腺病毒转染与蛋白负载在促进树突状细胞成熟中的作用对比

用复制缺陷型腺病毒空载体和表达乳腺珠蛋白的重组腺病毒转染树突状细胞(DC),用人重组乳腺珠蛋白负载DC,以常规培养的DC作为对照组,比较腺病毒转染与蛋白负载在促进DC成熟中的作用。结果显示:除DC对照组外,其他3组DC均表现出成熟DC的形态;在CD80、CD83、CD86、IL-12的表达上,腺病毒转染DC组和蛋白负载组均高于DC对照组,而腺病毒转染组除CD86外的其他指标均高于蛋白负载DC组。认为腺病毒转染与蛋白负载均能促进DC的成熟,但腺病毒转染比蛋白负载更能促进DC的成熟。

负载BMP-2水凝胶缓释系统对糖尿病患者的治疗效果研究

本研究的初衷在于对负载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的水凝胶缓释系统的评估研究。方法 研究对象是随机选拔的100名糖尿病患者,根据治疗手段将其分为观察组和对照组,各50人。观察组接受负载BMP-2的水凝胶缓释系统的治疗,对照组则接受常规治疗。对比治疗前后两组的血糖标准、整体有效率以及不良反应。结果 观察组在治疗后的空腹血糖、餐后2小时血糖胆固醇、糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及甘油三酯(TG)指标均远低于对照组,总的治疗有效率也超过了对照组,而且不良反应的发生率也显著低于对照组,这些差异都有显著的统计学意义(p<0.05)。结论 负载BMP-2的水凝胶缓释系统对糖尿病患者具有良好的治疗效果,能显著改善患者的血糖和血脂水平,提高治疗有效率,并且不良反应较低,值得在临床上推广应用。

体外冲击波联合增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子治疗兔骨不连的研究

目的:欲评价体外冲击波联合增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子经皮直接注射入骨折断端加速骨不连愈合、促进成骨过程的作用。方法:48只兔使用单纯随机抽样的方法分为4组,制备共48侧桡骨模型,并行不同方案的治疗:A组12只骨不连兔只给予ESW治疗;B组12只骨不连兔给予ESW联合纤维蛋白胶(Fibrin Glue,FG)治疗;C组12只骨不连兔给予ESW联合FG/骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2 rh BMP-2)/重组人碱性成纤维生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhb FGF)治疗;D组12只骨不连兔给予ESW联合FG/rh BMP-2/rhb FGF/人重组血管内皮细胞生长因子(recombinant human vsacular endothelial growth factor,rh VEGF)治疗。联合治疗后,应用常规X线摄片、组织形态光学检查及生物力学试验等方法检测冲击波联合药物治疗后的骨折愈合情况。结果:与A组单纯体外冲击波治疗相比,B组FG+体外冲击波治疗组骨折线稍模糊,骨痂面积开始增多,骨折断端距离缩短。组织形态学显示大片软骨形成,软骨细胞增生活跃,周围纤维结缔组织中可见新生血管形成。生物力学测定结果发现两组之间并没有差距,无统计学意义(P>0.05)。C组FG/rh BMP-2/rhb FGF+体外冲击波治疗组骨折线模糊,纤维骨痂消失,可见明显增生的骨小梁。与B组:FG+体外冲击波治疗组相比,C组:FG/rh BMP-2/rhb FGF+体外冲击波治疗组生物力学明显有差异,且具有显著性统计学意义(P<0.01)。D组:FG/rh BMP-2/rhb FGF/rh VEGF+体外冲击波治疗组4周时骨折线明显模糊,骨小梁明显增多。8周时骨折线消失,且愈合后塑形好。组织形态学显示以纤维结缔组织为主,中间见大量成骨细胞。与C组FG/rh BMP-2/rhb FGF+体外冲击波治疗组相比,差异具有显著性统计学意义(P<0.01),说明更能够提高抗弯曲力度。结论:体外冲击波联合经皮注射增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子具有促进骨折愈合作用,有望成为一种非手术治疗骨不连的良好方法。

评价体外冲击波联合增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子治疗骨不连的临床疗效

目的分析研讨体外冲击波疗法(ESW)联合增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子治疗骨不连的临床疗效。方法 60只兔子,随机分为A组、B组、C组、D组,每组15只,共制备60例左侧桡骨模型。采用不同方式进行干预,A组采用ESW治疗,B组采用ESW+纤维蛋白胶(FG)治疗,C组采用ESW+FG+重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)+重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)治疗,D组采用ESW+FG+rhbFGF+rhBMP-2+重组人血管内皮生长因子(rh VEGF)治疗,观察比较四组兔子的治疗效果。结果各标本中点为桡骨模型缺损部位,下桡骨6 cm部位用钢锯整齐锯断。测定生物力学结果 ,A组、B组、C组和D组的最大负荷数分别为(88.82±2.31)、(95.66±3.82)、(116.44±4.75)、(126.82±5.40)N,B组、C组和D组最大负荷数高于A组,C组和D组最大负荷数高于B组,D组最大负荷数高于C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论建立临床治疗骨不连疾病采用体外冲击波联合增强型纤维蛋白胶负载骨生长因子,对骨折愈合有促进作用,属于骨不连非手术治疗方式中较为良好的一种。

负载蛋白聚糖4的温度敏感性聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯可注射水凝胶对软骨修复的影响

目的探讨负载蛋白聚糖4(PRG4)的温度敏感性聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯共聚物(PCEC)可注射水凝胶材料表征及修复新西兰兔软骨缺损的效果。方法2022年3月至2023年6月,利用PCEC温敏性水凝胶负载了PRG4效应因子(PRG4@PCEC),使用扫描电子显微镜观察冷冻干燥的PRG4@PCEC水凝胶的形貌,测量PCEC和PRG4@PCEC水凝胶的最低共溶温度;使用活/死细胞染色技术评估水凝胶的生物安全性;采用雄性新西兰大白兔18只,36个膝关节缺损样本,随机分为3组,其中12个缺损组用PRG4@PCEC水凝胶修复,12个缺损组用PCEC水凝胶修复,12个缺损组为空白对照组,观察水凝胶的软骨修复能力;通过微型计算机断层扫描(Micro-CT)分析软骨下骨再生,标本组织切片苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色及荧光定量聚合酶链反应(PCR)评估水凝胶对软骨缺损的修复作用。组间比较采用t检验。结果水凝胶具有明显的多孔微观结构,PCEC和PRG4@PCEC水凝胶分别在35℃和38℃表现出最低共溶温度;激光共聚焦观察活/死细胞染色结果证明PRG4@PCEC水凝胶对于兔软骨细胞具有良好的生物相容性;载有PRG4的水凝胶组在8周时,缺损已经完全被高含量的新生软骨组织填充,表明软骨缺损修复最佳;Micro-CT显示在8周时PCEC组[(37.33±0.39)mm^(3)]和PRG4@PCEC组[(25.33±0.21)mm^(3)]软骨下骨缺损体积均小于对照组[(51.57±0.49)mm^(3),t=32.19、69.56,P<0.01];切片染色显示PRG4@PCEC水凝胶组软骨下骨有效形成;荧光定量PCR结果显示在4周和8周PCEC组(2.79±0.07、2.18±0.10)与PRG4@PCEC组白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平(1.54±0.07、0.80±0.10)均低于对照组(3.21±0.08、2.54±0.07,t=0.68、4.97、27.63、24.43,P<0.01),同时PCEC组(0.95±0.24、1.45±0.34)和PRG4@PCEC组Ⅱ型胶原蛋白(COL2)基因表达水平(1.19±0.45、1.53±0.26)高于对照组(0.64±0.07、1.01±0.14,t=7.47、0.08、10.70、3.12,P<0.05)。结论负载PRG4的温度敏感性PCEC可注射水凝胶具有良好的温度敏感性和生物安全性,对关节软骨缺损有明显修复作用。

负载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的水凝胶缓释系统毒性分析

探讨负载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的水凝胶缓释系统对小鼠的毒性影响。方法 将小鼠分为实验组、阴性对照组和阳性对照组,观测三组小鼠在第30天、60天和90天时的体质量以及主要脏器的质量及脏器质量系数。分析涉及小鼠血液成分的差异,感知免疫球蛋白、补体、炎症因子及淋巴细胞的微妙变化。同时,对比三组小鼠脾脏中B、T细胞的比例明晰。经过研究,在体重、内脏质量、血常规以及淋巴细胞的增长比例上,实验组与阴性对照组并无显著的区别。然而阳性对照组却不同,其在这些方面存在着显著的差异。再看血清中的情况,阳性对照组小鼠的IgE、IgG、IgM、补体C3、TNF-a与IL6浓度均显著高于实验组和阴性对照组,而实验组与阴性对照组比,这些血清成分没有显著的差异。延伸至B、T细胞比例,实验组与阴性对照组的数值诧异的相似,而阳性对照组的数值则较两组为低。汇合研究得出,骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在水凝胶载体中缓释,对小鼠并无明显的毒性影响,具备应用于骨缺损修复的安全有效载体的条件。

VPI-7分子筛的合成及生物学性能

采用水热法,通过调变反应溶胶的量合成了不同尺寸的不规则圆片状多孔锌硅分子筛VPI-7,并研究了其生物学性能.扫描电子显微镜观测结果表明,制备的样本由VPI-7条状晶体聚集成微球,并进一步相互交联形成微米级孔隙,其形貌可以促进钙磷化合物在样品表面的沉积,同时可以负载并缓释蛋白.细胞学检测结果表明,VPI-7分子筛有利于细胞黏附增殖,具有良好的生物相容性.

树枝状高分子修饰的水溶性近红外二区荧光聚合物的合成及其在肿瘤相关抗原载运中的应用

通过在具有供体-受体-供体结构的近红外二区(NIR-Ⅱ)荧光分子(TTQ-F)的侧链上修饰聚酰胺-胺型树枝状高分子(PAMAM)合成了一种NIR-Ⅱ荧光高分子(TTQ-F-PAMAM).该树枝状修饰的高分子不仅可以实现在900~1200 nm近红外二区范围的荧光成像,同时有着良好的光稳定性.PAMAM作为一种三维、高度有序的新型高分子,可以控制和设计分子的大小与功能基团,且具有较好的水溶性与单分散性.而TTQ-F-PAMAM上独特的PAMAM结构所带来的大量氨基,使其对卵清蛋白(OVA)的包载率可以达到16.43%.更重要的是,负载OVA的同时,可以有效载运至树突状细胞(dendritic cell,DC)内,并在其细胞环境中加速OVA的释放从而进一步激活DC的免疫反应.具体表现为DC细胞膜表面共刺激因子CD80和CD86的表达大大提高,以及分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)和白细胞介素-12p70(Interleukin-12p70,IL-12p70)的能力增强.本工作不仅实现了对肿瘤相关抗原的载运以及对抗原提呈细胞的激活,而且其近红外成像能力可以为今后的免疫治疗研究提供新的策略与方法.