蛋白激酶CβⅡ通过调控翻译起始介导上皮-间充质转化促进肝细胞癌转移

目的:研究蛋白激酶C β Ⅱ(protein kinase C β Ⅱ, PKCβⅡ)上调Snail和Twist蛋白表达介导上皮-间充质转化的分子机制。方法:采用[35S]-甲硫氨酸掺入实验和核糖体分离实验观察PKCβⅡ对Snail和Twist mRNA翻译的影响。敲减真核翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E, eIF4E)通过核糖体分离实验、Western blot及RT-qPCR观察对PKCβⅡ调控Snail和Twist表达的影响。利用Western blot观察PKCβⅡ对调控eIF4E活性的相关信号通路的影响。利用Western blot观察应用丝裂原活化蛋白激酶相互作用激酶1(mitogen-activated protein kinase-interacting kinase 1, MNK1)抑制剂或雷帕霉素对PKCβⅡ调控Snail和Twist蛋白表达的影响。利用Transwell实验观察敲减eIF4E对PKCβⅡ调控肝癌细胞侵袭的影响。结果:[35S]-甲硫氨酸掺入实验和核糖体分离实验表明,相比β-actin,PKCβⅡ显著上调Snail和Twist mRNA的翻译(P<0.01)。敲减eIF4E抑制PKCβⅡ介导的Snail和Twist mRNA翻译和蛋白表达的上调(P<0.01),但对Snail和Twist的转录没有影响。高表达PKCβⅡ激活细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)/MNK1及蛋白激酶B(protein kinase B, PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)/eIF4E结合蛋白1(eIF4E-binding protein 1, 4E-BP1)通路上调eIF4E的活性(P<0.01)。应用MNK1抑制剂或雷帕霉素可抑制PKCβⅡ介导的Snail和Twist蛋白表达上调(P<0.01)。敲减eIF4E抑制PKCβⅡ介导的肝癌细胞侵袭能力的增强(P<0.01)。结论:PKCβⅡ通过激活ERK/MNK1通路和AKT/mTOR/4E-BP1通路上调eIF4E的活性,优先促进Snail和Twist mRNA的翻译,介导上皮-间充质转化,从而促进肝细胞癌的转移。这提示PKCβⅡ作为肝细胞癌治疗靶点的潜力。

慢性应激抑郁大鼠脑内亚细胞成分蛋白激酶CβⅡ表达的变化

目的探讨慢性不可预见性应激抑郁模型大鼠大脑皮层亚细胞成分蛋白激酶CβⅡ(PKCβⅡ)的表达水平以及三环类抗抑郁剂(TCAs)阿米替林、5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)氟西汀对其影响。方法24只Sprague-Dewley雄性大鼠随机分为抑郁模型组6只,阿米替林治疗组6只,氟西汀治疗组6只,正常对照组6只。采用慢性轻度不可预见性应激方法建立抑郁模型,将9种刺激随机安排到18d,每天1种,应激前以及应激18d末对各组大鼠进行敞箱实验及液体消耗实验,第19天起阿米替林组、氟西汀组分别每天腹腔注射阿米替林(10mg.kg-1.d-1)、氟西汀(10mg.k-g1.d-1)1次,模型组及对照组每天腹腔注射等体积生理盐水1次,均持续21d。用蛋白质免疫印迹法检测大鼠大脑皮层亚细胞成分PKCβⅡ的表达水平。结果抑郁大鼠大脑皮层细胞膜PKCβⅡ蛋白表达水平(230.57±62.86)较对照组(331.26±17.94)明显减少(P<0.05);抑郁大鼠大脑皮层细胞浆PKCβⅡ蛋白表达水平(286.43±56.92)与对照组(343.55±70.48)比较,有下降趋势,但差异无显著性(P>0.05)。阿米替林、氟西汀治疗3周后抑郁大鼠大脑皮层亚细胞成分PKCβⅡ表达水平无明显变化(P>0.05)。结论大脑皮层细胞膜PKCβⅡ蛋白表达水平明显下降可能是抑郁症发病的重要环节。阿米替林、氟西汀对抑郁大鼠大脑皮层亚细胞成分PKCβⅡ的蛋白表达水平没有影响。

人非小细胞肺癌中蛋白激酶CβⅡ的表达与细胞凋亡的相关性研究

目的 探讨人非小细胞肺癌 (NSCLC)中蛋白激酶C(PKC) βⅡ的表达及细胞凋亡在肺癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组织化学LSAB法和TUNEL法检测了 119例人NSCLC组织、癌旁肺组织和 3 2例肺良性疾病肺组织中PKC βⅡ的表达和凋亡细胞。 结果 ( 1)NSCLC组织中PKC βⅡ表达水平( 85 .3 9%)显著高于癌旁肺组织 ( 65 .69%)和肺良性病变肺组织 ( 5 3 .2 2 %) (P <0 .0 5 ) ,癌旁肺组织中PKC βⅡ表达水平显著高于肺良性疾病肺组织 (P <0 .0 5 )。NSCLC组织中凋亡指数 ( 5 .2 7%)显著低于肺良性疾病肺组织 ( 15 .84%) (P <0 .0 5 )。 ( 2 )NSCLC组织中PKC βⅡ的表达水平与临床病理生理特征无明显关系 (P >0 .0 5 )。NSCLC组织的细胞凋亡水平与肺癌P TNM分期、原发肿瘤大小 (T)及淋巴结转移状态 (N)有密切关系 (P <0 .0 5 ) ,而与细胞分化程度、组织学类型 ,患者性别和年龄等均无明显关系 (P >0 .0 5 )。 ( 3 )PKC βⅡ的表达水平与细胞凋亡水平呈显著负相关 (P <0 .0 1)。结论 NSCLC中PKC βⅡ的异常激活和细胞凋亡受抑制在NSCLC发生、发展中可能起重要作用。PKC βⅡ介导的细胞增殖过度和凋亡受抑可能是NSCLC发生、发展的重要机理之一。

不同毛色小鼠背部皮肤中甘油二酯激酶ζ和蛋白激酶CβⅡ的表达和定位

背景:在皮肤和毛发色素形成机制中,未曾有甘油二酯激酶ζ(diacylglycerol kinaseζ,DGKζ)参与色素形成的相关报道。目的:探讨DGKζ、蛋白激酶CβⅡ(Protein Kinase CβⅡ,PKCβⅡ)在不同毛色小鼠背部皮肤中的表达、定位及其与毛色形成的相关性。方法:取2月龄白色、灰色和黑色小鼠各6只,去毛取背部皮肤,Real-time PCR检测小鼠背部皮肤中DGKζ、PKCβⅡmRNA表达;Western blotting检测小鼠背部皮肤中DGKζ、PKCβⅡ和p-PKCβⅡ蛋白表达;免疫组织化学ABC法染色检测DGKζ和p-PKCβⅡ表达。实验方案经山西医科大学动物实验中心伦理委员会批准。结果与结论:①DGKζ、PKCβⅡ在3种毛色小鼠背部皮肤中mRNA表达趋势一致,均为:灰色组>白色组;黑色组>白色组,其差异有显著性意义(P<0.05);②PKCβⅡ活性的p-PKCβⅡ/PKCβⅡ,其变化趋势与DGKζ在3种毛色小鼠背部皮肤中表达趋势一致:灰色组>白色组;黑色组>白色组,其差异有显著性意义(P<0.05);③DGKζ和p-PKCβⅡ在灰色和黑色小鼠背部皮肤毛囊的外根鞘、毛母质细胞及毛母质的黑素细胞呈阳性表达,而在白色小鼠背部皮肤毛囊的外根鞘、毛母质细胞及毛母质的黑素细胞呈阴性表达;④结果说明,DGKζ、PKCβⅡ在黑、灰和白色小鼠背部皮肤中的表达与定位提示它们可能参与毛色的形成。

低氧肺动脉高压大鼠蛋白激酶CβⅡ蛋白表达及膜转位水平的变化

目的 建立慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型并初步探讨蛋白基酶CβⅡ（PKCβⅡ）在慢性低氧性肺动脉高压的发生发展过程中所起的作用.方法 建立慢性常压低氧肺动脉高压大鼠模型,将清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组、低氧1d、3d、7d、14d和21d组,检测大鼠右心室收缩压（right ventricle systolic pressure,RVSP）和右心室肥厚指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）,采用HE染色观察肺动脉病理学改变,Western blotting方法检测大鼠肺动脉内PKCβⅡ蛋白表达和膜转位水平的变化.结果 （1）与正常对照组相比,低氧暴露1d、3d、7d、14d、21d后RVSP均明显上升（P＜0.05）; RVHI低氧3d、7d、14d、21 d组较正常对照组明显上升（P＜0.05）;低氧暴露3、7和21 d组肺动脉病理学改变明显.（2）PKCβⅡ蛋白的表达量在慢性低氧3d、7d、14d和21 d与正常对照组相比明显降低（P＜0.05）,慢性低氧3d后PKCβⅡ膜转位水平较正常对照组明显下降（P＜0.05）.结论 PKCβⅡ蛋白表达和膜转位水平的下调可能参与了大鼠慢性低氧性肺动脉高压的发生和发展过程.

蛋白激酶CβⅡ与原发性肝癌的研究进展

综述了蛋白激酶C的分类及其亚型,蛋白激酶C-βⅡ的结构、激活、细胞信号传导、抑制凋亡作用及与肿瘤的关系.

蛋白激酶CβⅡ诱导上皮-间质转化及血管新生促进肝癌发展

目的探讨蛋白激酶CβⅡ(PKCβⅡ)在肝细胞癌(HCC)发展中的作用机制。方法免疫印迹法观察PKCβⅡ在肝细胞系L02和肝癌细胞系SK-hep1、Hep G2、BEL-7404、7721、Hep3B和huh7中的表达,构建稳定高表达PKCβⅡ的细胞系,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达的变化;通过免疫印迹法、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和放线菌酮(CHX)追踪实验,观察PKCβⅡ调控E-cadherin、N-cadherin和Snail表达的分子机制;小室迁移和侵袭实验(transwell assay)以及裸鼠尾静脉注射观察PKCβⅡ对肝癌细胞转移的影响;成管实验观察PKCβⅡ对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管形成能力的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)观察PKCβⅡ对肝癌细胞上清中血管内皮生长因子A(VEGFA)含量的影响。结果 PKCβⅡ在肝癌细胞系中的表达高于肝细胞系L02,PKCβⅡ促进肝癌细胞形态从鹅卵石样上皮细胞向梭行间质样细胞的转变,通过mRNA水平下调E-cadherin(P <0. 05)和上调N-cadherin(P <0. 01)的蛋白表达,通过翻译水平上调Snail蛋白表达,PKCβⅡ还促进了肝癌细胞的迁移、侵袭(P <0. 01)以及VEGFA的分泌(P <0. 01)和血管新生(P <0. 01)。结论蛋白激酶CβⅡ诱导上皮-间质转化及血管新生在肝癌的发展中有重要作用。

蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究

背景与目的:肿瘤微环境中存在的炎性因子参与肿瘤的生长及转移,蛋白激酶CβⅡ(protein kinase CβⅡ,PKCβⅡ)能否通过调节炎性因子参与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的侵袭尚不清楚。研究PKCβⅡ对HCC侵袭的作用及相关机制,深入探讨PKCβⅡ与肿瘤炎性微环境之间的关系。方法:收集PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理HCC细胞,采用transwell法检测细胞的侵袭情况,采用细胞因子抗体芯片检测上清液中细胞因子的变化,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测PKCβⅡ高表达对白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)上清液中含量及转录的影响,采用transwell法检测IL-6中和抗体及IL-6受体(IL-6 receptor,IL-6R)中和抗体对PKCβⅡ高表达诱导HCC细胞侵袭的影响,采用Western blot检测信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、P-STAT3的蛋白表达,采用非参数Spearman检验分析HCC组织中PKCβⅡ和IL-6表达的相关性。结果:采用PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理可以提高HCC细胞Huh7(P<0.01)和Hep3B(P<0.05)的侵袭能力;PKCβⅡ高表达显著提高上清液中IL-6的含量(P<0.01)及IL-6的转录(P<0.01);IL-6中和抗体及IL-6R中和抗体均可以抑制PKCβⅡ介导的HCC细胞侵袭能力的增加(P<0.01),P-STAT3蛋白表达升高(P<0.05);HCC组织中PKCβⅡ和IL-6的表达呈正相关(r=0.697,P<0.01)。结论:PKCβⅡ通过IL-6自分泌途径促进HCC细胞的侵袭。

血浆硫化氢水平与行维持性血液透析的终末期肾病并动脉粥样硬化患者传统型蛋白激酶CβⅡ激活的相关性研究

目的分析血浆硫化氢(H_2S)水平与行维持性血液透析(MHD)的终末期肾病(ESRD)并动脉粥样硬化(AS)患者传统型蛋白激酶CβⅡ(cPKCβⅡ)激活的相关性。方法选取2010—2014年在西安医学院第二附属医院行MHD的ESRD患者120例,根据AS发生情况分为A组(未并发AS,n=60)和B组(并发AS,n=60);另选取同期体检健康者60例作为对照组。采用硫化物敏感电极法检测血浆H_2S水平,采用Western bloting法检测cPKCβⅡ膜转位率。比较A组和B组患者一般资料和实验室检查指标,比较3组受试者血浆H_2S水平和cPKCβⅡ膜转位率,并分析cPKCβⅡ膜转位率与行MHD的ESRD并AS患者其他观察指标的相关性。结果两组患者性别、年龄、体质指数(BMI)、透析时间、吸烟率、嗜酒率、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及使用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、钙通道阻滞剂、β-受体阻滞剂者所占比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者血红蛋白、清蛋白、肌酐、尿素氮(BUN)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A、B组患者血浆H_2S水平低于对照组(P<0.05),cPKCβⅡ膜转位率高于对照组(P<0.05);B组患者血浆H_2S水平低于A组,cPKCβⅡ膜转位率高于A组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,cPKCβⅡ膜转位率与行MHD的ESRD并AS患者血浆H_2S水平呈负相关(r=-0.88,P<0.05)。结论血浆H_2S水平与行MHD的ESRD并AS患者cPKCβⅡ激活有关。

蛋白激酶C-βⅡ对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的研究蛋白激酶C-βⅡ对SMMC-7721人原发性肝癌细胞增殖的影响.方法体外基因扩增获得pcDNA3/PKCβⅡ真核表达质粒.脂质体介导pcDNA3/PKCβⅡ基因体外转导人原发性肝癌SMMC-7721细胞,分为实验组(pcDNA3/PKCβⅡ)、对照组(pcDNA3空载体)及空白对照组.细胞计数、MTT法、细胞形态学观察、流式细胞仪等方法检测PKCβⅡ对SMMC-7721人原发性肝癌细胞增殖的影响.结果细胞生长曲线检测结果显示转导入PKCβⅡ的SMMC-7721细胞数目明显增加;MTT法显示转染PKCβⅡ的人原发性肝癌细胞SMMC-7721的OD值增加(P<0.01);细胞形态学观察实验组SMMC-7721细胞间连接紧密,巨核、双核、多核、奇异型的核也明显增加,核分裂像增多,特别是出现不对称、多极性及顿挫性等病理性核分裂像尤为明显;流式细胞仪检测显示转导PKCβⅡ的SMMC-7721细胞细胞周期中S期细胞明显增多.结论PKCβⅡ可促进SMMC-7721细胞增殖,其机制可能与促进细胞DNA合成相关.

结肠腺癌中蛋白激酶C亚型的表达及意义

目的探讨蛋白激酶C(PKC)α、βⅡ、ε、ζ在结肠腺癌中的表达及与结肠腺癌发生、发展及转移的关系。方法选择2010年4月至2012年8月大庆油田总医院收治的82例原发性结肠腺癌患者的手术切除标本,其中管状腺癌52例,黏液腺癌30例;淋巴结转移39例,无淋巴结转移43例。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测癌组织标本中PKCα、βⅡ、ε、ζ蛋白的表达。结果 52例结肠管状腺癌中,PKCα、βⅡ、ζ3个亚型的阳性表达率在高、中、低各分化组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05);而PKCε亚型的阳性表达率在高、中分化组之间以及中、低分化组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05),但高分化组的阳性表达率显著低于低分化组(χ2=31.523,P<0.05)。黏液腺癌组织中PKCα、βⅡ的阳性表达率显著低于管状腺癌组织(P<0.05),而PKCε的阳性表达率则显著高于管状腺癌组织(P<0.05);黏液腺癌组织与管状腺癌癌组织中PKCζ的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。原发性结肠腺癌患者中无淋巴结转移者癌组织中PKCα的阳性表达率显著高于有淋巴结转移者(P<0.05);无淋巴结转移者癌组织中PKCβⅡ、ε、ζ的阳性表达率与有淋巴结转移者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PKC各亚型在结肠腺癌发生、发展和转移中的作用不同,PKCε在结肠管状腺癌中的表达与分化有关,PKCε可能参与了黏液腺癌的黏液分泌,PKCα、βⅡ可能与结肠管状腺癌的细胞增殖有关;PKCα与结肠腺癌淋巴结转移有关。

术后持续性疼痛大鼠脊髓中PKCβⅡ的表达变化

目的 ：观察术后持续性疼痛大鼠脊髓中蛋白激酶CβⅡ（protein kinase CβⅡ,PKCβⅡ）表达的变化。方法 ：将大鼠随机分为对照组、假手术组、术后持续性疼痛组[皮肤肌肉切口牵拉组（skin/muscle incision and retraction,SMIR组）]。对照组不做任何处理;假手术组切割皮肤、肌肉;SMIR组在假手术组基础上牵拉皮肤、肌肉1 h。测定各组术后1、3、7、14、21 d时机械性刺激缩爪阈值（mechanical withdrawal threshold,MWT）;用Westorn Blot、免疫荧光染色技术比较术后第7天各组PKCβⅡ的表达情况。结果：SMIR组术后3～21 d MWT显著降低（P〈0.001）,比对照组、假手术组降低显著（P〈0.001）;和对照组、假手术组比较,术后7 d SMIR组PKCβⅡ蛋白的表达显著增加（P〈0.001）。结论 ：术后持续性疼痛激活大鼠脊髓PKCβⅡ信号。

脑衰蛋白反应调节蛋白-2参与低氧预适应减轻小鼠脑缺血损伤

目的研究参与低氧预适应(HPC)的经典型蛋白激酶CβⅡ(cPKCβⅡ)相互作用的脑衰蛋白反应调节蛋白-2(CRMP-2)对缺血脑是否有保护作用。方法成年雄性BALB/c小鼠随机分为常氧(Nor)、HPC、常氧假手术(Nor+sham)、HPC假手术(HPC+sham)、常氧缺血(Nor+I)和HPC缺血(HPC+I)等6组(每组n=6)。应用小鼠整体HPC和脑中动脉梗死(MCAO)致脑局部缺血模型,结合免疫沉淀、双向凝胶电泳和质谱等技术,分离和鉴定与cPKCβⅡ相互作用蛋白;利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)技术,分析CRMP-2磷酸化和蛋白降解水平在脑HPC和缺血中的变化。结果与Nor组比,HPC鼠脑皮层组织内有10种与cPKCβⅡ相互作用蛋白的表达发生了明显变化,其中CRMP-2在膜相关蛋白组分中的表达量升高,而在胞质蛋白组分中的表达量降低。在脑缺血模型中,与Nor+Sham组相比,Nor+I组小鼠脑皮层缺血核心区(Ic)CRMP-2磷酸化水平明显降低(P<0.05,n=6);与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层Ic区内CRMP-2磷酸化水平明显增高(P<0.05,n=6)。脑缺血可导致CRMP-2发生水解并伴随着大量55ku水解片段(BDP)的出现,但与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层缺血半影区(P)内CRMP-2水解片段减少,水解率明显降低(P<0.05,n=6)。结论CRMP-2参与了HPC缓解小鼠脑缺血Ic区内CRMP-2磷酸化水平的降低和减少P区内CRMP-2水解片段从而减轻缺血脑组织的损伤。

滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠心肌微血管损伤的影响

目的:探讨滋膵通脉饮对糖尿病心肌病大鼠心肌微血管损伤的影响及其作用机制。方法:将51只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(9只)和造模组(42只)。造模组大鼠采用长期高糖高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg)方法建立糖尿病心肌病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、滋膵通脉饮高剂量组、滋膵通脉饮低剂量组、特异性βⅡ-蛋白激酶C(PKC-βⅡ)抑制剂[Ruboxistaurin(LY333531)HCl,Rx抑制剂]组,每组9只。滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠分别予相应剂量[60.84、15.21 g/(kg·d)]滋膵通脉饮灌胃,Rx抑制剂组大鼠予PKC-βⅡ抑制剂混悬液灌胃[1.00 mg/(kg·d)]。空白对照组和模型组大鼠均予蒸馏水灌胃[10 mL/(kg·d)]。2次/d,连续给药4周。给药结束后测量体质量、空腹血糖及糖化血清蛋白;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测心肌组织PKC-βⅡ、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及血管内皮细胞钙粘连蛋白(VE-cadherin)表达;定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测心肌组织PKC-βⅡmRNA、VE-cadherin m RNA、VEGF mRNA、VEGFR2 mRNA表达;透射电镜观察心肌微血管的超微结构。结果:模型组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、心肌组织PKC-βⅡ、VEGF蛋白相对表达量及心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量均高于空白对照组(P<0.01),体质量、心肌组织VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及心肌组织VE-cadherin mRNA、VEGFR2mRNA相对表达量均低于空白对照组(P<0.01)。滋膵通脉饮高、低剂量组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白均低于模型组(P<0.05或P<0.01),体质量均高于模型组(P<0.01);Rx抑制剂组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、体质量与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);滋膵通脉饮低剂量组、Rx抑制剂组大鼠心肌组织PKC-βⅡ、VEGF蛋白相对表达量及心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.01),VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及VE-cadherin mRNA、VEGFR2 mRNA相对表达量均高于模型组(P<0.01);滋膵通脉饮高剂量组大鼠心肌组织VE-cadherin、VEGFR2蛋白相对表达量及VE-cadherin mRNA、VEGFR2 m RNA相对表达量高于模型组(P<0.05或P<0.01),心肌组织PKC-βⅡmRNA、VEGF mRNA相对表达量低于模型组(P<0.01)。透射电镜显示空白对照组大鼠微血管管腔圆滑规整,内皮细胞附着在基底膜内,基底膜均匀连续,胞间紧密连接完整;模型组大鼠心肌微血管损伤明显,基底膜及胞间连接断裂,细胞间隙增宽,管腔通透性增加;Rx抑制剂组、滋膵通脉饮高剂量组、滋膵通脉饮低剂量组大鼠微血管损伤均有不同程度改善,基底膜及胞间连接断裂改善或消失,细胞间隙轻微增宽或不明显。结论:滋膵通脉饮可抑制糖尿病心肌病大鼠PKC-βⅡ激活,影响VEGF的表达,从而调节心肌微血管细胞间正常连接,改善心肌微血管损伤。这可能是其治疗糖尿病心肌病的机制之一。