蛋白酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3信号通路在大鼠肾脏移植慢性排斥反应中的作用机制

目的探讨蛋白酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路在大鼠肾脏移植慢性排斥反应中的作用机制。方法将60只大鼠分为空白对照组[供鼠(10只)、受鼠(10只)均为Lewis大鼠]、阳性对照组[供鼠(10只)为F344大鼠,受鼠(10只)为Lewis大鼠]和STAT3拮抗组[供鼠(10只)为F344大鼠,受鼠(10只)为Lewis大鼠],检测其术前及术后12周血肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)水平并进行比较。比较3组大鼠肾脏组织病理学变化和慢性移植损伤指数(CADI)评分。采用免疫组化检测转化生长因子(TGF)-β1/果蝇母性DPP同源蛋白(Smad)3、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)纤维化指标。采用蛋白质印记法(Western blot)检测TGF-β1、α-SMA、JAK2和STAT3蛋白的表达。结果空白对照组和STAT3拮抗组大鼠血清SCr及BUN水平均低于阳性对照组(P<0.05)。阳性对照组大鼠肾脏组织弥漫性炎症细胞浸润表现较明显,其他两组大鼠中炎症细胞浸润较少。阳性对照组大鼠CADI评分明显高于其他两组(P<0.05)。空白对照组和STAT3拮抗组大鼠肾脏组织中TGF-β1、α-SMA、JAK2和STAT3蛋白表达水平明显低于阳性对照组(P<0.05)。结论STAT3的特异性抑制剂可在大鼠肾脏移植慢性排斥反应中抑制JAK2/Smad3信号通路所引起的炎症反应,对肾脏移植起到一定的保护作用。

蛋白酪氨酸激酶JAK/信号传导子和转录激活子STAT信号通路的调控与口腔肿瘤的关系

口腔肿瘤具有多样复杂性,肿瘤的发生机制不明。JAK/STAT信号通路是继Ras通路之后出现的又一重要的细胞因子信号传导通路。该通路能够传导多种细胞内信号,涉及细胞增殖分化、细胞凋亡、炎症及肿瘤等多种病理生理过程。本文对JAK/STAT信号通路及其与口腔肿瘤发生和治疗的关系作一综述。

同型半胱氨酸血症诱导内皮细胞蛋白激酶C和核转录因子-κB的活化

目的探讨内皮细胞蛋白激酶C(PKC)和核转录因子-κB(NF-κB)信号传导系统在调节高同型半胱氨酸(Hcy)血症发病过程中的作用。方法Hcy、PKC抑制剂或两者联合作用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)不同时间点后,用TransAMTM系统和凝胶电泳迁移率实验(EMSA)法检测NF-κB P65的活性,蛋白质印迹技术分析相关蛋白的表达。结果EMSA和TransAMTM系统检测显示,在高浓度Hcy刺激下,HUVEC中NF-κB的活化高峰出现在作用0.5 h和6 h时;且伴有IκBα短暂快速的磷酸化(P<0.05);Hcy刺激0.5 h后PKC水平较对照组明显上升(P<0.05);予以PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ(100 nmol/L)处理后,由Hcy所介导的NF-κB的激活作用和IκBα磷酸化效应几乎完全被抑制。结论Hcy能诱导HUVEC NF-κB系统活化,这些生物学效应是通过PKC信号通路来实现的;PKC抑制剂能显著抑制上述效应。

信号传导及转录激活因子4在肝病中作用机制的研究进展

信号传导与转录激活因子(STAT)是由Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK)活化的一类转录因子。STAT4是JAK/STAT信号通路中的一名重要成员。近年在各肝病的研究中发现,STAT4与各种肝病的发生与发展均有密切关系。本文将近年对STAT4在各型肝病中的作用影响与相关研究作一综述,以期为找到更有效的缓解和治愈肝病的新方法提供新思路。

PP2C蛋白磷酸酶调控的细胞信号通路研究进展

2C类蛋白磷酸酶是蛋白磷酸酶家族的重要成员,可以对丝/苏氨酸残基特异性脱磷酸。近来研究表明,2C类蛋白磷酸酶控制着大量关键的细胞功能,如增殖、细胞周期阻滞、衰老和细胞程序性死亡、凋亡和自噬等,因而在介导机体免疫反应、衰老、神经发育及肿瘤发生发展中发挥重要的生物学作用。总结PP2C基因各亚型参与介导的重要细胞信号通路,如丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)、转化生长因子-β(TGF-β)/Smads、核转录因子-κB(NF-κB)及DNA损伤应答通路,以期为阐明上述生理病理过程的分子基础和调控机制提供新的思路。

硝普钠对实验性脑出血大鼠神经功能及蛋白酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3通路的影响

目的研究硝普钠对实验性脑出血大鼠神经功能及蛋白酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组,模型组和实验组,每组20只。模型组和实验组大鼠通过注射Ⅶ型胶原酶及肝素混合液构建实验性脑出血模型,对照组予以等量0. 9%NaCl;实验组大鼠于建模后6,24,72,120 h予以腹腔注射硝普钠1 mg·kg^(-1),模型组及对照组则予以等量0. 9%NaCl。用称重法测定各组大鼠脑含水量;用DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠脑组织细胞凋亡情况;用蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织JAK2/STAT3通路蛋白表达。结果对照组,模型组和实验组建模后72 h脑含水量分别为(76. 05±2. 04)%,(84. 91±2. 58)%,(79. 68±3. 01)%;神经细胞凋亡率分别为(7. 52±1. 86)%,(50. 23±2. 43)%,(26. 24±2. 37)%;脑组织中p-JAK2蛋白相对表达量分别为0. 07±0. 13,1. 26±0. 05,0. 33±0. 05,p-STAT3蛋白相对表达量分别为0. 20±0. 03,0. 38±0. 06,0. 26±0. 09,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论硝普钠对实验性脑出血大鼠的脑损伤有一定的保护作用,可能与其调控JAK2/STAT3通路,减轻脑组织细胞凋亡有关。

蛋白质酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3通路在瘦素调节小胶质细胞炎性反应中的作用

蛋白质酪氨酸激酶2/信号传导与转录激活因子3（JAK2/STAT3）通路是近年来发现的一条由细胞因子刺激的信号转导通路,参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程[1].本实验旨在观察瘦素作用小胶质细胞后是否通过JAK2/STAT3信号转导通路诱导小胶质细胞免疫应答反应,探讨瘦素对小胶质细胞免疫炎性反应调节的机制.

c-Myc调控葡萄糖转运蛋白4激活酪氨酸激酶/信号转导与转录激活因子促进三阴性乳腺癌机制研究

目的探讨c-Myc调控葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)激活酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路促进三阴性乳腺癌(TNBC)进展机制。方法通过生信分析GLUT4、c-Myc关联性及GLUT4与乳腺癌临床病理特征间关系。收集三阴性乳腺癌患者临床样本,免疫组织化学检测GLUT4和c-Myc表达水平。构建敲除c-Myc的MDA-MB-231细胞株,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测GLUT4表达水平。构建敲除GLUT4和同时敲除GLUT4及c-Myc的MDA-MB-231细胞株,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测增殖,流式细胞仪检测凋亡,Transwell检测迁移和侵袭。Western blot进一步分析c-Myc调控GLUT4对JAK/STAT的影响。正态分布计量资料比较采用独立样本t检验,多组资料组间比较采用方差分析。结果生信分析结果显示,在乳腺癌中GLUT4明显下调(P<0.01)且与乳腺癌TNM分期、病理分级、PAM50分型等相关。免疫组织化学评分结果显示,c-Myc在TNBC癌组织中表达显著高于癌旁组织(7.233比4.567,t=4.551,P<0.01),而GLUT4显著低表达(4.800比7.933,t=5.702,P<0.01)。在MDA-MB-231细胞中敲除c-Myc,RT-qPCR结果显示,c-Myc敲除组GLUT4表达量高于阴性对照组(2.486±0.273比1.070±0.140,F=55.005,P<0.01),Western blot结果显示,c-Myc敲除组GLUT4表达量高于阴性对照组(0.691±0.041比0.431±0.055,F=29.027,P<0.01)。构建GLUT4低表达的MDA-MB-231细胞株,RT-qPCR结果显示,GLUT4沉默组表达量低于阴性对照组,差异有统计学意义(0.507±0.076/0.137±0.025/0.317±0.085比1.150±0.200,F=45.016,P<0.01)。CCK-8结果显示,组细胞存活率高于阴性对照组(128.614±13.780比95.875±9.130,F=26.927,P<0.01),继续敲除c-Myc后细胞存活率低于阴性对照组(70.977±5.906比95.875±9.130,F=26.927,P<0.01)。流式细胞术结果显示,同时敲除GLUT4及c-Myc后细胞凋亡高于阴性对照组(12.170±1.283比3.263±0.691,F=102.946,P<0.01)。Transwell结果显示,敲除GLUT4后细胞迁移数高于阴性对照组[(237.333±14.364)个比(156.667±10.693)个,F=91.074,P<0.01]、侵袭数高于阴性对照组[(257.000±9.539)个比(152.333±5.132)个,F=90.437,P<0.01],细胞迁移侵袭能力增强,而同时敲除c-Myc和GLUT4后细胞迁移数低于阴性对照组[(67.000±14.177)个比(156.667±10.693)个,F=91.074,P<0.01]、侵袭数低于阴性对照组[(91.667±13.650)个比(152.333±5.132)个,F=90.437,P<0.01],细胞迁移侵袭能力减弱。Western blot结果显示,敲除GLUT4后c-Myc(0.814±0.060比0.447±0.028)、p-JAK2(0.629±0.038比0.380±0.030)、p-STAT3(0.698±0.029比0.288±0.016)表达量均高于相应阴性对照组(F=17.541,P<0.01),而继续敲低c-Myc后,GLUT4表达量高于单纯敲低GLUT4组(0.618±0.029比0.529±0.049,F=68.772,P<0.05),p-JAK2(0.510±0.033比0.629±0.038)、p-STAT3(0.410±0.050比0.698±0.029)表达量低于单纯敲低GLUT4组(F=68.772,P<0.01)。结论在三阴性乳腺癌中,c-Myc可抑制GLUT4表达并通过调控JAK/STAT信号通路影响肿瘤细胞的增殖侵袭和凋亡。

虎杖苷调节酪氨酸激酶3/信号转导因子和转录激活因子3信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨退变的影响

目的探究虎杖苷调节酪氨酸激酶3/信号转导因子和转录激活因子3(JAK3/STAT3)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨退变的影响。方法采用随机数字表法将50只大鼠分为假手术组、模型组、虎杖苷低剂量组、虎杖苷高剂量组、虎杖苷高剂量+Colivelin(JAK3/STAT3激活剂)组,每组大鼠各10只。改良Mankin评分评价软骨退变程度;酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅱ型胶原CTX(CTX-Ⅱ)水平;苏木精-伊红(HE)染色和番红O-固绿染色观察关节软骨组织形态学改变;原位末端转移酶标记法(TUNEL)观察大鼠软骨细胞凋亡情况;蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠关节软骨组织基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、JAK3、STAT3蛋白。组间比较采用单因素方差分析。结果与假手术组比较,KOA模型组大鼠软骨严重退变,软骨表面膜样结构被显著破坏,与模型组比较,虎杖苷高剂量组大鼠软骨退变程度和软骨表面膜样结构破坏程度显著减轻;虎杖苷高剂量组大鼠Mankin评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ水平、细胞凋亡率、软骨组织MMP-3、MMP-13、磷酸化JAK3(p-JAK3)/JAK3、p-STAT3/STAT3蛋白相对表达显著低于模型组[(5.30±1.13)分比(12.90±2.36)分、(11.49±1.57)pg/ml比(28.61±3.85)pg/ml、(3.18±0.52)pg/ml比(7.59±1.16)pg/ml、(6.23±1.14)pg/ml比(16.83±1.94)pg/ml、(15.78±1.71)pg/ml比(28.53±3.65)pg/ml、(10.86±1.39)pg/ml比(19.61±2.37)pg/ml、(6.76±0.78)%比(21.83±1.84)%、(0.41±0.03)比(0.74±0.06)、(0.81±0.07)比(1.24±0.11)、(0.46±0.04)比(0.87±0.08)、(0.57±0.05)比(1.05±0.09),t=9.185、13.021、10.970、14.897、10.003、10.071、23.846、15.556、14.749、14.496、14.743,P<0.05];激活剂Colivelin可部分逆转虎杖苷对KOA大鼠软骨的保护作用。结论虎杖苷通过抑制JAK3/STAT3信号通路可降低炎性反应,进而改善膝骨关节炎大鼠软骨退变。

中风活心软胶囊通过PPARγ受体上调STAT3磷酸化激活PI3K/AKT通路抑制脑缺血再灌注损伤内质网应激的作用机制研究

目的探讨中风活心软胶囊介导过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)受体上调信号传导转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化诱导磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BAKT serine/threonine kinase,AKT)信号通路参与脑缺血再灌注损伤内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和神经保护的作用机制研究,阐明中风活心软胶囊对脑缺血后神经损伤修复的调控机制。方法选取30只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和治疗组,采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(middle cerebral artery ischemia,MCAI)大鼠模型,采用改良神经功能损伤评分(modified neurological severity score,mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,以mNSS评分2~18分为造模成功。仅治疗组给予中风活心软胶囊。Western blot法分别检测缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白的表达,检测ER应激标记分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)及真核翻译起始因子2α激酶3(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)-激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)-C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)通路蛋白表达水平。结果模型组大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察缺血半暗区皮质神经元显著减少,提示右侧MCAI大鼠模型构建成功。模型组、治疗组mNSS评分均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠缺血区PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K及AKT蛋白表达均低于对照组与治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组各指标比较差异无统计学意义。治疗组、模型组大鼠缺血区GRP78、PERK、ATF4和CHOP蛋白表达均高于对照组,但治疗组均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中风活心软胶囊可显著提高脑缺血大鼠缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白表达,其作用机制可能是通过介导PPARγ受体上调STAT3磷酸化诱导PI3K/AKT信号通路参与脑缺血再灌注损伤ER应激和神经保护,从而发挥脑保护效应。

PIM1基因对急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 mRNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(U937细胞正常培养)、Si-PIM1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、Si-NC组(U937细胞转染不含PIM1 mRNA的低表达腺病毒载体)、CoA1组(U937细胞中加入浓度为20μmol/L的JAK2激活剂CoA1)、Si-PIM1+CoA1组(U937细胞转染含PIM1 mRNA低表达的腺病毒载体并加入浓度为20μmol/L的CoA1)。培养24 h。荧光定量PCR和蛋白印迹法检测U937细胞PIM1 mRNA和蛋白、JAK2/STAT3通路、细胞周期、凋亡相关蛋白表达;噻唑蓝法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果:AML患者骨髓单个核细胞中PIM1 mRNA表达水平高于单纯缺铁性贫血患者(P<0.05)。与U937组相比,Si-PIM1组细胞PIM1 mRNA和蛋白、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、CDK2蛋白、细胞增殖活性、S期比例、G2/M期比例降低(均P<0.05),p27、Caspase-3蛋白、G0/G1期、凋亡率升高(均P<0.05),而CoA1组上述指标的变化情况与Si-PIM1组正好相反,CoA1可逆转Si-PIM1对U937细胞的作用效果。U937组、Si-PIM1+CoA1组、Si-NC组U937细胞上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:敲低PIM1基因表达可抑制U937细胞增殖、促进凋亡,缓解ALM进程,且上述作用可能与抑制JAK2/STAT3通路活化有关。

表皮生长因子受体(EGFR)的细胞内信号传导

表皮生长因子受体（EGFR）是一种存在于细胞表面的多功能跨膜蛋白分子,具有酪氨酸蛋白激酶活性,EGFR与配体结合后启动细胞内信号传导通路,不同的通路之间存在交叉对话（Cross-talks）共同完成细胞生理功能.对EGFR的深入研究,不仅可阐明细胞生长和发育等重要的生命过程,而且在医药和工业上也将有广泛的应用.

尾型同源盒转录因子通过酪氨酸激酶/信号传导与转录激活因子信号通路抑制胃癌细胞的迁移及侵袭

目的探讨尾型同源盒转录因子（CDX2）通过酪氨酸激酶（JAK）/信号传导与转录激活因子（STAT）信号通路抑制胃癌细胞MKN-45的迁移及侵袭。方法Lipofectamine？2000将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）-N1-CDX2及空白质粒转入胃癌细胞中，Western blot及反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测转染效果，噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，Western blot检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9及JAK2/STAT3信号通路激活情况。结果与对照组比较，pEGFP-N1-CDX2组中CDX2蛋白（0.18±0.01比0.82±0.08）及mRNA（0.21±0.01比0.84±0.08）表达量显著上升，细胞活力降低（0.78±0.07比0.37±0.03），细胞迁移距离[（6.82±0.67）比（30.73±3.08） nm]及侵袭数目[（50.21±5.09）比（148.36±13.50）个]显著提高，MMP-2（0.79±0.07比0.17±0.01）、MMP-9（1.00±0.10比0.26±0.02）、JAK2（0.49±0.05比0.22±0.02）及磷酸化STAT3（p-STAT3，1.28±0.12比0.38±0.03）表达量显著下调，差异均具有统计学意义。结论CDX2通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制胃癌细胞的迁移及侵袭。

针加灸对阿尔茨海默病大鼠海马区蛋白酪氨酸激酶-2/信号转导和转录激活因子-3信号通路的影响

目的:通过观察针加灸对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马区蛋白酪氨酸激酶-2(JAK2)、信号转导和转录激活因子-3(STAT3)、细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS3)的影响,探讨针加灸治疗AD的作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、治疗组,每组15只。采用双侧海马注射5!L Aβ1-42法(1!L/min)制备AD大鼠模型。治疗组予针刺加艾灸"百会"、双侧"肾俞"穴进行治疗,15min/次,每日1次,5次为1个疗程,共治疗4个疗程,每个疗程期间休息2d。治疗结束后Morris水迷宫实验检测各组大鼠记忆和空间探索能力,免疫组化法和Western blot法分别测定各组大鼠海马区JAK2、STAT3、SOCS3的阳性细胞数及蛋白表达水平。结果:与对照组和假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01),跨越原平台次数和在安全象限平台停留时间明显缩短(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),跨越原平台次数和安全象限平台停留时间明显延长(P<0.01)。与对照组和假手术组比较,模型组大鼠海马区JAK2、STAT3阳性细胞数及蛋白表达明显增多(P<0.01),SOCS3阳性细胞数及蛋白表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠海马区JAK2、STAT3阳性细胞数及蛋白明显减少(P<0.01),SOCS3阳性细胞数及蛋白表达明显增多(P<0.01)。结论:JAK2/STAT3信号通路和负反馈因子SOCS3均参与了AD发病的病理过程,针灸可能通过上调SOCS3来抑制JAK2/STAT3信号通路,降低其活化,减少慢性炎性反应发生发展,从而提高AD大鼠学习记忆能力,达到治疗AD的作用。

支气管哮喘患儿外周血suPAR、JAK/STAT信号通路与气道重构的相关性分析

目的探究支气管哮喘(BA)患儿外周血可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)、酪氨酸激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)信号通路与气道重构的相关性。方法选取2021年1月—2023年1月吐鲁番市高昌区人民医院呼吸与危重症医学科收治的BA患儿106例为研究对象(BA组),根据哮喘分级标准分为间歇状态亚组(n=58)、轻度亚组(n=29)和中重度亚组(n=19)。另选取同期健康体检儿童106例为健康对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清suPAR水平,实时荧光定量PCR方法测定血清JAK、STAT水平。比较不同组间患儿血清suPAR、JAK、STAT水平、肺功能及气道重构状况;分析血清suPAR水平、JAK/STAT与BA患儿肺功能及气道重构的关系。结果与健康对照组比较,BA组患儿血清suPAR、JAK、STAT水平及气道壁厚度与气道腔外径比(T/D)、气道壁总面积占气道总面积百分比(WA%)均显著升高(t/P=20.572/<0.001,16.640/<0.001,16.182/<0.001,14.414/<0.001,19.359/<0.001),第1秒用力呼气容积(FEV_(1))占预计值百分比(FEV_(1)%)、FEV_(1)占用力肺活量百分比(FEV_(1)/FVC)均降低(t/P=22.796/<0.001,15.559/<0.001);间歇状态亚组、轻度亚组、中重度亚组BA患儿中,血清suPAR、JAK、STAT水平及T/D、WA%依次升高(F/P=23.667/<0.001,52.475/<0.001,30.306/<0.001,76.897/<0.001,62.594/<0.001),FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC依次降低(F/P=99.545/<0.001,91.936/<0.001);Pearson相关性分析显示,血清suPAR、JAK、STAT水平与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均呈显著负相关(suPAR:r/P=-0.467/<0.001,-0.424/<0.001,JAK:r/P=-0.601/<0.001,-0.560/<0.001,STAT:r/P=-0.458/<0.001,-0.412/<0.001),与T/D、WA%均呈显著正相关(suPAR:r/P=0.427/<0.001,0.411/<0.001,JAK:r/P=0.541/<0.001,0.455/<0.001,STAT:r/P=0.477/<0.001,0.484/<0.001),且FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC与T/D、WA%呈显著负相关(T/D:r/P=-0.627/<0.001,-0.546/<0.001,WA%:r/P=-0.590/<0.001,-0.504/<0.001)。结论suPAR高表达及JAK/STAT通路激活可能与BA的发生发展有关,且suPAR水平、JAK/STAT通路与BA患儿气道重构密切相关,有望成为BA诊治新靶点。

大柴胡汤含药血清通过JAK2/STAT3信号通路抑制AR42J细胞炎症反应

目的探讨大柴胡汤含药血清对胰腺腺泡细胞炎症反应的防治作用及可能机制。方法HPLC法检测大柴胡汤中指标成分含量;采用雨蛙肽处理AR42J细胞复制急性腺泡细胞炎症模型,采用CCK-8方法检测大柴胡汤含药血清对细胞活力的影响;Western blot方法检测细胞内JAK2、STAT3及NFκB磷酸化程度;ELISA法检测IL-6和TNF-α含量。结果大柴胡汤中黄芩苷和芍药苷含量分别为13.02 mg/mL、7.19 mg/mL,大柴胡汤含药血清用量不超过20%;大柴胡汤含药血清降低炎性细胞上清液中TNF-α和IL-6含量,降低细胞内JAK2、STAT3及NFκB磷酸化作用,减轻细胞炎症反应;STAT3抑制剂cucurbitacin可减弱大柴胡汤的炎症抑制作用。结论大柴胡汤含药血清可减轻腺泡细胞急性炎症作用,其机制可能为抑制细胞内JAK2/STAT3信号通路进而降低NFκB活性,减少促炎性细胞因子合成。

IL-6通过调控JAK2/STAT3信号通路减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨IL-6通过调控酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路减轻急性肺损伤(ALI)的机制。方法将人肺癌细胞A549细胞分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+IL-6过表达组、LPS+IL-6干扰组、LPS+空载组。空白对照组细胞正常培养,LPS组LPS处理细胞,LPS+IL-6过表达组LPS处理细胞后转染IL-6过表达质粒,LPS+IL-6干扰组LPS处理细胞后转染IL-6干扰质粒,LPS+空载组LPS处理细胞后转染空载质粒。采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,qRT-PCR法检测IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达水平,Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,过表达IL-6可增加LPS诱导的ALI细胞凋亡率、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,JAK2、STAT3 mRNA表达水平,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平,降低细胞增殖率和SOD水平;干扰IL-6则相反。结论IL-6可通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,降低氧化应激和炎症反应,从而减轻ALI。

基于JAK/STAT信号通路探讨槲皮素通过调控IL-6对结肠癌模型大鼠的保护机制

目的 基于酪氨酸蛋白激酶/信号传导及转录激活蛋白(JAK/STAT)通路探讨槲皮素对白细胞介素(IL)-6的影响,并分析其对结肠癌大鼠的保护作用。方法 40只雄性C57BL/6小鼠,平均分为对照组、模型组、实验组(槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组)。除对照组外均构建结肠癌模型,建模成功后,实验组(槲皮素低、高剂量组)分别给予槲皮素(20、80 mg/kg)灌胃持续4 w。记录各组造模前、造模成功后及末次给药后小鼠的体质量变化情况;酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、干扰素(IFN)-γ水平;测量小鼠结肠长度及肿瘤数量;苏木素-伊红染色观察小鼠结肠组织病理结构;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测小鼠结肠组织细胞凋亡水平;Western印迹法检测小鼠结肠组织中p-JAK、p-STAT、Ki67、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-9蛋白表达情况。结果 造模前,各组体质量比较无显著差异(P>0.05);造模成功后,与对照组相比,模型组、槲皮素低、高剂量组体质量明显降低(P<0.05);末次给药后,与模型组相比,槲皮素给药组体质量明显升高(P<0.05);与对照组相比,模型组、槲皮素低、高剂量组血清IL-6、TNF-α、IFN-γ、结肠肿瘤数量、JAK、STAT磷酸化水平、促癌蛋白Ki67表达均明显升高,结肠长度、细胞凋亡率、促凋亡蛋白Caspase-9表达明显减少(P<0.05),与模型组相比,槲皮素给药血清IL-6、TNF-α、IFN-γ、结肠肿瘤数量明显降低,结肠组织病理结果明显改善,结肠长度、细胞凋亡率明显减少,JAK、STAT磷酸化水平、促癌蛋白Ki67表达均逐渐减少,促凋亡蛋白Caspase-9表达逐渐升高(均P<0.05)。结论 槲皮素能够通过抑制炎症反应、促进癌细胞凋亡来抑制结肠癌的发展进程,其作用机制可能通过抑制IL-6表达及JAK/STAT通路的磷酸化实现的。

细胞因子信号转导抑制蛋白1与多发性骨髓瘤免疫治疗的研究进展

细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)是一种由细胞产生并反馈性抑制细胞因子信号转导的负性调节因子。SOCS1可抑制多种细胞因子的信号转导过程,如IL-6、IL-2、IL-12、IL-15、IL-7和干扰素等,也可通过抑制酪氨酸激酶-信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)信号通路而抑制信号转导过程。同时SOCS1还可能通过影响T细胞的分化、成熟及活性和影响树突细胞的成熟及功能而参与免疫调控过程。通过基因干扰技术沉默树突细胞中的SOCS1可增强机体的抗肿瘤反应,这为一些恶性肿瘤(如多发性骨髓瘤)更有效的免疫治疗打下基础。