无量山乌骨鸡肝脏组织发育特征及脂蛋白脂酶基因表达研究

【目的】明确无量山乌骨鸡肝脏组织发育过程中脂质沉积和脂酶活性的变化特征以及与脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因表达的相关性。【方法】以1(D1)、42(D42)、84(D84)、126(D126)日龄共4个阶段的无量山公鸡和母鸡为研究对象,测定体重和肝脏组织重量并计算肝脏指数,HE石蜡切片染色鉴定肝脏组织的形态学变化,采用甘油三酯(triglyceride,TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP法)检测肝脏组织中TG含量,采用比色法检测LPL和肝酯酶(hepaticlipase,HL)活性,采用实时荧光定量PCR检测肝脏组织中LPL基因mRNA表达量,采用Pearson相关性分析确定LPL基因表达量和肝脏组织各指标之间的相关性。【结果】无量山乌骨鸡公鸡和母鸡在不同生长阶段肝脏重差异均显著(P<0.05),D42和D84肝脏指数分别与D1和D126相比差异显著(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织中TG含量均在D84时出现峰值;母鸡LPL和HL活性在D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05),公鸡LPL和HL活性在D42时达到顶峰,公母鸡总脂酶活性分别在D42和D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织LPL基因mRNA表达的峰值分别在D42和D1,且母鸡LPL基因mRNA表达量在D1、D42和D126共3个发育阶段均与HL活性呈显著相关(P<0.05)。【结论】无量山乌骨鸡肝脏组织重量、肝脏指数、TG含量、脂酶含量和LPL基因mRNA表达量在不同发育阶段变化较大,而成鸡脂酶活性主要受性别影响,母鸡中LPL基因mRNA表达量与HL活性显著相关。结果为进一步研究无量山乌骨鸡肝脏脂肪代谢调控机制提供科学依据。

脂蛋白脂肪酶(LPL)基因缺陷相关疾病与治疗进展

脂蛋白脂肪酶(LPL)是人体脂蛋白中甘油三酯代谢的关键限速酶,由心肌、骨骼肌、脂肪细胞等实质细胞合成,分泌到细胞间隙与硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)结合,在肝素的作用下解离,被毛细血管内皮细胞上的糖基化磷脂酰肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)捕获转位入血,将血液中脂蛋白中核心甘油三酯水解,释放游离脂肪酸,供机体氧化利用或储存。其活性受多种互作蛋白调节,包括ApoCs、ANGPTLs、LMF1等。编码LPL的基因发生突变、蛋白合成加工过程出现错误或相关互作蛋白异常都会导致LPL缺失或功能异常,出现血脂升高或伴发胰腺炎等临床症状,严重威胁患者的生命健康。目前LPL缺陷相关疾病的临床常规治疗手段是降脂药与严格饮食控制相结合,治疗效果并不理想。近年来,以LPL及其互作蛋白基因为靶点的药物相继进入临床研究和上市阶段,取得了良好的临床效果,其中以基因替代、寡核苷酸和小RNA类药物最受关注。本综述结合LPL的特性、LPL缺乏症(LPLD)的病理机制,总结现有的治疗方法及药物研发进展,以期对LPLD的药物研发和医学干预提供思路。

鲤脂蛋白脂肪酶基因特性、表达分布、重组蛋白获得及酶活性比较

为研究鲤脂蛋白脂肪酶(CcLPLs)的基因特征、时空表达分布及酶活性,实验利用基因组同源搜索获取鲤CcLPLs同源基因并分析其序列特征;通过荧光定量PCR(qPCR)方法对CcLPLs在不同组织的表达进行分析;采用原核表达系统获取CcLPLs重组蛋白,并使用对硝基苯酚法测定各重组蛋白的酶活性。结果显示,鲤基因组中挖掘到5个CcLPLs基因(CcLPLA1a、CcLPLA1b、CcLPLA2a、CcLPLA2b*和CcLPLBa),经验证,CcLPLA2b*是假基因,共线性分析显示,鱼类特有基因组加倍过程中出现基因丢失的现象,而鲤特有的基因组加倍致使鲤存在5个CcLPLs。CcLPLA1a和CcLPLA1b核苷酸序列和氨基酸序列相同,同源性分析显示,CcLPLBa与CcLPLA1s的同源性为64%,与CcLPLA2a同源性为50.8%。qPCR结果显示,CcLPLs的表达量在肝脏、心脏、脂肪、肌肉、脑、肠道和脾脏中依次降低,在各个组织中,各基因表达量从高到底依次为CcLPLA1s、CcLPLA2a和CcLPLBa。鲤正常投喂、饥饿及再投喂状态下CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏、肌肉和脂肪组织中的表达结果显示,饥饿状态下,CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏中的表达量高于正常投喂组,而在肌肉和脂肪中低于正常投喂组;再投喂后,CcLPLA1s和CcLPLA2a在肝脏中表达水平降至正常投喂组,而在肌肉和脂肪中表现为先升高后降低的趋势。通过构建具有促溶效果的原核表达载体,分别获得了原核表达重组蛋白Skp-CcLPLs和SlyDCcLPLs,酶活性测定结果显示,重组蛋白其脂蛋白脂肪酶活性从高到低依次为CcLPLA1a、CcLPLBa和CcLPLA2a,最适pH均为8.0,发挥最大活性的NaCl浓度为0.6 mol/L。本研究探讨了鲤CcLPLs同源基因在进化中的表现,对CcLPLA1s、CcLPLA2a和CcLPLBa的时空表达进行了分析,测定了投喂和饥饿对CcLPLA1s、CcLPLA2a表达的影响,揭示鲤饥饿胁迫下脂质代谢及响应对策,为控制鲤脂肪含量提供靶点,成功进行重组蛋白的原核表达并测定了其酶活性,为鱼类脂蛋白脂肪酶研究提供参考。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体临床前神经系统安全性评价

目的通过评价AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)腺相关病毒注射液对C57BL/6N小鼠中枢神经系统的影响,以确定受试物可能关系到人的安全性问题。方法共使用40只小鼠,雌雄各半,分别单次尾静脉给予溶媒对照、1.0×10^(13)、5×10^(13)、1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC304腺相关病毒注射液,采用功能观测组合试验方法(FOB),分别在给药前和给药后1、4、24、48、96 h,7、14 d观察小鼠运动功能、感觉功能、自主活动等行为,评价受试物对小鼠中枢神经系统的影响,并在给药后第14天检测血清TG、白蛋白和总蛋白改变。结果本研究前期,采用荧光定量PCR方法检测小鼠脑中目的基因(LPL),其结果显示给予1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC3042周后,仍可在脑区内检测到目的基因(LPL)的拷贝数,基于上述数据开展了GC304行为学检测,其结果显示给予GC304后,可引起与药理作用相关的甘油三酯的明显降低,但在给药后2周内,GC304各剂量组动物笼内观察、手持观察、开放场观察、反射评价各指标均未见明显异常。结论GC304可进入脑区,且给药后14 d内,目的基因在脑区内仍有少量分布,但其不会诱导产生神经毒性,为临床用药提供了参考。

脂蛋白脂肪酶基因多态性与老年高血压患者大动脉粥样硬化型脑梗死风险的遗传关联

目的探讨脂蛋白脂肪酶(LPL)基因rs264多态性与老年高血压患者大动脉粥样硬化型脑梗死风险的遗传关联。方法选择2019年1月至12月在山西医科大学第一医院神经内科以大动脉粥样硬化型脑梗死入院的高血压患者130例为病例组,选择同期年龄、性别匹配的体检中心高血压患者260例为对照组。检测LPL基因rs264多态性,采用logistic回归分析LPL基因多态性与大动脉粥样硬化型脑梗死的遗传关联研究。结果2组rs264位点AA、AG、GG基因型频率及A、G等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。rs264位点GG基因型是高血压患者大动脉粥样硬化型脑梗死的独立危险因素(OR=0.248,95%CI:0.106~0.582,P=0.001)。结论LPL rs264位点基因多态性可能与老年高血压患者大动脉粥样硬化型脑梗死的发病相关,可能作为其风险预测的有效遗传因子。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在小鼠体内的毒性研究

目的评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在小鼠体内的毒性。方法(1)急性毒性研究中,40只C57BL/6N小鼠随机分为2组,分别为溶媒组和受试物组,单次尾静脉注射后,进行连续15 d临床症状观察、体重和摄食量测定,于第15天剖检。(2)长期毒性研究中,440只小鼠随机分为4组,分别设置溶媒组,受试物低剂量组(1×10^(13)vg·kg^(-1))、中剂量组(5×10^(13)vg·kg^(-1))和高剂量组(1.5×10^(14)vg·kg^(-1)),单次尾静脉注射后,对动物体重、摄食量、血液学、血清生化、免疫毒性及免疫原性等毒性指标进行测定。给药后4周和6个月时解剖,动物进行组织病理学检查,并在2、4周,3、6个月采用q PCR的方法检测GC304在动物各个脏器的分布和表达情况。结果(1)急性毒性研究中,动物临床症状、体重、摄食量未见异常,未见与GC304相关的大体病理学改变。(2)长期毒性研究中,动物临床症状、体重、摄食量、细胞因子和T淋巴细胞亚群未见与GC304相关的明显异常。GC304能够降低血浆中甘油三酯以及与抗药抗体相关的白蛋白/球蛋白比值下降,能够诱导抗AAV5结合抗体和中和抗体的产生,并持续至给药后6个月。给予GC304后,未检测到抗脂蛋白脂肪酶(LPL)抗体。组织病理学结果显示,小鼠给药后4周,注射部位出现与药物相关的炎性细胞浸润,至给药后6个月可见恢复。与药物相关的改变为脾脏生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多、腹股沟淋巴结生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多。qPCR检测结果显示,GC304在小鼠外周血及脏器广泛分布和表达,但在肝脏中分布和表达显著高于其他脏器。结论C57BL/6N小鼠单次静脉给予GC304后,主要在肝脏中表达和分布,并且动物耐受性良好,未见明显毒性反应,为该药物进入临床试验提供参考。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在食蟹猴体内的毒性研究

目的评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在食蟹猴体内的毒性。方法30只食蟹猴,分为溶媒对照组(静脉注射溶媒)、GC304低剂量组(3×10^(13)vg·kg^(-1))和高剂量组(1×10^(14)vg·kg^(-1))。试验期间,所有动物进行临床症状和注射部位观察,每周进行摄食量和体重测定。在给药前后不同时间点进行免疫原性检测(包含抗AAV5结合抗体、中和抗体及抗LPL结合抗体)、血液学、血清生化、血凝和尿生化检查,并同时进行T淋巴细胞分型、细胞因子、心电、血压、体温和眼科检查。给药后4周和6个月解剖,动物进行大体观察、脏器称重和组织病理学检查,同时进行GC304的生物分布研究及表达产物测定,并在不同时间点对血液中目的基因DNA进行检测。结果受试物对食蟹猴临床症状、注射部位、体重、摄食量、眼睛各项指标、体温、血压、心电图、血凝、血清生化、T淋巴细胞分型、尿液、细胞因子、脏器重量等指标未见影响。高剂量组动物给药后4周血小板下降。与给予受试物相关的组织病理学改变为脾脏和腹股沟淋巴结生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多。低剂量和高剂量均可引起食蟹猴产生抗AAV5结合与中和抗体,给药后6个月2种抗体仍维持在较高的水平,但未见明显的剂量-效应关系。给予GC304后,未显著诱导食蟹猴产生抗LPL抗体。qPCR检测结果显示,受试物在食蟹猴外周血及脏器广泛分布和表达,但主要集中在肝脏。结论食蟹猴单次静脉给予GC304,动物耐受性良好,未见明显毒性反应,且主要在肝脏中分布和表达,为该药物进入临床试验提供参考。

非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织中脂蛋白脂肪酶及其相关调控因子的表达及二乙基二硫代氨基甲酸对其的调控作用

目的探讨脂蛋白脂肪酶(LPL)及其相关调控因子在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝组织中的变化和二乙基二硫代氨基甲酸(DDC)对其的调控作用。方法将15只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为3组,每组5只。对照组给予普通饲料喂养;模型组给予胆碱缺乏的氨基酸(CDAA)饲料喂养,建立NASH模型;治疗组在采用高脂CDAA饲料喂养的同时给予DDC灌胃治疗。用Real-time PCR方法检测NASH小鼠肝组织中LPL及其活性相关调节因子的表达变化;探讨DDC对LPL及其活性相关调节因子的调控作用。结果模型组小鼠肝组织中LPL基因表达为3.527±1.389,显著高于对照组(1.233±0.887),LPL酶活性的负性调控因子血管生成素样蛋白ANGPTL3、ANGPTL4及载脂蛋白apoC-Ⅰ、apoC-Ⅲ的表达分别为0.060±0.045、0.396±0.203、0.292±0.159、0.145±0.058,均显著低于对照组(1.126±0.650、1.051±0.373、1.016±0.205、1.141±0.751),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组小鼠肝组织中LPL基因表达为0.597±0.111,显著低于模型组(1.030±0.288),ANGPTL3、ANGPTL4、apoC-Ⅰ表达分别为1.284±0.181、2.040±0.602、1.514±0.369,均显著高于模型组(1.006±0.119、0.909±0.088、0.969±0.124),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NASH小鼠肝组织中LPL表达升高,LPL酶活性抑制因子表达降低;DDC抑制LPL基因表达,并上调LPL酶活性的负性调控因子。

内源性脂蛋白脂肪酶及其对牦牛乳风味劣变的影响机制研究进展

牦牛乳中脂蛋白脂肪酶(lipoprtein lipase,LPL)水解甘油三脂所产生的游离脂肪酸会转化为更有效的挥发性化合物从而影响牦牛乳风味。该文对牦牛乳中的内源性LPL作用于乳脂肪而影响其风味的机制进行了综述,概述了牦牛乳中LPL的分离纯化方法、结构功能、酶活性的影响因素及牦牛乳体系中劣变风味物质的影响机制,以期对牦牛乳中脂肪酸影响风味机制的进一步探究提供理论依据。

脂蛋白脂肪酶基因突变致高甘油三酯血症性急性胰腺炎1例临床分析

目的分析脂蛋白脂肪酶(LPL)基因突变致高甘油三酯血症性急性胰腺炎(HTG-AP)的临床特征。方法回顾1例LPL基因突变致HTG-AP患者的病历资料,分析其诱发因素、临床表现、基因突变位点以及诊治情况。结果该病例为青年女性,因“上腹痛伴恶心、呕吐1 d”入院。入院前1 d暴饮暴食后出现中上腹持续性绞痛,呈阵发性加重,并向腰背部放射,同时伴恶心、呕吐。既往因异位妊娠予甲氨蝶呤治疗。门诊急查血淀粉酶342.4 U/L、血脂肪酶3132.0 U/L;腹部CT平扫符合胰腺炎并周围渗出表现。入院后立即予中高流量吸氧、液体复苏、醋酸奥曲肽抑制胰液分泌、乌司他丁抑制胰蛋白酶活性、持续胰岛素泵入快速降脂、抗感染以及营养支持等对症治疗。入院后3 h,患者病情急性加重,考虑诊断重症急性胰腺炎。静脉采血可见乳糜血,TG达到63.66 mmol/L,诊断为HTG-AP。经DNA测序发现,该患者LPL:NM_000237.2:c.89-1G>C、LPL:NM_000237.2:c.900G>A;p.(Gly300=)杂合突变,其父母上述两个位点DNA测序结果均未见异常,考虑该患者LPL基因突变为后天突变。在前述治疗基础上,予血浆置换、人工肝血液净化治疗后好转出院,随访1年未复发。后该患者因妊娠停用贝特类药物,于发病16个月后TG升高至4.8 mmol/L。结论本例HTG-AP患者为青年女性,因暴饮暴食急性起病且病情进展迅速,临床表现为中上腹持续性绞痛,呈阵发性加重并向腰背部放射,同时合并急性呼吸窘迫综合征、全身炎症反应综合征、急性胰周液体积聚等严重并发症;LPL:NM_000237.2:c.89-1G>C、LPL:NM_000237.2:c.900G>A;p.(Gly300=)杂合突变导致HTG-AP发病。

脂蛋白脂肪酶与非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)通常与代谢风险因素有关,包括肥胖、血脂异常和糖尿病等。脂蛋白脂肪酶(LPL)是调控血清中甘油三酯水平的关键酶,与上述风险事件的发生密切相关,提示LPL在NAFLD中发挥重要作用。

应用RNA干扰技术体外抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达

目的 给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础。方法 利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 ,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA ,构建重组干扰质粒pSIREN DNR shRNA ,将干扰质粒与人脂蛋白脂肪酶真核表达质粒 pCDNA3 hLPL以脂质体方法共转染COS 7细胞 ,通过实时荧光定量聚合酶链反应、Westernblot和活性检测等方法判断脂蛋白脂肪酶基因抑制的效果。结果 转染干扰质粒的细胞中脂蛋白脂肪酶mRNA、蛋白表达以及酶活性均明显降低 ,抑制率可达 70 %以上。结论 所选靶序列可以有效抑制细胞中脂蛋白脂肪酶基因的表达 。

SGLT2抑制剂治疗2型糖尿病肾病效果及与SUA Smad1蛋白脂蛋白的相关性

目的:观察SGLT2抑制剂治疗2型糖尿病肾病(Type 2 diabetic nephropathy,T2DN)效果,分析T2DN与血尿酸(Serum uric acid,SUA)、Smad1蛋白、脂蛋白的相关性。方法:回顾性分析本院2020年4月至2022年3月收治的72例T2DN患者的临床资料(研究组),根据患者尿白蛋白排泄率(Urinary albumin excretion rate,UAER),统计早期糖尿病肾病(UAER 30-300mg/24h)、临床糖尿病肾病(UAER>300mg/24h)者例数,连续接受3个月的SGLT2抑制剂治疗(10mg/次,1d/次)后,评估治疗效果及不良反应。另选取同期在本院进行健康体检的54例健康者作为对照组。对比不同人群SUA、Smad1蛋白、脂蛋白的水平,采用Spearman分析上述因子与UAER间的相关性。结果:研究组SUA、Smad1蛋白、脂蛋白水平均高于对照组(P<0.05)。72例T2DN患者经治疗后总有效率为87.50%(63/72),不良反应总发生率为9.72%(7/72)。治疗后,T2DN患者SUA、Smad1蛋白、脂蛋白水平较治疗前降低(P<0.05)。经统计,早期糖尿病肾病组45例,临床糖尿病肾病组27例。治疗前,早期糖尿病肾病组SUA、Smad1蛋白及脂蛋白水平均低于临床糖尿病肾病组(P<0.05)。治疗后,两组患者SUA、Smad1蛋白、脂蛋白水平较治疗前降低,其中早期糖尿病肾病组低于临床糖尿病肾病组(P<0.05)。Spearman分析结果显示:SUA、Smad1蛋白、脂蛋白表达与UAER均呈正相关关系(P<0.001)。结论:SUA、Smad1蛋白、脂蛋白在T2DN患者中呈高表达,经SGLT2抑制剂治疗可降低SUA、Smad1蛋白、脂蛋白的水平,不良反应低。临床通过检测SUA、Smad1蛋白、脂蛋白水平,可反映患者肾损伤程度,对制定治疗方案有一定指导价值。

国人脂蛋白脂肪酶基因突变的筛查

目的筛查天津地区脂蛋白脂肪酶基因突变情况,并探讨其对血脂水平的影响。方法利用聚合酶链反应—单链构象多态性分析技术对386例样本(血脂正常组278例,血脂异常组108例)的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。对于频率较高的多态性位点,引入限制性核酸内切酶位点利用聚合酶链反应限制片长多态性进行鉴定。结果在386例样本中,共检出4种突变,检出率为14.5%,其中1例为目前国内外未见报道的外显子3 Leu103→Leu同义突变杂合子,1例为目前亚洲首报的外显子5 Pro207→Leu突变杂合子,3例内含子3受位剪接点上游6 bp的C→T转换的突变杂合子,1例Ser447→stop突变纯合子,50例Ser447→stop突变杂合子。结论我国天津地区人群存在着广泛的脂蛋白脂肪酶基因变异,既具有与大多数国家相同的Ser447→stop多态性位点,也具有自身的特点。

NO-1886对过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶和肿瘤坏死因子α基因表达的影响

为了探讨脂蛋白脂肪酶活化剂NO 1886对高脂高糖饮食喂养贵州小香猪过氧化物体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子α表达的影响 ,选择雄性贵州小香猪 15头 ,随机分为 3组。正常对照组喂普通饲料 ;高脂高糖组喂高脂高蔗糖饲料 ;治疗组喂高脂高蔗糖饲料 4个月后加 1%NO 1886治疗。 8个月后处死动物 ,采用Trizol提取组织总RNA ,逆转录聚合酶链反应检测过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果发现 ,正常对照组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达较低。高脂高糖组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达增强 ,NO 1886使高脂高糖喂养增强肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α表达的作用减弱 ;在脂肪组织 ,治疗组脂蛋白脂肪酶的表达水平最高 ,分别比正常对照组和高脂高糖组高 2 7%和 2 0 % ;NO 1886抑制高脂高糖喂养小香猪脂肪组织肿瘤坏死因子α的表达。结果提示 ,NO 1886能促进小香猪脂肪组织脂蛋白脂肪酶的表达 ,显著抑制脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达 ,高调脂肪组织过氧化体增殖物激活型受体γ ,减弱肝脏和肌肉过氧化体增殖物激活型受体α的表达 ,是NO 1886有效降低血浆游离脂肪酸和肿瘤坏死因子α水平可能的机制。

黄芪当归合剂对肾病综合征大鼠脂蛋白脂酶和卵磷脂胆固醇酰基转移酶的影响

目的：探讨黄芪当归合剂（合剂）调节脂代谢紊乱的可能机理。方法：在肾病综合征（ＮＳ）高脂血症及高胆固醇血症大鼠，观察合剂对血清白蛋白、血脂及脂质降解的两个关键酶脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）和卵磷脂胆固醇酰基转移酶（ＬＣＡＴ）活性的影响。结果：ＮＳ大鼠出现明显低白蛋白、高脂血症，同时ＬＰＬ活性降低，ＬＣＡＴ活性相对不足；在ＮＳ大鼠应用合剂治疗后，不仅血清白蛋白明显升高、血脂明显下降，ＬＰＬ及ＬＣＡＴ活性亦明显增加；高胆固醇血症时ＬＰＬ及ＬＣＡＴ活性无明显改变，合剂对其活性亦无影响。结论：ＮＳ大鼠ＬＰＬ活性降低，ＬＣＡＴ活性相对不足是其高脂血症发生机理之一。合剂通过增加ＬＰＬ和ＬＣＡＴ活性，促进循环中含载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）。

饲料脂肪水平对瓦氏黄颡鱼生长及脂蛋白脂酶基因表达的影响

研究采用脂肪水平分别为4.7%、7.9%、10.9%、15.4%、18.9%的五种等氮配合饲料饲喂瓦氏黄颡鱼早期幼鱼,进行了为期30d的生长实验,探讨了瓦氏黄颡鱼早期幼鱼的脂肪需求。并克隆了瓦氏黄颡鱼脂蛋白脂酶(LPL)cDNA序列片段,采用实时荧光定量PCR研究了饲料脂肪水平对肝脏LPL基因表达水平的影响。结果表明,饲料脂肪水平从4.7%增加到10.9%显著促进了瓦氏黄颡鱼早期幼鱼的生长(P<0.05)。饲料脂肪水平显著影响了实验鱼的鱼体体成分,随着饲料脂肪水平的升高,鱼体干物质和脂肪含量显著增加而蛋白含量显著下降(P<0.05)。高脂诱导了瓦氏黄颡鱼肝脏LPL基因表达,摄食15.4%、18.9%这两组较高脂肪水平的实验鱼肝脏LPLmRNA表达水平显著升高(P<0.05)。根据特定生长率通过折线回归分析得出瓦氏黄颡鱼早期幼鱼最适脂肪水平为11.2%。

甘糖酯对高脂血症大鼠血脂及脂蛋白脂酶的调节作用

目的 探讨甘糖酯调节血脂的分子机制。方法 以不同剂量甘糖酯 (37 8,75 6mg·kg-1 ·d-1 )给高脂血症大鼠ig给药 3周 ,禁食 1 2h后 ,测定大鼠血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)的浓度变化 ,用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测组织中脂蛋白脂酶 (LPL)mRNA的表达。结果 甘糖酯有降低血清TC ,TG和LDL C ,升高HDL C的作用 ,同时提高LPLmRNA的表达 ,且呈剂量依赖性关系。甘糖酯对LPLmRNA转录的促进作用与其降低TC ,TG和LDL C的作用呈正比关系。结论 甘糖酯通过促进LPLmRNA转录而调节血脂水平 ,这可能是甘糖酯降血脂。

双生子中脂蛋白脂酶基因S447X突变与血脂、血压的关联和连锁分析

目的在以一般人群为基础的中国成人双生子中探讨脂蛋白脂酶(LPL)基因S447X突变是否和血脂、血压有关联和连锁。方法基于双生子登记系统,对双生子进行问卷、体检、生化指标测定以及S447X突变的检测。按性别分层,分别进行S447X突变与甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及其异常之间的单因素和控制混杂因素后的多因素关联分析。用基于Halesman-Elston回归的非参数同胞对连锁分析方法,在异卵双生子(DZ)中进行该突变位点和血脂、血压的连锁分析。结果在962对成人双生子中,S447X突变等位基因的频率为8.6%;TG、HDL、SBP和DBP的遗传度分别为57%、68%、46%和44%;单因素和多因素关联分析显示,在女性双生子中,S447X突变和TG下降12.9%显著相关,也和SBP下降2.7mm Hg(1mm Hg=0.133kPa)、DBP下降1.8mm Hg显著相关。而且,S447X突变和高TG异常、低HDL异常及高血压的发生风险降低也呈显著相关,OR值分别为0.38(95%CI0.20～0.76)和0.49(95%CI0.29～0.81)和0.47(95%CI0.25～0.86)。结论在女性双生子中,S447X突变和血脂改善及血压降低相关,但在男性双生子中没有发现这种关联。也没有发现S447X突变位点和血脂及血压性状位点的连锁关系。因此,S447X突变和血脂及血压的关系可能是由于该突变和其它调节血脂和/或血压的功能性突变存在连锁不平衡所致。

不同脂肪含量饲料对吉富罗非鱼鱼种生长性能、脂蛋白脂酶活性及其基因表达的影响

试验选用均质量(2.63±0.16 g)的吉富罗非鱼鱼种315尾,随机分成3组,每组3个重复,每个重复35尾,分别饲喂3.7%、7.7%和16.6%的低、中、高脂肪水平的等氮饲料,探讨不同脂肪含量饲料对吉富罗非鱼鱼种生长、肝体指数、脂肪沉积、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)活性及其基因表达的影响,并初步探讨LPL基因表达与脂肪沉积的关联规律,试验周期90 d。结果显示:(1)饲喂高脂饲料的试验鱼肝体指数、脏体指数显著升高,肥满度无显著变化,肝脏与肌肉脂肪含量显著升高;(2)饲喂高脂肪饲料试验鱼的增重率显著下降、饲料系数下降显著;(3)LPL基因在吉富罗非鱼鱼种肝脏和肌肉中均有表达,但肝脏中LPL mRNA表达丰度显著高于肌肉;(4)在再投喂48 h内,在第6小时时,高脂肪试验组鱼肝脏LPL活性显著高于中、低脂肪试验组,但随后显著降低,显著低于3.7%试验组;7.7%和3.7%试验组鱼肝脏LPL活性呈现先升高后下降的趋势;(5)饲喂高脂饲料的试验鱼肝脏中LPL mRNA表达丰度最高,显著高于3.7%低脂试验组;(6)吉富罗非鱼肝体指数、肝脏和肌肉脂肪含量与肝脏LPL表达具有显著的线性正相关。结果表明,LPL mRNA在吉富罗非鱼肝脏和肌肉中表达具有组织特异性;高脂饲料显著抑制了吉富罗非鱼鱼种增重;高脂饲料显著促进了吉富罗非鱼肝脏LPL的分泌,诱导了其肝脏中LPL基因表达,促进肝脏与肌肉脂肪沉积;LPL基因参与调节吉富罗非鱼脂肪沉积。