p38MAPK抑制剂对小鼠急性移植物抗宿主病的发生及小肠损伤的影响

目的探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580对小鼠异基因骨髓造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生及小肠损伤的影响。方法用60只BALB／c小鼠作为受鼠，分为正常对照组、单纯照射组、模型组和干预组，每组15只。单纯照射组、模型组和干预组小鼠均接受7．5Gyy射线全身照射。C57BL／6小鼠作为供鼠，取其骨髓细胞及脾细胞经尾静脉输注给接受照射后的受鼠，建立小鼠aGVHD模型。干预组为aGVHD模型小鼠给予SB203580干预，末次给药48h后处死。模型组小鼠为aGVHD模型仅给予等量二甲基亚砜。移植后观察小鼠的一般状态和生存情况。移植后10d取各组小鼠小肠组织，采用RT-PCR、Westernblot及免疫组化方法检测磷酸化p38MAPK、Fas、FasL的表达。结果干预组小鼠的体重下降程度为（13．00±0．50）％，轻于模型组的（25．00±0．75）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；干预组小鼠的aGVHD的临床评分（3．33±0．82）低于模型组（6．33±1．36），差异有统计学意义（P〈0．05）；干预组小鼠的小肠组织中磷酸化p38MAPK、Fas、FasL的相对表达水平分别为1．43±0．02、0．81±0．03、0．97±0．03，均显著低于模型组的1．76±0．05、1．52±0．04、1．48±0．04。结论SB203580可抑制aGVHD小鼠小肠组织中p38MAPK通路的活化，减少Fas和FasL信号通路所引起的细胞凋亡，有效减轻aGVHD的发生及靶器官小肠的损害。

P13K、P38MAPK及ERK1／2抑制剂对EGF诱导的血管平滑肌细胞迁移的实验研究

目的探讨P13K抑制剂Wortmannin、P38MAPK抑制剂SB202190及ERK1／2抑制剂PD98059对表皮生长因子（EGF）诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMCs）迁移的影响。方法以1％FCS血清孵育为对照，用EGF（10ng／ml）刺激，平行加入PD98059（PD组）、SB202190（SB组）和Wortmannin（WT），划痕损伤实验分析VSMCs迁移情况。结果划痕后24h，EGF组VSMCs迁移较对照组明显（P〈0．01），WT组、SB组及PD纽与EGF组相比都明显抑制VSMCs迁移（P〈0．01），但三个抑制剂组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；划痕后30h，EGF组VSMCs迁移仍较对照组明显（P〈0．01），WT组、SB组及PD组与EGF组相比则明显抑制VSMCs迁移（P〈0．叭），且三个抑制剂组之间差异有统计学意义，其中sB组较WT组和PD组抑制VSMCs的迁移更明显（P〈0．01）。结论EGF诱导VSMCs迁移可能通过P13K、P38MAPK及ERK1／2途径起作用，且P38MAPK途径作用更明显。

p38MAPK参与胰蛋白酶诱导的食管上皮细胞炎症

目的 研究p38 MAPK在胰蛋白酶（trypsin）诱导食管黏膜上皮细胞炎症反应中的机制.方法 原代培养食管黏膜上皮细胞,使用胰蛋白酶进行刺激,观察p38 MAPK磷酸化程度;给予p38 MAPK抑制剂SB203580（1、10 μmol/L）进行干预治疗,观察炎症相关指标的变化.结果 胰蛋白酶刺激剂量依赖地增加了p38 MAPK磷酸化,提示胰蛋白酶激活了食管黏膜上皮细胞中的p38MAPK通路;SB203580治疗抑制了胰蛋白酶诱导的炎症因子白介素8（IL-8）、环氧酶2（COX2）、肿瘤坏死因子α（TNFα）的mRNA表达水平,同时抑制了胰蛋白酶诱导的食管上皮细胞中诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达和细胞中一氧化氮（NO）的生成.结论 p38 MAPK通过调节IL-8、COX2、TNFα、iNOS等炎症相关因子参与了胰蛋白酶诱导的食管黏膜上皮损伤.

整合素β_1表达上调对非小细胞肺癌吉非替尼耐药的影响

目的:探讨整合素β1表达上调对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptortyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)吉非替尼抑制非小细胞肺癌细胞增殖以及肿瘤生长的影响。方法:将PC9、PC9/PCD(脂质体pcDNA3.1稳定转染空白对照株)和PC9/D6(脂质体稳定转染整合素β1细胞株)3株细胞经0.5μmol/L吉非替尼作用后,MTT法检测3株细胞的增殖情况。建立3株细胞的裸鼠移植瘤模型,设治疗组(3mg/kg吉非替尼)和对照组(1%Tween-80),观察肿瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线,称取瘤体质量,计算抑瘤率。免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中整合素β1、EGFR和pEGFR的表达情况。结果:转染了整合素β1的PC9/D6组增殖率明显高于PC9/PCD和PC9组(P<0.05)。吉非替尼对PC9/D6裸鼠移植瘤的生长抑制最不明显,抑制率是61.38%,与PC9/PCD和PC9组比较差异具有统计学意义(P<0.01);PC9/PCD和PC9组的抑制率分别是93.54%和95.16%。PC9/D6裸鼠移植瘤中整合素β1的表达水平高于PC9/PCD和PC9组(P<0.01)。EGFR在3组之间表达的差异无统计学意义。3组裸鼠移植瘤经吉非替尼治疗后,pEGFR表达水平均有不同程度的下降,但PC9/D6治疗组中pEGFR表达水平显著高于PC9/PCD和PC9组(P<0.01)。结论:无论体内或体外实验均显示,整合素β1表达上调可降低细胞株或移植瘤对吉非替尼的敏感性,提示整合素β1可能通过一种新的耐药机制参与了肿瘤细胞对EGFR-TKI的耐药。

甲状腺癌的分子靶向治疗进展

甲状腺癌的治疗方法主要以手术为主,但对于转移性的、侵袭性的和晚期的甲状腺癌患者来说,手术效果有限,而且碘放射治疗和化疗对这些恶性程度较高的肿瘤治疗效果往往不太理想,因此分子靶向治疗的出现则为这些患者带来了新的希望。本文将从甲状腺癌发病的分子机制,分子靶向治疗药物的作用机制、治疗效果和不良反应等方面作一综述。