红景天苷对类风湿关节炎患者血清脯氨酸羟化酶2及蛋白磷酸酯酶2A和丝裂原活化蛋白激酶表达水平的影响

目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的同时予以红景天苷治疗,2组均治疗3个月。比较治疗前后2组中医证候评分、临床症状与体征、实验室检查指标[包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)]、临床疗效,健康状况评定量表(HAQ)与28个关节疾病活动度评估(DAS28)评分,血清PHD2、PP2A、MAPK水平与基因表达,不良反应。结果治疗后2组主症、次症评分均低于治疗前且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组临床症状与体征均轻于对照组,ESR、CRP、RF和anti-CCP水平均低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[95.8%(46/48)比80.4%(37/46)](P=0.020)。治疗后观察组HAQ与DAS28评分均低于对照组[(5.0±1.0)分比(7.2±1.2)分、(3.1±0.5)分比(4.1±0.7)分](t=9.528、7.444,均P<0.001)。治疗后观察组PHD2、MAPK水平及基因表达均低于对照组,PP2A水平及基因表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.528)。结论红景天苷治疗RA可增强临床效果、减轻患者症状、改善实验室指标且安全。推测与降低PHD2和MAPK表达、增加PP2A表达有关。

异丙酚、人参皂苷Rg-1、蛋白磷酸酯酶-2A和氯化锂对大鼠电休克后学习记忆及海马内谷氨酸含量的影响

目的观察异丙酚、人参皂苷Rg-1、蛋白磷酸酯酶-2A(PP-2A)和氯化锂对电休克(ECT)后嗅球切除抑郁模型大鼠学习记忆和海马内谷氨酸(Glu)浓度的影响。方法按随机单位组设2个干预因素,即ECT干预(2水平:无处置、施行1疗程ECT)和药物干预(5水平:海马CA1区分别微量注射生理盐水、异丙酚、人参皂苷Rg-1、PP-2A、氯化锂,20 g/L)的所有组合(2×5析因设计)。全部ECT处置结束24 h内开始Morris水迷宫检测,高效液相色谱法检测Glu在海马内的浓度。结果单独使用异丙酚或ECT均可造成学习记忆障碍,而二者联合使用则会缓解ECT后的学习记忆障碍;人参皂苷Rg-1、PP-2A和氯化锂对学习记忆无明显影响,但与ECT合用则可改善ECT后的学习记忆;ECT干预与药物干预存在交互作用。ECT可明显增加海马中Glu浓度;异丙酚和人参皂苷Rg-1在ECT前后均可减少Glu浓度;且ECT干预与药物干预存在交互作用。PP-2A和氯化锂在ECT前后对Glu浓度无明显影响。结论 ECT可使海马Glu浓度升高,导致学习记忆障碍;异丙酚与人参皂苷Rg-1、PP-2A和氯化锂均可改善ECT后的学习记忆;前两者与降低海马中Glu浓度有关,后两者与此无关。

蛋白激酶Cγ和蛋白磷酸酯酶Aα在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中表达的变化

目的 探讨蛋白激酶Cγ (PKCγ)和蛋白磷酸酯酶Aα (PP2B Aα)在慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马中的表达及其意义。方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为应激组和对照组 ,对应激组实行慢性复合应激 4 2d后 ,用Morris水迷宫 ,Y 迷宫对 2组大鼠进行学习和记忆能力测试 ,然后用免疫组织化学方法 ,观察 2组大鼠PKCγ和PP2B Aα的表达 ,并用计算机图像分析系统对免疫阳性反应结果进行处理。结果 应激组比对照组学习记忆能力明显增强 ;在海马CA3区PKCγ的免疫反应阳性明显增强 ;PP2B Aα在海马CA1和CA3区的免疫反应阳性明显减弱。结论 海马内PKCγ和PP2B Aα表达的变化可能参与了慢性复合应激致大鼠学习记忆增强的机制。

血清蛋白磷酸酯酶2A水平与宫颈癌的相关性研究

目的宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,本研究拟在血清学和组织学水平共同探讨宫颈癌患者蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)水平的变化。方法分别选择同期宫颈无病变健康体检者(健康对照组)30例,高危型人乳头瘤病毒(hsHPV)感染患者17例和宫颈癌患者23例,采用酶联免疫吸附试验检测血清PP2A蛋白表达水平;另选取健康对照者24例,hsHPV感染患者18例和宫颈癌患者14例,采用酶活试剂盒检测组织PP2A活性。结果与健康对照组相比,hsHPV感染组血清PP2A水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),同时组织PP2A酶活性下调,PP2A活性仅为健康对照组的66%,差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组血清PP2A水平下降明显,差异有统计学意义(P<0.05),同时组织酶活性显著下调,PP2A酶活性仅为健康对照组的45%,差异有统计学意义(P<0.05)。与hsHPV感染组相比,宫颈癌组患者血清PP2A水平下调差异有统计学意义(P<0.05),组织酶活性水平下调差异也有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌患者血清PP2A蛋白表达水平显著下调,同时组织学水平PP2A酶活性亦下降。该研究结果为宫颈癌发病机制提供了新的资料,为宫颈癌的早期诊断提供了新的靶标分子。

新型二氟甲基磷酸类酪氨酸蛋白磷酸酯酶1B抑制剂的分子动力学模拟和结合自由能计算(英文)

通过分子对接建立了一系列含二氟甲基磷酸基团(DFMP)或二氟甲基硫酸基团(DFMS)的抑制剂与酪氨酸蛋白磷酸酯酶1B(PTP1B)的相互作用模式,并通过1ns的分子动力学模拟和molecular mechanics/generalized Born surface area(MM/GBSA)方法计算了其结合自由能.计算获得的结合自由能排序和抑制剂与靶酶间结合能力排序一致;通过基于主方程的自由能计算方法,获得了抑制剂与靶酶残基间相互作用的信息,这些信息显示DFMP/DFMS基团的负电荷中心与PTP1B的221位精氨酸正电荷中心之间的静电相互作用强弱决定了此类抑制剂的活性,进一步的分析还显示位于DFMP/DFMS基团中的氟原子或其他具有适当原子半径的氢键供体原子会增进此类抑制剂与PTP1B活性位点的结合能力.

蛋白磷酸酯酶-1和-2A抑制剂对NG108-15细胞tau蛋白磷酸化的影响

Alzheimer痴呆(AD)的主要脑病理变化之一为由超磷酸化的tau蛋白组成的神经原纤维缠结(Neurofibrillary tangle,NFT)。AD的Tau蛋白异常磷酸化与蛋白磷酸酯酶(PP)-2A和-1缺陷有关。本文首先用免疫印迹法显示NG含两大组分的tau蛋白。MTT方法观察到PP-2A和PP-1抑制剂冈 田酸(Okadaic acid.OA)处理NG108-14细胞能导致细胞代谢明显下降,同时免疫印迹法显示OA能导致的NG细胞Tau蛋白磷酸化。该研究为建立AD样蛋白磷酸酯酶缺陷引起的tau蛋白磷酸化的细胞模型奠定了基础。

阻断酪氨酸蛋白激酶Src表达对蛋白磷酸酯酶2A活性和tau蛋白磷酸化的影响

目的:研究细胞内酪氨酸蛋白激酶Src对蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)酪氨酸307位点(Y307)磷酸化和活性以及tau蛋白磷酸化的影响,为阿尔茨海默病脑内PP2A活性下调和tau蛋白异常磷酸化机制提供实验依据。方法:体外培养小鼠成神经瘤N2a细胞,转染特异性阻断Src表达的SiRNA,检测转染不同时间点PP2A Y307的磷酸化水平、PP2A的活性以及tau蛋白在不同位点的磷酸化水平。结果:转染Src SiRNA 12 h时Src蛋白水平显著降低,PP2A Y307的磷酸化水平下降,但总的PP2A蛋白水平也降低,伴随PP2A活性下调,tau蛋白在Ser198/199/202位点发生过度磷酸化。结论:细胞内PP2A活性的调节受多种因素的影响,单纯阻断上游Src的表达可降低PP2A的活性,并导致tau蛋白的过度磷酸化。

丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶在tau蛋白异常磷酸化中的作用

Tau蛋白过度磷酸化在阿尔采末病(A lzheimer's d isease,AD)发病过程中发挥重要作用,抑制蛋白磷酸酯酶活性,可诱导tau的过度磷酸化和聚积。本文拟就近年来蛋白磷酸酯酶在tau蛋白异常磷酸化中的作用作一综述。

下调蛋白磷酸酯酶2A活性对抑郁症大鼠症状改善效果及其作用机制

目的探讨下调蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)活性对抑郁模型大鼠症状改善效果及其作用机制。方法以慢性温和不可预知应激诱导抑郁症大鼠模型30只,分为对照A组、对照B组、低浓度冈田酸(OA)组、中浓度OA组、高浓度OA组及最优浓度OA组各5只;检测对照A组、对照B组、低浓度OA组、中浓度OA组、高浓度OA组PP2A的活性,筛选最优浓度OA;对照A组及对照B组分别从侧脑室微量注射无菌生理盐水5μl,低浓度OA组、中浓度OA组、高浓度OA组、最优浓度OA组分别从侧脑室注射浓度为5 nmol/L、10 nmmol/L、20 nmol/L及最优浓度OA溶液各5μl。对对照B组及最优浓度OA组进行蔗糖水消耗试验、旷场试验、体重及水迷宫等行为学测试,检测去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、皮质醇(CORT)水平,检测脑组织中酪氨酸羟化酶(TH)、细胞外信号激酶(ERK)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)及糖原合酶激酶3β(GSK-3β)的蛋白水平及磷酸化水平检测。结果 OA组的浓度越高PP2A的活性越低(P<0.01),将20 nmol/L OA组设为最优浓度OA组;最优浓度OA组旷野实验的水平及垂直得分均高于对照B组(P<0.05);随观察时间延长,最优浓度OA组的糖水饮用量、体重增加,水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.05),且在给药后第8、15、22天,与对照B组比较,其糖水饮用量、体重均较高,水迷宫逃避潜伏期较短(P<0.05);最优浓度OA组NE、5-HT水平,TH、ERK、AKT蛋白水平以及TH、ERK、AKT、GSK-3β的磷酸化水平均高于对照B组(P<0.05);最优浓度OA组CORT水平以及GSK-3β蛋白水平均低于对照B组(P<0.05)。结论 PP2A的活性随OA浓度升高而降低,下调PP2A活性可能通过调节TH、ERK以及AKT/GSK-3β信号途径,从而改善大鼠的抑郁症状。

杆状病毒的酪氨酸蛋白磷酸酯酶研究

酪氨酸蛋白磷酸酯酶是生命细胞内一类重要的酶 ,与细胞信号转导有关 ,对多种生理过程如生长、分化、代谢、细胞周期调节和细胞骨架等具有重要的调节功能。某些杆状病毒和痘苗病毒的基因组中具有编码酪氨酸蛋白磷酸酯酶的开读框 ,与感染性和致病性有关。病毒编码的酪氨酸蛋白磷酸酯酶具有双重底物特异性 ,即可以同时催化蛋白质酪氨酸和丝氨酸

蛋白磷酸酯酶对Alzheimer神经原纤维缠结的松解作用

神经原纤维缠结是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ患者的特征性脑病理损伤，其形成机制至今不明．根据神经原纤维缠结的基本组分是异常磷酸化ｔａｕ蛋白的聚集形式双螺旋丝（ｐａｉｒｅｄｈｅｌｉｃａｌｆｉｌａｍｅｎｔｓ，ＰＨＦ）的研究结果，推测蛋白磷酸酯酶与蛋白激酶的失衡可能与ＰＨＦ的形成有关．将蛋白磷酸酯酶ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－２Ｂ与ＰＨＦ一起在３７℃保温３０ｍｉｎ可使ＰＨＦ缠结结构松解，成为单个ＰＨＦ原纤维，延长去磷酸化反应时间至３ｈ可使ＰＨＦ结构进一步松解，释放一些游离ＰＨＦ原纤维片段．放免印迹定量分析结果表明：ＰＰ－２Ａ处理的ＰＨＦ样品比对照者释放游离ｔａｕ蛋白的量增加２５％．此外，ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－２Ｂ去磷酸化的ＰＨＦ对脑中钙激活的中性蛋白水解酶的抗性降低．这些研究资料从结构上显示了Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病脑病理损伤的可逆性。

酿酒酵母丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶的功能与调控

从酿酒酵母蛋白磷酸酯酶的分类和结构特征入手,阐述了该蛋白家族中的亚家族成员丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶的功能和表达调控。深入研究酿酒酵母丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶,特别是PP2C蛋白磷酸酯酶的细胞功能及其调控,将对新药研发和疾病干预治疗提供重要基础。

蛋白磷酸酯酶2A通过MAPK信号通路抑制宫颈癌细胞侵袭

目的:探讨蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)在宫颈癌细胞侵袭中的作用及其可能机制。方法:常规培养Hela细胞,通过药物或基因调节PP2A水平,药物实验中将Hela细胞分为3组,即正常对照组(DMSO处理,n=6)、DES组(10nM PP2A激动剂DES处理,n=6)和OA组(10nM PP2A抑制剂OA处理,n=6);质粒转染组中将Hela细胞分为对照组(DsRed组,n=6)、wtPP2A组(n=6)和siPP2A组(n=6),按分组要求转染相应质粒。采用小室穿孔实验观察其对Hela细胞侵袭的影响;蛋白免疫印迹实验(Western Blot)观察其对MAPK信号通路的作用。结果:研究发现上调PP2A可显著抑制Hela细胞侵袭,而下调PP2A则显著促进Hela细胞侵袭;激活PP2A可去磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶家族(p-JNK, p-p38和p-ERK MAPK)及金属蛋白酶9(MMP-9)。结论:PP2A可能通过去磷酸化MAPK信号通路下调MMP-9起调节宫颈癌细胞侵袭的作用。

ZPSJ复方对ICV-STZ模型大鼠海马组织蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的影响

目的:观察燥湿解毒、助脾散精中药ZPSJ方对ICV-STZ模型大鼠海马组织蛋白激酶GSK-3β和蛋白磷酸酯酶PP-2A的影响。方法:SPF级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠28只,通过双侧侧脑室注射STZ复制SAD模型,分为假手术组、模型组、多奈哌齐组和ZPSJ治疗组。结果:与假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区GSK-3β阳性表达的神经元明显增多(P<0.01),经ZPSJ复方治疗后GSK-3β表达明显减少(P<0.05);同时,与假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区PP-2A阳性表达的神经元明显减少(P<0.01),而经ZPSJ复方治疗后PP-2A活性表达明显增加(P<0.05)。多奈哌齐组与模型组比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:ZPSJ复方可能通过调节脑组织GSK-3β和PP-2A的表达及其平衡而抑制tau蛋白的异常过度磷酸化。

蛋白磷酸酯酶在Alzheimer氏病tau蛋白异常磷酸化中的作用

用蛋白磷酸酯酸PP-2A、-2B和-1型分别处理的Alzheimer病（AD）异常磷酸化tau蛋白可不同程度恢复其促微管聚集和组装功能。PP－2A的恢复作用比PP－2B和PP－1更强．PP－2A，PP－2B和PP－1使异常tau蛋白水解释放磷酸的量分别为其总量的57％，36％和30％。tau蛋白Ser－235位的磷酸化不是决定其功能的关键位点，而Thr－231的磷酸化可能与微管组装早期的成核聚集作用有关。该研究证明：体内蛋白磷酸酯酶PP－2A，PP－2B和PP－1可能参与tau蛋白异常磷酸化过程，保持这些磷酸酯酶的活性有可能抑制AD神经原纤维退化．

上调蛋白磷酸酯酶2A水平可显著抑制宫颈癌细胞迁移

目的:探讨蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)在宫颈癌迁移中的作用。方法:培养Hela宫颈癌细胞,通过药物或质粒转染干预PP2A水平。药物实验中将Hela细胞分为3组,即正常对照组(DMSO处理,n=6),DES组(10nM PP2A激动剂DES处理,n=6)和OA组(10nM PP2A抑制剂OA处理,n=6);质粒转染实验中将Hela细胞分为DsRed-vector组(n=6),DsRed-PP2Ac组(n=6)和DsRed-siPP2Ac组(n=6),按分组要求转染相应质粒。采用划痕实验观察各组不同时间点(药物0h、24h、48h;转染0h、48h)Hela细胞迁移情况并比较组间差异。结果:药物或基因上调PP2A可显著抑制宫颈癌细胞的迁移,而药物或基因下调PP2A水平则明显促进宫颈癌细胞的迁移。结论:PP2A在宫颈癌的发展中起重要的作用,该研究可为宫颈癌的发展提供新的分子机制,亦可为宫颈癌临床药物的开发提供新的靶点。

蛋白磷酸酯酶-2A和-1抑制剂对成神经瘤细胞的影响

蛋白磷酸酯酶（PP）－2A和一1的缺陷参与Alzheimer病（AD）微管相关蛋白tau的异常磷酸化，继而导致神经细胞退化死亡。本研究采用不同剂量PP－2A和PP－1的抑制剂Okadaicacid（以下简称OA）与成神经瘤细胞株（SH－SYSY）共培养，实验结果显示：OA导致细胞代谢明显降低，突起消失，微管受损，死亡加速。OA的上述细胞毒性在PP－2A和PP－1均被抑制时显著增强。该研究进一步为PP－2A和PP－1与神经细胞活性的关系提供了实验依据，也为建立AD蛋自磷酸酯酶缺陷实验模型奠定了基础。

家蚕核型多角体病毒酪氨酸蛋白磷酸酯酶基因核苷酸序列分析

从家蚕核型多角体病毒中国镇江株 (BmNPV ZJ)基因组DNA中克隆出酪氨酸蛋白磷酸酯酶基因 (ptp) ,该基因的编码部分由 5 0 7个核苷酸组成 ,其中A为 16 3、C为 99、G为 113、T为 132 ,G +C含量约为 4 2 %。根据其核苷酸序列推演的蛋白质由 16 8个氨基酸残基组成 ,其中含有酪氨酸蛋白磷酸酯酶催化活性区的 11个氨基酸“HC”基序。该基因与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)ptp和BmNPV T3株 (日本 )的ptp核苷酸序列的同源性分别为 96 8%和 98 2 %。BmNPV ZJ酪氨酸蛋白磷酸酯酶 (BmNPV ZJPTPase)的氨基酸全序列与AcMNPV、BmNPV T3、芹菜夜蛾核型多角体病毒 (AfMNPV)PTPase和黄杉毒蛾核型多角体病毒 (OpMNPV)PTPase 1的氨基酸全序列的同源性分别为 97%、97 6 %、96 %和 6 0 % ,而与OpMNPVPTPase 2的同源性仅为 2 0 %。在NCBI数据库中查找BmNPV ZJPTPase的同源性序列 ,查找到的 5 99381个序列中发现至少有 14种mRNA加帽酶其N端部分存在PTPase催化活性区的“HC”基序 ,但其氨基酸全序列的同源性只有 31%～ 32 %。该基因序列已被GenBank数据库收录 ,登录号为AF316

轻度认知障碍患者淋巴细胞蛋白磷酸酯酶-2A的变化

【目的】探讨轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)患者淋巴细胞蛋白磷酸酯酶-2A(protein phosphotase-2 A,PP-2 A)的变化。【方法】用32P放射性标记法检测了PP-2 A的活性,并用免疫印迹法检测不同病程MCI患者及正常对照组血淋巴细胞PP-2 A的表达。【结果】1年MCI患者淋巴细胞PP-2 A的活性(0.91±0.06)与对照组(1.02±0.08)比较有降低(P<0.05),2年MCI(0.83±0.07)和3年MCI(0.85±0.07)患者淋巴细胞PP-2 A的活性与对照组比较有明显降低(P<0.01,P<0.01),与1年MCI的比较虽有降低的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。1年MCI组淋巴细胞PP-2 A的表达(0.95±0.06)与对照组(1.01±0.07)比较无明显降低(P>0.05),而2年MCI组(0.85±0.07)及3年MCI组(0.86±0.06)的PP-2 A表达与对照组相比明显降低(P<0.01,P<0.01),1年MCI组与2年MCI组的PP-2 A的表达无明显差别(P>0.05),与3年MCI组也无差别(P>0.05)。【结论】MCI患者淋巴细胞PP-2 A的活性及表达降低,对MCI的诊断可能有参考价值。

白念珠菌蛋白磷酸酯酶CaPph3和调节亚基CaPsy2在调节菌丝发育中的作用

目的:研究白念珠菌蛋白磷酸酯酶CaPph3及调节亚基CaPsy2在调控白念珠菌菌丝发育过程中的作用。方法:利用遗传毒性试剂HU和MMS分别处理CaPPH3和CaPSY2缺失株,观察移除毒性试剂后缺失株的菌丝发育情况。结果:(1)缺失株的表型鉴定:在含有遗传毒性试剂MMS、HU以及CP平板上,与野生型菌株RM1000相比,CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双缺失株均表现出明显生长缺陷,且各缺失株间差异不大。(2)缺失株对遗传毒性试剂敏感度测定:用MMS和HU处理各菌株后,野生型菌株的存活率约95%,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株存活率明显下降,且相互之间差异不大。(3)缺失株菌丝发育实验:用0.020%MMS处理各菌株4小时后,野生型菌株RM1000还维持酵母态,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株已出芽形成菌丝;而移除MMS后野生型菌株形成菌丝,6小时后不再延长,在菌丝顶端形成酵母态细胞,而CaPPH3、CaPSY2和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株仍维持菌丝态。用40 mmol/L HU处理各菌株4小时后,各菌株都维持酵母态;而移除HU后野生型菌株仍维持酵母态,而CaPPH3缺失株、CaPSY2缺失株和CaPPH3 CaPSY2双基因缺失株则会逐渐形成菌丝。结论:CaPph3和CaPsy2参与调节遗传毒性试剂诱导的白念珠菌的菌丝发育。