栀子苷调节PI3K/AKT/mTOR信号通路在动脉粥样硬化形成过程中对Th17/Treg功能的影响

目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普通饲料,模型组和栀子苷组小鼠喂养高脂饲料。从第8周开始,栀子苷各剂量组每日灌胃栀子苷(25、50、100 mg/kg),连续8周。试验结束时,采用油红O染色评估主动脉及其根部动脉粥样硬化(AS)病变面积比。采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A和IL-10 mRNA表达;采用流式细胞仪分析脾脏中Th17和Treg细胞百分比;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:油红O染色病变显示,栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组病变百分比低于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平升高(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脾脏中Th17细胞百分比升高,Treg细胞百分比降低(P<0.05)。栀子苷处理恢复了AS小鼠Th17和Treg细胞的平衡。栀子苷抑制PI3K的表达及AKT和mTOR的磷酸化,MHY1485(mTOR活化剂)减弱了栀子苷对T细胞分化的影响。结论:栀子苷抗AS作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号引起的Treg细胞增多和Th17细胞减少有关。

温阳解郁方通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对抑郁小鼠前额皮质自噬的影响

目的探讨温阳解郁方对抑郁小鼠前额皮质自噬水平的影响及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/m TOR)信号通路的调控作用。方法仔鼠出生后随机分为空白对照组12只、模型组60只,模型组采用母婴分离联合慢性束缚应激制备抑郁小鼠模型,离乳后随机分为模型组,温阳解郁方低、中、高剂量(8.35、16.70、33.40 g·kg^(-1))组和氟西汀(2.6 mg·kg^(-1))组,于离乳第21天至束缚完成第111天给予药混饲料干预。采用糖水偏好、悬尾实验和旷场实验评价小鼠焦虑抑郁行为;免疫组化法检测小鼠前额皮质泛素结合蛋白(p62)的表达;免疫荧光组织化学法检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的表达;Western Blot和Real-time PCR法检测PI3K/Akt/m TOR信号通路及自噬相关指标的蛋白和m RNA表达水平。结果行为学实验中,与正常对照组比较,模型组小鼠糖水偏好度、中央区活动时间及中央穿越次数明显降低,悬尾不动时间明显升高(P<0.01);与模型组比较,温阳解郁方中、高剂量组和氟西汀组小鼠糖水偏好度、中央区活动时间及中央穿越次数明显增加,悬尾不动时间明显缩短(P<0.05,P<0.01)。免疫组化、免疫荧光、Western Blot和Real-time PCR实验中,与正常对照组比较,模型组小鼠PI3K/Akt/m TOR信号通路和p62的蛋白及m RNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)、Beclin-1和LC3的蛋白及m RNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳解郁方中、高剂量组和氟西汀组小鼠PI3K/Akt/m TOR信号通路和p62的蛋白及m RNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01),Beclin-1和LC3的蛋白及m RNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论温阳解郁方可能通过激活PI3K/Akt/m TOR信号通路,降低前额皮质神经元和胶质细胞自噬水平,进而发挥抗抑郁疗效。

壮医药线点灸通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调节MMP对膝骨性关节炎大鼠的治疗作用

目的通过观察壮医药线点灸对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠的治疗效果,探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调节基质金属蛋白酶(MMP)影响KOA炎症反应作用机制。方法将60只大鼠随机为对照组、模型组、药线组,雌雄各一半,每组20只,模型组和药线组膝关节注射木瓜蛋白酶,建立大鼠KOA模型,对照组注射等量生理盐水,药线组进行壮医药线点灸治疗。体外培养大鼠膝骨关节软骨细胞,并分为正常组、实验组和实验+LY组,苏木素-伊红(HE)染色观察各组关节软骨组织形态变化,用免疫蛋白印迹法检测大鼠软骨组织及细胞中磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、Akt、p-Akt、mTOR和MMP-13蛋白的相对表达量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测关节液中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量。结果对照组软骨细胞分布均匀,软骨层平整,滑膜结构完整;模型组软骨细胞减少且排列杂乱,软骨层不平整;药线组关节软骨边缘不平整,软骨细胞排列杂乱;药线组软骨细胞增生且分布不均,关节软骨表面不规则欠光滑。3组关节软骨关节液的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量差异均具有统计学意义(F=159.011,790.594,258.998;均P<0.05)。与模型组比较,对照组和药线组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著降低(均P<0.05),且与对照组比较,药线组TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著升高(P<0.05)。建模成功后,3组关节软骨组织的PI3K、p-Akt、mTOR和MMP-13蛋白表达水平差异均具有统计学意义(F=200.099,462.172,28.451,583.269;均P<0.05);与模型组比较,对照组和药线组PI3K蛋白、p-Akt蛋白和mTOR蛋白的相对表达量均显著升高(均P<0.05),MMP-13蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),且与对照组比较,药线组PI3K蛋白、p-Akt蛋白和mTOR蛋白相对表达量均显著降低(均P<0.05),MMP-13蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。3组关节软骨细胞的PI3K、p-Akt、mTOR和MMP-13蛋白表达水平差异均有统计学意义(F=223.826,137.457,30.455,273.428;均P<0.05),与正常组比较,实验组和实验+LY组PI3K、p-Akt和mTOR的蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05),MMP-13蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);且与实验组相比较,实验+LY组PI3K、p-Akt和mTOR的蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05),MMP-13蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05)。结论壮医药线点灸有效抑制炎症反应,其作用机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路调节MMP-13的表达有关。

PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂在肾癌治疗中的应用进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路是细胞内重要的信号转导通路之一,可以调节细胞生长、分化、迁移、存活、血管生成和代谢,并参与多种恶性肿瘤的发生发展。肾癌(RCC)作为泌尿系统常见的恶性肿瘤,有较高的转移率,且对放化疗具有明显的耐受性,随着肿瘤分子生物学的发展,肾癌靶向生物治疗逐渐成为研究的热点。PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂对RCC的疗效显著,以该信号通路为靶点的RCC药物主要为PI3K抑制剂,Akt抑制剂和mTOR抑制剂,这些药物可通过抑制信号通路的异常激活,阻断肿瘤细胞的增殖和生长,诱导细胞凋亡,并抑制肿瘤的侵袭和血管生成。而PI3K、mTOR双重抑制剂虽然处于临床试验阶段,但是其在RCC治疗的研究中表现出更可靠的前景性。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫大鼠Cajal间质细胞的影响

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠的治疗作用机制。方法:将105只大鼠随机选取15只作为空白组,制备DGP大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、蚕沙提取物高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g·kg^(-1))及莫沙必利组(1.5 mg·kg^(-1)),每组12只,灌胃4周。检测大鼠胃排空率、随机血糖,苏木素-伊红(HE)染色观察胃窦部形态变化,免疫组化分析c-Kit表达,原位末端标记法(TUNEL)染色观察Cajal间质细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组胃排空率显著降低(P<0.01),胃窦部腺体结构破坏,c-Kit表达显著减少(P<0.01),Cajal间质细胞(ICC)凋亡增加;与模型组比较,蚕沙提取物高、中、低剂量组及莫沙必利组胃排空率均显著升高(P<0.01),胃窦腺体结构逐渐紧密,ICC凋亡减少,其中蚕沙提取物高剂量组c-Kit表达明显升高(P<0.05)。经Western blot检测,与空白组比较,模型组p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K及p-mTOR/mTOR蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.01),蚕沙提取物中、低剂量组及莫沙必利组p-PI3K/PI3K蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),蚕沙提取物低剂量组p-mTOR/mTOR蛋白表达降低(P<0.05)。在随机血糖方面,与空白组比较,模型组随机血糖显著升高(P<0.01);与模型组比较,蚕沙提取物高、中剂量组随机血糖明显降低(P<0.05);与莫沙必利组比较,蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.05),蚕沙提取物高、中、低剂量组p-PI3K/PI3K蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:蚕沙提取物可提高DGP大鼠胃排空率、减轻ICC的凋亡,同时降低随机血糖,其中蚕沙提取物高剂量组抑制ICC凋亡疗效显著,其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

长链非编码RNA及其相关信号通路在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌(HCC)是一种常见的恶性肿瘤,其发病机制尚不明确,但发病率高。大多数患者在癌症晚期时确诊,因此治疗手段和治疗药物的选择有限,整体预后较差。HCC的发病可能涉及遗传学和表观遗传学改变,在HCC中Wnt、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Janus激酶/信号转导及转录活化因子(JAK/STAT)等信号通路异常激活,并参与了肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、耐药等。部分肝脏差异性表达的长链非编码RNA(lncRNA)参与HCC中Wnt、PI3K/Akt/mTOR、JAK/STAT信号通路的表达调控且涉及多种机制,深入研究lncRNA与相关信号通路的作用对于HCC治疗及预测有重要作用。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨炙甘草汤抗大鼠MIRI致室速和室颤的作用机制

目的:通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨炙甘草汤干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常(室速和室颤)的作用及其机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,炙甘草汤低、中、高剂量组(11.43,22.86,45.72 g·kg^-1),稳心颗粒组(2.43 g·kg^-1),连续给药干预10 d。末次给药2 h,采用结扎冠状动脉左前降支法制备大鼠MIRI模型,记录心电图的变化。造模成功后采集血液及心脏组织,检测血清中肌酸肌酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)及丙氨酸氨基转移酶(AST)的含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌肌钙蛋白(CtnI)的含量;免疫组化法检测心肌PI3K,Akt,mTOR的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3),自噬标志物Beclin1和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达及磷酸化p-PI3K,p-Akt,p-mTOR的水平。结果:模型组大鼠100%发生室速,91.67%发生室颤;与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,AST以及CtnI的含量显著升高(P<0.01),心肌组织中PI3K,Akt,mTOR表达显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin1的相对表达量显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR显著降低(P<0.01);与模型组比较,炙甘草汤高剂量组室速、室颤发生率显著降低(P<0.01),较其他给药组持续时间短(P<0.01);炙甘草汤高剂量组CK,LDH,AST水平及CtnI含量显著降低(P<0.01);炙甘草汤给药组的PI3K,Akt,mTOR的表达随剂量的增加而显著降低(P<0.01);LC-3,Beclin1的表达随炙甘草汤各剂量组的增加有不同程度地下降(P<0.01),而PI3K/Akt/mTOR相关蛋白表达比值明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:炙甘草汤预处理能使异常升高的心肌酶CK,LDH,AST,CtnI降低,抑制细胞的过度自噬,上调PI3K,Akt和mTOR的表达,说明炙甘草汤抗MIRI致心律失常的作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

莪连颗粒对胃癌大鼠胃组织自噬及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨莪连颗粒对胃癌大鼠胃组织自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、莪连颗粒组和胃复春组。除正常组常规饲养外,模型组、莪连颗粒组及胃复春组使用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合法诱导构建胃癌大鼠模型,并分别予以生理盐水、莪连颗粒水溶液(3.240 g·kg(-1))及胃复春水溶液(0.390 g·kg(-1))灌胃,连续48周。剖腹取胃,肉眼观察胃大体改变,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胃组织微管相关蛋白1轻链3β(LC3B),Beclin1,p62,PI3K,Akt,mTOR mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃胀大,胃壁变薄,胃黏膜色泽苍白,皱襞萎缩浅平,走行紊乱,可见结节及赘生物;与模型组比较,莪连颗粒组大鼠胃胀大减轻,胃壁变薄改善,胃黏膜色暗,皱襞减少,走行尚规整,偶见细颗粒状结节。HE染色显示,与正常组比较,模型组大鼠胃组织腺体排列拥挤紊乱,形态多样,细胞形态不一,胞浆嗜碱性,核大深染不规则,可见核分裂像,黏膜肌层浸润破坏;与模型组比较,莪连颗粒组大鼠胃组织腺体排列尚规整,少部分可见轻度异型细胞。与正常组比较,模型组大鼠胃组织LC3B,Beclin1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05),PI3K,p62,Akt及mTOR mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,莪连颗粒组胃组织LC3B,Beclin1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),PI3K mRNA及p62,Akt,mTOR mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:莪连颗粒可改善胃癌大鼠胃组织细胞异型性,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进自噬相关。

中药单体调控PI3K/Akt/mTOR信号通路治疗骨肉瘤的研究进展

骨肉瘤是临床上常见的一种原发性骨恶性肿瘤,具有肿瘤异质性高,预后差,易发生病变局部侵袭和远处转移及病死率高的特点。新辅助化疗联合保肢术为目前治疗骨肉瘤的主要治疗手段,虽然通过此种治疗方法有效地降低了骨肉瘤患者的致残率和致死率,但随着化疗技术的应用,长时间化疗药物的使用使得骨肉瘤细胞对其产生耐药作用,降低了肿瘤细胞对药物的敏感度,使得此治疗方式具有了一定的局限性。近年来,随着中医药抗肿瘤的发展和进步,中医药以其治疗效果明显,不良反应少等优势受到了广泛的关注。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路作为经典的癌症信号通路,在骨肉瘤细胞中被异常激活,通过影响肿瘤细胞的周期、抑制肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞的自噬及促进肿瘤新生血管的生成,影响骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和转移等活动。临床研究发现,中药单体可以通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的活性,对骨肉瘤细胞的增殖、凋亡、自噬及新生血管的生成等方面产生作用,发挥抑制骨肉瘤组织和细胞发展的作用,并且能高效的逆转肿瘤细胞对抗癌药物的多药耐药。该文将从中医对骨肉瘤的认识和经验积累,及中药单体调控PI3K/Akt/mTOR信号通路在治疗骨肉瘤疾病的研究进展作一综述,以期为中医药治疗骨肉瘤疾病的应用提供参考。

桦木酸通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导人结肠癌细胞SW620凋亡及自噬

目的:研究桦木酸对人结肠癌细胞SW620凋亡和自噬的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,确定最佳给药时间及给药浓度,用于后续实验;设置空白组、桦木酸低、中、高浓度组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察桦木酸对SW620细胞形态的影响。采用Annexin-V/碘化丙啶(PI)双染法检测SW620细胞凋亡率。分别采用Hoechst33258染色及细胞自噬染色(MDC)观察细胞凋亡和自噬体发生情况。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3),微管相关蛋白Ⅰ轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、p62、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果:桦木酸以浓度、时间依赖性的方式抑制SW620、HT29、HCT116细胞的活性;与桦木酸给药24 h比较,W620、HT29、HCT116细胞给药48 h细胞活性明显降低(P<0.05,P<0.01),给药48 h的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),其中SW620细胞给药48 h的IC;最小。HE染色、Hoechst33258染色显示,桦木酸组可见浓度依赖性细胞凋亡;MDC染色可见细胞自噬体数量增加。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与空白组比较,桦木酸低、中、高浓度组Bax、Caspase-9、cleaved Caspase-3、LC3Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),桦木酸中、高浓度组Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.01);桦木酸低、中、高浓度组p62、p-Akt、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:桦木酸对SW620细胞活性有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路从而诱导人结肠癌细胞SW620的凋亡及自噬有关。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬探讨当归四逆汤对痛风性关节炎大鼠的影响

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路,探讨当归四逆汤对痛风性关节炎(GA)大鼠自噬水平的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1))和当归四逆汤低、中、高剂量组(6.54、13.08、26.16 g·kg^(-1)),每组10只,并分别给予相应药物灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。于第5天给药1 h后向各组(正常组除外)大鼠右侧踝关节注射尿酸钠混悬液(50 g·L^(-1))建立GA模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。观察大鼠踝关节肿胀情况;测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β水平;观察踝关节病理形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PI3K、Akt、m TOR、LC3、Beclin-1、p62 m RNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀指数显著升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P<0.01),踝关节滑膜组织可见明显炎性细胞浸润和纤维组织增生,滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p62蛋白表达显著升高(P<0.01),PI3K、Akt、m TOR、p62 m RNA表达显著升高(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 m RNA表达降低(P<0.01)。与模型组比较,当归四逆汤中、高剂量组大鼠关节肿胀明显减轻(P<0.05);血清中TNF-α、IL-6、IL-1β表达量显著明显降低(P<0.05);踝关节滑膜组织未见明显炎性细胞浸润,纤维组织增生减轻;滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p62蛋白表达量均明显降低(P<0.05),PI3K、Akt、m TOR、p62 m RNA表达量亦明显降低(P<0.05),而LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 m RNA表达量均明显上升(P<0.05)。结论:当归四逆汤可以抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路,提高大鼠滑膜组织自噬水平,改善痛风性关节炎,并且以高剂量效果最佳。

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨补肾通络方对血管性痴呆大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的:探讨补肾通络方对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经元突触可塑性的影响及其作用机制研究。方法:选用SPF级SD大鼠,采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立VD大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组,补肾通络方高、中、低剂量组,胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组,并设假手术对照组,分别给予对应的药物灌胃,1次/d,连续4周;其中补肾通络方高、中、低剂量组的灌胃剂量分别为3,1.5,0.75 g·kg^(-1),IGF-1组灌胃剂量20μg·kg^(-1),模型组和假手术组给予同体积的生理盐水灌胃。末次灌胃结束后,采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,原位末端标记法(TUNEL)检测海马神经元细胞凋亡情况,高尔基染色法(Golgi)观察海马神经元突触形态及树突棘数量变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),突触素(SYP)及淀粉样前体蛋白(APP)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数明显减少(P<0.05),细胞凋亡数目明显增多(P<0.05);树突棘数量明显减少(P<0.05);PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显减少,APP表达明显增多(P<0.05);与模型组比较,补肾通络方组,IGF-1组逃避潜伏期、游泳路程明显缩短,撤除平台后跨越原平台次数明显增多(P<0.05),细胞凋亡数目明显减少(P<0.05);PI3K,Akt,mTOR,SYP蛋白表达明显增多,APP表达明显减少(P<0.05);与IGF-1组比较,在大鼠逃避潜伏期、游泳路程、撤除平台后跨越原平台次数,细胞凋亡数目,树突棘数量,PI3K,Akt,mTOR,SYP,APP蛋白表达等,补肾通络方高剂量组差异均无统计学意义;补肾通络方中、低剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾通络方能够改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR自噬通路,改善海马神经元细胞突触可塑性有关。

温胆汤通过调控PI3K/Akt/mTOR通路介导的脂肪细胞自噬对肥胖痰湿证炎症状态的影响

目的:观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠脂肪细胞炎症因子、自噬活性标志物及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路关键分子蛋白表达的影响,探讨肥胖痰湿证炎症状态形成的物质基础及温胆汤的干预机制。方法:将126只SD大鼠随机分成2组,即空白组16只和造模组110只,空白组喂养基础饲料,造模组喂养高脂饲料建立肥胖痰湿证动物模型,共8周。造模成功后,视体质量情况,按顺序淘汰体质量过轻者,遴选出48只肥胖大鼠,随机分为模型组、奥利司他组(32.40 mg·kg^(-1))、雷帕霉素组(2 mg·kg^(-1))、温胆汤低、中、高剂量组(4.45、8.90、17.80 g·kg^(-1)),每组8只;另在空白组大鼠中随机选取8只设为正常组,各用药组按剂量(以生药量计算)给予灌胃,模型和正常组给予等体积蒸馏水灌胃,每天1次,共6周。检测或计算大鼠体质量、Lee’s指数、脂体比和肥胖率,采用免疫组化二步法检测脂肪细胞自噬活性标志物动物自噬启动蛋白1(ULK1)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、人自噬相关蛋白5(Atg5)、p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脂肪细胞炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、IL-4、IL-10、IL-13和转化生长因子(TGF)-β的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脂肪细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子classⅠ-PI3K、磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)、Akt、mTORC1、ULK1、结节性硬化症(TSC)1、TSC2的表达。结果:与空白组比较,造模组体质量和Lee’s指数显著升高(P<0.01),肥胖率>20%,有形体肥胖、活动度下降,食欲下降,皮毛无光泽、蓬松,便溏,对外界反应能力下降,饮水量减少等痰湿证表现,与正常组比较,模型组体质量、Lee’s指数、脂体比、脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达、促炎和抗炎细胞因子水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),脂肪细胞classⅠ-PI3K、PIP3、Akt、mTORC1、TSC1、TSC2蛋白表达显著下降(P<0.01),但ULK1表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各用药组体质量、脂体比、脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1、IL-4、IL-13水平明显降低(P<0.05,P<0.01),且雷帕霉素组、温胆汤中、高剂量组IL-10、TGF-β水平显著降低(P<0.01),奥利司他组TGF-β的表达显著降低(P<0.01),信号通路关键分子蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),但ULK1显著降低(P<0.01)。与雷帕霉素组比较,温胆汤各剂量组脂肪细胞所有自噬活性标志物蛋白表达显著升高(P<0.01),温胆汤低剂量组炎性因子(除TNF-α外)含量明显升高(P<0.05,P<0.01),信号通路关键分子蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),温胆汤中剂量组炎性因子(除IL-16、MCP-1、IL-10外)含量明显升高(P<0.05,P<0.01),温胆汤中、高剂量组信号通路各关键分子蛋白除PI3K外表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与奥利司他组比较,温胆汤低、中剂量组脂肪细胞自噬活性标志物蛋白表达显著升高(P<0.01),温胆汤低剂量组IL-6、IL-4、TGF-β含量显著升高(P<0.01),所有信号通路关键分子蛋白表达显著降低(P<0.01),温胆汤中剂量组IL-4含量显著升高(P<0.01),信号通路关键分子蛋白除PI3K外表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),温胆汤高剂量组体质量、自噬活性标志物ULK1、LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),信号通路关键分子PIP3、mTORC1、TSC1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),而自噬活性标志物Beclin1、Atg5蛋白、炎性因子TNF-α、IL-13含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:肥胖痰湿证炎症状态的形成与PI3K/Akt/mTOR通路介导的脂肪细胞自噬密切关联,且温胆汤可有效干预肥胖痰湿证大鼠的慢性炎症状态,其作用机制可能与调控该信号通路进而改善脂肪细胞自噬有关。

二十五味鬼臼丸激活PI3K/Akt/mTOR介导的自噬缓解去势大鼠骨质疏松作用

目的:探讨二十五味鬼臼丸通过激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制过度自噬防治绝经后骨质疏松(PMOP)症的作用机制。方法:将雌性SD大鼠通过手术去势,随机分为假手术(Sham)组、手术(OVX)组、二十五味鬼臼丸(GJ)组、盐酸雷洛昔芬(RLX)组,每组10只。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、比色法检测血清中雌激素、骨代谢标志物和胫骨组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,流式细胞术检测骨髓间充质干细胞内活性氧(ROS)水平,马松(Masson)染色观察胫骨近端病理变化,微计算机断层扫描技术(Micro-CT)观察胫骨微结构参数变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胫骨组织中自噬效应蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、微管相关蛋白5(Atg5)、PI3K、Akt、mTOR的表达情况。结果:与Sham组比较,OVX组大鼠血清雌二醇(E_(2))、钙离子(Ca^(2+))及骨组织T-SOD、GSH-Px、PI3K、Akt、mTOR mRNA明显下降(P<0.05,P<0.01);胫骨内骨密度(BMD)、骨表面积和骨体积比(BS/BV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁连接性(Con)明显下降(P<0.05,P<0.01),骨骺生长板较薄,骨髓腔内充满脂肪空泡;磷(P)、MDA、ROS和Beclin1、LC3、Atg5 mRNA、蛋白水平及骨小梁分离度(Tb.Sp)明显升高(P<0.05,P<0.01)。与OVX组比较,GJ、RLX组大鼠血清E_(2)、Ca^(2+)及骨组织SOD、GSH-Px、PI3K、Akt、mTOR mRNA水平明显上升(P<0.05,P<0.01);胫骨内BMD、BS/BV、Tb.Th、Tb.N、Con明显升高,骨骺生长板相对增厚,骨髓腔内脂肪空泡明显减少(P<0.05,P<0.01);P、MDA、ROS、Beclin1、LC3、Atg5 mRNA、蛋白及Tb.Sp水平明显降低(P<0.05,P<0.01);p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR信号通路,在OVX组中显著降低(P<0.01),在GJ、RLX组中显著增高(P<0.01)。结论:二十五味鬼臼丸降低氧化应激抑制自噬,防治绝经后骨质疏松,其机制可能激活PI3K/Akt/mTOR信号通路从而抑制自噬有关。

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护作用机制

目的:观察助卵汤对环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢储备功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分为正常组10只,模型组50只,模型组采用环磷酰胺(第1天50 mg·kg^(-1)负荷剂量+第2~15天8 mg·kg^(-1)小剂量维持)腹腔注射进行造模,造模成功后随机分为模型组、阳性药物补佳乐组(0.1 mg·kg^(-1)·d^(-1))、助卵汤低、中、高剂量组(14、28、56 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,模型组与正常组予以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续给药21 d。检测各组大鼠动情周期、体质量,计算卵巢脏器指数与子宫脏器指数,苏木素-伊红(HE)染色检测卵巢组织病理情况及卵巢切面各级卵泡计数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清抗苗勒激素(AMH)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抑制素-B(INH-B)激素含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达,免疫组化检测大鼠卵巢组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,体质量及卵巢脏器指数与子宫脏器指数减少,原始卵泡数量减少,次级卵泡和闭锁卵泡数量增多,FSH升高(P<0.01),LH升高(P<0.05),AMH水平下降(P<0.05),卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均降低(P<0.01),LC3B蛋白表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,补佳乐和助卵汤各剂量组上述指标均改善,AMH含量升高(P<0.05),FSH降低(P<0.05),LC3B蛋白表达量显著降低(P<0.01),PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均有升高趋势,且补佳乐组和助卵汤低、中剂量组升高差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:助卵汤可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制卵巢颗粒细胞过度自噬的发生,从而逆转造模对大鼠卵巢储备功能的影响。

中药干预mTOR信号通路防治骨质疏松症研究进展

骨质疏松症(OP)是一种老年人多见的全身性骨骼疾病,其病理特征是骨流失、骨微结构退变等,其临床上多表现为骨骼脆性增加、骨痛等症状。同时,OP会因其引起的骨骼高脆性而增加骨折风险,最终导致OP患者终身残疾或死亡,给患者及其家庭带来了沉重的经济负担和心理负担。既往研究发现,OP发病机制极其复杂,与成骨细胞增殖与分化、破骨细胞活性与功能的障碍和自噬激活的异常等众多因素相关。近年来,国内外研究发现,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)相关信号通路参与骨稳态的调节,可通过调控成骨细胞增殖与分化、破骨细胞功能、激活细胞自噬而促进骨形成、改善骨代谢和骨微结构,在OP防治中发挥着至关重要的作用。此外,中医药防治OP历史悠久、疗效明确,且具有作用靶点多、不良反应小、来源广泛的特点和优势。因此,该文通过检索和查阅国内外最新研究报道,简略阐述了mTOR相关信号通路在OP发生发展中的作用,详细总结了中药提取物及中药复方干预mTOR相关信号通路防治OP的最新研究成果,旨为mTOR相关信号通路与OP的关系、临床应用中医药防治OP等领域的深入研究提供参考和依据。

PI3K/Akt通路调控结直肠癌机制及中医药治疗研究进展

结直肠癌(CRC)作为世界上第三大常见癌症,起源于结肠和直肠的肠上皮细胞,随着全球经济的快速发展,其在发展中国家的发病率也逐年猛增。在过去几年中,尽管预防性的结肠镜筛查提高了CRC患者生存率,但仍有大多数病例是在症状出现后才被发现,且目前临床中CRC手术治疗风险高、易复发,放化疗治疗不良反应大、患者心理负担重,因而针对CRC尚无理想的诊疗方案。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)作为经典的致癌通路为多种恶性疾病的诊疗提供了可能,也为CRC的治疗提供了新的方向。近年来,中医凭借自身“治未病”和多成分、多靶点、多途径的优势在癌症治疗中成为一大焦点,其不良反应小的优势更是与西医在治疗上相互弥补。多项研究表明,中药单体和中药复方可通过干预PI3K/Akt信号通路,可抑制CRC细胞的增殖、侵袭、迁徙、血管新生,促进了癌细胞的凋亡、自噬,从而减缓CRC发展进程,达到治疗CRC的作用。近几年与此相关的研究成果更新迅速,过去的总结文献未能及时纳入最新研究成果,为众多学者的文献检索带来诸多不便,故而该文从PI3K/Akt通路、PI3K/Akt通路与CRC关联性及中医药干预治疗CRC进展等3个方面出发,对相关信息进行补充总结,以期为今后CRC在分子生物学中的发展及临床新药研发上提供参考。

溴莫尼定对低氧诱导的PC12细胞神经损伤的保护作用

目的探讨溴莫尼定对缺氧诱导的PC12细胞神经损伤的保护作用及其机制。方法实验于2018年5月至2019年8月进行,建立缺氧诱导的大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤PC12细胞损伤模型,实验分为对照组、缺氧组(缺氧损伤)、缺氧+0.25µmol/L溴莫尼定组、缺氧+0.5µmol/L溴莫尼定组、缺氧+1µmol/L溴莫尼定组。采用MTT法检测各组细胞活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;根据检测试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)含量;蛋白质印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/信号转导及转录活化因子3(STAT3)信号通路相关蛋白表达。结果缺氧处理后,细胞活力较对照组降低[(0.35±0.04)比(0.69±0.08)](P<0.05),溴莫尼定不同剂量组细胞活力较Hypoxia组升高[(0.37±0.05)、(0.40±0.06)、(0.44±0.05)、(0.53±0.07)、(0.60±0.09)比(0.35±0.04)](P<0.05);Hypoxia组细胞凋亡率增加[(32.89±3.46)%比(3.58±0.34)%](P<0.05),溴莫尼定干预后细胞凋亡率降低[(7.41±0.75)%比(32.89±3.46)%](P<0.05),Bax蛋白表达量降低[(1.48±0.16比3.76±0.31)](P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量升高[(0.89±0.12)比(0.29±0.04)](P<0.05);Hypoxia组细胞SOD含量较对照组降低[(50.43±5.36)U/mg比(173.39±18.21)U/mg](P<0.05),溴莫尼定干预后可提高缺氧诱导的细胞SOD含量降低[(143.28±15.43)U/mg比(50.43±5.36)U/mg](P<0.05);Hypoxia组细胞LDH[(62.31±6.82)U/mL比(19.07±1.65)U/mL]、丙二醛含量[(4.29±0.43)µmol/g比(1.35±0.12)µmol/g]较对照组增高(P<0.05),溴莫尼定处理后可降低缺氧引起的LDH[(31.35±3.21)U/mL比(62.31±6.82)U/mL]、丙二醛含量[(1.76±0.19)µmol/g比(4.29±0.43)µmol/g]增加(P<0.05);Hypoxia组细胞Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、STAT3、p-STAT3表达降低(P<0.05),溴莫尼定处理后可提高细胞Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、STAT3、p-STAT3的表达(P<0.05);抑制Akt/mTOR/STAT3信号通路可逆转溴莫尼定对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡及LDH、丙二醛、SOD水平的影响。结论溴莫尼定可通过激活Akt/mTOR/STAT3信号通路促进缺氧诱导的PC12细胞增殖、抑制细胞凋亡及增强其抗氧化能力进而对缺氧诱导的神经细胞损伤发挥保护作用。

丹酚酸A对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制研究

目的 探究丹酚酸A对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制。方法 该研究起止时间为2018年5月至2019年5月。购买华拓生物生产的HGMC人肾小球系膜细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组五组,A组细胞不添加任何药物,B组、C组、D组、E组细胞均加入10 mg/L LPS培养,1 h后C组、D组、E组分别加入低剂量丹酚酸A(10 mg/L)、中剂量丹酚酸A(20 mg/L)、高剂量丹酚酸A(40 mg/L)处理24 h后做后续试验。检测细胞增殖、凋亡、细胞周期分布以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路指标表达量。结果 与A组相比,B组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率降低,S期、G2/M期细胞分布率升高;与B组相比,C组、D组、E组G0/G1期细胞分布率、细胞凋亡率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低;与C组相比,D组、E组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低(均P<0.05);与D组相比,E组细胞凋亡率(37.59±4.62)%、G0/G1期细胞分布率(86.95±11.62)%升高,S期、G2/M期细胞分布率分别为(10.23±1.03)%、(4.26±1.03)%降低(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达量升高,B细胞淋巴瘤相关X蛋白(Bax)表达量降低(P<0.05);与B组相比,C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与C组相比,D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与D组的(26.12±2.25)%、(0.49±0.28)、(0.87±0.45)、(0.59±0.25)、(0.88±0.12)、(1.25±0.20)、Bax表达量(0.87±0.12)相比,E组细胞12 h增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量分别为(19.02±1.06)%、(0.25±0.11)、(0.32±0.15)、(0.25±0.12)、(0.54±0.12)、(0.42±0.22)降低,Bax表达量(1.59±0.22)升高(P<0.05)。结论 丹酚酸A可能经促进PI3K/AKT/mTOR信号通路失活调控caspase-3、Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白,而发挥促进LPS诱导人肾小球系膜细胞凋亡,抑制增殖,阻滞细胞周期进程的作用。

敦煌方大补肺汤联合顺铂对Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的干预作用及分子机制

目的:探讨敦煌方大补肺汤联合顺铂对Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的干预作用及相关分子机制。方法:C57BL/6J小鼠50只,随机挑选10只作为空白组(不造模),40只皮下接种Lewis细胞,复制Lewis肺腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组(等量生理盐水)、顺铂组(5 mg·kg^(-1))、大补肺汤组(14.35 g·kg^(-1)·d^(-1))、大补肺汤联合顺铂组(大补肺汤14.35 g·kg^(-1)·d^(-1)+顺铂5 mg·kg^(-1)),每组10只,连续治疗14 d。观察小鼠一般状况,记录体质量变化,计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数,血常规检测外周血白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HGB),流式细胞术检测脾脏CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)调节性T细胞(Treg)、自然杀伤(NK)细胞表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定肿瘤组织内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组体质量降低(P<0.05),脾指数、胸腺指数明显降低(P<0.05),脾脏中NK细胞百分比明显下降(P<0.05),Treg细胞百分比明显升高(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量均明显下降(P<0.05);与模型组比较,大补肺汤组肿瘤生长明显抑制,体质量升高,瘤质量明显降低(P<0.05),NK细胞百分比明显升高(P<0.05),Treg细胞比例明显降低(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量明显升高(P<0.05),顺铂组肿瘤生长明显抑制,体质量明显降低(P<0.05),瘤质量明显降低(P<0.05),胸腺指数、脾指数明显降低(P<0.05),Treg细胞百分比明显降低(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量明显下降(P<0.05),大补肺汤联合顺铂组肿瘤生长明显抑制,瘤质量明显降低(P<0.05),各给药组肿瘤组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化及mRNA水平明显降低(P<0.05);与顺铂组比较,大补肺汤联合顺铂组肿瘤生长明显抑制,瘤质量明显降低(P<0.05),体质量明显升高(P<0.05),脾指数、胸腺指数明显升高(P<0.05),NK细胞明显升高(P<0.05),Treg细胞百分比明显降低(P<0.05),WBC、PLT、HGB数量明显增多(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR磷酸化及mRNA水平明显降低(P<0.05)。结论:大补肺汤联合顺铂具有增效减毒作用,可有效调节免疫功能,增加NK细胞比例,降低Treg细胞比例,改善骨髓抑制,下调PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制Lewis肺腺癌荷瘤小鼠的肿瘤生长。