蛋白质定向进化的研究进展

在工业生物催化过程和生物细胞工厂构建方面,蛋白质定向进化被广泛地应用于酶的分子改造.蛋白质定向进化不仅可以针对某一目的蛋白进行改造,还可以改善代谢途径、优化代谢网络、获得期望表型细胞.为了获得更高效的突变效率,快捷、高通量的筛选方法,提高蛋白质定向进化的效果,研究者不断开发蛋白质体内、体外进化方法,取得了新的进展和应用.本文介绍了最近发展的蛋白质定向进化技术的原理、方法及特点,总结了突变文库的筛选方法和蛋白质定向进化的最新应用,最后讨论了蛋白质定向进化存在的挑战和未来发展方向.

蛋白质定向进化技术的进展及其在酶制剂改造中的应用

综述了几种建立突变库的新方法 ,并介绍了定向进化在酶制剂改造中的具体应用。

蛋白质定向进化及其在微生物代谢调控中的应用

蛋白质定向进化是非理性改造蛋白质的一种有效方法。利用蛋白质定向进化技术可以改变代谢流,扩展或构建新的代谢途径,弱化或消除不必要或有害的代谢途径,从而达到提高某种代谢产物产率或降解有害物质的目的。蛋白质定向进化技术在代谢调控中的应用有效拓宽了代谢工程的应用范围。本文介绍了主要的蛋白质定向进化技术如易错PCR技术、DNA改组技术、交错延伸技术和临时模板随机嵌合技术等,评述了蛋白质定向进化技术对微生物细胞代谢中的关键蛋白进行定向改造,从而改善其代谢能力,调控微生物代谢等的应用。

蛋白质定向进化的研究技术及应用

蛋白质定向进化是在人类改造蛋白质的过程中产生的。蛋白质定向进化通常分三步进 行,即随机诱变、体外重组和筛选。每一步都有多种研究技术。蛋白质定向进化大大加速了人类 改造蛋白质的步伐,在实际应用研究和基础理论研究中都具有重要意义。

ProSAR驱动的蛋白质定向进化技术

改进蛋白质序列空间检索策略是未来蛋白质工程研究的一个关键。本文介绍了一种被称为蛋白质序列-活性相关性(ProSAR)驱动的蛋白质定向进化策略的原理、机器学习算法及应用,为提高蛋白质定向进化效率和解决酶学性质的多维优化问题提供了办法和思路。

黑曲霉葡萄糖氧化酶高产基因工程菌研究进展

葡萄糖氧化酶能够催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸-δ-内酯,具有广泛的应用领域。黑曲霉是传统的产葡萄糖氧化酶工业菌种,经过几十年的工业应用,产酶水平已经达到极限。目前应用于表达葡萄糖氧化酶的表达系统主要有黑曲霉、酿酒酵母和巴斯德毕赤酵母。近些年来蛋白质定向进化手段开始应用于葡萄糖氧化酶的分子改造,有望使黑曲霉葡萄糖氧化酶的工业化产量得到进一步的提高。介绍葡萄糖氧化酶高产基因工程菌研究进展。