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疾病相关的蛋白质与配体DNA分子结合区域的分析与预测
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作者 冯永娥 孙鹏哲 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期57-62,共6页
很多细胞的生命活动涉及到特定的DNA分子与蛋白质相互作用,而且这些相互作用与人类很多疾病的产生密切有关。为了了解蛋白质与DNA分子结合的分子机制,确定蛋白质序列中哪些残基与DNA分子结合是非常重要的。但是目前,精确识别蛋白与DNA... 很多细胞的生命活动涉及到特定的DNA分子与蛋白质相互作用,而且这些相互作用与人类很多疾病的产生密切有关。为了了解蛋白质与DNA分子结合的分子机制,确定蛋白质序列中哪些残基与DNA分子结合是非常重要的。但是目前,精确识别蛋白与DNA分子结合残基还很困难。在这项研究中,我们将使用机器学习算法来预测疾病相关蛋白与DNA分子的结合区域,这为下一步精确识别结合位点奠定了基础。预测模型中使用的数据集来自于Uniprot和PDB数据库,我们提取位置特异性打分矩阵(PSSM)、氨基酸的理化指数为特征,利用随机森林算法、5折交叉检验结果得到:在使用103种理化指数作为特征时,预测总精度最高达到94%,精确率、召回率以及马氏相关系数分别为88%、75%和0.78。可见该模型对于疾病相关的蛋白与DNA分子的结合区域是有较好的识别能力。 展开更多
关键词 疾病相关的蛋白质 位置特异性打分矩阵 蛋白质与配体dna分子结合 机器学习算法
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蛋白质与极性配体复合物的绝对结合自由能计算
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作者 王存新 宋伟 陈慰祖 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期143-146,共4页
介绍了用分子动力学模拟与热力学积分法相结合 ,模拟蛋白质与配体的绝对结合自由能的方法 .通过分子转换法 ,使蛋白质分子 (包括水分子 )与配体小分子之间的相互作用逐渐减弱 (或增强 )至完全消失 (或完全出现 ) .运用体约束方法 ,计算... 介绍了用分子动力学模拟与热力学积分法相结合 ,模拟蛋白质与配体的绝对结合自由能的方法 .通过分子转换法 ,使蛋白质分子 (包括水分子 )与配体小分子之间的相互作用逐渐减弱 (或增强 )至完全消失 (或完全出现 ) .运用体约束方法 ,计算了配体与受体结合后平动、转动自由度的丧失即熵效应所引起的自由能变化 .以胰蛋白酶双突变体 (D189G/G2 2 6D)与极性配体苯甲脒为例 ,研究了蛋白质活性部位与极性配体的相互作用对结合自由能的影响 ,该复合物绝对结合自由能的模拟结果 (- 15 5kJ/mol)与实验值 (- 10 5kJ/mol)相近 . 展开更多
关键词 蛋白质 极性配体复合物 绝对结合自由能 热力学积分法 分子转换法 计算
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基于几何约束的蛋白质-配体准确结合自由能计算 被引量:5
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作者 付浩浩 陈淏川 +2 位作者 张宏 邵学广 蔡文生 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第4期472-480,共9页
蛋白质-配体的结合过程伴随着复杂的结构变化,在分子模拟可及的时间尺度内难以完全捕获,这使得准确估计蛋白质-配体的结合自由能十分困难.一种有效的解决途径是采用几何约束减小需要采样的构象空间,再通过后处理方式扣除约束的影响.本... 蛋白质-配体的结合过程伴随着复杂的结构变化,在分子模拟可及的时间尺度内难以完全捕获,这使得准确估计蛋白质-配体的结合自由能十分困难.一种有效的解决途径是采用几何约束减小需要采样的构象空间,再通过后处理方式扣除约束的影响.本文综述了三种几何约束策略——漏斗状约束、球形约束和七自由度约束与自由能计算算法结合准确计算结合自由能的原理和进展,重点概述理论严谨的七自由度约束的最新进展以及与Alchemistry或重要性采样方法的联用策略,最后,讨论了如何针对不同体系选择合适的计算策略以及蛋白质-配体准确结合自由能计算在药物设计等领域中的挑战和前景,并提出了将上述方法进一步运用于研究更复杂的蛋白质-蛋白质问题的可能性. 展开更多
关键词 蛋白质-配体 结合自由能 分子模拟 自由能微扰 重要性采样
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小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶载体的构建
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作者 刘英 刘运强 +4 位作者 周钦 陶大昌 彭艳 刘合焜 张思仲 《福建医科大学学报》 2007年第2期97-100,共4页
目的构建用于小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶的载体,为产生Znf230基因敲除的小鼠模型准备条件。方法设计和合成引物,经PCR从小鼠的基因组中扩增出5′同源臂、3′同源臂及锚定序列,长度分别为4,4,1kb的片段,反向插入pBS载体的neo基... 目的构建用于小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶的载体,为产生Znf230基因敲除的小鼠模型准备条件。方法设计和合成引物,经PCR从小鼠的基因组中扩增出5′同源臂、3′同源臂及锚定序列,长度分别为4,4,1kb的片段,反向插入pBS载体的neo基因的两侧,从而构建小鼠Znf230条件基因打靶载体Znf230-pBS(5)。结果经过限制性内切酶及DNA测序鉴定,证实该条件基因打靶载体含有的同源序列与Genebank公布的基因序列一致,表明载体构建成功。结论PCR技术和定向克隆技术是构建条件基因打靶载体简单而可靠的方法。运用该技术可获得小鼠锌指蛋白基因Znf230的条件基因打靶载体。 展开更多
关键词 dna结合基因蛋白质 基因 聚合酶链反应 克隆 分子
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新工程蛋白可阻止癌症生长并再生神经元
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《现代医院》 2020年第6期872-872,共1页
配体是在细胞之间或细胞内部传递信号的蛋白质分子。配体通过与称之为受体的细胞蛋白质结合来发挥作用。在与配体结合后,受体可以向细胞的其他部分发送额外的信号,以调节我们的生物过程。然而,如果这些信息被混淆,则会使我们患上一系列... 配体是在细胞之间或细胞内部传递信号的蛋白质分子。配体通过与称之为受体的细胞蛋白质结合来发挥作用。在与配体结合后,受体可以向细胞的其他部分发送额外的信号,以调节我们的生物过程。然而,如果这些信息被混淆,则会使我们患上一系列不同的疾病。 展开更多
关键词 细胞蛋白质 传递信号 配体结合 神经元 蛋白质分子 受体 发挥作用
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真核DNA拓扑异构酶Ⅰ蛋白超家族的进化踪迹分析与全新抗肿瘤药物结合位点的识别
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作者 宋云龙 亓云鹏 +8 位作者 张万年 盛春泉 张珉 姚建忠 余建鑫 缪震元 周有骏 朱驹 吕加国 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第2期182-190,共9页
拓扑异构酶Ⅰ(TopoisomeraseⅠ,TopoⅠ)抑制剂已成为新型抗肿瘤药物研究的热点.识别靶酶上全新的药物结合位点对于设计、优化TopoⅠ抑制剂具有重要意义,据此设计的化合物不仅可以创新结构类型,克服现有的喜树碱类药物的毒性,而且有望很... 拓扑异构酶Ⅰ(TopoisomeraseⅠ,TopoⅠ)抑制剂已成为新型抗肿瘤药物研究的热点.识别靶酶上全新的药物结合位点对于设计、优化TopoⅠ抑制剂具有重要意义,据此设计的化合物不仅可以创新结构类型,克服现有的喜树碱类药物的毒性,而且有望很好地解决与现有的喜树碱类药物的交叉耐药性问题.通过对真核DNA拓扑异构酶Ⅰ蛋白超家族多元序列联配研究,构建了蛋白质系统进化树,并在此基础上采用进化踪迹分析识别得到了人拓扑异构酶Ⅰ上重要功能残基.研究发现,喜树碱分子7,9位周围存在亚家族特异性的疏水性残基Ala351,Met428,Pro431,表明在喜树碱分子对应区域引入疏水性基团取代,会提高抗肿瘤活性.尤其值得注意的是,超家族保守的蛋白残基Lys436,有望成为新型喜树碱类药物改造的重要靶点,据此设计的新型化合物将有望解决喜树碱类药物水溶性差的问题.此外,突变将导致喜树碱耐药性的蛋白残基Asn352,Arg364为真核TopoⅠ蛋白超家族保守残基,由于对接研究已表明它们均不与喜树碱直接相互作用,因此它们将是发现新型非喜树碱类TopoⅠ抑制剂的重要药物结合位点. 展开更多
关键词 dna拓扑异构酶 结合位点 超家族 抗肿瘤药物 识别 真核 Topo 系统进化树 抗肿瘤活性 喜树碱 抑制剂 药物研究 结构类型 多元序列 相互作用 化合物 耐药性 疏水性 碱类 残基 设计 蛋白质 特异性 水溶性 分子 突变
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肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位喹诺酮耐药决定区变异型与底物分子对接分析 被引量:6
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作者 糜祖煌 翁幸鐾 高军晖 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期208-211,共4页
目的了解2种肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位喹诺酮耐药决定区变异型与各种底物的结合能力。方法参照野生型作同源建模获得2种肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位变异型(I型和FH型)立体结构,ArgusLab4.1软件中的DOCK模块做DNA旋转酶A亚单... 目的了解2种肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位喹诺酮耐药决定区变异型与各种底物的结合能力。方法参照野生型作同源建模获得2种肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位变异型(I型和FH型)立体结构,ArgusLab4.1软件中的DOCK模块做DNA旋转酶A亚单位野生型和2种变异型与7种喹诺酮类药物分子对接,计算酶与底物结合自由能值(AG),并计算DNA旋转酶A亚单位氨基酸残基与环丙沙星相互作用原子对数量及距离。结果肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位变异型I型、FH型与吡哌酸、环丙沙星、加替沙星结合自由能值分别为-26.60750、-29.53039、-29.49309kJ/mol,-26.69644、-28.97283、-29.59050kJ/mol;野生型分别为-27.18882、-30.87200、-30.24404kJ/mol,即吡哌酸、环丙沙星、加替沙星与2种变异型结合力下降,呈现耐药。I型、FH型与左氧氟沙星结合自由能值为-29.01381、-29.49757kJ/tool,野生型为-28.01620kJ/mol。I型、FH型与萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星结合自由能值有升有降。DNA旋转酶A亚单位野生型、I型、FH型与环丙沙星相互作用形成原子对距离在5×10^-10m以内的分别有16对、2对和4对;形成原子对距离在4×10^-10m以内的只有8对,均为野生型。结论肺炎克雷伯菌DNA旋转酶A亚单位2种变异型与环丙沙星结合力下降是耐药的形成因素。 展开更多
关键词 克雷伯菌 肺炎 dna拓扑异构酶类 Ⅱ型 喹诺酮类 变异(遗传学) 分子构象 蛋白质结合 药物耐受性
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大鼠Mecp_2基因的RNA干扰有效序列筛选
8
作者 张玉稚 王汉森 +4 位作者 潘虹 李美蓉 包新华 金靖 吴希如 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期529-532,共4页
目的:以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列。方法:首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白(RFP)的融合基因表达质粒,然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA(siRNA,small interference RNA)共转染HEK293T细胞... 目的:以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列。方法:首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白(RFP)的融合基因表达质粒,然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA(siRNA,small interference RNA)共转染HEK293T细胞,构成外源基因系统,以此对于4个备选的siRNA对大鼠Mecp2基因的抑制有效性进行筛选。然后将筛选到的有效序列siRNA转染自身表达大鼠Mecp2基因的PC12细胞,以免疫荧光染色显示大鼠Mecp2蛋白的表达情况,通过内源大鼠Mecp2基因表达被抑制的情况验证所筛选序列的RNA干扰有效性。结果:针对大鼠Mecp2基因mRNA918—936位核苷酸的siRNA(序列:5'-GCUGUGAAGGAAUCUUCUA-3’)是对大鼠Mecp2基因进行RNA干扰的有效序列。此有效siRNA序列所在的位置相当于大鼠Mecp2基因第4外显子,推测可同时抑制大鼠Mecp2α和大鼠Mecp2β的表达。且此靶序列位于大鼠Mecp2基因编码区,推测可同时抑制1.9kb和10kh的大鼠Mecp2基因mRNA的表达。结论:本研究为建立稳定的大鼠神经元Mecp2基因表达敲低的神经细胞模型和研究脑发育过程中Mecp2基因的功能打下了基础。 展开更多
关键词 dna结合蛋白质 dna甲基化 RNA 分子干扰
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生物工艺学中的分析技术
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作者 周振康 《运城学院学报》 1986年第4期54-59,80,共7页
生物工艺学是生物学、化学和工程学结合在一起而产生的一门新兴学科。它利用重组脱氧核糖核酸(DNA)的研究和开发,生产农业、医药和工业的新产品。如:将人体的Somatostatin激素基因(带有遗传信息的DNA片断),与大肠杆菌的DNA重组,而生产... 生物工艺学是生物学、化学和工程学结合在一起而产生的一门新兴学科。它利用重组脱氧核糖核酸(DNA)的研究和开发,生产农业、医药和工业的新产品。如:将人体的Somatostatin激素基因(带有遗传信息的DNA片断),与大肠杆菌的DNA重组,而生产出此种激素。这是当今世界上最有生气的科学领域之一,目前发展势头正由实验室研究移向工业生产水平。 展开更多
关键词 生物工艺学 分析技术 dna 免疫测定 生物分子 蛋白质结合 抗原活性 生物大分子 荧光标记 工业生产
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转化生长因子β1及其信号转导分子Smad2在病变肾小球中的表达及其意义 被引量:22
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作者 阮永华 张志刚 +2 位作者 张秀荣 刘琛 郭慕依 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期314-317,共4页
目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)及其信号转导分子Smad 2在肾小球肾炎中的表达及其意义。方法 以 11例肾小球轻微病变为对照组 ,对各种不同组织学类型的IgA肾病 4 0例、膜性肾炎 10例、硬化性肾炎 11例的肾穿刺活检标本 ,分别行... 目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)及其信号转导分子Smad 2在肾小球肾炎中的表达及其意义。方法 以 11例肾小球轻微病变为对照组 ,对各种不同组织学类型的IgA肾病 4 0例、膜性肾炎 10例、硬化性肾炎 11例的肾穿刺活检标本 ,分别行原位分子杂交检测肾小球Smad 2mRNA的表达和免疫组织化学ABC方法观察TGF β1、Ⅳ型胶原及纤连蛋白在肾小球中的染色强度 ,并对其检测结果作图像分析处理。结果 除轻微病变型IgA肾病的Smad 2mRNA表达外 ,其他病理类型肾炎中病变肾小球TGF β1蛋白和Smad 2mRNA的表达均高于对照组 ,且两者在肾小球中的表达与Ⅳ型胶原、纤连蛋白在肾小球中的沉积呈正相关。结论 TGF β1及其信号转导分子Smad 2可能参与了病变肾小球细胞外基质的过量积聚 。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 转化生长因子-Β dna结合蛋白质 反式作用因子 原位分子杂交
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High-accuracy mapping of protein binding stability on nucleosornal DNA using a single-molecule method
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《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期438-440,共3页
关键词 蛋白质相互作用 dna结合 分子 高精度 稳定性 双链dna 映射 dna序列
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shRNA抑制缺氧条件下人视网膜色素上皮细胞低氧诱导因子-1α基因对血管内皮生长因子表达的影响
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作者 肖青 石浩军 +2 位作者 吕明良 曾水清 邝文辉 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1022-1027,共6页
目的探讨缺氧条件下人视网膜色素上皮(hRPE)细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法利用体外转录法合成针对HIF—1α mRNA序列的靶点之一的小发卡环RNA(shRNA),以化学低氧诱导剂CoCl2模拟RPE... 目的探讨缺氧条件下人视网膜色素上皮(hRPE)细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法利用体外转录法合成针对HIF—1α mRNA序列的靶点之一的小发卡环RNA(shRNA),以化学低氧诱导剂CoCl2模拟RPE细胞缺氧环境,对缺氧培养条件下hRPE细胞的HIF-1α进行RNA干扰,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α和VEGF mRNA的表达,免疫印迹法检测HIF—1α和VEGF蛋白水平,以正常组、缺氧组及阴性转染组作为对照,观察其对HIF-1α基因的沉默效果及对VEGF表达的抑制作用。结果转染HIF-1α mRNA的特异性shRNA后,RT-PCR检测结果显示缺氧条件下hRPE细胞HIF-1α基因沉默效果为77.1%,VEGF mRNA的表达水平下降了27.8%;免疫印迹法检测结果显示HIF—1α和VEGF蛋白水平显著降低。结论针对HIF-1α mRNA的shRNA能有效地使HIF-1α基因沉默,进而抑制缺氧对VEGF的上调作用。(中华眼科杂志.2007。43:1022—1027) 展开更多
关键词 RNA 分子干扰 蛋白质 dna结合蛋白质 血管内皮生长因子A 缺氧 色素上皮
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HIF-1α基因克隆及其转染骨髓干细胞的实验研究
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作者 唐滔 杨进福 +2 位作者 李峰 杨一峰 胡建国 《中国医师杂志》 CAS 2009年第8期1013-1017,共5页
目的构建并鉴定HIF.1et真核表达载体HIF-1α-pcDNA3.1,研究HIF-1α真核表达载体HIF-1α-pcDNA3.1体外转染MSCs及HIF-1a基因在MSCs中的表达情况。方法抽提大鼠心肌细胞mRNA,以mRNA为模版,逆转录得到cDNA,PCR扩增HIF-let目的基因,... 目的构建并鉴定HIF.1et真核表达载体HIF-1α-pcDNA3.1,研究HIF-1α真核表达载体HIF-1α-pcDNA3.1体外转染MSCs及HIF-1a基因在MSCs中的表达情况。方法抽提大鼠心肌细胞mRNA,以mRNA为模版,逆转录得到cDNA,PCR扩增HIF-let目的基因,连接到pGEM-T载体中,酶切,测序证实,双酶切将HIF-1α转至pcDNA3.1中。采用密度梯度离心-贴壁培养法获Wistar大鼠MSCs。采用脂质体介导技术将HIF-1α-pcDNA,,转染至MSCs,在倒置显微镜下观察转染后细胞形态和生长情况的变化,通过RT-PCR,Western和ELISA鉴定HIF-1α在细胞中的表达情况。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示RT-PCR扩增出的特异片段约2480bp,基因测序结果与GenBank报道的完全一致,成功构建了HIF-1α-pcDNA¨真核表达载体。采用Percoll密度梯度离心-贴壁培养法易获取大鼠MSCs。RT-PCR证实采用阳离子脂质体Lipofectamine2000转染的MSCs表达HIF-1α mRNA明显增加,West-era和ELISA检测证实转基因MSCs表达HIF-1α蛋白明显增加。结论成功克隆HIF-1仅基因,利用脂质体将HIF-1α-pcDNA3.1转染至MSCs,通过RT-PCR、Western和ELISA等检测证实外源性HIF-1α在MSCs中获有效表达。 展开更多
关键词 dna结合蛋白质类/遗传学 克隆 分子 骨髓祖代细胞
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缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子干扰性RNA抑制鼠视网膜新生血管的研究
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作者 蒋剑 夏晓波 +4 位作者 许惠卓 熊宇 宋伟涛 熊思齐 李岩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期921-928,共8页
目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)小片段干扰性RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用。方法本研究采用随机对照方法。构建HIF-1α siRNA重组质粒。C57BL/6J小鼠玻璃体腔注射增强型绿色荧光蛋白(E... 目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)小片段干扰性RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用。方法本研究采用随机对照方法。构建HIF-1α siRNA重组质粒。C57BL/6J小鼠玻璃体腔注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒pEGFP-N1,1d后视网膜铺片观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达。选7天龄C57BL/6J小鼠90只,17只为正常组,73只建立氧诱导的视网膜新生血管模型,分为模型对照组、空载体组和基因治疗组(HIF1α siRNA组、VEGF siRNA组及共转染组)。于出氧舱前1d,向空载体组小鼠玻璃体腔注射空载体质粒;HIF—1α siRNA组注射HIF—1α siRNA,VEGF siRNA组注射VEGF165 siRNA,共转染组注射HIF1α siRNA+VEGF165 siRNA。采用荧光造影视网膜铺片方法观察血管形态变化;制作组织切片计算突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数;采用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测视网膜HIF—1α和VEGF的表达。采用单因素方差分析和组间最小显著差法进行统计学分析。结果pEGFP-N1经脂质体LF2000介导转染视网膜细胞后1d即可见GFP表达。基因治疗组较模型对照组新生血管丛明显减少,荧光渗漏明显减轻,其中共转染组效果最明显。基因治疗组[HIF-1α siRNA组为(27.73±2.33)个,VEGF siRNA组为(15.43±3.23)个,共转染组为(8.70±2.88)个]较其他3组突破视网膜内界膜的细胞核数量减少,差异均具有统计学意义(F=3016.527,P〈0.01)。视网膜HIF-1α mRNA及蛋白表达水平:模型对照组(1.08±0.06,0.383±0.009)和空载体组(1.09±0.05,0.386±0.010)较正常组(0.81±0.07,0.035±0.003)上调,而HIF-1α siRNA组(0.46±0.06,0.182±0.008)较模型对照组下调,抑制效率分别为57.4%和52.5%,差异均有统计学意义(F=139.804,2686.001;P〈0.01)。VEGF mRNA及蛋白表达水平:模型对照组(1.53±0.07,0.340±0.004)和空载体组(1.59±0.06,0.337±0.009)较正常组(0.27±0.08,0.051±0.008)明显上调,而基因治疗组较模型对照组明显下调,差异均有统计学意义(F=421.423,2513.583;P〈0.01),其中共转染组下调最明显,抑制效率分别为85.6%和80.9%。结论HIF-1α siRNA和VEGF165 siRNA均可有效抑制小鼠视网膜新生血管形成,两种siRNA共转染抑制效果最明显。 展开更多
关键词 视网膜新生血管化 RNA 分子干扰 蛋白质 dna结合蛋白质 血管内皮生长因子类 基因疗法
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Proteomic and molecular investigations revealed that Acidithiobacillus caldus adopts multiple strategies for adaptation to NaCl stress 被引量:2
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作者 Xu Guo Chengying Jiang +3 位作者 Yuanming Luo Mingjiang Zhang Ansgar Poetsch Shuangjiang Liu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2014年第3期301-309,共9页
Acidithiobacillus caldus plays an important role in commercial bioleaching.To understand how NaCl stress adaptation occurs in A.caldus,we grew A.caldus strain SM-1 in media containing high NaCl concentrations.SM-1 gre... Acidithiobacillus caldus plays an important role in commercial bioleaching.To understand how NaCl stress adaptation occurs in A.caldus,we grew A.caldus strain SM-1 in media containing high NaCl concentrations.SM-1 grew at concentrations of up to 1.0-mol L^(-1)NaCl,but growth was severely inhibited at higher concentrations.Proteomic analysis showed that SM-1 used multiple strategies to respond to NaCl stress.In addition to several heatshock proteins,enzymes involved in proline biosynthesis increased under NaCl stress.In addition,two DNA-binding proteins and a third protein of unknown function(Atc_(1291)),which was subsequently identified as a putative single-stranded DNA-binding protein,were up-regulated in the presence of NaCl stress.These DNA-binding proteins might play a role in response to osmotic stress.Atc_(1291)was cloned and expressed in Escherichia coli.Surprisingly,we found that E.coli BL21/pET28a-atc_(1291)grew to higher cell densities than E.coli BL21/pET28a,regardless of NaCI stress.Homologs to Atc_(1291)were identified in several groups of Proleohacleria.The role of Atc_(1291)in enhancing cell growth needs further investigation. 展开更多
关键词 蛋白质组学 盐胁迫 dna结合蛋白 NACL胁迫 显示 分子 抑制浓度 大肠杆菌
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Cloning the interferon regulatory factor 1 gene in lungfish (Protopterus annectens) and its molecular evolution among sarcopterygians
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作者 GAN XiaoNi WANG DengQiang +1 位作者 WANG XuZhen CHEN XinWen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2011年第17期1782-1786,共5页
Sarcopterygians is an important vertebrate clade that includes crossopterygians and tetrapods.Crossopterygians are lobe-finned fish that include lungfish and coelacanths.Tetrapods include amphibians,reptiles,avians an... Sarcopterygians is an important vertebrate clade that includes crossopterygians and tetrapods.Crossopterygians are lobe-finned fish that include lungfish and coelacanths.Tetrapods include amphibians,reptiles,avians and mammals.To compare the interferon regulatory factor 1 (irf-1) gene structure and to explore phylogenetic relationships among sarcopterygians,we cloned the cDNA sequence of irf-1 from lungfish and compared it with irf-1 orthologs in other sarcopterygian species.The lungfish is a primitive sarcopterygian that occupies a very important position in vertebrate phylogeny.Interferon regulatory factors (IRFs) are a family of proteins involved in innate immunity.To date,11 IRF family members have been reported.All IRFs share homology in the first 115 amino acids,which encompasses a DNA binding domain containing a characteristic repeat of 5 tryptophan residues separated by 10-18 amino acids.IRF-1 and IRF-2 were the first members of this family to be reported and they have a very important role in innate immunity.However,studies of the irf-1 and irf-2 genes are mostly confined to mammals;very few non-mammalian irf-1 genes have been reported.Consistent with the irf-1 gene sequences already published,the first 345 nucleotides of lungfish irf-1 are highly conserved.At the carboxyl terminal a C-terminal transactivating region motif and an interferon associated domain (IAD2) were identified.417 million years separate the present from the closest common ancestor of lungfish and tetrapods;however,the irf-1 genes among sarcopterygians are highly conserved and have very obvious phylogenetic relationships.Also the interrelationship tree of sarcopterygians,based on IRF-1 amino acid sequences,is identical with trees produced using other data,such as morphological characteristics or mitochondrial gene sequences. 展开更多
关键词 调节因子 I基因 干扰素 肺鱼 分子进化 克隆 dna结合结构域 蛋白质家族
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