大鼠血管平滑肌细胞迁移与西洛他唑的干预效应

目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用。方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入终浓度为0.5μmol/L西洛他唑培养72h为西洛他唑组,对照组为加入等量的Dulbecco改良的Eagle培养液培养的血管平滑肌细胞。应用细胞刮伤实验和基质金属蛋白酶活性测定分析西洛他唑对原代培养血管平滑肌细胞迁移能力的影响。应用蛋白质印记杂交方法分析给药前后血管平滑肌细胞内基质金属蛋白酶2,9和细胞外信号调节激酶蛋白的表达情况。结果:①细胞刮伤实验显示,与对照组比较,西洛他唑组血管平滑肌细胞迁移能力明显受抑,迁移距离明显缩短。明胶酶活性分析发现,西洛他唑组细胞基质金属蛋白酶活性明显低于对照组。②蛋白质印迹杂交分析发现,西洛他唑可引起原代培养血管平滑肌细胞迁移能力下降。西洛他唑组细胞内基质金属蛋白酶2,9蛋白表达明显低于对照组(14.34±0.70,12.65±0.98;93.67±1.90,83.67±1.05,t=67.86,85.65,P<0.05)。③蛋白质印迹杂交分析检测显示,西洛他唑组与对照组血管平滑肌细胞内信号调节激酶1,2蛋白表达无明显差异(P>0.05);细胞内磷酸化信号调节激酶蛋白表?

大鼠弥漫性轴突损伤后神经丝68蛋白水平减少

目的 通过检测大鼠弥漫性轴突损伤 (DAI)后神经丝蛋白 68(NF68)水平 ,探讨弥漫性轴突损伤的病理机制。方法 用一种对大鼠头颅旋转装置致伤引发大鼠DAI。Sprague Dawley(SD)大鼠 1 8只随机分 3组 (30min ,2 4 ,72h组 ) ,每组 6只 ,在不同时间点取脑白质、海马、胼胝体和脑干标本进行NF68印记杂交 (Westernblot) ,检查神经丝蛋白 68水平。结果 Westernblot看到对照动物NF68水平没有变化 ,而损伤动物明显NF68的丢失 ,特别是脑干。NF68蛋白水平减少在损伤后30min即出现直到损伤后 72h。在NF68丢失的同时伴有 31、 42 7和 52Kda低分子量蛋白条带的出现 ,在 2 4h最明显。结论 NF68降解是由病理性钙蛋白酶激活引起的。损伤后 2