超声弹性成像联合血清Mac-2结合蛋白糖基化异构体、NADPH氧化酶2对慢性乙型肝炎患者肝纤维化的诊断价值

目的探讨超声弹性成像联合血清Mac-2结合蛋白糖基化异构体(Mac-2 binds protein glycosylated isomers,M2BPGi)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者肝纤维化的诊断价值。为肝纤维化的诊断提供参考依据。方法选取宜昌市第三人民医院于2021年1月—2023年3月期间收治的175例CHB患者为研究对象,并根据肝纤维化程度分为非显著性肝纤维化组(n=67)和显著性肝纤维化组(n=108)。多因素Logistic回归分析法分析发生显著性肝纤维化的影响因素;超声弹性成像联合血清M2BPGi、NOX2水平对显著性肝纤维化的诊断价值采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析。结果非显著性肝纤维化组和显著性肝纤维化组丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)和血小板计数(platelet count,PLT)比较差异均具有统计学意义(P均<0.05);与非显著性肝纤维化组比较,显著性肝纤维化组患者应变均值(mean strain value,MEAN)和峰度明显较低(P<0.05),偏度、复杂度(complexity,COMP)、对比度、标准差、蓝色区域面积比(ratio of blue area,AREA)和血清M2BPGi和NOX2水平均明显较高(P<0.05)。血清M2BPGi、NOX2、ALT、COMP、AREA是影响CHB患者发生显著性肝纤维化的独立危险因素,而PLT和MEAN是其保护因素(P<0.05)。ROC分析结果显示,M2BPGi、NOX2、MEAN、COMP和AREA联合诊断显著性肝纤维化的AUC为0.933,显著大于各指标单独诊断的AUC(P<0.05)。结论M2BPGi和NOX2在发生显著性肝纤维化的CHB患者血清中的水平较高,2者联合超声弹性成像对显著性肝纤维化具有较高的诊断价值。

桑叶黄酮抗氧化及抑制蛋白糖基化作用

为观察桑叶总黄酮的降糖作用及其对抗氧化酶、蛋白糖基化的影响.用桑叶总黄酮(8g生药/kg体重)灌胃四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠4周,观察给药前后血糖变化,测定LPO、SOD、GSH-px及果糖胺水平;分别以0.001,0.01,0.1g/L桑叶总黄酮浓度加入体外蛋白糖基化体系孵育1,4,7,14,21,28d,测定早期糖化蛋白产物的浓度.结果表明:与对照组比较,桑叶总黄酮组有明显降血糖作用.桑叶总黄酮组血糖由(18.33±3.33)mmol/L降至(10.19±4.45)mmol/L,P<0.05,LPO含量由(10.51±2.31)nmol/L,降至(6.01±2.04)nmol/L,P<0.05,SOD水平由(471.1±103.0)Nu/mL,升至(678.7±31.5)Nu/mL,P<0.001,果糖胺水平由(6.22±1.37)mmol/L,降至(1.70±0.32)mmol/L,P<0.05,体外糖化蛋白产量孵育时间呈正相关,0.1g/L桑叶总黄酮在各时间点均能使糖化蛋白生成量降低.因此:桑叶总黄酮能显著降低糖尿病大鼠血糖、LPO含量并提高SOD水平,抑制蛋白糖基化.

桑叶总黄酮对体外蛋白糖基化的抑制作用

目的 研究桑叶总黄酮对非酶糖基化的抑制作用。方法 从桑叶中提取不同浓度 (0 0 0 1,0 0 1,0 1g/L)总黄酮加入体外白蛋白糖基化体系中 ,分别孵育 1,4 ,7,14 ,2 1,2 8天 ,测定早期糖化白蛋白产物的浓度。结果 糖化蛋白产量与孵育时间呈正相关 ,桑叶总黄酮 (0 1g/L)在各时间点均使糖化蛋白生成较对照组少。 结论 蛋白质非酶糖化与葡萄糖孵育时间正相关 。

STZ糖尿病大鼠眼球及主动脉组织蛋白糖基化及脂质过氧化的观察

对21只雄性Wistar糖尿病大鼠和10只正常Wiscar大鼠的眼球及主动脉组织中糖基化蛋白(GP)及过氧化脂质(LPO)水平进行了观察。注射STZ后2周大鼠眼球和主动脉组织中GP和LPO水平均显著升高,大鼠眼球和主动脉组织中GP与血糖呈正相关,眼球及主动脉组织中LPO水平与眼球及主动脉组织中GP呈正相关。在用胰岛素治疗的糖尿病大鼠,这些组织中糖基化的程度减轻,而脂质过氧化升高的幅度也有所降低。

钙粘蛋白糖基化修饰的研究进展

钙粘蛋白超家族是一大类依赖Ca^(2+)糖蛋白超家族分子,介导细胞连接、细胞与组织间质连接作用。在组织和器官的形态形成过程中发挥了重要作用。钙粘蛋白除了具有N-糖基化修饰外,还具有O-甘露糖基化修饰。就钙粘蛋白的糖基化修饰研究包括最新的O-甘露糖基化修饰的进展加以综述。

被膜蛋白糖基化在HIV感染中的作用

在HIV感染过程中 ,病毒被膜蛋白糖基化起着重要作用。它使病毒粒子具有高度糖基化的表面 ,帮助HIV逃避人体免疫细胞识别和攻击。在病毒入侵时 ,被膜糖蛋白与宿主细胞表面的受体结合 ,并进行一系列构象变化 ,使病毒粒子顺利地与宿主细胞膜融合。介绍近年来对被膜蛋白糖基化过程与HIV成熟、感染和逃避免疫应答等方面分子水平作用机理的深入了解 ,这些作用机理将会有助于艾滋病疫苗的研制和以“糖链为靶”药物的开发。

蛋白糖基化修饰在肿瘤生物学行为、能量代谢、免疫及耐药过程中的调控作用研究进展

蛋白糖基化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰形式,真核生物中有超过50%的蛋白质都具有糖基化修饰。蛋白糖基化修饰主要受糖基转移酶和糖苷酶的调控,通过改变肿瘤相关因子的糖基化状态,可以影响肿瘤的生物学行为(迁移、侵袭、转移能力)。蛋白糖基化修饰能够与糖代谢的关键因子(糖代谢关键酶、低氧诱导因子1α)相互作用,影响肿瘤能量代谢。蛋白糖基化修饰能够作用于抗程序性细胞死亡受体配体1、C型凝集素树突状细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素等肿瘤免疫的关键因子,从而促进肿瘤的免疫逃避能力。此外,蛋白糖基化修饰还可以调控MDR1,缓解肿瘤的耐药性。

糖尿病鼠主动脉胶原蛋白糖基化的干预治疗

目的 观察新一代α—葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖(acarbose)对实验性糖尿病（DM）大鼠主动脉胶原非酶糖基化的影响。方法 用链脲佐菌素(50mg·kg^-1，ip)造成大鼠糖尿病模型，分别观察糖尿病组，糖尿病+阿卡波糖组及正常对照组1、3、6个月病程中各组主动脉胶原及胶原非酶糖基化终产物(AGES)量变化(荧光光谱测定法)。结果 糖尿病大鼠主动脉胶原及胶原AGEs含量明显高于正常对照组，且随病程延长，此种增加更明显(p<0．01)，而阿卡波糖治疗组胶原及胶原AGEs含量降低，与未治疗组相比存在差异(p<0．01)。结论 阿卡波糖对糖尿病大鼠主动脉胶原蛋白糖基化的形成有抑制作用。

大豆11S球蛋白糖基化有害交联产物的形成及抑制机理

目的:针对食品工业大豆蛋白糖基化改性工艺,建立大豆11S球蛋白-糖模拟体系,探究该体系中晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)形成的影响因素,探究黄酮类化合物抑制AGEs形成的机理,以便进行有效调控。方法:荧光光谱法(λ_(ex)/λ_(em)=340 nm/465 nm)测定糖的种类和浓度、温度、pH值以及黄酮抑制剂等对AGEs形成的影响,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征糖基化过程及黄酮对AGEs的抑制效果,通过液相色谱-串联质谱(liquid chromatograph-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定反应过程中槲皮素及其产物的变化。结果:糖种类为果糖;11S球蛋白与果糖质量浓度分别为2、8 mg/m L,pH值为9.2,温度为121℃条件下产生的荧光性AGEs量最多;槲皮素、木犀草素、染料木素、芦丁4种黄酮对荧光性AGEs的形成均有一定抑制效果;LC-MS/MS结果表明槲皮素通过捕获糖基化中间产物甲基乙二醛(methylglyoxal,MGO),抑制了大分子交联性的荧光性AGEs形成;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了1 mmol/L槲皮素有效降低了大分子交联的产物,但不影响糖的修饰改性,乳化性能得到较好的改善。结论:采用分子质量较大的糖,降低糖质量浓度、pH值和反应温度,添加黄酮类化合物可有效抑制大豆蛋白糖基化过程中有害产物AGEs的形成。

蛋白糖基化修饰在肿瘤多药耐药中的作用

恶性肿瘤为目前人类延长预期寿命的最大障碍。化疗是临床上抗肿瘤治疗的重要手段,但恶性肿瘤极易在化疗中产生多药耐药性(multidrug resistance,MDR)从而导致患者的不良预后。恶性肿瘤的MDR已被证实通过多种机制产生,如药物转运与吸收、细胞凋亡和DNA损伤修复等。蛋白糖基化修饰在肿瘤MDR中扮演重要角色。本文通过对蛋白糖基化修饰在肿瘤MDR中的分子机制进行综述,以期为临床上恶性肿瘤MDR的逆转提供理论基础。

病毒蛋白糖基化研究进展

病毒蛋白糖基化较为常见,但是长期处于被忽视的地位。近些年随着糖生物学相关技术的发展,病毒蛋白质糖基化的研究也取得了快速发展。目前已知病毒糖蛋白与病毒生成、病毒感染、机体免疫应答均有密切关系。从病毒蛋白糖基化类型、功能和应用三个方面进行了综述。

蛋白糖基化修饰在结直肠癌发病及治疗中的作用

结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,发病率和死亡率居高不下。蛋白糖基化修饰异常是人类肿瘤的普遍特征,在肿瘤的发病、发展和治疗等过程中具有重要作用。肿瘤的特异性糖基化修饰异常可以被应用于肿瘤的筛查、病理分期和治疗等。本综述通过对结直肠癌中特异性的异常糖基化修饰、糖基化为基础的结直肠癌诊断和病理分期生物标记物,以及糖基化修饰在结直肠癌治疗中的作用进行总结,为进一步研究结直肠癌的发病机制、新型肿瘤筛查生物标记物和治疗靶点提供参考。

蛋白糖基化抑制剂对病理性瘢痕成纤维细胞Fas蛋白的表达与功能的影响

目的研究N-糖链合成抑制剂衣霉素对病理性瘢痕成纤维细胞Fas蛋白的表达与诱导凋亡功能的影响。方法瘢痕疙瘩及增生性瘢痕各5例，以健康皮肤为对照，免疫组织化学法检测组织中成纤维细胞Fas蛋白表达；组织块贴壁法培养成纤维细胞；Western Blot法及流式细胞术检测衣霉素处理及未处理各组成纤维细胞Fas蛋白水平的表达及凋亡率的变化。结果病理性瘢痕及健康皮肤成纤维细胞胞质及胞膜中均可见Fas蛋白表达；增生性瘢痕、瘢痕疙瘩及健康皮肤成纤维细胞Fas蛋白糖基化水平依次降低，3组成纤维细胞在Fas单克隆抗体（Fas monoclonal antibody，FasMcAb）作用后凋亡率与Fas蛋白糖基化成正相关，衣霉素可明显降低病理性瘢痕成纤维细胞Fas蛋白糖基化水平，但对健康皮肤成纤维细胞Fas蛋白糖基化水平抑制作用不明显。结论FasMcAb诱导病理性瘢痕成纤维细胞凋亡与成纤维细胞Fas蛋白糖基化水平成正相关，而衣霉素可显著降低成纤维细胞Fas蛋白糖基化水平。

蛋白糖基化改变与类风湿关节炎发病关系研究进展

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以慢性多关节炎症为主要表现的全身性自身免疫性疾病，发病机制复杂，目前认为主要与人类白细胞抗原DR4基因（HIA—DR4）相关遗传因素、瓜氨酸化现象、调节性T细胞等因素有关，同时也与免疫球蛋白IgG的末端半乳糖残基丢失密切相关。新的研究也进一步证实，RA中除半乳糖残基的改变外，还存在其他蛋白质的多种糖基化改变，说明蛋白糖基化改变在RA发病中发挥着重要作用。本文就近年来RA与糖生物学相关进展做一综述，并对RA发病中蛋白糖基化变化的类型及其意义进行初步阐述。

丁香精油抗LDL糖基化活性及其主要成分—丁香酚与牛血清白蛋白的相互作用

实验室前期研究结果表明,在国家规定的药食两用物品名单中,丁香抗氧化活性最强。前人发现天然产物的抗氧化功能与抗糖基化活性息息相关。因此,目的是在此基础上进一步对丁香精油(clove essential oil,CEO)的抗糖基化活性及其中含量最高的组分—丁香酚(Eugenol)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的相互作用进行研究。在低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的非酶糖基化孵育体系中,光谱测定结果表明CEO对LDL糖基化早期、中期和末期产物的生成均具有显著的抑制效果,且对末期产物的抑制作用最强。采用气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography mass spectrometry,GC-MS)对CEO分析发现,CEO中含量最多的组分是丁香酚。通过多光谱和分子对接对丁香酚与BSA的相互作用研究发现,紫外-可见(ultraviolet-visible,UV-Vis)光谱表明丁香酚与BSA之间存在相互作用;在荧光发射光谱中,随着丁香酚浓度增加,BSA的荧光强度逐渐增强且发生蓝移,进一步证明了二者之间存在相互作用。通过计算不同温度下的结合常数发现,丁香酚与BSA产生相互作用过程中有热力学过程参与,热力学参数和位点标记竞争试验表明丁香酚通过氢键和范德华力与BSA在位点Ⅰ结合。随着丁香酚浓度增加,丁香酚与BSA混合体系的同步荧光(synchronous fluorescence,SF)、三维荧光(three-dimensional,3D)和傅里叶变换红外(Fourier transform infrared,FTIR)光谱的信号强度在发生变化的同时也发生了位移,表明丁香酚的添加使BSA构象发生了改变。通过分子对接技术进一步验证了丁香酚与BSA间相互作用的试验结果。该研究为丁香进一步开发应用提供理论支持。

空肠弯曲菌蛋白糖基化系统及利用该系统在大肠杆菌中表达糖蛋白的研究进展

蛋白质糖基化是蛋白质翻译后的一种重要加工过程，其种类主要有N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化是指寡糖链连接在蛋白的天冬酰胺β-酰胺氮上，O-糖基化是指寡糖链连接在蛋白的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的羟基的氧原子上。自从1976年在古细菌中发现S-层糖蛋白以来，已经在古细菌和细菌中发现70多种糖基化蛋白，

蛋白质糖基化修饰的非变性构象分辨质谱研究进展

糖基化是蛋白质最重要的翻译后修饰之一,能够调控蛋白质的电荷态、结构及分子间相互作用等,进而影响其功能。糖基化的高度异质性导致传统的结构解析方法很难对糖蛋白进行全面表征。随着分析技术的发展,质谱在糖蛋白结构解析中发挥了重要作用。蛋白质组学质谱技术可在多肽水平上对复杂、低丰度蛋白质糖基化修饰的化学组成与位点信息进行鉴定。非变性质谱技术(native mass spectrometry,nMS)则直接在完整蛋白水平上揭示聚糖异质性及其对蛋白高级结构和相互作用的调控效应。作为结构质谱的代表性技术,基于离子淌度的nMS受益于离子淌度仪的构象分辨能力和构象去折叠功能,能够在非变性质谱的基础上提供离子的三维动态结构信息,为异构体结构快速鉴定提供不可替代的解决方案。本文重点介绍了两种新兴离子淌度质谱技术,即非变性动态构象分辨质谱技术和糖型分辨结构质谱技术,并以3种常见蛋白体系为例,介绍其在糖蛋白构象研究领域的最新进展。