黑曲霉T21 glaA 5’上游调控区的两个蛋白结合因子及其靶序列

采用凝胶阻滞法从糖化酶高产株黑曲霉(Aspergillus niger)T21部分纯化的蛋白提取液中检测到与糖化酶基因(glaA)5＇cis调控区特异结合的两个蛋白因子,其一的靶DNA定位在glaA翻译起始点(ATG)上游-580～-509及-318～-254bp两个区域,另一蛋白因子的靶DNA定位在-809～-580区域.-580～-509序列含有“TATA”的重复结构,-318～-254序列富含“GC”以及-809～-580序列含有CCAAT的特点暗示此3片段及其所结合的蛋白因子在A.niger T21 glaA的表达调控中可能有重要作用.

胰岛素样生长因子结合蛋白2对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制研究

背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L)。采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点。将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验。根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和HG组;(2)NG组和NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和HG-IGFBP2-siRNA组。(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高。与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P<0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG 72 h时和Cleaved Caspase 3在HG 48 h时蛋白水平最高(P<0.05),据此选72 h为后续实验诱导时间点。RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P>0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P<0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验。与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P<0.05)。与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略。

胰岛素样生长因子结合蛋白作为衰老相关疾病生物标志物的研究进展

衰老是细胞、组织和器官功能不可逆的衰退过程,与多种衰老相关慢性疾病的发生和发展密切相关。在全球人口老龄化背景下,早期诊断和监测衰老相关疾病,对于实现健康老龄化具有重要意义。胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor-binding proteins,IGFBPs)作为重要的分泌蛋白,在调控衰老相关疾病中的作用逐渐被揭示,展现出作为衰老及相关疾病生物标志物的巨大潜力。该文综述了IGFBPs在衰老相关疾病中的临床应用价值和研究进展,旨在为衰老相关疾病的预警、诊断和预后提供新的思路和方法。

胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达与首发精神分裂症患者认知损伤的相关性

目的:探讨精神分裂症患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)水平及与认知功能之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测103例精神分裂症患者和64名正常对照的血清IGF-1和IGFBP-1蛋白的表达水平;采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估患者的临床症状及严重程度;使用中文版认知功能成套测验(MCCB)评价研究对象的认知功能。结果:精神分裂症组外周血中的IGFBP-1表达增高(P=0.01),而IGF-1的表达与HCs组无明显差异(P>0.05)。IGF-1的表达水平与患者认知功能维度中的工作记忆、言语学习与记忆、视觉学习与记忆、社会认知及MCCB总分均呈负相关(P均<0.05),IGFBP-1的表达水平与患者的认知功能维度中的处理速度评分呈负相关(P<0.05),正常对照组IGF-1和IGFBP-1与认知功能评分均无相关性(P>0.05)。结论:精神分裂症患者血清中IGF-1与IGFBP-1的表达与患者认知功能存在负相关,表明IGF-1及IGFBP-1在精神分裂症认知损伤中发挥了一定的作用。

血清B型脑钠肽、胰岛素样生成因子结合蛋白-3水平与非酒精性脂肪肝患者心房颤动的关系

目的探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者血清B型脑钠肽(BNP)、胰岛素样生成因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平与心房颤动发生的关系。方法选取105例NAFLD患者纳入观察组,另选取105例健康体检者纳入对照组。收集患者的临床资料,比较2组血清BNP、IGFBP-3水平,分析NAFLD患者发生心房颤动的影响因素,探讨血清BNP、IGFBP-3的交互作用对NAFLD患者心房颤动发生风险的影响,评估血清BNP、IGFBP-3水平对NAFLD患者心房颤动的预测价值。结果观察组血清BNP、IGFBP-3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者1年内发生心房颤动30例,心房颤动患者的体质量指数(BMI)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、BNP和IGFBP-3水平均高于未发生心房颤动患者,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于未发生心房颤动患者,差异有统计学意义(P<0.05);BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C、BNP和IGFBP-3均为NAFLD患者发生心房颤动的影响因素(P<0.05);BNP、IGFBP-3存在交互作用,且NAFLD患者心房颤动发生风险中有50.47%归因于两者交互作用;血清BNP、IGFBP-3联合预测的曲线下面积为0.928,显著大于BNP、IGFBP-3单独预测的曲线下面积0.753、0.821(P<0.05)。结论BNP、IGFBP-3在NAFLD患者血清中的表达水平显著升高,两者联用可有效预测患者心房颤动的发生。

多囊卵巢综合征不孕女性血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3、游离睾酮指数水平及与卵巢储备功能的关系

目的 分析多囊卵巢综合征(PCOS)不孕女性血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、游离睾酮指数(FAI)水平及其与卵巢储备功能的关系。方法 回顾性分析青岛市第八人民医院收治的120例PCOS不孕女性(观察组)和42名健康体检女性(对照组)的临床资料。比较观察组和对照组研究对象血清IGFBP-3及FAI水平,并统计观察组患者卵巢储备功能情况,比较卵巢储备功能正常、卵巢储备功能低下患者的基线资料,分析PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的影响因素,血清IGFBP-3、FAI水平与PCOS不孕女性卵巢储备功能的关系及其对PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的预测效能。结果 与对照组比较,观察组患者血清IGFBP-3水平更低,FAI水平更高(P<0.05)。120例PCOS不孕女性中,38例存在卵巢储备功能低下。与卵巢储备功能正常患者比较,卵巢储备功能低下患者的盆腔炎发生率、婚姻不满意占比及FAI水平更高(P<0.05),血清IGFBP-3水平更低(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示盆腔炎(95%CI:1.151~6.290)、婚姻满意程度(95%CI:1.033~4.952)、血清IGFBP-3水平(95%CI:0.040~0.286)及FAI水平(95%CI:10.024~185.807)是PCOS不孕女性的卵巢储备功能低下的影响因素(P<0.05)。Pearson分析显示血清IGFBP-3水平与卵巢储备功能呈正相关关系(r=0.513,P<0.05),FAI水平与卵巢储备功能呈负相关关系(r=-0.495,P<0.05)。ROC曲线分析血清IGFBP-3、FAI水平及两者联合预测PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的AUC分别为0.786、0.845、0.912,且联合预测的AUC值更高(P<0.05)。结论 与正常人群比较,PCOS不孕女性血清IGFBP-3水平更低,与卵巢储备功能呈正相关关系;FAI水平更高,与卵巢储备功能呈负相关关系,即血清IGFBP-3水平越低,FAI水平越高,卵巢储备功能越低下,血清IGFBP-3联合FAI水平对卵巢储备功能低下具有较好的预测效能。

胰岛素样生长因子Ⅱ信使核糖核酸结合蛋白3和上游移码蛋白1对支架内再狭窄的预测价值

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)的胰岛素样生长因子Ⅱ信使核糖核酸(mRNA)结合蛋白3(IMP3)、上游移码蛋白1(UPF1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选取2021年2月至2023年2月于青岛大学附属医院接受PCI的ACS患者138例,依据冠状动脉造影显示的血管再狭窄情况分为ISR组21例和非ISR组117例。比较2组患者一般临床资料、实验室检查结果、超声心动图数据,检测IMP3、UPF1及VEGF水平。采用多因素logistic回归分析PCI术后支架表面再内皮化的影响因素,用ROC曲线分析VEGF、IMP3及UPF1对ISR的预测价值。结果ISR组患者血清VEGF、IMP3水平低于非ISR组,血清UPF1水平高于非ISR组(P<0.05,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,VEGF(OR=1.095,95%CI:1.034~1.151,P=0.001)、IMP3(OR=3.413,95%CI:1.824~6.381,P=0.014)是PCI术后支架表面再内皮化的保护因素,UPF1(OR=0.252,95%CI:0.047~0.965,P=0.006)是PCI术后支架表面再内皮化的危险因素。Pearson相关性分析显示,IMP3与VEGF呈正相关(r=0.665,P=0.000),UPF1与VEGF呈负相关(r=-0.580,P=0.000)。ROC曲线分析显示,UPF1和IMP3及VEGF联合是预测ISR的最优指标,曲线下面积为0.899(95%CI:0.796~1.000,P=0.000),敏感性为85.71%,特异性为83.33%。结论IMP3可通过促进VEGF表达,抑制ISR的发生;UPF1可抑制VEGF的表达,导致ISR的发生。UPF1和IMP3及VEGF联合可有效预测PCI术后ISR的发生,具有良好的预测价值。

胰岛素样生长因子结合蛋白-4在结直肠肿瘤中的研究进展

结直肠癌是最常见的消化系统癌症之一,其晚期或转移性肿瘤患者的预后仍然很差。而胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)是一种多功能的细胞增殖调控因子,具有IGFBP结构域和甲状腺球蛋白I型结构域,其在骨骼发育、细胞增殖、信号转导以及调控细胞生长方面发挥着重要的作用,并且参与生物体的衰老过程以及多种疾病的发生。在结直肠肿瘤中,IGFBP-4既可通过与胰岛素样生长因子(IGF)结合发挥抑制肿瘤细胞增殖、分化以及生长,又可通过Wnt/β-catenin、IL-6、Bcl-2/Bax等多种信号通路参与结直肠肿瘤发生与发展过程。因此,本研究就近年关于IGFBP-4结构功能以及其与结直肠肿瘤发生关系的研究进展进行分析和总结。

胰岛素样生长因子2结合蛋白2基因多态性与妊娠期糖尿病的关系

目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs4402960位点、rs1470579位点和rs11705701位点的多态性。结果GDM组总胆固醇、空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,GDM组IGF2BP2基因rs4402960位点GG基因型较少,TT基因型较多,等位基因T频率较高,等位基因G频率较低(P<0.05);rs11705701位点等位基因A频率较低,等位基因G频率较高(P<0.05);而其他基因型和基因频率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGF2BP2基因多态性与GDM发生有关,可通过基因多态性结果评估和筛选GDM高风险人群,以提高对GDM控制。

左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

急性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子结合蛋白-7、沉默信息调节因子4表达水平及意义

目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)、沉默信息调节因子4(SIRT4)在急性心力衰竭(AHF)患者血清中的表达水平及其对预后的预测价值。方法 选取151例AHF患者(AHF组)和151例健康体检者(对照组)作为研究对象,检测并比较2组血清IGFBP-7、SIRT4、N-末端钠尿肽前体(NT-proBNP)和活性氧(ROS)水平。分析血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS水平与病情分级的关系;采用Pearson相关系数法分析IGFBP-7、SIRT4与NT-proBNP、ROS的相关性;采用多因素Logistic回归分析法分析AHF患者预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清IGFBP-7、SIRT4对AHF患者预后不良的预测效能。结果 AHF组血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP和ROS水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AHF组患者中,病情分级Ⅳ级者血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP和ROS水平高于Ⅲ级者和Ⅱ级者,且Ⅲ级者高于Ⅱ级者,差异有统计学意义(P<0.05);AHF组预后不良者病情分级和血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS表达水平均高于预后良好者,差异有统计学意义(P<0.05)。AHF患者血清IGFBP-7、SIRT4水平均分别与血清NT-proBNP、ROS水平呈正相关(r=0.523、0.498、0.578、0.557,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,病情分级和血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS水平均为AHF患者预后的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清IGFBP-7、SIRT4对AHF患者预后均有一定预测价值,曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.795,且两者与ROS联用的预测价值更高,AUC为0.909(95%CI:0.858~0.959)。结论 IGFBP-7、SIRT4在AHF患者血清中呈高表达,且其表达水平与患者病情分级和预后显著相关,两者联合检测对患者预后具有较高的预测价值。

胰岛素样生长因子结合蛋白3在脑梗死模型的表达及Smad信号通路的参与机制

目的 探讨Smad信号通路机制在脑梗死模型大鼠中的作用以及脑组织胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的表达变化与神经功能的关系。方法 60只健康成年雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,每组20只,模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估各组大鼠的改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用苏木精-伊红染色法检测脑组织病理学变化情况,采用Western blot法对大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白水平进行检测,并采用逆转录聚合酶链反应测定大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4 mRNA水平。用Spearman相关性分析IGFBP-3、Smad2、Smad4、P21表达水平之间的相关性。结果 苏木精-伊红染色结果显示,模型组大鼠出现明显脑组织水肿,表现为脑细胞排列紊乱,小胶质细胞数量变多,脑细胞核仁出现模糊,其中脑梗死面积为20.55%。与假手术组和正常对照组比较,模型组大鼠mNSS评分、IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白及mRNA相对表达水平明显升高,P21蛋白及mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中IGFBP-3 mRNA表达水平与mNSS评分、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA呈显著正相关(r=0.568,r=0.623,r=0.597,P<0.01);IGFBP-3 mRNA表达水平与P21呈显著负相关(r=-0.573,P<0.01)。结论 脑梗死大鼠脑组织IGFBP-3水平显著升高,且IGFBP-3水平与脑梗死大鼠神经功能之间关系密切,其作用机制可能与Smad信号通路有关。

潜在转化生长因子β结合蛋白4影响肿瘤细胞伪足形成抑制结直肠癌转移的分子机制研究

目的 探究潜在转化生长因子β结合蛋白4(latent transforming growth factor beta binding protein 4,LTBP4)通过影响肿瘤细胞伪足形成从而遏制结直肠癌细胞转移的分子机制。方法 在结直肠癌细胞株DiFi中使用小干扰si-LTBP4敲减LTBP4,在结直肠癌细胞株HCT15中使用LTBP4过表达质粒过表达LTBP4。使用人源慢病毒在DiFi细胞株中稳定敲减/不敲减LTBP4构建稳转细胞株shLTBP4和shNC。Western blot法检测LTBP4、原肌球蛋白4(tropomyosin 4,TPM4)、金属基质蛋白酶14(matrix metalloproteinase-14,MMP14)及酪氨酸激酶底物5(tyrosine kinase substrate 5,TKS5)等蛋白。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测LTBP4及TPM4的表达。Transwell迁移实验检测敲低/过表达LTBP4后结直肠癌细胞的体外转移能力。使用裸鼠尾静脉注射shLTBP4或shNC稳转细胞株构建裸鼠肺转移模型及阴性对照,检测结直肠癌细胞敲减LTBP4后的体内转移能力。转录组测序检测差异基因表达情况。鬼笔环肽染色观察敲低LTBP4后细胞骨架改变及侵袭性伪足形成情况。结果 qPCR实验检测发现,LTBP4在DiFi、HCT8和KM12C细胞株中均高表达(均P<0.05),在HCT15和KM12SM细胞株中均低表达(均P<0.01)。Westen blot检测发现,LTBP4在DiFi、HCT8和KM12C细胞株中均高表达(均P<0.01),在HCT15、KM12SM及RKO细胞株中均低表达(均P<0.05)。在高表达LTBP4的DiFi细胞株中转染小干扰si-LTBP4,敲低LTBP4,转染后72 h后进行transwell迁移实验发现,肿瘤细胞迁移能力增强(P<0.01);而在低表达LTBP4的HCT15细胞株中过表达LTBP4,72 h后肿瘤细胞迁移能力减弱(P<0.01)。裸鼠肺转移模型在通过尾静脉注射稳转细胞株shLTBP4以及shNC 5周后进行小动物活体荧光成像发现,敲减LTBP4后,小鼠肺部荧光信号增强(P<0.01)。高通量转录组测序发现,在DiFi细胞株中敲减LTBP4使细胞骨架蛋白TPM4的表达量增加(P<0.01),维持细胞运动功能(如肌动蛋白丝束收缩、应力纤维改变和肌动蛋束的调节)相关通路显著富集(均P<0.05)以及细胞形态改变相关通路(如轴突伸展调节、突触前膜、核孔和活性离子跨膜传输等)显著富集(均P<0.05)。Western blot、qPCR及免疫荧光实验验证DiFi细胞株中敲减LTBP4促进细胞运动相关蛋白TPM4的表达(均P<0.01)。结论 LTBP4可以通过调控TPM4的方式抑制侵袭性伪足的形成从而遏制结直肠肿瘤细胞的转移。

0~6岁儿童血锌、25-羟基维生素D、胰岛素样生长因子结合蛋白-3的水平及临床意义

目的 探究0~6岁儿童血中锌、25-羟基维生素D[25-(OH)D]、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的水平及临床意义。方法 选取2018年4月至2020年4月贵港市人民医院0~6岁儿童80例,其中21例发育缓慢患儿作为缓慢组,59例健康正常儿童作为对照组。比较2组血锌水平、25-(OH)D水平、IGFBP-3水平、骨密度、身高、体重,采用相关性分析它们的关系;多因素回归分析发育迟缓的相关影响因素。结果 缓慢组较对照组血锌[(59.79±12.33)μmol·L^(-1)比(72.09±15.47)μmol·L^(-1)]、25-(OH)D[(26.68±8.56)ng·mL^(-1)比(34.99±10.02)ng·mL^(-1)]、IGFBP-3[(0.60±0.19)ng·mL^(-1)比(0.99±0.30)ng·mL^(-1)]、身高[(81.25±8.49)cm比(103.85±11.26)cm]、体重[(11.97±3.67)kg比(16.51±5.43)kg]均更低(均P<0.05),骨密度不足者占比更高(100.00%比20.34%,P<0.05);血锌、25-(OH)D、IGFBP-3水平与儿童骨密度分级呈负相关(r=-0.515、-0.888、-0.449,均P<0.05),与身高(r=0.633、0.582、0.794)、体重(r=0.517、0.499、0.815)均呈正相关(均P<0.05);血锌(OR=0.376)、25-(OH)D(OR=0.438)、IGFBP-3水平(OR=0.735)、骨密度分级[OR=1.155(轻度不足)、1.522(中度不足)、2.374(重度不足)]均为儿童发育迟缓的影响因素(均P<0.05)。结论 0~6岁发育迟缓儿童血中锌、25-(OH)D、IGFBP-3水平均较低,且三者与患儿的骨密度呈负相关,与体重和身高呈正相关,均是影响发育迟缓的危险因素。

胰岛素样生长因子结合蛋白-7在急性心力衰竭所致呼吸困难诊断中的应用

目的探讨血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)以及IGFBP7联合N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)在急性心力衰竭所致呼吸困难中的诊断价值。方法选取2018年3月至2020年9月中国医科大学附属第一医院急诊科就诊的154例急性呼吸困难患者为研究对象,根据临床诊断结果,将患者分为非急性心力衰竭组(n=93)和急性心力衰竭组(n=61)。2组患者均进行血常规,肝、肾功能,胸部X线片、心电图和超声心动图检查及左心室射血分数(LVEF)、血浆IGFBP7和NT-proBNP水平检测。采用t检验或χ2检验比较2组各项临床指标的差异,对有统计学意义(P<0.05)指标采用logistic回归分析急性心力衰竭的危险因素。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析IGFBP7、NT-proBNP以及二者联合对急性心力衰竭患者呼吸困难的诊断价值。结果与非急性心力衰竭组比较,急性心力衰竭组患者合并高血压、冠状动脉疾病、心房颤动比例,血浆IGFBP7和NT-proBNP水平显著增高,而合并哮喘/慢性阻塞性肺疾病(COPD)比例、LVEF和肾小球滤过率估算值(eGFR)则显著降低(均P<0.05)。logistic回归分析结果显示,IGFBP7、NT-proBNP升高及LVEF降低是急性心力衰竭的危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析表明,IGFBP7的ROC曲线曲线下面积(AUC)为0.878(0.821~0.935)。IGFBP7最佳截断值为98.4 ng/mL,诊断心力衰竭性呼吸困难的灵敏度为85.2%,特异度为82.8%。NT-proBNP的ROC曲线AUC为0.879(0.818~0.940)。NT-proBNP的最佳截断值为1366 ng/L,诊断心力衰竭性呼吸困难的灵敏度为85.2%,特异度为89.2%。二者联合诊断的AUC为0.952(0.918~0.986),灵敏度为88.5%,特异度92.5%。结论单独使用IGFBP7或联合NT-proBNP是诊断急性心力衰竭所致呼吸困难的有效方法,IGFBP7可作为一种新型的急性心力衰竭的生物学标志物。

血糖控制对1型糖尿病儿童生长发育的影响及与胰岛素样生长因子结合蛋白3型的相关性研究

目的 评估血糖控制对1型糖尿病(T1DM)儿童生长发育的影响,并分析其与胰岛素样生长因子结合蛋白3型(IGFBP-3)的相关性。方法 将2018年7月至2021年12月唐山市妇幼保健院儿科门诊收治的70例青春期前T1DM儿童纳入本次横断面研究,其中35例男性和35例女性,分别纳入研究组1组和2组。另选同时间段内30名年龄匹配的健康儿童纳入对照组,包括15名男性和15名女性。比较3组的儿童身高、体重、身高和体重百分位数、糖化血红蛋白(HbA1c)和IGFBP-3水平,并采用Spearman分析HbA1c与身高、身高百分位数、体重、体重百分位数进行的相关性,IGFBP-3与身高、身高百分位数、体重、体重百分位数、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPBG)、HbA1c的相关性。结果 研究1组、研究2组和对照组的平均身高分别为(129.287±13.41)、(127.73±10.15)、(136.760±13.431) cm,平均体重分别为(31.10±9.45)、(28.33±7.76)、(35.86±9.02) kg,与对照组相比,研究1组、研究2组儿童的身高和体重均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究1组、研究2组和对照组身高百分位数的为24.58%、28.05%和87.20%,体重百分位数的为42.77%、38.44%和86.46%,与对照组相比,1型糖尿病儿童的身高和体重百分位数均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究1组、研究2组和对照组的血清IGFBP-3分别为(3978.19±812.50)、(3796.24±795.25)、(4948.75±982.42) ng/mL,研究1组、研究2组儿童的血清IGFBP-3明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究1组、研究2组和对照组的HbA1c分别为(9.71±1.52)%、(9.20±1.17)%和(5.02±0.27)%,与对照组相比,研究1组、研究2组儿童的HbA1c明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究1组与研究2组间上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。Spearman分析显示,HbA1c与血清IGFBP-3、身高和身高百分位数呈负相关(r=-0.332、-0.269、-0.402),血清IGFBP-3与身高、身高百分位数、体重及体重百分位数呈正相关(r=0.373、0.349、0.381、0.365)。结论 青春期前男性T1DM与女性T1DM儿童的血糖相关指标均较健康儿童明显升高,而IGFBP-3明显降低,且身高、体重及对应百分比均低于健康儿童,但男、女T1DM无显著差异,T1DM患儿血清IGFBP-3水平、生长发育与血糖控制有关。

灯盏花素通过转录因子cAMP反应元件结合蛋白磷酸化促进细胞自噬保护心肌细胞缺血-再灌注损伤的机制研究

背景心肌缺血-再灌注(ischemia-reperfusion injury,I/R)损伤是心肌梗死血流再灌注后出现的常见临床问题,自噬在心肌I/R损伤过程中的作用机制尚不完全明确。目的研究灯盏花素在保护心肌缺血再灌注损伤过程中通过转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)促进自噬减轻细胞损伤的机制。方法在50μmol/L灯盏花素为最佳应答浓度的基础上进行实验。实验分为正常对照(Vehicle)组、I/R组、灯盏花素处理(Scu+I/R)组和CREB抑制并灯盏花素处理(KG501+Scu+I/R)组。通过糖氧剥夺培养方式建立小鼠心肌细胞I/R损伤模型,MTT法测定细胞活力;生化法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平;RT-PCR测定线粒体内膜融合蛋白1(optic atrophy 1,Opa1)和线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)表达;Western blot测定LC3、CREB和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB)表达。结果MTT测定发现:相比于其他浓度,50μmol/L灯盏花素可显著增加细胞活力,使I/R损伤心肌细胞SOD表达增加(P<0.01),MDA表达减少(P<0.01),LDH表达减少(P<0.01),ATP表达增加(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ比值增加(P<0.05),Drp1 mRNA表达减少(P<0.01),Opa1 mRNA表达增加(P<0.01),p-CREB/CREB比值增加(P<0.01)。CREB抑制剂(KG-501)可显著降低灯盏花素处理组的ATP、Opa1 mRNA表达(P均<0.01),使LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低(P<0.05),细胞活力降低(P<0.01)。结论灯盏花素能够促进缺血心肌细胞自噬,缓解氧化损伤,提高心肌细胞活力。在保护心肌缺血-再灌注损伤过程中,灯盏花素可能通过CREB通路调节自噬作用。

胰岛素样生长因子结合蛋白-7水平与2型糖尿病病人心血管风险的关系

目的:分析胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)水平与2型糖尿病病人心血管风险的关系。方法:选取2018年12月—2019年12月于我院就诊的158例2型糖尿病病人,入院时测量病人基线IGFBP7水平,根据IGFBP7水平中位数分为高水平组和低水平组,各79例。治疗后通过门诊、电话等方式随访2年,记录两组主要不良心血管事件(MACE)发生情况。采用Kaplan-Meier曲线分析两组2型糖尿病病人心血管风险,并将所有完成随访的病人根据是否发生MACE事件分为发生组和未发生组,采用多因素Logistic回归分析IGFBP7对2型糖尿病的影响,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析IGFBP7对2型糖尿病病人发生MACE的预测效能。结果:截至末次随访时间2021年12月19日,实际纳入有效病例:高水平组73例,低水平组70例。Kaplan-Meier曲线分析显示,高水平组MACE发生风险高于低水平组(Log-Rank χ^(2)=6.289,P=0.012)。多因素Logistic回归分析显示,基线IGFBP7水平(OR=1.428)、空腹血糖(OR=5.293)、糖化血红蛋白(OR=7.004)、餐后血糖(OR=2.037)、三酰甘油(OR=4.335)、总胆固醇(OR=20.327)、低密度脂蛋白胆固醇(OR=4.731)是2型糖尿病病人发生MACE的独立危险因素。ROC分析显示,IGFBP7水平预测2型糖尿病病人MACE发生的ROC曲线下面积为0.920,高于空腹血糖(0.730)、糖化血红蛋白(0.696)、餐后血糖(0.760)、三酰甘油(0.798)、总胆固醇(0.770)、低密度脂蛋白胆固醇(0.727)。结论:高基线IGFBP7水平的2型糖尿病病人发生MACE风险升高,IGFBP7水平联合高血脂代谢指标(三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)及高血糖状态指标(空腹血糖、糖化血红蛋白、餐后血糖)建立的模型预测2型糖尿病病人MACE发生有较好的效能。

大菱鲆IGF结合蛋白的营养调控功能

为揭示IGF结合蛋白(Insulin-like growth factor binding protein, IGFBP)对水产动物生理生长和营养代谢的影响,选取大菱鲆肌成纤维细胞作为研究对象,通过生物信息学分析将斑马鱼(Danio rerio)、智人(Homo sapiens)和大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)中igfbp基因的氨基酸序列共同进行分析推断进化历史,对肌成纤维细胞进行IGFBPs的抑制剂(NBI 31772)和IGF1R的抑制剂(BMS 554417)处理,通过荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、Annexin V-FITC染色、代谢物测定等分析。结果显示:大菱鲆IGFBP家族共有12个基因,不同的igfbp基因具有显著的组织表达特异性。在脑、鳃、胆囊组织中igfbp2a表达量最高;在眼、肌肉、肾脏、皮肤组织中igfbp5a表达量最高;在脾脏和心脏组织中igfbp3b表达量最高;在肝脏组织中igfbp2b表达量最高;在肠组织中igfbp4表达量最高;大菱鲆肌成纤维细胞在营养诱导后igfbp1a、igfbp3b、igfbp4、igfbp5a和igfbp5b基因表达呈先下降后上升的趋势。igf2相较于igf1对营养应答更敏感。短期抑制IGFBPs能够促进IGF的信号激活能力,而长期抑制IGFBPs则降低IGF的活性并导致细胞凋亡。此外,长期抑制IGFBPs会造成糖酵解和三羧酸循环代谢中间物含量降低,但会积累细胞内游离必需氨基酸。研究成果为进一步认识IGFBPs及IGF信号通路在水产动物中的作用提供了新的参考。

血清胰岛素样生长因子结合蛋白7的水平与多囊卵巢综合征及其胰岛素抵抗的关系

目的探讨血清胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)水平与多囊卵巢综合征(PCOS)及其胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选择2021年10月至2022年12月于徐州市中心医院生殖中心就诊的PCOS患者为PCOS组(91例),收集同时期同年龄段因输卵管因素或男方因素行辅助生殖的女性为对照组(85例)。收集所有研究对象的一般资料,包括年龄、体质量指数(BMI)、腰围等;检测研究对象血清中部分生化指标如血糖、脂代谢相关指标、生殖激素水平等。采用二元Logistic回归分析评价血清IGFBP7水平与PCOS及其IR发生的关系;采用多因素线性回归分析筛查与PCOS患者IGFBP7水平升高有关的因素。结果PCOS组患者的BMI、腰围、抗苗勒管激素(AMH)、黄体生成素(LH)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、游离雄激素指数(FAI)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIN)、胰岛素抵抗的稳态模型指数(HOMA-IR)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、IGFBP7水平均显著高于对照组(P<0.05),而年龄、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、性激素结合球蛋白(SHBG)水平均显著低于对照组(P<0.05);两组间卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))水平差异均无统计学意义(P>0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,血清AMH、TT、SHBG及IGFBP7水平与PCOS的患病独立相关(P<0.05);TG、HDL-c、IGFBP7水平与PCOS患者合并IR独立相关(P<0.05)。在PCOS组中,血清IGFBP7水平与FAI、FPG、FIN、HOMA-IR、TG呈正相关,与SHBG、HDL-c呈负相关(P<0.05)。线性回归分析结果显示,FAI、FIN水平升高是IGFBP7水平升高的独立相关因素(P<0.05)。结论血清IGFBP7水平的升高与PCOS及其IR的发生独立相关;FAI与FIN水平的升高与PCOS患者血清IGFBP7水平的升高独立相关。