腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是主要的细胞能量调节器。AMPK的活化将启动其级联效应,参与调节一系列机体能量代谢,如糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢等,最终影响畜禽肉的品质。因此,AMPK及其下游信号通路有可能...腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是主要的细胞能量调节器。AMPK的活化将启动其级联效应,参与调节一系列机体能量代谢,如糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢等,最终影响畜禽肉的品质。因此,AMPK及其下游信号通路有可能成为改善肉品品质的重要靶点。本文主要探讨AMPK的活化机制和级联效应,分析其对肉品品质的影响,从而为改善肉品品质提供理论依据。展开更多
目的观察丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂对弓形虫速殖子侵入细胞的影响。方法 IFA 荧光标记检测在不同剂量抑制剂作用下及在不同时间其宿主细胞感染速殖子的差异;SDS-PAGE 和 Western blot 分析 MA...目的观察丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂对弓形虫速殖子侵入细胞的影响。方法 IFA 荧光标记检测在不同剂量抑制剂作用下及在不同时间其宿主细胞感染速殖子的差异;SDS-PAGE 和 Western blot 分析 MAPK 的表达及其相对活性。结果在 PD980591μM 和10μM 作用下其感染率仅分别为对照组的18.00%(u=9.03,P<0.01)和14.80%(u=7.93,P<0.001);在 PD98059 50μM 作用下宿主细胞感染率在24h 和48h 分别为对照组的55.45%(u=3.58,P<0.01)和49.15%(u=4.08,P<0.01);与对照比较,其 MAPK 的相对活性明显下降,10μM 和50μM 组分别降低了43.03%(u=2.72,P<0.01)和78.79%(u=5.74,P<0.001)。结论 PD98059通过作用于 MAPK 信号转导途径而抑制速殖子侵入宿主细胞的过程。展开更多
目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度...目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞,诱导生成CIK细胞并鉴定;使用不同浓度PLK1抑制剂BI-2536处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率;以MDA-MB-231细胞作为靶细胞,CIK细胞为效应细胞,MTT法检测不同效靶比下细胞存活率;再以BI-2536联合CIK细胞处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法测定细胞内胱天蛋白酶(caspase)-3与caspase-9蛋白活性;构建TNBC裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、BI-2536组、CIK组和BI-2536+CIK组,按照分组对裸鼠进行处理后,每隔2d测量瘤体,21d后处死裸鼠称重瘤体,苏木精-伊红染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内细胞增殖标记物Ki-67及caspase-3、caspase-9蛋白阳性表达情况。结果与诱导前比较,诱导后CIK细胞亚群中CD3^(+)CD8^(+)和CD3^(+)CD56^(+)细胞比例均增高,CD3^(+)CD4^(+)细胞比例减少(P<0.05);不同浓度BI-2536作用下的MDA-MB-231细胞存活率均下降,不同效靶比的CIK细胞作用下的MDA-MB-231细胞存活率也下降(P<0.05);相较于单独BI-2536或CIK细胞处理,BI-2536和CIK细胞联合作用后细胞存活率下降,细胞凋亡率升高,caspase-3与caspase-9蛋白活性增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤模型实验发现,BI-2536和CIK细胞联合作用能够抑制肿瘤组织生长,肿瘤质量减小,肿瘤组织内细胞排列稀疏且增殖受抑制,Ki-67阳性率降低,caspase-3和caspase-9阳性率均增加(P<0.05)。结论使用PLK1抑制剂BI-2536联合CIK细胞能够在体外和体内抑制TNBC肿瘤细胞增殖,并提高对肿瘤细胞的杀伤作用,该机制可能与激活caspase依赖性途径有关。展开更多
文摘腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是主要的细胞能量调节器。AMPK的活化将启动其级联效应,参与调节一系列机体能量代谢,如糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢等,最终影响畜禽肉的品质。因此,AMPK及其下游信号通路有可能成为改善肉品品质的重要靶点。本文主要探讨AMPK的活化机制和级联效应,分析其对肉品品质的影响,从而为改善肉品品质提供理论依据。
文摘目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞,诱导生成CIK细胞并鉴定;使用不同浓度PLK1抑制剂BI-2536处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率;以MDA-MB-231细胞作为靶细胞,CIK细胞为效应细胞,MTT法检测不同效靶比下细胞存活率;再以BI-2536联合CIK细胞处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法测定细胞内胱天蛋白酶(caspase)-3与caspase-9蛋白活性;构建TNBC裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、BI-2536组、CIK组和BI-2536+CIK组,按照分组对裸鼠进行处理后,每隔2d测量瘤体,21d后处死裸鼠称重瘤体,苏木精-伊红染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内细胞增殖标记物Ki-67及caspase-3、caspase-9蛋白阳性表达情况。结果与诱导前比较,诱导后CIK细胞亚群中CD3^(+)CD8^(+)和CD3^(+)CD56^(+)细胞比例均增高,CD3^(+)CD4^(+)细胞比例减少(P<0.05);不同浓度BI-2536作用下的MDA-MB-231细胞存活率均下降,不同效靶比的CIK细胞作用下的MDA-MB-231细胞存活率也下降(P<0.05);相较于单独BI-2536或CIK细胞处理,BI-2536和CIK细胞联合作用后细胞存活率下降,细胞凋亡率升高,caspase-3与caspase-9蛋白活性增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤模型实验发现,BI-2536和CIK细胞联合作用能够抑制肿瘤组织生长,肿瘤质量减小,肿瘤组织内细胞排列稀疏且增殖受抑制,Ki-67阳性率降低,caspase-3和caspase-9阳性率均增加(P<0.05)。结论使用PLK1抑制剂BI-2536联合CIK细胞能够在体外和体内抑制TNBC肿瘤细胞增殖,并提高对肿瘤细胞的杀伤作用,该机制可能与激活caspase依赖性途径有关。
