自身免疫性甲状腺炎血清蛋白质二硫化物异构酶A3抗体的表达

目的探讨自身免疫性甲状腺炎(AIT)患者血清蛋白质二硫化物异构酶A3抗体(PDIA3Ab)的表达,并对该抗体总IgG及各亚型与甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)及甲状腺功能(甲功)进行相关性分析。方法用ELISA法检测AIT与非AIT患者血清PDIA3Ab总IgG及各亚型滴度,电化学发光法检测TPOAb、TgAb及甲功。结果与非AIT患者相比,AIT患者血清PDIA3Ab总IgG、IgG1、IgG3滴度均显著增加(P <0.05),AIT甲功正常组与AIT甲减组血清PDIA3Ab总IgG及各亚型滴度无显著差异(P> 0.05),AIT甲减组血清PDIA3Ab IgG1亚型滴度与TgAb呈负相关(r=-0.679,P <0.05),排除TPOAb、TgAb对甲功的影响后,与促甲状腺激素(TSH)呈正相关(r=0.550,P <0.05)。AIT患者血清PDIA3Ab总IgG、IgG3亚型滴度与TPOAb、TgAb、甲功均无关(P> 0.05)。结论除甲状腺过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(Tg)之外,PDIA3可能是AIT的一种非经典自身抗原,发挥甲状腺腺外损伤作用。

蛋白质二硫键异构酶A3在消化系统肿瘤中的研究进展

目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致死率、致残率在逐年上升。蛋白质二硫异构酶A3(PDIA3)是PDI家族中重要的一员,是一种功能广泛的硫醇氧化还原酶,其在多种肿瘤中的表达含量升高,与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。尽管大量研究表明,PDIA3在许多肿瘤的发生和发展中起着至关重要的作用,但目前尚无系统的报道PIDA3在消化系统肿瘤中的作用。因此,该文综述了PDIA3在4种消化系统肿瘤中的不同表达情况及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段或临床预后中的作用,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点。这对提高肿瘤患者的生存率具有十分重要的意义。

脂联素和蛋白质二硫键异构酶在糖尿病心肌病中的作用研究进展

糖尿病心肌病(DCM)与多种心血管疾病相关,如:猝死、心律失常、心绞痛、心源性休克及心力衰竭等,是糖尿病患者死亡的主要原因之一。因DCM的发病机制复杂,目前尚无明确特效的治疗方案。脂联素是主要由脂肪细胞、心肌细胞分泌的能调控糖脂代谢、保护心肌和血管的细胞因子,其水平降低可导致糖尿病心肌易损性增加,是DCM发病机制之一。蛋白质二硫键异构酶(PDI)是一种多功能的特殊蛋白,也是调节脂联素合成、分泌及多聚体形成的重要蛋白。本文就PDI通过脂联素对DCM的作用进展予以综述。

微小RNA-15a-5p靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的探讨微小RNA-15a-5p(miR-15a-5p)是否可通过靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白(PDIA6)而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法选取2018年2月至2019年3月江南大学附属医院接受治疗的前列腺癌病人50例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白印迹法(Western blotting)分别检测前列腺癌组织、癌旁组织中miR-15a-5p、PDIA6的表达量;体外培养人前列腺癌DU145细胞,将细胞分为miR-NC组、miR-15a-5p组、si-NC组、si-PDIA6组、miR-15a-5p+pcDNA组、miR15a-5p+pcDNA-PDIA6组;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证miR-15a-5p、PDIA6的靶向关系。结果与癌旁组织相比,前列腺癌组织中miR-15a-5p的表达水平降低[(1.00±0.17)比(0.68±0.11)],PDIA6 mRNA[(0.99±0.09)比(1.64±0.18)]和蛋白[(0.44±0.07)比(0.76±0.17)]表达水平升高;转染miR-15a-5p mimics或转染si-PDIA6可降低细胞存活率(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-15a-5p可靶向结合PDIA6;PDIA6过表达可降低miR-15a-5p过表达对DU145细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论过表达miR-15a-5p通过降低PDIA6的表达对列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力有抑制作用。

蛋白质二硫键异构酶在心血管疾病中作用机制的研究进展

蛋白质二硫键异构酶是一种主要存在于内质网中的巯基-二硫键氧化还原酶。已经证实其具有催化二硫键形成及重排、调节蛋白质的折叠等多种生物学功能,现发现该蛋白也可作为一个潜在的心血管疾病生物学标志物,在急性心肌梗死中可以减少梗死面积和凋亡心肌细胞数目;在糖尿病心肌病中,能降低心肌易损性;在高血压和血栓形成过程中也担任着一个重要的角色。因此,本文主要针对蛋白质二硫键异构酶在心血管疾病发生发展中的机制研究进展予以综述。

蛋白质二硫键异构酶参与血栓形成的研究进展

血栓形成可引起心、脑、肺、肾等重要脏器缺血,甚至危及生命。现代凝血理论已证实蛋白质二硫键异构酶在生理性、病理性凝血反应中发挥重要作用。蛋白质二硫键异构酶具有氧化还原、异构化及分子伴侣的作用,能够催化二硫键与巯基之间的互变反应,对参与血栓形成的多种蛋白具有调控作用。近年来关于蛋白质二硫键异构酶对血栓形成调节研究的不断深入,其抑制剂成为抗凝药物研发的新热点。现主要就其作用机制存在的争议展开综述。

ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究免疫原性细胞死亡相关基因——自噬相关基因5(ATG5)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在宫颈癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性、相关信号通路及药物敏感性。方法:收集自2016年1月至2023年12月间青岛大学附属医院60例宫颈癌癌组织标本作为实验组,26例因子宫肌瘤、子宫腺肌症切除的正常宫颈组织标本作为对照组,并收集相应的临床资料。采用免疫组化法检测宫颈癌组织和正常宫颈组织中ATG5、PDIA3蛋白的表达差异,分析其表达与各项临床病理参数之间的关系。基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)在线分析宫颈癌组织中ATG5、PDIA3的表达水平对患者预后的影响,使用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因集富集分析(GSEA)探究ATG5和PDIA3基因可能涉及的生物学功能及信号通路,用p RRophetic包分析宫颈癌患者癌组织中ATG5、PDIA3高低表达与患者对化疗药物的敏感性。结果:ATG5、PDIA3在宫颈癌组织中的表达率均显著高于正常宫颈组织(83.3%vs 11.5%,χ^(2)=39.538,P=0.001;75.0%vs 46.2%,χ^(2)=6.753,P=0.009),ATG5的表达水平在肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移方面的差异显著(均P<0.01);PDIA3的表达水平在肿瘤直径、分化程度、FIGO分期和淋巴结转移方面的差异显著(P<0.05或P<0.01)。ATG5和PDIA3的表达水平呈正相关(r=0.679,P<0.001)。GEPIA在线分析网站预后分析显示,ATG5和PDIA3高表达宫颈癌患者的预后差(均P<0.05)。ATG5和PDIA3主要富集的功能及信号通路包括细胞增殖与分化、抗原加工与提呈、P53结合、Wnt信号通路、MAPK信号通路及mTOR信号通路。结论:ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中呈高表达,两者高表达与患者不良预后有关,ATG5和PDIA3参与细胞增殖与分化、抗原加工提呈及多种信号通路,有望成为宫颈癌治疗的潜在靶点。

PDIA3在腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜中的蛋白表达及其意义

背景:肠易激综合征(IBS)的发病机制尚未完全明了,内脏敏感性增高是其主要的病理生理基础之一。研究显示蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在内脏高敏感大鼠结肠黏膜组织中高表达,但其在腹泻型IBS(IBS-D)患者结肠黏膜中的蛋白表达及其意义尚不清楚。目的:探讨PDIA3在IBS-D患者结肠黏膜中的蛋白表达及其作用机制。方法:收集符合罗马Ⅲ诊断标准的15例IBS-D患者和15例健康对照者。采用蛋白质印迹法检测结肠黏膜PDIA3蛋白表达,ELISA法检测结肠黏膜孵育上清液类胰蛋白酶浓度。结果:与对照组相比,IBS-D患者结肠黏膜中PDIA3蛋白表达明显上调,类胰蛋白酶浓度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。IBS-D患者类胰蛋白酶浓度与PDIA3蛋白表达呈正相关(r=0.750,P=0.003)。结论:PDIA3可能通过促进类胰蛋白酶释放,导致内脏敏感性增高,从而在IBS-D的发病机制中起重要作用。

双向凝胶电泳和质谱技术在睾丸蛋白表达研究中的应用

目的 :探讨双向凝胶电泳和质谱技术在睾丸蛋白表达研究中的应用。 方法 :用双向凝胶电泳分离成年雄性ICR小鼠睾丸总蛋白 ;从胶上切下 2个蛋白点 ,经胶内原位酶解后 ,用质谱仪测得其肽质量指纹谱 ;再通过数据库检索鉴定蛋白质。 结果 :从胶上切下的 2个蛋白点数据库检索结果是小鼠血清白蛋白和蛋白质二硫化物异构酶。 结论 :用双向凝胶电泳分离睾丸蛋白样品取得了很高的分辨率 ,质谱技术鉴定蛋白快速方便 。

内质网蛋白质折叠分子伴侣在氟尿苷耐药绒毛膜癌JeG-3／FUDRA细胞中的作用

目的比较氟尿苷（FUDR）耐药的绒毛膜癌（绒癌）细胞系JeG．3／FUDRA细胞和其亲本细胞系JeG一3细胞（FUDR敏感）之间表达差异的蛋白质，探讨其在绒癌耐药发生中的作用。方法采用双向差异凝胶电泳（2-DE）技术筛选JeG一3／FUDRA细胞和JeG．3细胞之间表达差异的蛋白质，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）技术鉴定差异表达的蛋白质。利用靶基因功能的显著性（GO）分析和途径（Pathway）分析方法对差异表达的蛋白质进行分析和筛选，筛选出目的蛋白质。蛋白印迹法验证JeG一3／FUDRA细胞中目的蛋白质的表达；小分子干扰RNA（siRNA）干扰JeG一3／FUDRA细胞中目的蛋白质的表达后，观察其耐药性的变化。结果2-DE技术检测显示，在JeG-3／FUDRA细胞和JeG-3细胞中共筛选出46个差异表达的蛋白质，并经MALDI—TOF．MS技术鉴定证实其均为差异表达的蛋白质点；通过GO分析和Pathway分析方法对差异表达的蛋白质进行分析和筛选后发现，内质网蛋白质折叠分子伴侣钙网蛋白（CALR）、蛋白二硫异构酶A3（PDIA3）和相对分子质量为78000的葡萄糖调节蛋白（GRP78）在耐药细胞中表达均明显增高。蛋白印迹法检测显示，JeG-3／FUDRA细胞中CALR、PDIA3、GRF78蛋白的表达强度明显高于JeG-3细胞。干扰JeG一3／FUDRA细胞中CALR和PDIA3基因的表达后，JeG-3／FUDRA细胞的耐药性分别下降了76．3％（干扰前后分别为36．7±2．0和8．7±3．1，P〈0．05）和51．4％（干扰前后分别为36．7±2．0和17．8±1．2，P〈0．05）。结论内质网蛋白质折叠分子伴侣CALR、PDIA3、GRP78很可能参与了绒癌细胞FUDR耐药的发生。

PDIA3在足月胎膜早破患者胎盘、胎膜组织中的表达及意义

目的观察足月胎膜早破(t PROM)患者胎盘、胎膜组织中蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择t PROM患者30例(观察组)、正常足月产妇30例(对照组),分别采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测两组胎膜、胎盘组织中的PDIA3蛋白和mRNA。结果观察组胎盘、胎膜组织中PDIA3蛋白阳性表达率分别为93.33%、86.67%,对照组分别为60.00%、50.00%,P均<0.05。观察组胎盘、胎膜组织中PDIA3 mRNA相对表达量分别为2.025±0.180、1.440±0.053,对照组分别为0.958±0.418、1.024±0.049,两组比较,P均<0.05。结论 t PROM患者胎盘、胎膜组织中PDIA3呈高表达,其可能参与了t PROM的发生、发展。

PCA-决策树模型评价PDIA3Ab与4种甲状腺相关指标对自身免疫性甲状腺炎的诊断价值

目的研究主成分分析(principal component analysis,PCA)-决策树模型评价血清蛋白质二硫化物异构酶A3抗体(PDIA3Ab)与4种甲状腺相关指标对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的诊断价值。方法选取90例甲状腺炎患者,根据是否具有自身免疫性分为非AIT组(42例)、AIT组(48例),选取同期体检健康志愿者50例作为对照组。检测所有受试者血清PDIA3Ab、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、游离甲状腺素(FT_(4))/游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、促甲状腺激素(TSH)水平,分析各组间水平差异和各指标的相关性,并采用PCA-决策树模型评价各指标对AIT的诊断价值。结果3组受试者间FT_(4)/FT_(3)、TSH、TgAb、TPOAb、PDIA3Ab水平差异显著(P<0.05),其中AIT组各指标水平均显著高于非AIT组、对照组,非AIT组各指标水平显著高于对照组(P<0.05)。Spearman检验结果显示PDIA3Ab与甲状腺相关指标均存在正相关性(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示TPOAb的曲线下面积(AUC)最大(0.931),其敏感度、特异度均最高(83.33%、94.44%)。决策树、PCA-决策树模型分析AIT组的诊断准确率分别为69.70%、75.76%,预测准确率分别为73.33%、80.00%。结论FT_(4)/FT_(3)、TSH、TgAb、TPOAb、PDIA3Ab对AIT的诊断均有一定诊断价值,借助PCA-决策树模型可进一步提高AIT的诊断和预测准确率。

建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型PDIA3的表达变化及临床意义

背景:目前认为脊髓缺血再灌注损伤是造成脊髓减压手术后"二次瘫痪"的主要原因,而控制应激相关蛋白和兴奋性氨基酸对脊髓缺血再灌注损伤的治疗至关重要。目的:观察蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在兔脊髓缺血再灌注损伤后表达变化。方法:依据Zivin法建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型,将36只新西兰白兔随机均分成6组,对照组只显露腹主动脉而不阻断血流,30 min后关闭腹腔;实验组阻断腹主动脉血流30 min后分别再灌注0,6,12,24,48 h再关闭腹腔。首先均利用改良Tarlov评分进行运动功能评价;随后取损伤段腰髓(L3-L5),结合荧光差异双向凝胶电泳和质谱分析筛选出PDIA3;其次应用免疫印迹印证质谱;最后通过免疫组织化学结果观察其在脊髓内的时间和空间表达变化特点。结果与结论:(1)运动功能评分结果:实验动物于脊髓缺血再灌注损伤发生后均可见后肢功能逐渐好转现象,评分结果为缺血再灌注24 h达最高水平,48 h又略有下降;(2)免疫印迹结果:对照组PDIA3表达有清晰印迹显示,缺血再灌注0 h印迹轻度增强,6-12 h进一步增强,24 h显著减弱至最低水平,48 h再次升高到6-12 h水平;(3)免疫组织化学结果:神经元胞浆中可见PDIA3表达,且中间神经元表达量明显多于运动神经元;(4)结果表明:脊髓缺血再灌注损伤发生发展过程中PDIA3异常上调,说明PDIA3与脊髓缺血再灌注损伤密切相关,可作为其诊断和治疗的新靶点。

干扰或过表达PDIA3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨干扰或过表达蛋白质二硫键异构酶(PDI)A3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养星形胶质细胞,构建PDIA3干扰及过表达载体稳定株系,采用过氧化氢(H 2O 2)诱导建立星形胶质细胞损伤模型。实验将星形胶质细胞分为对照组(NC组)、H 2O 2组、H 2O 2+si-con组、H 2O 2+si-PDIA3组、H 2O 2+pcDNA组、H 2O 2+pcDNA-PDIA3组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PDIA3 mRNA表达;Western印迹检测PDIA3及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。收集各组星形胶质培养基上清液检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平。结果与NC组相比,H 2O 2组星形胶质细胞中PDIA3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);H 2O 2组细胞LDH释放量、TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率及p-p38蛋白表达均显著升高(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显升高(P<0.05),PDIA3过表达后明显降低(P<0.05);H 2O 2组细胞存活率显著降低(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显降低(P<0.05),PDIA3过表达后明显升高(P<0.05)。结论PDIA3过表达可改善H 2O 2诱导的星形胶质细胞氧化应激及炎症损伤,其可能通过抑制p38MAPK信号通路激活而发挥作用。

内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常活化与PDIA3/STAT3的相关性研究

背景内脏高敏感的发生与肠系膜淋巴结树突状细胞(mesentericlymph node dendritic cells,MLNDC)的异常活化相关;蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfideisomerase A3,PDIA3)可以调节信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)通路的活性.我们假设,在MLNDC中,PDIA3可以抑制STAT3通路,激活MLNDC,并最终引起内脏高敏感.目的初步探讨PDIA3/STAT3在内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常免疫活化中的可能作用方法40只C57BL/6小鼠随机分成对照组(20只)和模型组(20只),采用束缚应激建立小鼠肠易激综合征内脏高敏感模型,用腹部撤回反射评估小鼠肠道敏感性,磁珠分选技术分离两组小鼠MLNDC,流式检测分选纯度以及比较两组MLNDC表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex II,MHC-II)类分子的表达情况,蛋白印记技术和免疫荧光技术比较两组MLNDC中PDIA3和磷酸化-信号转导与转录激活因子3(phosphorylated signal transduction andactivator of transcription 3,P-STAT3)的表达及分布情况,混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)比较两组DC对初始T淋巴细胞的激活能力.结果模型组小鼠结肠扩张容量阈值明显低于对照组[(0.53mL±0.07 mL)vs(0.85 mL±0.12 mL),t=-10.845,P=0.000];流式检测磁珠分选所得的小鼠树突状细胞特异性抗原CD11c阳性MLNDC为86.61%±7.02%;模型组MLNDC表面MHC-Ⅱ类分子表达显著高于对照组[(73.08%±2.64%)vs(53.20%±4.50%),t=-7.617,P=0.000];与对照组相比,模型组小鼠MLNDC表达PDIA3明显升高[(0.77±0.04)vs(0.42±0.03),t=11.086,P=0.000],同时P-STAT3的表达明显下降[(0.73±0.03)vs(1.24±0.18),t=-4.737,P=0.038)],MLR中刺激初始T淋巴细胞增殖的能力明显增强[(34.24%±2.95%)vs(17.22%±3.47%),t=6.472,P=0.003].结论内脏高敏感小鼠MLNDC的异常免疫活化或许和PDIA3/STAT3有关.

慢病毒介导PDIA3过表达对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障的影响及其机制

目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组(Control组)、模型组(Model组)、空载慢病毒组(Lv-NC组)和PDIA3过表达慢病毒组(Lv-PDIA3组),每组15只。采用连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液建立UC小鼠模型,造模成功后开始注射慢病毒干预。慢病毒干预7 d后结束实验,对各组小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA法检测血清中炎症因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及肠黏膜屏障通透性标志物D-乳酸(D-Lac)、二胺氧化酶(DAO)含量,qRT-PCR检测结肠组织中PDIA3 mRNA水平,Western blot检测结肠组织中PDIA3、ZO-1、Occludin、Claudin-1、IκBα、p-NF-κB p65(Ser536)、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与Control组比较,Model组小鼠结肠组织受损严重,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平均升高,而ZO-1、Occludin和Claudin-1等蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);与Model组比较,Lv-PDIA3组小鼠结肠组织受损程度减轻,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平降低,同时ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.01),而Lv-NC组差异无统计学意义。结论过表达PDIA3能明显改善UC小鼠肠黏膜屏障功能,其机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关。

通过抑制蛋白质二硫键异构酶P4HB阻断NK细胞活化的研究

目的探究蛋白质二硫键异构酶脯氨酰-4-羟化酶β亚基(P4HB)在自然杀伤细胞(NK)活化中的功能。方法NK细胞在无血清和细胞因子的培养基中培养12 h后,白细胞介素(IL)-2、IL-12和IL-18联合刺激4 h,利用蛋白印迹检测P4HB的表达水平;将不同终浓度的P4HB特异性抑制剂bacitracin作用于原代NK细胞以及NK细胞系(N16),ELISA检测NK细胞的干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平,流式细胞术(FACS)检测P4HB抑制剂对NK细胞杀伤K562细胞的影响;不同终浓度P4HB抑制剂预处理NK细胞后,与CD20抗体孵育,利用双荧光素酶报告系统检测其对Daudi-Luc细胞的杀伤作用。结果NK细胞活化时P4HB表达水平升高,抑制P4HB可降低NK细胞IFN-γ分泌水平并可减弱其对K562细胞的杀伤以及抗体依赖的细胞毒(ADCC)作用。结论蛋白质二硫键异构酶P4HB在NK细胞活化过程中发挥着重要作用。

PDIA3对人Jurkat T细胞TCR信号通路的调控

为了研究蛋白质二硫键异构酶A3前体(protein disulfide isomerase A3 precursor,PDIA3)在T细胞受体(T cell receptor,TCR)信号通路中的具体功能,利用电穿孔法将T细胞内的PDIA3蛋白水平敲低,通过Western blotting检测ζ-链相关蛋白70(zeta-chain associated protein 70,ZAP70)的磷酸化修饰水平,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验检测细胞因子IL-2的分泌情况,流式细胞术分析分化抗原簇69(cluster of differentiation 69,CD69)表达水平及荧光素酶报告基因检测NF-κB信号通路.结果显示:T细胞中PDIA3蛋白下调后导致ZAP70蛋白的磷酸化水平、CD69表达和IL-2的分泌都明显降低,并且影响了NF-κB信号通路,表明PDIA3蛋白对T细胞的活化有促进作用,参与T细胞TCR信号通路的调控,为进一步深入研究PDIA3与TCR下游一些功能蛋白的相互作用打下了基础.

ERp57在非酒精性脂肪肝中的作用

目的探讨蛋白二硫化物异构酶A3(ERp57)在非酒精性脂肪肝病中的作用。方法用1mmol/L脂肪酸混合物(油酸/软脂酸比例为2∶1)作用于人肝细胞L02构建脂肪肝细胞模型,采用RNA干扰技术在脂肪肝模型中抑制ERp57表达。流式细胞仪和荧光显微镜观察抑制ERp57表达后肝细胞脂质堆积情况,流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,Western blot技术检测脂代谢相关蛋白固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1)表达情况。结果 Western blot显示,ERp57 siRNA转染L02细胞有效抑制了ERp57表达,减少了L02细胞内脂质堆积,但对脂肪酸混合物诱导的肝细胞凋亡无明显影响。与对照siRNA转染组相比,ERp57 siRNA转染组肝细胞的SREBP-1蛋白表达下调。结论抑制ERp57表达通过调节脂代谢相关蛋白SREBP-1减少L02细胞内脂质堆积。

抗血小板治疗的研究进展

临床上常用的抗血小板药作用机制都包括一定的抗血栓治疗效果,但都具有内在出血风险,严重的会导致心血管不良事件甚至是死亡。最新临床前研究发现抑制磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)、蛋白质二硫键异构酶,血小板表面膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(Platelet glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)外向信号传导、蛋白酶活化受体和血小板膜糖蛋白VI(GPVI)介导的黏附途径等,可以抑制血栓同时保持止血,这可能带来更有效,更安全的抗血小板治疗方法。