基于c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路探讨阿魏酸钠对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用

目的 探讨阿魏酸钠(SF)通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用。方法 腹腔注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,模型制作成功后随机分为模型组、SF低剂量(SF-L)组(50 mg/kg)、 SF高剂量(SF-H)组(100 mg/kg)、SF+JNK抑制剂(SF+SP600125)组(SF 100 mg/kg+SP600125 10 mg/kg)、 SF+JNK激活剂[SF+茴香霉素(AN)]组(SF 100 mg/kg+AN 5 mg/kg),每组12只,另取12只SD大鼠不做处理作为空白组。给药结束24 h后观察各组大鼠行为学变化,ELISA法检测血清中5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,TUNEL染色观察脑组织神经元凋亡情况,免疫组织化学法检测脑组织中TNF-α、 IL-6、降钙素基因相关肽(CGRP)表达,Western blotting法检测脑组织中JNK/p38 MAPK通路相关蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠挠头次数以及爬笼次数明显增加,神经元凋亡率显著升高;血清5-HT含量显著降低,NO、TNF-α和IL-6水平显著升高;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及磷酸化JNK(p-JNK)/JNK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK比值均显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,SF-L组、SF-H组大鼠挠头次数及爬笼次数显著减少,神经元凋亡率显著降低;血清中5-HT含量显著升高,NO、TNF-α和IL-6水平显著降低;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均显著降低(均P<0.05)。与SF-H组比较,SF+SP600125组能够显著增强SF对偏头痛大鼠的保护作用;SF+AN组能够显著逆转SF对偏头痛大鼠的保护作用。结论 SF可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路的表达,有效抑制偏头痛大鼠神经源性炎症反应,减少神经元凋亡,实现对偏头痛大鼠的保护作用。

一氧化氮激活应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶及p38MAP激酶诱导脑缺血再灌注后神经元凋亡

目的研究脑缺血区周边组织一氧化氮合酶(NOS)的表达与应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(SAPK/JNK)及p38MAP激酶(p38MAPK)激活的关系;探讨一氧化氮(NO)诱导脑缺血再灌注后神经元凋亡的可能机制。方法采用TUNEL染色法观察脑缺血再灌注不同时段模型鼠缺血区周边组织凋亡的阳性神经元数量;免疫组织化学、蛋白免疫印迹方法检测活化型Caspase-3、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和SAPK/JNK,p38MAPK及其磷酸化组分的表达。结果再灌注后1h、2h缺血区周边组织nNOS表达明显增强;自1h起iNOS开始表达,12 h达到高峰。1h p-SAPK/JNK表达较强,以后逐渐减弱;p38MAPK各时段表达均明显增强,以6h为著,p-p38MAPK表达高峰亦在6h。6h活化型Caspase-3开始表达,12 h达到高峰;12 h开始出现TUNEL阳性神经元,24 h达到高峰。结论缺血区周边组织NOS表达的增强可能通过激活SAPK/JNK及p38MAPK诱导脑缺血再灌注后神经元凋亡。

MKR转基因2型糖尿病小鼠脂肪组织p38丝裂原活化蛋白激酶、c-jun氨基末端激酶蛋白的表达及左归复方的保护作用

目的观察MKR转基因2型糖尿病小鼠脂肪组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶、c-jun氨基末端激酶蛋白表达的变化及左归复方(滋阴益气活血解毒组方)的保护作用。方法 40只MKR小鼠经鉴定后,随机分为MKR模型组、左归复方高、低剂量组、文迪雅组,每组10只。C57BL/6J(C57)野生鼠10只作为空白对照组。各药物组分别以相应剂量连续给药30天。于给药前、第15天及第30天,分别作空腹血糖测定。末次给药后0.5 h,心脏取血,放射免疫法测血清胰岛素,酶联免疫吸附测定法检测血清细胞间黏附分子、血管细胞黏附分子,Westernblotting和免疫组织化学检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶、c-jun氨基末端激酶蛋白在脂肪组织中的表达。结果①左归复方干预治疗后,其高剂量具有显著的降低MKR小鼠空腹血糖、改善高胰岛素血症的作用(P<0.05,P<0.01);②MKR鼠具有显著增高的炎症因子水平,而左归复方干预治疗后具有降低与炎症反应相关的细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1水平的作用(P<0.01);③MKR小鼠脂肪组织中p38丝裂原活化蛋白激酶和c-jun氨基末端激酶蛋白表达均上调,但与C57野生鼠比较差异无统计学意义(P>0.05);左归复方干预治疗后,MKR小鼠脂肪组织中p38丝裂原活化蛋白激酶和c-jun氨基末端激酶蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01),左归复方下调p38丝裂原活化蛋白激酶和c-jun氨基末端激酶蛋白表达与阳性对照药文迪雅作用相当。结论左归复方能显著改善MKR小鼠糖代谢及其炎症损伤,其机制为下调脂肪组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和c-jun氨基末端激酶蛋白表达,增强脂肪组织对胰岛素的敏感性和炎症抑制作用。

高血糖状态对大鼠骨骼肌和心肌C-Jun氨基末端激酶和p38信号转导系统的影响

目的:探讨高血糖状态对大鼠骨骼肌和心肌C-Jun氨苯末端激酶(C-JunN-terminalkinase,JNK)和p38激酶活性的作用,进一步了解糖尿病的发病机制,为糖尿病的临床康复治疗提供一些理论依据。方法:12周龄、体质量200～230g的SD大鼠12只,根据是否注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)随机分为高血糖组(n=6)和正常血糖组(n=6)。高血糖组大鼠腹腔内注射STZ(65mg/kg)建立持续高血糖模型(血糖>16mmol/L)。正常血糖组大鼠不注射STZ,维持正常血糖。运用化学发光法测定骨骼肌和心肌JNK和p38活性。结果:骨骼肌和心肌JNK活性在高血糖组明显增高,分别高于正常血糖组1.8倍和1.4倍。骨骼肌和心肌p38活性在高血糖组分别高于正常血糖组的2.0倍和1.6倍。结论:高血糖状态可以激活骨骼肌和心肌JNK和p38信号转导通道。提示细胞信号转导系统参与了糖尿病的发病机制。

黄芪甲苷通过激活JNK/p38 MAPK信号通路对急性脑梗死模型大鼠神经功能的影响

目的分析黄芪甲苷通过激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对急性脑梗死模型大鼠神经功能的影响。方法选取50只健康SPF级SD大鼠,10只作为对照组,其余40只建立急性脑梗死模型,其中30只大鼠建模成功,将30只大鼠随机分为模型组、药物对照组、黄芪甲苷组,每组10只对建模成功的大鼠进行给药处理,对照组、模型组大鼠采用0.9%氯化钠溶液灌胃,药物对照组给予20 mg/kg阿托伐他汀灌服,黄芪甲苷组给予70 mg/kg黄芪甲苷应用液灌服,均灌胃12周。观察4组大鼠病理组织学、神经功能[神经元特异性烯醇化酶(NSE)、星形胶质源性蛋白(S100β)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)]、炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)]、JNK/p38 MAPK通路相关mRNA表达量、JNK/p38 MAPK通路。结果与对照组比较,模型组、药物对照组、黄芪甲苷组SOD、CAT降低,NSE、S100β、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、CRP、JNK、p38 MAPK mRNA、JNK、p38 MAPK升高(P<0.05);与模型组比较,药物对照组、黄芪甲苷组SOD、CTA升高,NSE、S100β、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、CRP、JNK、p38 MAPK mRNA、JNK、p38 MAPK降低,(P<0.05);与药物对照组比较,黄芪甲苷组SOD、CTA升高,NSE、S100β、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、CRP、JNK、p38 MAPK mRNA、JNK、p38 MAPK降低(P<0.05)。结论采用黄芪甲苷对急性脑梗死模型大鼠干预,可改善大鼠氧化应激指标,降低炎性反应,使大鼠神经功能得到改善,其作用机制可能与调控JNK/p38 MAPK信号通路有关。

丝裂素活化蛋白激酶基因在不同胎龄的胎儿皮肤中表达特征及意义

目的 探讨细胞外信号调节激酶 1(erk1)、erk2 ,丝裂素活化蛋白激酶p38(p38MAPK)和 3种c Jun氨基末端激酶 (jnk1、jnk2和jnk3)基因在不同胎龄的胎儿和少儿皮肤中表达的变化特征。方法 用病理学技术检测不同发育时期皮肤的结构特征后 ,提取不同胎龄的胎儿和少儿皮肤的总RNA ,分离mRNA ,用RT PCR方法检测这 6种基因在不同组织中的表达特征。结果 与早期妊娠胎儿相比 ,晚期妊娠胎儿皮肤中 ,p38MAPK和jnk1基因表达水平显著降低 ,jnk2和jnk3基因的mRNA含量明显升高。在少儿皮肤中erk2、p38MAPK和jnk1基因表达水平进一步降低 ,而jnk2和jnk3基因表达明显增加。结论 早期妊娠胎儿皮肤中erk2和p38MAPK基因高表达、jnk2和jnk3基因低表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕愈合相关。

如意金黄贴对前列腺增生模型大鼠P38、JNK2、NF-кBP65和STAT3蛋白的影响

目的:探讨如意金黄贴(RJP)对丙酸睾酮所致大鼠良性前列腺增生(BPH)的作用及机制。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为6组,即对照组、模型组、保列治组、RJP高剂量组、RJP中剂量组、RJP低剂量组,每组8只。对照组注射生理盐水0. 5 ml/kg,其余各实验组皮下注射丙酸睾酮10 mg/kg,每天1次,连续30 d,诱导建立BPH模型。于造模第1天起给予药物干预,保列治组灌胃给药保列治(4. 5 mg/kg),RJP高、中、低剂量组大鼠背部脱毛区贴42. 0、21. 0、10. 5 cm2/kg的药膏,对照组和模型组背部脱毛区贴基质贴,每天给药1次,连续30 d。实验结束取前列腺、精囊腺和包皮腺; HE染色观察前列腺病理组织形态学,计算前列腺间质、上皮和腺腔面积比; Western印迹分析P38、NF-кBP65、、STAT3、和JNK2的蛋白表达。结果:与模型组比较,RJP高剂量组可降低前列腺上皮细胞增生,下调上皮细胞面积比,上调腺腔面积比(P <0. 05); RJP高剂量组可明显降低前列腺组织中P38、pP38、NF-кBP65、p-NF-кBP65、STAT3、p-STAT3、JNK2的表达,RJP中剂量组可减少大鼠前列腺组织中JNK2和NF-кBP65的表达,上调p-JNK表达(P <0. 05),RJP低剂量组可明显减少大鼠前列腺组织中JNK2的表达而上调p-JNK表达(P <0. 05)。结论:RJP可通过抑制P38、p-P38、NF-кBP65、p-NF-кBP65、STAT3、p-STAT3、JNK2的表达、或上调p-JNK表达拮抗大鼠前列腺增生。

丝裂原活化蛋白激酶途径与肝细胞癌研究进展

肝细胞癌(HCC)是世界第五大常见肿瘤,也是肝脏最常见的恶性肿瘤。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一类广泛存在于细胞内的高度保守的丝氨酸和苏氨酸蛋白激酶,是细胞内重要的信号转导系统,参与细胞的生长、发育、分化和凋亡等一系列病理生理过程。它是目前研究的热点,参与了包括肝癌在内的多种肿瘤的发生发展过程。

磷酸化c—Jun氨基末端激酶和P38丝裂原活化蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中的表达

目的探讨磷酸化c—Jun氨基末端激酶（p—JNK）和P38丝裂原活化蛋白激酶（p—P38MAPK）在寻常性银屑病皮损中的表达。方法收集30例确诊的寻常性银屑病患者皮损，同时收集30例健康人皮肤组织作为对照组。采用免疫组化及Western印迹法分别检测p-JNK和p-P38MAPK蛋白在寻常性银屑病皮损组织和正常人皮肤中的表达情况。结果免疫组化结果显示，寻常性银屑病皮损组织p-JNK和p-P38MAPK表达的平均吸光度（AOD）值分别为0．663±0．016和0．436±0．011，均明显高于对照组（0．333±0．009和0．306±0．010），差异有统计学意义（t=44．869、21．913，均P〈0．001）。Western印迹法同样显示，寻常性银屑病皮损p-JNK和p-P38MAPK蛋白相对表达量均显著高于对照组，差异均有统计学意义（t值分别为20．477和165．084，均P〈0．05）。结论JNK和P38MAPK的活化可能参与了寻常性银屑病表皮细胞的过度增殖。

p38丝裂原活化蛋白激酶通路对紫杉醇诱发细胞凋亡中γ-氨基丁酸B型受体表达变化的影响

目的 通过给予p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPKs）抑制剂（SB203580）,探讨紫杉醇诱发细胞凋亡中p38MAPKs通路对γ-氨基丁酸B型受体（GABAB受体）表达变化的影响及其作用机制.方法 随机选取原代培养5d,浓度约为1×109/L的海马细胞,给予不同浓度（0、0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L）紫杉醇,采用噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测法分别检测海马神经元细胞抑制率（n=3）及凋亡率（n=4）变化,以此确定紫杉醇诱发细胞凋亡的最适浓度.另选取原代培养5d的海马细胞随机分为4组：对照组（C组）、10 μmol/L SB203580处理组（K组）、紫杉醇最适浓度处理组（N组）、10 μmol/L SB203580＋紫杉醇最适浓度混合组（K＋N组）,培养时间为24h,保持各组加液量一致,Western blot法测定海马细胞GABAB受体及核因子-κB（NF-κB）蛋白表达水平（n=3）.结果 紫杉醇对海马细胞活力的抑制具有时间和浓度的交互作用（F=9.127,P＜0.05）,根据MTT法（n=3）和流式细胞仪法（n=4）检测结果,各浓度紫杉醇处理24h对海马神经元凋亡率的影响差异有统计学意义（F=64.523,P＜0.05）,并计算出紫杉醇诱发细胞凋亡的最适浓度为1 μmol/L[早期凋亡率达（48.63±5.76）％].蛋白表达结果显示（n=3）：与C组比较,N组和K＋N组GABAB受体与NF-κB表达均明显增高（P＜0.05）,而K组GABAB受体与NF-κB表达均降低（P＜0.05）;与K组比较,N组和K＋N组NF-κB和GABAB受体表达均增高（P＜0.05）;与N组比较,K＋N组NF-κB和GABAB受体表达均降低（P＜0.05）.结论 在紫杉醇诱发细胞凋亡过程中,抑制p38MAPKs通路可上调GABAB受体表达,而其下游因子NF-κB可能是其调控GABAB受体表达变化的关键靶点.

雷公藤红素下调p-p38、p-JNK、NF-κB减轻脑梗死后的炎症反应

目的探讨脑缺血后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、核因子-κB(NF-κB)的表达变化,观察雷公藤红素的脑保护作用及机制。方法用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉永久性脑梗死(pMCAO)模型。实验分为3组:溶剂对照组,假手术组和雷公藤红素组(3mg·kg^(-1)腹腔注射)。采用RT-qPCR和Western blot观察p-p38、p-JNK、NF-κB基因和蛋白表达变化,比较各组的患侧脑水肿、脑梗死体积和神经功能评分。结果与溶剂对照组相比,雷公藤红素组脑水肿明显低于溶剂对照组(P<0.05);梗死体积明显小于溶剂对照组(P<0.05);神经功能评分明显小于溶剂对照组(P<0.05);p-p38、p-JNK、NF-κB的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05)。结论雷公藤红素对脑梗死大鼠具有脑保护作用,雷公藤红素通过调节p-p38,p-JNK和NF-κB的表达可能是其脑保护作用机制之一。

JNK、P38-MAPK、IκB-α在异基因CD4^+T细胞致人脐静脉内皮细胞损伤中的表达及与TF的关系

目的检测磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、P38-丝裂原活化的蛋白激酶(P38-mitogen activated protein kinase,P38-MAPK)、核转录因子抑制因子(IκB-α)及组织因子(tissue factor,TF),在异基因及同基因CD4+T细胞与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)混合培养时在HUVECs中的表达,分析JNK、P38-MAPK、IκB-α与TF的相关性,探讨TF在异基因造血干细胞移植急性移植物抗宿主病(aGVHD)血管内皮损伤中可能的作用机制。方法体外原代分离培养HUVECs,用人T细胞亚群阴性分离柱试剂盒,从健康志愿者周围血中分离出CD4+T细胞作为异基因实验组,以同基因CD4+T细胞为对照组,用γ干扰素预处理HUVECs后与CD4+T细胞混合培养,分别在培养前及培养后不同时间点用流式细胞仪检测HUVECs中TF抗原的表达,实时定量PCR检测TF-mRNA基因的转录状况,Western blot检测磷酸化JNK、P38-MAPK、IκB-α的蛋白含量。结果异基因组TF及磷酸化JNK、P38-MAPK、IκB-α的表达明显升高,与对照组在不同时间点比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。相关性分析显示,TF与磷酸化JNK、P38-MAPK表达呈正相关,而与磷酸化IκB-α表达无相关性。结论 TF可能通过JNK、P38-MAPK信号通路参与异基因造血干细胞移植时aGVHD血管内皮细胞的活化与损伤。

普拉克索下调TXNIP表达对氧糖剥夺/再灌注心肌细胞p38/JNK通路的作用研究

目的探究普拉克索对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)心肌细胞的作用及其可能的作用机制。方法CCK-8检测细胞活力;试剂盒检测LDH和CK-MB活性、MDA和SOD含量;流式细胞术检测ROS产生和细胞凋亡;Western blot检测硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、p-p38、p38、p-JNK和JNK蛋白表达;qRT-PCR检测TXNIP mRNA表达。结果与对照组比较,OGD/R组心肌细胞活力、SOD含量明显降低(P<0.05),而LDH活性、CK-MB活性、ROS产生、MDA含量和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),TXNIP、p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达明显升高(P<0.05);与OGD/R组比较,Pra-50μmol/L组和Pra-100μmol/L组心肌细胞活力、SOD含量明显升高(P<0.05),而LDH活性、CK-MB活性、ROS产生、MDA含量和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),TXNIP、p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达明显降低(P<0.05),且普拉克索的作用呈剂量依赖性;与Pra-100μmol/L组比较,Pra-100μmol/L+oe-NC组心肌细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05);与Pra-100μmol/L+oe-NC组比较,Pra-100μmol/L+oe-TXNIP组心肌细胞活力、SOD含量明显降低(P<0.05),而LDH活性、CK-MB活性、ROS产生、MDA含量和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),TXNIP mRNA表达和TXNIP、p-p38/p38、p-JNK/JNK蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论普拉克索通过下调TXNIP表达抑制p38/JNK通路活化,改善心肌细胞OGD/R损伤。

肺炎链球菌热休克蛋白40通过p38MAPK和JNK通路诱导小鼠巨噬细胞免疫应答

目的探讨肺炎链球菌热休克蛋白40(HSP40)引起小鼠巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达、纯化重组HSP40蛋白(r HSP40),去除其中的脂多糖(LPS)。r HSP40处理C57BL/6野生小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)后,反转录PCR检测BMDM中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-23p19、IL-12p40、IL-12p35、IL-10的mRNA水平,ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-12p40水平;r HSP40刺激后,ELISA检测野生型、Toll样受体2(TLR2)和TLR4缺陷的BMDM中TNF-α和IL-6的表达水平;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂预处理BMDM后,ELISA检测其对r HSP40诱导TNF-α和IL-6水平的影响;Western blot法检测p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平。结果获得纯度90%以上的r HSP40;r HSP40可显著增强p38MAPK、JNK的磷酸化水平和TNF-α、IL-6的表达;p38MAPK和JNK抑制剂可显著抑制TNF-α和IL-6的表达;与野生BMDM相比较,TLR4缺陷的BMDM表达TNF-α和IL-6显著降低。结论 HSP40诱导小鼠巨噬细胞产生免疫应答受JNK及p38MAPK信号通路调控,并且此过程依赖TLR4。

基于JNK/c-Jun与p38MAPK信号通路的肝再生调控的双向平衡

肝细胞有效再生以代偿肝功能是促进肝衰竭良好转归的生理基础。肝再生调控机制复杂而精密,肝细胞大面积死亡后触发的肝再生进程能否动态平衡并适时终止,直接关系到肝再生速率及再生肝组织正常功能的实现。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是最为经典的丝/苏氨酸蛋白激酶信号系统,具有广泛的生物学功能,其下游可通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)/c-Jun与p38MAPK信号途径参与肝脏的生理与病理进程。本文从JNK/c-Jun与p38MAPK信号途径入手,剖析其在肝衰竭肝再生过程中的变化特点,以理解肝再生调控的复杂性及其双向平衡的基本特质。

不同转移能力的人前列腺癌细胞亚系中p38和c-Jun氨基末端激酶激活机制

目的 研究P2嘌呤受体激动剂ATP对不同转移性的人前列腺癌细胞亚系 1E8和 2B4的p38和c Jun氨基末端激酶 (JNK)信号传导途径的影响。方法 以常规的蛋白免疫印迹法 ,用特异识别双磷酸化p38和JNK的特异性抗体 ,检测活化的 (磷酸化的 )p38和JNK。结果 外源性ATP以时间和剂量依赖性的方式激活细胞内的p38,并且在高转移性的 1E8细胞中ATP诱导的p38活化水平明显高于不转移的 2B4细胞。但是在ATP的作用下JNK未见明显激活。P2嘌呤受体拮抗剂苏拉明(suramin)和p38抑制剂SB 2 0 35 80均可有效抑制ATP对p38的激活 ,抑制率分别为 ,1E883%和 79% ,2B481%和 6 9%。两细胞亚系中 ,G蛋白调节剂百日咳毒素均未明显影响ATP对p38的激活。结论 细胞外ATP在恶性肿瘤细胞中能够诱导激活p38信号通路 ,且p38激活水平在转移性不同的前列腺癌细胞亚系间存在差异。我们的研究为恶性肿瘤细胞生长及转移机制研究提供了有效线索。

茶氨酸在大鼠脑缺血/再灌注过程中对海马c-Jun氨基末端激酶和P38信号通路的作用

目的 探讨茶氨酸在大鼠脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion， I/R）过程中对大鼠海马c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinases, JNK）和P38信号通路所发挥的作用。 方法 雄性SD大鼠108只，体重290-310 g，采用随机数字表法分成假手术组（SH组）、I/R组、茶氨酸组（TH组），每组36只。每组根据再灌注时间分为2、6、12、24、48、72 h 6个亚组，每亚组6只。采用4-VO法建立SD大鼠全脑缺血模型，在预定时间点行灌注、固定、取脑、石蜡包埋切片，免疫组化检测磷酸化JNK（phosphorylate JNK， p-JNK）和磷酸化P38（phosphorylate P38， p-P38）的表达变化，光镜下计数CA1区存活细胞，TUNEL法检测CA1区凋亡细胞。 结果 与SH组比较，I/R组海马CA1区各时点p-JNK和p-P38表达明显增加（P〈0.01），于再灌注2 h时即明显升高［灰度值分别为（163.5±3.8）和（163.0±1.9）］，24 h到高峰［灰度值分别为（132.3±4.9）和（141.0±5.7）］。TH组p-JNK和p-P38的表达则无明显增高，各时点与I/R组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。海马CA1区神经元存活数目TH组明显高于I/R组（P〈0.01），凋亡细胞数显著低于I/R组（P〈0.01）。 结论 在大鼠全脑I/R损伤过程中，茶氨酸通过抑制JNK和P38信号通路的激活可对脑I/R损伤导致的细胞损伤起到保护作用，对临床脑缺血的治疗有一定的指导意义。

甲状腺功能减退对雄性大鼠睾丸线粒体氧化应激及p38和c-Jun氨基末端激酶基因mRNA表达的影响

目的检测甲状腺功能减退（简称甲减）对雄性大鼠睾丸线粒体氧化应激及p38和c-Jun氨基末端激酶（JNK）基因mRNA表达的影响，探讨甲减造成雄性生殖系统损伤的机制。方法健康雄性Wistar大鼠30只，按体质量（240—270g）采用随机数字表法分为3组：对照组（C组，灌胃生理盐水1ml／100g）、低剂量组（L组，灌胃0．1mg,／kg丙基硫氧嘧啶1ml／100g）和高剂量组（H组，灌胃10．0ms／ks丙基硫氧嘧啶1ml／100g），每组10只大鼠，每3天称体质量1次，灌胃处理60d。灌胃结束次日，处死大鼠，放射免疫法检测血清甲状腺激素水平[总三碘甲状腺素原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）、促甲状腺激素（TSH）]；分光光度法检测睾丸线粒体超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性；实时定量PCR检测睾丸线粒体p38和JNK基因mRNA表达水平。结果灌胃30、60d，H组大鼠体质量[（265．73±5．10）、（253．72±5．09）g]均低于C组[（344．62±4．69）、（395．33±8．36）g]和L组[（333．66±3．53）、（386．08±7．70）g，P均〈0．05]。灌胃60d，H组睾丸脏器系数[（1．20±0．05）g/100g]高于C组[（0．88±0．03）g／100g]和L组[（0．93±0．03）g／100g，P均〈0.05]。灌胃60d，H组，IT江（0．39±0．01）nmol／L]和仉[（15．47±1．21）nmol／L]均低于C组[（0.86±0．07）、（45．56±1．52）nmol／L]和L组[（0．79±0．06）、（39．02±1．33）nmol／L，P均〈0．05]；TSH[（0．65±0．09）mU／L]高于C组[（0．18±0．06）mU／L]和L组[（0．27±0．05）mU／L，P均〈0．05]。灌胃60d，，H组SOD[（60．37±3．14）U／mg prot]低于C组[（75.18±6．13）U／mg prot，P〈0．05]；H组[（1．46±0．25）U／mg prot]和L组CAT[（1．67±0．39）U／mg prot]低于C组[（3．79±0．44）U／mg prot，P均〈0．05]。灌胃60d，，H组p38基因（1．3874±0．1220）表达水平均高于与C组（1．0000±0．0000）和L组（1．1142±0．1241．P均〈0．05）；各剂量组JNK基因mRNA表达差异无统计学意义（F=0．95，P〉0．05）。结论甲减可通过增强睾丸线粒体氧化应激水平进而激活丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中p38途径来损伤大鼠生殖系统。

没食子酸丙酯对脑缺血大鼠神经元SAPK/JNK及p38MAPK激活的抑制作用

目的探讨没食子酸丙酯对大鼠脑缺血再灌注模型缺血区周边组织神经元损伤的保护作用及其可能机制。方法通过Nissl和TUNEL染色法检测阳性神经元数量,蛋白免疫印迹、免疫组化法观察活化型Caspase-3,SAPK/JNK,p38MAPK及其磷酸化组分的表达。结果没食子酸丙酯干预后,SAPK/JNK,p-SAPK/JNK(1h),p38MAPK,p-p38MAPK(6h)及活化型Caspase-3(12h)表达均减弱,TUNEL阳性神经元减少(24h),Nissl阳性神经元增多(24h),神经元凋亡率明显降低。结论没食子酸丙酯保护缺血再灌注后神经元损伤的机制可能与抑制SAPK/JNK及p38MAPK的激活有关。