探讨Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)对施万细胞TNF-α自分泌的作用。方法予TNF-α处理施万细胞及siRNA干扰SSeCKS表达后,ELISA法检测培养基上清中TNF-α的含量,蛋白免疫印迹检测SSeCKS、磷酸化p38、磷酸化JNK、总p38、总JNK的表达。结果 TNF-α可以诱导施万细胞自分泌及SSeCKS表达的增加;干扰SSeCKS表达可以抑制TNF-α的自分泌及p38与JNK通路的激活。结论在施万细胞中,SSeCKS可能通过影响p38及JNK激活对TNF-α的自分泌发挥正向调控作用。

SSeCKS对牛肺动脉内皮细胞黏附和迁移的影响

目的:研究SSeCKS在细胞外基质成份诱导内皮细胞黏附和迁移中的作用。方法:用纤黏连蛋白(FN)诱导内皮细胞,以Western blotting分析SSeCKS表达量的变化;用Ro31-8220、calphostin C(蛋白激酶C抑制剂)预处理内皮细胞,观察对细胞黏附和迁移的影响,以共聚焦显微镜观察其对SSeCKS、F-actin和vinculin在细胞定位的影响。结果:FN能够显著诱导内皮细胞黏附和迁移,SSeCKS的表达量也随之增加,具有时间和剂量依赖性;经Ro31-8220、calphostin C处理细胞后,SSeCKS表达量明显减少,细胞黏附率和迁移细胞数也较处理前显著减少,SSeCKS由细胞质散在分布向核周聚集,且SSeCKS与F-actin、vinculin在细胞边缘共定位比处理前减少。结论:SSeCKS参与细胞外基质诱导内皮细胞黏附和迁移的过程,由其介导的PKC信号转导促进了这一过程,蛋白激酶C抑制剂可有效抑制此过程。

短期能量限制对正常大鼠胰岛素敏感性的影响

目的探讨短期能量限制(CR)对正常大鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。方法将24只F344/NSIc系雄性大鼠随机分为对照组(AL组)和能量限制组(CR组)各12只。AL组自由摄入食物及水,CR组限制食物摄入(不禁水)8周(饲料总摄入量为对照组的64%)。采用高胰岛素—正常血糖钳夹试验测定两组葡萄糖输注率(GIR)判断其胰岛素敏感性(GIR越高,胰岛素敏感性越高);比较两组体质量增加及内脏脂肪重量;Western blot法检测骨骼肌葡萄糖转运体4(Glu T4)、蛋白激酶B底物蛋白160(AS160)及磷酸化AS160(p-AS160)蛋白表达。结果CR组GIR明显高于对照组,体质量及内脏脂肪重量明显低于对照组;两组Glu T4、AS160及p-AS160蛋白表达无显著差异。结论短期CR可提高大鼠正常状态下的胰岛素敏感性,其机制可能与AS160上游的胰岛素信号转导蛋白有关。

AngⅡ诱导的肾损伤大鼠肾脏组织中SSeCKS的表达研究

目的建立由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾损伤大鼠模型,观察受损肾脏组织中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表达情况。方法 26只Wistar大鼠随机分为模型组(n=10)、假手术组(n=10)和正常对照组(n=6)。模型组和假手术组大鼠经皮下埋置药物缓释泵分别向体内灌注AngⅡ和等量生理盐水,释放速度均为200 ng/(kg.min);正常对照组大鼠不予任何处理。各组大鼠均于埋泵后第3天收集24 h尿样后处死,留取肾皮质组织。采用磺基水杨酸法进行24 h尿蛋白定量检测;透射电子显微镜观察大鼠肾脏组织超微结构变化;免疫荧光染色法观察和分析SSeCKS在大鼠肾脏组织中的表达部位及荧光强度;采用RT-PCR技术检测各组大鼠肾脏组织中SSeCKS mRNA的表达。结果模型组大鼠24 h尿蛋白定量明显高于假手术组和正常对照组(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现模型组大鼠肾小球内皮细胞皱缩、剥脱。免疫荧光染色分析结果显示:SSeCKS表达主要定位于肾小球基膜和部分系膜细胞区,模型组大鼠肾脏组织荧光强度显著高于假手术组和正常对照组。模型组大鼠肾脏组织中SSeCKS mRNA表达明显高于假手术组和正常对照组。结论通过皮下埋置AngⅡ药物缓释泵成功制作大鼠肾损伤模型,受损肾脏组织中SSeCKS的表达明显上调。