表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用

目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型。方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌40例(Ⅰ-Ⅱ期26例,Ⅲ-Ⅳ期14例),正常人32例。应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证。结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%。结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段。

蛋白质芯片表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术在肿瘤早期诊断中的研究进展

蛋白质芯片表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorp-tion/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是近年发展起来的蛋白质组学研究的新技术,在各种肿瘤的早期诊断和研究中,具有广阔的发展前景及临床意义。就其技术原理、组成、在肿瘤早期诊断中的运用及发展前景作一综述。

应用表面加强激光解吸-电离飞行时间质谱技术筛选特发性肺纤维化的差异蛋白

工学校目的筛查特发性肺纤维化（IPF）患者支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清中的差异蛋白，以期发现对诊断有价值的生物标志物。方法应用表面加强激光解吸一电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术对34例IPF患者（IPF组）和25例非吸烟健康者（对照组）血清和BALF进行检测获得蛋白质指纹图谱，用生物标志物模式软件、生物标志物导向软件对测得的数据进行处理。结果BALF中共检测出247个蛋白峰，与对照组比较，IPF组13个蛋白质峰差异有统计学意义，其中7个标志物峰强度显著增加，质荷比分别为2240．57、3459．32、3501．78、4146．50、4516．51、4615．88、5651．26（均P〈0．01）；6个标志物峰强度显著下降，质荷比分别为4989．91、5043．68、6968．76、11687．70、11782．10、14733．30（均P〈0．01）。血清中共检测出142个蛋白峰，与对照组比较，IPF组9个蛋白质峰差异有统计学意义，且9个标志物峰强度均显著增加，质荷比分别为3382．59、3453．39、4608．28、5825．48、8936．76、9164．27、11525．30、11689．40、11886．00（P〈0．05或P〈0．01）。结论SELDI—TOF—MS技术用于IPF患者BALF和血清蛋白质谱分析可筛选出有意义的差异表达蛋白，为进一步发现对IPF诊断有价值的生物标志物提供了实验基础。

蛋白质芯片SELDI-TOFMS技术的研究进展及其在临床中的应用

蛋白质芯片为新一代的蛋白质组研究技术,由美国Ciphergen生物系统公司引进,表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOFMS)提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。投放至今虽短短10来年,但卓越的成果已广为医学科学界重视,尤其在恶性肿瘤的早期诊断、监控和预后研究上。蛋白质是细胞内执行生物功能的最终分子,蛋白质组学研究让人类更深入了解疾病和生命的本源,不断发现的特异性肿瘤标志物更为攻克癌症带来新希望。这里除对表面增强激光解吸电离_飞行时间质谱作较详尽的介绍外,更重点阐述其近年来蛋白质芯片近期的研究进展和在临床中的应用,并就其优劣和发展前景作出评估。

表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱技术对卵巢不同病变组织差异蛋白质的检测

目的 检测正常卵巢组织及良性、交界性和恶性卵巢肿瘤组织蛋白的指纹图谱，寻找差异表达蛋白质。方法取卵巢不同病变组织，提取蛋白质，采用表面增强激光解吸电离一飞行时间质谱仪对其进行蛋白质指纹图谱检测并进行初步分析。结果良、恶性卵巢肿瘤蛋白指纹图谱比较，癌组织中一些蛋白质高表达，如质荷比（M／Z）为15112．15、15296．79、7560．78、16049．39、7682．06、7932．30、15851．32、4619．68和8052．10的蛋白质。交界性卵巢肿瘤蛋白指纹图谱介于良、恶性图谱之间，如M／Z为15112．15、15851．32、7560．78、7682．06和7932．30的蛋白质。结论卵巢不同病变组织的蛋白指纹图谱中具有差异蛋白质，其有可能为卵巢肿瘤的临床诊断和治疗奠定分子基础。

运用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术建立结直肠癌预测诊断模型

目的寻找与结直肠癌相关的蛋白质并建立结直肠癌血清蛋白指纹图谱诊断预测模型。方法随机选取结直肠癌病例36例（结直肠癌组）和疝或行胆囊择期手术的患者36例（对照组），术前静脉采血，采用弱阳离子交换蛋白质芯片（CM10），经表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱（SELDI—TOF—MS）技术测定，建立结直肠癌的血清蛋白指纹图谱诊断预测模型；选取88例结直肠癌患者和44例正常对照进行盲法验证。结果通过两组比较，得到5个差异蛋白峰，并以此建立诊断预测模型，其敏感性为100％，特异性为97．2％。盲法验证显示敏感性为71．6％，特异性为72．7％。其中质荷比为8908与13707的蛋白均存在于结直肠癌组和正常组的比较中，提示上述蛋白质与结直肠癌相关。结论运用SELDI—TOF—MS技术建立的血清蛋白指纹图谱模型对诊断结直肠癌具有较高的敏感性与特异性。质荷比为8908与13707的蛋白可能成为结直肠癌的肿瘤标记物。

SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值

目的:建立肝癌血清学诊断模型,探讨评估SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值.方法:用弱阳离子交换芯片(CM10芯片)和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术,测定60例肝癌患者和60例正常对照者的血清蛋白质指纹图谱,应用BiomarkerWizard统计软件比较肝癌组和正常对照组血清蛋白质表达的差异性,采用Biomarker Pattern软件分析数据建立肝癌诊断模型,比较介入治疗前后血清蛋白质指纹图谱的差异性.结果:在质荷比(M/Z)为2000-10000范围内,和正常血清比较,肝癌的差异峰有3个(M/Z为4182Da、5710Da、6992Da;P<0.01),4182Da和5710Da下调,6992Da上调.用这3个差异蛋白峰建立肝癌诊断模型,诊断肝癌的灵敏度为93.3%(28/30),特异度为90.0%(27/30),正确率为91.7%(55/60),约登指数为0.833.差异蛋白峰(M/Z4182Da)在介入术后1mo明显上调(P<0.05).结论:应用SELDI-TOF-MS技术进行肝癌血清蛋白质指纹图谱分析,建立肝癌诊断树模型,对肝癌的诊断有一定的价值;筛选出的差异蛋白峰对肝癌的介入治疗评估有一定的应用价值.

应用SELDI-TOF-MS筛选多囊卵巢综合征卵泡液中差异蛋白的研究

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者与正常排卵妇女卵泡液中差异蛋白质的表达,建立PCOS的卵泡液诊断模型。方法采用表面增强激光解吸-电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测24例PCOS患者的卵泡液和20例排卵正常的对照患者卵泡液中的蛋白质,采用支持向量机方法建立PCOS的诊断模型,评估诊断模型的预测效能;采用卡方检验检验PCOS的卵泡液模型间特异性和敏感度的不同。结果 PCOS患者与排卵正常妇女的卵泡液中共检测到89个差异的蛋白质,选取前10个统计学意义的蛋白质峰(P<0.05)合并建立诊断模型,获得5个差异的蛋白质,其中2033和5828质荷比(m/z)两个蛋白质峰在PCOS组卵泡液中的表达低于对照组(P<0.05),其余3个蛋白质峰2873、6452、8137m/z在PCOS组卵泡液中呈现高表达(P<0.05);5个卵泡液差异蛋白质峰组合所构建的诊断模型的特异性为99%,敏感度为97%。结论 PCOS患者的卵泡液与正常排卵妇女卵泡液中存在差异表达的蛋白质,PCOS患者卵泡液中表达的蛋白质的变化可能与PCOS患者的卵泡内卵子发育异常和排卵异常有关。

SELDI-TOF-MS在筛选肝癌高发家系与无癌家系血清蛋白差异中的应用

目的比较肝癌高发家系患者和无癌家系患者血清蛋白质谱图,探寻两者间的血清蛋白差异。方法用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及CM10蛋白芯片对25例肝癌高发家系患者和25例无癌家系患者血清样本进行分析,将获得的血清蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,建立高发家系患者和无癌家系患者的比较筛选模型。结果肝癌高发家系组与无癌家系组共有15个蛋白质差异有统计学意义。筛选出4个蛋白峰建立诊断模型的灵敏度为96.0%(24/25),特异度为88.0%(22/25),准确率为92.0%(46/50)。结论肝癌高发家系患者组和无癌家系患者组的血清存在一定的差异蛋白,SELDI技术在特异性蛋白生物标志分子的筛选等方面具有较好的临床应用前景。

不同结核病患者群血清蛋白质谱分析与比较

目的:比较分析菌阳肺结核与菌阴肺结核、肺结核与肺外结核患者的血清蛋白质谱,从蛋白质组学层面了解不同结核病患者群血清蛋白质谱的特征,为结核病诊断标志物的筛选提供指导。方法:应用表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片系统,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)对54例菌阳肺结核、45例菌阴肺结核、18例肺外结核患者的血清蛋白质进行检测;应用ClinProTools分析软件依据各蛋白质的质谱峰面积计算相对强度表示该血清蛋白质的丰度,采用t检验(对Anderson-Darling检验P>0.05的正态分布者)或Wilcoxon检验(对Anderson-Darling检验P<0.05的非正态分布者)分析比较菌阳肺结核与菌阴肺结核、肺结核与肺外结核患者各血清蛋白质的平均丰度。结果:(1)在3种不同结核病患者人群中均捕获到102种相对分子质量在1011.41～9435.07的不同血清蛋白质,经Anderson-Darling检验,在菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺外结核患者人群中分别有31、23和29种血清蛋白质呈正态分布。(2)正态分布的血清蛋白质在不同结核病患者人群间其水平未见显著差异。(3)非正态分布的血清蛋白质:在菌阳肺结核与菌阴肺结核患者人群间其水平未见显著差异;在肺结核与肺外结核患者人群间发现1个差异血清蛋白质(P=0.0251),其相对分子质量为5753.76,在肺结核与肺外结核患者人群血清中的平均丰度分别为15.42±4.86和28.29±14.08。结论:不同结核病患者群的血清蛋白质谱具有同质性,为普遍适用性结核病血清学诊断标志物的筛选提供了科学依据。

应用弱阳离子交换蛋白质芯片捕获的健康成人血清蛋白质/多肽谱分析

目的:分析健康成年人血清蛋白质/多肽谱特点,为人类血清蛋白质组研究提供基础性资料。方法:应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)磁珠处理30例健康成年人血清,通过表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测血清蛋白质/多肽谱,描述性分析其种类、分子质量范围、丰度(用相对强度计量)、个体性差异等。结果:共检测到947种蛋白质/多肽,不同个体其种类数量在34～108不等,相对分子质量范围为1059～10265,表达丰度在95～35419之间;分别有570、154、71、36、32、26、18、16、14、5、2和3种相应血清蛋白质/多肽在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、14例个体血清中存在。结论:WCX2磁珠仅能捕获到数量较少的低丰度、低分子量人血清蛋白/多肽,在受检人群中这些蛋白/多肽呈现高度的个体差异性。

血清SELDI蛋白质指纹图谱在乳腺癌腋淋巴结转移中的应用研究

目的:应用SELDI技术和生物信息学方法从血清中筛选乳腺癌蛋白质标志物并构建检测模型,为预测腋淋巴结(axillary lymph nodes,ALN)转移等提供可能的简便易行的方法。方法:应用SELDI-TOF-MS作为蛋白质组学摘要目的:应用SELDI技术和生物信息学方法从血清中筛选乳腺癌蛋白质标志物并构建检测模型,为预测腋研究平台,采用CM10芯片,对乳腺癌的血清进行了检测,探讨了乳腺癌患者血清蛋白质指纹图谱与是否发生ALN转移的关系,并结合生物信息学方法建立了相应的检测模型。结果:通过对ALN有(无)转移的乳腺癌患者血清蛋白指纹图谱数据的比较,找到了11个差异蛋白质峰(P<0.05),M/Z为M2164.16,M3269.90和M3272.31的3个蛋白质峰被选择用于构建分类决策树模型,该模型的交叉验证(测试组)总准确率为81.8%,ALN有转移的乳腺癌患者检出率为83.3%,ALN无转移的检出率为80%。结论:构建的分类决策树模型能达到区分ALN是否有转移的最佳效果,SELDI技术在确定乳腺癌患者是否发生腋淋巴结转移方面有一定的意义。

高发区自然人群贲门癌血清蛋白指纹图诊断模型的建立及临床价值

目的用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELD I-TOF-MS)分析食管癌高发区自然人群中贲门癌和正常对照血清蛋白表达谱的改变,筛选并建立高发区贲门癌血清蛋白指纹图诊断模型并探究其临床价值。方法采用CM10蛋白芯片及SELD I-TOF-MS技术对34例贲门癌和38例正常对照者血清蛋白指纹图谱进行检测,所得结果用ZUC I-蛋白芯片数据分析系统(ZUC I-Prote in Ch ip Data Analyze System)软件包分析,建立贲门癌蛋白指纹图诊断模型,并用留一法交叉验证作为评估模型、判别效果的方法。结果通过软件包运算,用3个质荷比峰(5 643.457 93、8 570.821 26、15 940.153 3 m/z)建立了贲门癌蛋白指纹图诊断模型,其准确度93.06%,敏感度85.29%,特异度100%,阳性预测值100%。结论本组建立的诊断模型可以有效区分贲门癌和健康人,为肿瘤高发区贲门癌的诊断与筛查提供了一条崭新途径。

帕金森病相关血清蛋白质标志物的筛选及鉴定

目的:探讨并初步鉴定帕金森病患者血清中相关蛋白质作为特异标志物的可能性。方法:应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)结合纳米磁珠技术检测44例帕金森病和60例健康对照的血清标本,应用生物信息学方法筛选差异蛋白峰,经高效液相色谱(HPLC)分离出差异蛋白,酶解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,利用Xcalibur的程序组件BioWorks 3.2完成蛋白质序列数据库鉴定分析。结果:经SELDI-TOF-MS结合纳米磁珠技术筛选出质荷比m/z位于8 937的蛋白质在帕金森病中高表达(帕金森病组表达强度为27.47±16.58,正常组表达强度为5.01±3.47),有显著差异(P<0.01);6 636和8 697的蛋白质在帕金森病中低表达(帕金森病组表达强度为5.43±2.66和20.22±9.57,正常组表达强度为18.85±7.56和51.13±26.22),有显著差异(P<0.01)。联合上述3种潜在蛋白质标志物,可区分帕金森病组和对照组,其中帕金森病患者检出率为90.0%(27/30),健康者检出率为92.5%(37/40)。对m/z为6 636、8 697和8 937的标志物进行鉴定,结果分别为载脂蛋白C-I、载脂蛋白C-III和补体成分3a。结论:鉴定出的载脂蛋白C-I、载脂蛋白C-III和补体成分3a在帕金森病的诊断中具有一定价值,值得进一步研究和探讨。

肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型的建立

目的建立肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨其对肺癌的诊断价值。方法收集127例肺癌患者、108例正常人血清标本,随机分成训练组(肺癌89例、正常人68例)与测试组(肺癌38例、正常人40例),应用表面增强激光解吸/电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)检测其蛋白质指纹图谱。用BioMarker Pattern软件分析训练组中肺癌与正常人血清中的差异蛋白后,建立肺癌诊断的最优分类树模型,然后用测试组血清标本盲法验证该模型的诊断效率。结果分类树诊断模型由质荷比分别为5 808、5 971和7 780的3种蛋白质组成。盲法验证显示,该模型诊断肺癌的准确率为92.3%,敏感性与特异性分别为92.1%(35/38)和92.5%(37/40)。结论肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型较以往的传统方法具有更高的敏感性与特异性,值得进一步研究。

结核病患者血清蛋白质/多肽谱的初步研究

目的了解结核病患者血清蛋白质/多肽的表达,为新型结核病血清学诊断方法的研究提供基础依据。方法 (1)应用WCX蛋白质芯片和表面增强激光解析-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对99例肺结核患者和18例肺外结核患者进行了血清蛋白质/多肽谱检测,采用ClinProTools分析软件进行比较分析。(2)以"结核"、"双向电泳"、"表面增强激光解析-电离飞行时间质谱"、"血清学"、"蛋白质组学"及相应英文为检索词在万方医学数据库、PUBMED中检索中、外文献进行文献复习。结果 WCX蛋白质芯片从血清中捕获到99种蛋白质/多肽,其中m/z为5 753.76的蛋白质在肺结核与肺外结核两组间差异有显著性,在肺外结核患者血清中表达上调,其平均质谱峰面积在肺结核患者和肺外结核患者中分别为15.42±4.86、28.29±14.08。结论结核病的发生可产生大致相同的血清蛋白质/多肽谱,在不同类型结核结核病患者血清中可以找到共同的血清学诊断标志物。

结核杆菌临床分离菌早期培养滤液蛋白质组的比较

目的：初步了解结核杆菌体外液培养条件下的早期蛋白质代谢和分泌活动状况。方法：将2株对抗结核一线药物敏感的结核杆菌临床分离茵接种Middlebrook7H9液体培养基进行培养，并于培养第7天用0．22μm滤纸过滤培养液制备早期培养滤液，应用与弱阳离子交换蛋白质芯片（WCX2）捕获滤液蛋白行表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-Ms）检测，描述性分析比较其蛋白质组。结果：在2株结核杆菌7d培养滤液中分别检测到相对分子质量为982～9329与941。9331、丰度为7～210与11-368（通过质谱峰面积计算相对强度值表示）的164与194种蛋白质；与Middlebrook7H9液体培养基本身蛋白质组比较，在2株结核杆菌7d培养滤液中分别有153和183种蛋白质新产生（其中10种在2份滤液中均有存在）、92和90种蛋白质消失、10和13种蛋白质丰度变小。结论：在体外液体培养条件下，结核杆菌蛋白质代谢和分泌活动活跃。且不同菌株间有较大差异。

血清蛋白质指纹图谱诊断模型在肾癌中的应用

目的检测肾癌患者血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于肾癌早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型。方法应用蛋白质芯片CM10及表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定168例血清标本(其中肾癌53例,肾良性占位性病变47例,健康志愿者68例)的蛋白质质谱,用随机抽取的118例标本(肾癌38例,肾良性占位病变30例,健康志愿者50例)作为训练组,应用支持向量机进行训练和交叉验证,建立肾癌诊断模型;其余50例标本进行盲法验证。结果利用质荷比分别为5350、4100、3446、5027和6115的5个蛋白峰建立区分肾癌和正常人的诊断模型,其敏感性为94.74%,特异性为92%。盲法验证显示敏感性为93.33%,特异性为88.89%。区分肾癌和肾良性占位病变的诊断模型,敏感性为92.11%,特异性为90%。区分透明细胞癌和其他病理类型的肾癌的诊断模型对透明细胞癌的判别率为92.84%,对其他病理类型的肾癌的判别率为81.82%。结论表面增强激光解吸电离/飞行时间质谱技术结合支持向量机建立肾癌血清蛋白质指纹图谱模型对诊断肾癌具有较高的敏感性与特异性。

耻垢分枝杆菌7天培养滤液与Middlebrook 7H9培养液蛋白质组对比分析

目的初步了解耻垢分枝杆菌体外培养过程中对蛋白质的利用及其蛋白分泌活动状况，以进一步了解其生物特性。方法应用与弱阳离子交换蛋白质芯片（WCX2）联用的表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测Middlebrook7H9培养液和耻垢分枝杆菌7天培养滤液蛋白质／多肽，采用描述性分析其蛋白质／多肽谱并比较两者间的差异。结果在Middlebrook7H9培养液中检测到97种蛋白质／多肽，相对分子质量在1050～3940之间，丰度水平在86～7838相对强度值之间（相对强度值通过质谱峰面积计算）；在耻垢分枝杆菌7天培养滤液中检测到125种蛋白质／多肽，相对分子质量在1050～9330之间，丰度水平在111～9961相对强度值之间；相对Middlebrook7H9培养液，耻垢分枝杆菌7天培养滤液的蛋白质／多肽谱发生了下列变化：45种消失、20种丰度降低、3种未变化、30种丰度增大、71种新产生。结论耻垢分枝杆菌作为快速生长分枝杆菌菌种，在体外培养生长时有活跃的蛋白质利用和分泌活动，对于既无侵袭力又无毒素产生的耻垢分枝杆菌而言，这些活动可能与其致病性密切相关，值得人们深入研究。

SELDI技术预测FOLFIRI方案治疗结肠癌疗效敏感性的应用研究

目的:应用SELDI技术发现预测FOLFIRI方案治疗晚期结肠癌患者疗效敏感性的界定指纹,探索新的用药指征。方法:选择12例行FOLFIRI方案化疗,并有可观察疗效的晚期结肠癌术后患者,应用表面增强飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术在化疗前对患者的血清样本进行检测,根据RECIST实体肿瘤疗效评价标准将FOLFIRI方案治疗1疗程(3周期)后2周～3个月内的患者分成稳定组(SD)和无效组(PD)。应用ProteinChip3.2.0和Biomarker Wizard3.1软件分析两组之间有显著差异的指纹(峰型及丰度)并进行比较。结果:术后稳定组与无效组相比有3个蛋白质峰有显著差异性,M/Z分别为1372、1698、1865,与稳定组相比,无效组上调的峰M/Z为1372和1698,下调的峰M/Z为1865。结论:应用SELDI技术可以获得预测FOLFIRI方案治疗结肠癌疗效敏感性的标识指纹,其M/Z为:1372±50H+、1698±50H+、1865±50H+。其中M/Z:1372±50H+丰度<10、1698±50H+丰度<5、1865±50H+丰度>10为预计FOLFIRI方案治疗结肠癌可获得稳定的标识指纹;其M/Z:1372±50H+丰度≥10、1698±50H+丰度≥5、1865±50H+丰度≤10为预计FOLFIRI方案治疗结肠癌无效的标识指纹。